牛乳蛋白质组学研究进展

牛乳是新生犊牛在可以消化食物之前提供的主要营养来源,使用蛋白质组学方法对牛乳进行系统、整体地研究,可以认识牛乳蛋白质的构成以及对机体的影响。本文综述了蛋白质组学在牛乳研究中的进展,旨在为分析不同的牛乳成分,为其将来在奶牛疾病预防和控制等方面的分析提供重要的依据。     

加减当归芍药汤对小鼠最大耐受量及组织病理学观察

为验证新型中药组方加减当归芍药汤的安全性及为新药临床应用提供合理依据,以小鼠为研究对象,进行最大耐受量试验。在预试验中将40只小鼠分为中药高(2.0g·mL~(-1))、中(1.0g·mL~(-1))、低(0.5g·mL~(-1))浓度及对照组4组,各剂量组小鼠每日灌服相同剂量中药,连续7d,测定LD50值。最大耐受量试验时将20只小鼠随机分为2组,试验组小鼠每日灌服高浓度药液3次,对照组灌服相同剂量蒸馏水,灌胃持续7d,观察小鼠行为及脏器病理学变化。结果表明:2组小鼠各脏器无眼观病变,脏器指数无显著差异。病理切片显示,2组小鼠心脏、脾脏及肾脏结构正常,无明显病变;试验组小鼠可见肝静脉周围肝细胞部分变性;部分肺泡充血。小鼠对该组方的最大耐受量为120g·kg~(-1)。这一研究提示,该中药组方日常用量内安全无毒,但在临床上以高浓度服用时应注意其肺毒性及肝毒性。     

黄曲霉毒素B1研究进展

AFB1饲料污染以及动物AFB1中毒方面的研究已经成为国内外关注的科学问题,通过查阅文献就AFB1研究进展并且重点针对AFB1的危害和防控的基础性研究进行概述,并对今后益生菌在黄曲霉素中的研究方向进行探讨,以期望为目前霉菌由于缺乏特异性的临床防治的方法从而造成畜牧业重大经济损失的瓶颈性问题提供理论参考资料。     

钙离子在内质网应激中的作用

内质网应激(ERS)是一种重要的细胞自我防御机制,内质网应激时,首先启动生存途径,但长时间的内质网应激将使细胞凋亡。钙离子(Ca~(2+))作为细胞内重要的第二信使,在细胞的各种生理及病理活动中发挥着重要作用,Ca~(2+)的稳态是细胞维持正常结构和功能的前提与基础。内质网是细胞中重要的钙库,当细胞受到外源性化合物作用时,内质网内Ca~(2+)代谢失衡,功能紊乱,导致内质网应激的发生。当细胞中Ca~(2+)耗竭,使得膜上Ca~(2+)通道打开,胞内钙池引发Ca~(2+)内流,使钙池再次充满。论文主要就内质网应激、内质网中钙离子的作用及钙池引发钙离子的内流进行概述,并展望了未来的研究方向,以期望为相关的研究提供参考。     

我国规模化牧场奶牛酮病防治状况调查分析

[目的]为了解2021年我国规模化牧场奶牛酮病发病情况和防控状况。[方法]本文选择105 个规模化牧场进行调查,包括酮病发病率、诊断和监测方法、治疗方法、治愈率、防控方法和治疗成本等。[结果]牧场奶牛平均单产为9.7 t,酮病平均发病率为17.9%,高国外控制目标。大多数牧场奶牛酮病诊断和监测,主要采用检测血液中β-羟丁酸浓度的方法,奶牛酮病治愈率无论单一或综合措施都达90%以上,奶牛酮病综合防控效果明显好于单一措施。[结论]目前我国规模化牧场奶牛酮病发病率控制目标、诊断和监测、治疗和防控仍需更多研究,完善和制定相应的技术规范,为规模化牧场奶牛酮病的高效防控提供技术支撑。     

高脂饮食构建大鼠脂肪肝模型的研究现状及分析

奶牛脂肪肝是泌乳初期高产奶牛易患的一种主要代谢疾病,常伴随奶牛产奶量、繁殖能力和免疫力的下降。由于奶牛的经济价值,不宜直接用于大批量实验造模研究,因此应用小动物建立理想的动物脂肪肝模型对奶牛脂肪肝的研究具有重要意义。通过查阅文献发现高脂饮食方法复制大鼠脂肪肝是研究动物脂肪肝常用的一种模型构建方法,而高脂饮食主要是指通过高脂高胆固醇饮食和高脂高糖饮食两种方式诱导大鼠产生脂肪肝,所以就目前关于这两种造模方法进行综述,旨在为奶牛脂肪肝的进一步研究、预防和治疗提供理想的动物模型。     

FGF21与奶牛隐性酮病血清BHBA相关性分析

为了分析黑龙江省某农场90头诊断为酮病的泌乳奶牛血清中FGF21与酮病相关性,应用ELISA试剂盒和生化分析仪测定奶牛血清中FGF21浓度以及酮病时主要血清指标,通过统计学分析FGF21与酮病相关性。结果表明隐性酮病时血清FGF21与BHBA呈正相关;临床酮病时血清FGF21与BHBA无相关性。结论 FGF21可能成为调解奶牛隐性酮病的新因子,但需要扩大样本数进一步研究。     

应用SELDI-TOF-MS技术对患脂肪肝奶牛血浆差异蛋白的分离鉴定及生物学分析

【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一，50%产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）是一种对生物样本蛋白质研究的新型高敏感性蛋白质组学方法，文章旨在探讨脂肪肝奶牛血浆蛋白质组学特征。【方法】于黑龙江某集约化养牛场选择产后7—28d，1—2胎次荷斯坦奶牛40头。清晨空腹尾静脉采血10mL，应用肝素抗凝（150U）迅速离心（3 000 r/min，5 min）分离血浆,置于-80℃冰箱冷冻保存。依据血浆甘油三酯（TG＞0.20 mmol·L^-1）, 血浆β-羟丁酸（BHBA＞1.2mmol·L^-1）浓度和临床症状，将其分为试验组（T）20头和健康对照组（C）20头。应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱，利用Ciphergen Protein Chip Software (Version 3.1.1)对在试验组和对照组所有样品中得到的峰图进行分析，得到原始数据。将两组之间的数据峰值做wilcoxon sum rank test统计检验，用计算出的P值判断峰在两组中是否有显著差异。以0.01作为P值的阈值，筛选出P值小于0.01的差异峰。在得到的差异峰中，将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比 (mass to charge ratio，m/z)进行比较，找到最相似的蛋白作为差异峰可能检测蛋白的预测结果。【结果】与对照组相比，试验组奶牛血浆蛋白质谱存在39个差异峰，在得到的39个差异峰中，将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比值进行比较，最终获得26个可预测的差异峰，预测蛋白11种。结果显示，相对于C组，11种预测蛋白在T组中均表达下调。通过生物信息学（Network，GO，Pathway）分析，应用Cytoscape软件对获得的11种蛋白进行牛类基因网络搜索，得到Networks分析结果图。在数据库中搜索到了试验结果中的淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)和纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain, FGA)两种差异蛋白，并得到其相关的Networks分析结果。应用Cytoscape软件中BinGO插件对11种蛋白进行GO分析，并得到GO分析结果。对这些蛋白质经软件搜库得到已经注释的差异蛋白有9种，分别为FGA、血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein, SAA)、血浆蛋白酶c1抑制剂（plasma protease c1 inhibitor, SERPING1 or C1INH）、血清载脂蛋白-CⅢ（apolipoprotein c-Ⅲ，ApoCⅢ）、海帕西啶（hepcidin, HAMP）、骨桥蛋白（osteopontin, OPN or SPP1）、 甲状腺素运转蛋白（transthyretin, TTR）、胱蛋白酶抑制剂C （cystatin-c, CysC or CST）、神经分泌血管生长因子蛋白（neurosecretory protein, VGF）。应用KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）pathway数据库搜索。搜索结果显示只有6种蛋白质可在数据库中搜到，分别是FGA、SERPING1、APO-CⅢ、APP、CysC、SPP1。并得到其相关的Pathway分析结果。这些蛋白可能是与奶牛脂肪肝发病机制相关的物质。【结论】应用SELDI-TOF-MS技术有效的分离了健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白，均在肝脏代谢或脂肪肝疾病发生发展过程中起重要的调节作用，对探究奶牛脂肪肝发病机理及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。差异蛋白对奶牛脂肪肝的发病机理的影响尚待进一步研究。     

酸性尿液的泌乳奶牛血/尿临床病理学变化

探讨泌乳奶牛尿液呈酸性时机体血/尿临床病理学的变化。根据尿液p H将实验奶牛分为极酸组15头,偏酸组9头和中性组22头。并对实验奶牛血尿中7项矿物元素、7项炎性因子、9项能量代谢指标的检测和统计分析。结果显示与中性组相比,极酸组血中K、Cu、GLU含量极显著低于中性组(P0.01),血Mg、尿Mg含量显著低于中性组(P0.05),尿Ca含量、血中LPS、BHBA、NEFA含量显著高于中性组(P0.05),尿中P、BUN含量极显著高于中性组(P0.01);与中性组相比,偏酸组尿Ca、尿P、血BHBA、血NEFA含量极显著高于中性组(P0.01),血中Fe、GLU和SAA及尿Cr含量显著低于中性组(P0.05)。结果表明泌乳奶牛尿液呈酸性时表明机体发生酸碱平衡紊乱,可能会伴发能量负平衡、酮病、炎症和矿物质代谢紊乱等病理状态。