利用同工酶鉴定杂交油菜种子纯度程序化方法

叙述了多年摸索出的一套用同工酶鉴定杂交油菜种子纯度电泳技术方法。该技术方法（包括酶的提取，凝胶配制，电泳酶显控制等）能很好地提高用同工酶鉴定杂交油菜（秦油２号和皖油９号）种子纯度的工作时效。因而在种子检验上具显著的实际应用价值     

基于超薄等电聚焦电泳技术的杂交水稻种子纯度鉴定

为评价超薄等电聚焦电泳技术鉴定杂交水稻种子纯度的准确性;分别利用超薄等电聚焦电泳技术和田间小区种植技术鉴定杂交水稻64S×G67F1种子纯度,比较两者的吻合程度。结果表明:用超薄等电聚焦电泳技术鉴定的种子纯度和大田种植鉴定的纯度完全吻合;说明超薄等电聚焦电泳技术鉴定杂交水稻种子纯度结果准确可靠。     

农作物种子电泳测纯技术

种子电泳技术是上世纪60年代后发展起来的一种生化技术，它是通过蛋白质或同工酶的分子大小和电荷数量或两项同时具有的差异进行分离，并形成不同电泳图谱而显示种和品种之间差异的有效方法。三十多年来醇溶蛋白质电泳技术、酸溶蛋白质电泳技术、盐溶蛋白质电泳技术、酯酶同工酶电泳技术等技术先后出现，并应用于水稻、玉米、蔬菜、杂交油菜种子纯度鉴定试验，均有成功的报导。尽管电泳技术鉴定纯度未定型，尚有许多不足之处，但因其成本低、速度快、分辨率较高，引起了种子工作者的高度重视，等电聚焦电泳技术出现后，因其谱带清晰、分辨率高而备受欢迎。为了进一步推动电泳技术在种子纯度鉴定中的推广应用，国际种子检验协会（ISTA）品种技术委员会于1983年成立生化测定工作组，致力于总结和发展种子测纯电泳技术。     

利用贮藏蛋白电泳技术鉴定杂交油菜品种的研究

[目的]为杂交油菜品种的真实性和纯度鉴定提供理论基础和参考依据。[方法]以杂交油菜种子为试材,分别提取种子中谷蛋白和球蛋白,采用SDS-PAGE技术分析并比较杂交油菜种子中谷蛋白和球蛋白的电泳图谱差异,并进行了杂交油菜种子纯度的验证性试验。[结果]谷蛋白和球蛋白的SDS-PAGE谱带在不同油菜品种间存在差异。谷蛋白电泳图谱谱带丰富且多态性较强,特征带也较多,能有效鉴定油菜杂种与亲本间的差异。球蛋白谱带虽然多态性较好,但图谱较为模糊,从而影响到品种鉴别的准确性。纯度验证性试验中,杂交油菜种子的电泳谱带具有较好的一致性,其中3粒种子电泳的谱带较多且染色深,可能为混入的其他品种种子。[结论]谷蛋白电泳图多态性较强,图谱清晰度较高,鉴定杂交油菜品种的效果更好。     

同工酶电泳技术在杂交水稻种子纯度鉴定中的应用探析

通过对酯酶同工酶电泳技术与田问种植法鉴定杂交水稻种子纯度的结果进行比较，证明两种鉴定结果无显著差异，酯酶同工酶电泳技术鉴定种子纯度可作为辅助手段应用于生产实践。该文还对酯酶同工酶电泳技术应用于杂交水稻种子纯度鉴定的一些问题作了讨论。     

基于SSR标记技术的油菜杂交品种沣油958的种子纯度鉴定

种子纯度是影响杂交油菜品种发挥杂种优势的重要因素。该研究利用SSR标记技术对国审杂交油菜新品种沣油958进行纯度鉴定,并与田间种植鉴定进行对比分析,结果表明:SSR鉴定与田间种植纯度鉴定结果非常接近,用SSR标记技术鉴定该品种纯度是可靠的。利用SSR标记进行纯度鉴定可以不受季节、鉴定人员经验影响,周期短,结果更为客观真实,是监控杂交油菜生产、销售的种子纯度质量的有效手段,在油菜杂交种纯度鉴定中具有明显的应用价值。     

杂交玉米、水稻和辣椒种子品种真实性和纯度的室内快速鉴定

利用超薄等电聚焦电泳技术对杂交玉米、水稻和辣椒的F1种子进行品种真实性和纯度鉴定,发现所测杂交玉米组合8×9、辣椒组合1×3的F1种子都同时具有父、母本特征带,均为真实的杂交种子.所测杂交玉米粤优1号和杂交水稻华优99的F1种子均不纯.     

两系杂交水稻种子贮藏后的纯度鉴定

采用超薄等电聚焦电泳技术研究了经不同贮藏时期的两系杂交水稻F1种子中父本特征蛋白质带的变化情况。结果表明,贮藏了0-12个月的F1种子中父本特征蛋白质带依然清晰,而贮藏了18个月后,部分F1种子中的父本特征蛋白质带变得模糊。所以,贮藏一年以内的F1种子还能用超薄等电聚焦电泳技术鉴定纯度,而贮藏18个月以上的F1种子则不能继续用超薄等电聚焦电泳技术鉴定纯度。     

利用种子醇溶蛋白快速鉴定油菜杂交种纯度的方法研究

探索出了一套快速鉴定油菜杂交种纯度的醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶不连续性电泳技术,并分析了醇溶蛋白在11个亲本材料间的多态性,发现不同亲本的醇溶蛋白谱带在3个电泳区域存在明显差异,多表现为显性遗传。用该方法鉴定2个杂交油菜品种样品的纯度,结果与田间种植鉴定和SSR标记鉴定高度一致,说明该方法应用于油菜杂交种纯度鉴定具有可行性与实用性。     

优质油菜品种秦优7号的选育、杂种生产及纯度检测

杂交油菜秦优7号是中国目前适应区域最广,年种植面积最大的高油双低优质油菜杂交种,其芥酸含量0.39%,硫苷含量25.39μmol/g,含油量43%左右,在气候适宜的年份,含油量可达45%以上。本文基于秦优7号的选育,提出了秦优7号多基因、多亲本聚合育种技术;细胞质雄性不育系陕3A以单株为本,父母本双双互选的高效育种技术;杂交油菜种子生产中的环境系、亲本系、媒介系3个系统的理论及其相应的关键制种技术;研制的应用油菜幼芽酯酶同工酶电泳技术和建立的RAPD和SSR分子标记快速检测杂交油菜种子纯度的技术,以及种子生产的质量控制技术、产业化运作机制等。     

转基因抗除草剂油菜相关基因的PCR检测及其在育种中的应用

以抗草甘膦杂交油菜三系和抗草丁膦杂交油菜二系亲本及其F1杂种为材料,探索建立和优化抗草甘膦的CP4、gox基因和抗草丁膦的bar基因及其Barnase、Barstar基因的PCR检测方法,为转基因抗除草剂油菜的品种选育、F1种子纯度鉴定和转基因油菜的生态安全性研究提供可靠、实用的检测方法。     

蛋白质电泳技术在品种真伪和纯度检验上的应用

应用种子贮藏蛋白和同工酶电泳技术对油葵品种康地4、5、6、7号及G101的父母本和杂交种在品种鉴定上的应用方面进行分析研究,结果表明:在所有品种中,种子贮藏蛋白电泳谱带多,但没有明显差别;过氧化物酶谱带数少,在G101杂交种有明显区别父母本的过氧化物酶谱带;酯酶电泳谱带数目较多且清晰,康地6号杂交种中出现了明显的父母本的互补酯酶电泳谱带.利用酯酶谱带对康地6号杂交种进行纯度鉴定,其结果与田间鉴定结果相近.     

双向电泳方法研究油菜的进展(英文)

在中国油菜是一种可提供高质量油和蛋白的油料作物。双向电泳技术是一种有效的研究蛋白表达方法。综述了该技术的改进及其在油菜研究中的蛋白质提取、营养元素抑制影响、环境抑制影响、生理学研究、及抗菌核病等方面的应用研究,发现该方法可为油菜基因组学研究提供了大量很有价值的信息。随着双向电泳技术的发展,其将在未来的油菜蛋白组学研究中发挥更大的作用。     

农业生物技术在水稻种子纯度鉴定中的应用

【研究目的】为了选择直观、准确、可靠、经济可行和易于操作的水稻种子纯度鉴定技术;【方法】分析和总结了电泳鉴定法、DNA分子标记鉴定法和叶色标记技术鉴定水稻种子纯度的研究进展及应用概况;【结论】作者认为电泳鉴定法及DNA分子标记鉴定法只能获得杂交水稻杂种纯度的基本数据,不具备有效排除假杂种的功能,也不可能采取后补救措施解决因纯度低而造成的产量损失。白化转绿型叶色标记技术运用在杂交水稻上,将结束传统种子纯度的检测方法,引发种子纯度检测的革命,具有极其广阔的市场前景。     

菜籽蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究(英文)

[目的]建立适用于菜籽蛋白质组研究的双向电泳技术。[方法]以湘油17号为材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、凝胶浓度、上样量等条件进行了优化。[结果]使用TCA-丙酮法提取菜籽总蛋白最佳,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数最多。当采用pH3～10IPG胶条和12%的凝胶、上样量为250μg时,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱。[结论]为开展油菜种子蛋白质组学研究奠定了基础。     

利用SSR标记对甘蓝型黄籽油菜贵油519杂种纯度鉴定

在用SSR(简单重复系列)标记构建了53份甘蓝型黄籽油菜种质资源的DNA指纹图谱的基础上,筛选出一个对黄籽油菜杂种贵油519及亲本具有共显性的SSR引物Ra2A05b,鉴定大田生产F1杂种群体的纯度,并对比田间调查的鉴定结果表明,SSR标记鉴定可以识别更多的非杂交种单株,如因微粉导致的自交、花粉污染、机械混杂等带来的非杂交种单株。就SSR标记鉴定杂交种纯度鉴定的可行性和优点进行了讨论。     

豫玉22玉米杂交种子纯度的SSR和SNP分子比较鉴定

为研究豫玉22玉米杂交种子的SSR和SNP两种分子标记纯度鉴定方法,为快速有效鉴定玉米种子纯度提供依据。采用SSR荧光标记法和SNP分子标记的KASP技术对豫玉22玉米杂交种子进行基因组DNA提取、引物筛选、基因型分析、纯度鉴定。豫玉22的SSR特异性引物为umc2007y4和bnlg161k8,纯度鉴定结果为97.92%。SNP特异性引物MaSNP64和MaSNP245纯度鉴定结果是98.44%。SSR和SNP分子标记鉴定豫玉22玉米杂交种子纯度的最佳方法,为拓展玉米杂交种纯度鉴定方法具有指导意义。     

利用盐溶蛋白UTLIEF技术快速鉴定玉米种子纯度

利用盐溶蛋白超薄等电聚焦电泳技术对6个同父异母、5个同母异父共11个玉米杂交品种种子进行纯度鉴定。结果显示,盐溶蛋白超薄等电聚焦电泳图谱带型稳定,多态性丰富,分辨率高,可将供试的血缘关系较近的玉米杂交品种区分开,而且该技术操作简便,可用于玉米种子纯度的快速鉴定。     

SSR标记在油菜隐性核不育杂交种的纯度鉴定研究

[目的]利用SSR标记对油菜隐性核不育杂交种的纯度进行鉴定。[方法]以贵州省油菜科学研究所选育的甘蓝型油菜"油研系列"为材料,利用简化的SSR标记技术对制种样品进行纯度分析。[结果]筛选出了2对条带清晰、易于统计的SSR引物;大田生产F1杂种群体的纯度鉴定结果表明,SSR鉴定的结果清晰可辨,可信度高,能较准确地反映种子的真实纯度。[结论]该试验为SSR标记在油菜种子纯度鉴定中的进一步应用奠定了基础。     

3种电泳法鉴定玉米种子纯度比较

研究比较了酯酶同工酶电泳法、蛋白质凝胶电泳法、醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳法3种方法在测试定玉米种子纯度方面的敏感性、多态性、准确性研究,认为醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳法较是较理想的玉米种子电泳纯度鉴定方法。