利用玉米秸秆酶解液发酵胶质芽胞杆菌WY120的研究

胶质芽胞杆菌WY120是微生物肥料生产常用菌株,传统的生物钾肥菌剂发酵生产的主要原料是采用淀粉、蔗糖和葡萄糖等。以玉米秸秆为原料,通过与淀粉蔗糖培养基发酵培养胶质芽胞杆菌的比较研究,探讨了玉米秸秆酶解液作为碳源发酵生产胶质芽胞杆菌的可行性。结果显示,玉米秸秆酶解液作为碳源发酵生产的胶质芽胞杆菌,其活菌数为3.52×108 cfu/mL,是淀粉蔗糖培养基的1.63倍。秸秆酶解液培养基的优化试验结果显示,其最佳初始葡萄糖浓度为15 g/L,活菌数可达到3.95×108 cfu/mL。当转速为250 r/min,pH控制在7.0~7.2时,5 L发酵罐的试验结果显示,其活菌数高达6.76×108 cfu/mL,是摇瓶培养的1.71倍。研究结果表明,玉米秸秆可替代传统的淀粉蔗糖为碳源发酵生产胶质芽胞杆菌,为玉米秸秆资源化利用提供了一种新途径。     

纳豆芽胞杆菌固定化载体改性及吸附研究

【目的】以麦饭石为载体,制备高效的纳豆芽胞杆菌固体菌剂,为纳豆芽胞杆菌的规模化应用奠定基础。【方法】运用酸、碱、盐等方法探索麦饭石进行改性条件,扩大麦饭石孔隙度及比表面积,提升其吸附能力;并通过添加保护剂(葡萄糖、糊精、淀粉)增加保藏期固体菌剂的有效活菌数残留率,为长期保藏固体粉剂提供技术支持。【结果】(1)确定了纳豆芽胞杆菌最适培养温度为40℃,最适培养pH为7.5。(2)经氯化钠、盐酸、硫酸和氢氧化钠溶液改性后的麦饭石吸附最大有效活菌数分别为13.17、12.6、12.7和11.9(×10~8 CFU·g~(-1))。其中0.5mol·L~(-1)氯化钠溶液改性效果最好,吸附有效活菌数达到13.17(×10~8 CFU·g~(-1))。(3)对照组、添加保护剂组(2%糊精、2%葡萄糖、2%淀粉)保藏至6个月时,有效活菌数分别为2.91、4.1、5.42和4.63(×10~8 CFU·g~(-1))。活菌数残留率为初始活菌数的22%、31%、41%和35%,其中2%葡萄糖保护剂比对照组有效活菌数残留率提高了1.86倍。【结论】改性麦饭石能极大提升麦饭石的吸附能力,同时保护剂的添加有利于麦饭石固体芽胞杆菌粉剂的长期保藏,本研究为麦饭石在微生物菌剂制备工艺的应用提供了一定的技术支持。     

苗床添加微生物肥料对植烟根际土壤微生物量碳氮的影响

【目的】探究苗床添加不同微生物肥料对两种植烟根际土壤微生物量碳氮含量的影响。【方法】通过育苗和大田试验,采用EM(Effective Microorgnisms)肥料、木霉菌(Trichoderma)肥料和胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)肥料及其组合物均匀拌入苗床育苗基质的方式,研究其对植烟根际土壤微生物量碳氮含量的影响。【结果】苗床添加3种微生物肥料及其组合物均能不同程度提高红花大金元(Honghuadajinyuan)和云烟85(Yunyan 85)根际土壤微生物量碳氮含量。不同肥料处理下,微生物量碳氮在各个生育时期均以混合添加EM肥料和胶质芽孢杆菌肥料处理最高,分别比对照提高29.8%～120.1%和29.7%～122.1%。同一肥料处理下,随着烤烟生育期的推进,土壤微生物量碳氮含量总体呈现先增加后降低的趋势,且在团棵期或旺长期达到最大值。【结论】苗床混合添加EM肥料和胶质芽孢杆菌肥料可明显增加两种植烟根际土壤中微生物量碳氮含量,使土壤保持较高的微生物活性和肥力水平,有利于烤烟的可持续和高效生产。     

复合芽胞杆菌共培养条件的响应面优化研究

在前期筛选出了具有耐盐、促生能力的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)SC-12和具有高效广谱抗病能力的解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BZ6-1,而且两株菌不存在拮抗作用。为了获得活菌数高、经济效益好的复合芽胞杆菌菌剂,以上述两株菌为研究对象,以活菌数为指标,采用单因素法、最陡爬坡法和Box-Behnken响应面法设计并优化共培养条件,并在100 L发酵罐中进行了验证试验。获得的最佳共培养条件如下:SC-12与BZ6-1的菌落数比例为2∶1(v/v);培养温度为30℃;培养时间为16 h;接种量为3%(v/v);转速为132 r/min;pH值为7.6。以优化后的培养条件进行两个菌株的共培养,得到的菌落数为11.00×108cfu/mL,比原始发酵得到的菌落数增加了39.20%;在100 L发酵罐中发酵的菌落数达到10.30×108cfu/mL,比原始发酵的菌落数增加了43.00%。     

辣椒疫霉病拮抗菌LRS-1固体发酵条件优化及其抑菌稳定性研究

为了生防型多粘类芽孢杆菌LRS-1的大规模生产应用,以LRS-1固体发酵活菌数为指标,研究了麦麸和草炭基本基质配比、碳源、氮源、初始含水量以及发酵时间、接种量、种龄等条件对LRS-1菌株固体发酵效果的影响;同时,以平板抑菌率为指标,研究了温度和pH值对LRS-1抑菌稳定性的影响。结果表明:LRS-1的最优固体发酵条件为麦麸与草炭的比例为30∶20,大米添加量12%,小米添加量25%,初始含水量80%,发酵时间6 d,接种量30%,种龄72 h;LRS-1在30℃左右与中碱性环境中可以保持稳定的抑菌效果。     

复合芽胞杆菌共培养条件的响应面优化研究

在前期筛选出了具有耐盐、促生能力的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)SC-12和具有高效广谱抗病能力的解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BZ6-1,而且两株菌不存在拮抗作用.为了获得活菌数高、经济效益好的复合芽胞杆菌菌剂,以上述两株菌为研究对象,以活菌数为指标,采用单因素法、最陡爬坡法和Box-Behnken响应面法设计并优化共培养条件,并在100 L发酵罐中进行了验证试验.获得的最佳共培养条件如下:SC-12与BZ6-1的菌落数比例为2:1(v/v);培养温度为30℃;培养时间为16 h;接种量为3％(v/v);转速为132 r/min;pH值为7.6.以优化后的培养条件进行两个菌株的共培养,得到的菌落数为11.00×108 cfu/mL,比原始发酵得到的菌落数增加了39.20％;在100 L发酵罐中发酵的菌落数达到10.30×108 cfu/mL,比原始发酵的菌落数增加了43.00％.     

畜禽粪便堆肥作为功能微生物载体的研究

以堆肥作为3株功能芽胞细菌液体菌剂的载体,通过优化载体含水量、温度和接种浓度等关键影响因子,以不同时间载体中有效活菌数的变化为指标,探讨堆肥代替草炭作为功能微生物载体的可行性和最适条件.研究结果表明,载体c(鸡粪)、P(猪粪)、M(1:1鸡粪猪粪)和TP(猪粪+草炭)在72 h内的有效活菌数均显著低于草炭;混合载体TC2(50%草炭+50%鸡粪)和TM1(25%草炭+75%1:1鸡粪猪粪)的有效活菌数随着时间的延长而增加,其中72h时TC2的有效活菌数达到11.40×109cfu·g-1,TMl的有效活菌数达到2.64×109cfu·g-1,均与草炭无显著差异,因此适宜代替草炭作为功能微生物的载体.采用单因素实验,载体TC2和TM1的最优化影响因子为含水量30%、吸附温度30℃、菌液接种浓度为108cfu·mL-1.     

炭基微生物肥料制备工艺及性质分析

以稻壳炭与氮磷钾肥及枯草芽孢杆菌孢子粉复合,采用掺混法、吸附法、混合造粒法3种工艺,设置10%、20%和30%三种稻壳炭添加水平,小试制备了9个炭基微生物肥料样品,并对其进行电镜扫描及元素含量、pH值、总养分、有效活菌数、缓释效果等的测定与分析。结果表明,采用混合造粒法制备的炭基微生物肥料负载氮磷钾肥和微生物孢子粉最多,其次是吸附法,掺混法最少。9个炭基微生物肥料样品中各元素含量比较丰富,工艺相同时,随着稻壳炭添加量的增加,C、N含量增加而H含量减少。9个炭基微生物肥料的pH值均呈酸性或接近中性,总养分含量均达到了复合肥国家标准的要求。枯草芽孢杆菌孢子粉与稻壳炭及氮磷钾肥复合60 d后,有效活菌数为3.4×10⁵~7.0×10⁵ g^-1,同种工艺制备的炭基微生物肥料的有效活菌数随稻壳炭添加量的增加而增加。炭基微生物肥料的7 d氮素累积水溶出实验表明,9个肥料样品均有一定的缓释功能,同种工艺制备的炭基微生物肥料的氮素累积释放率随稻壳炭添加量的增加而降低。稻壳炭添加量相同时,缓释效果混合造粒法>吸附法>掺混法。综上,添加30%的稻壳炭、采用混合造粒工艺制备的炭基微生物肥料具有最优的性质,可进一步验证其效果并推广应用。     

鸡粪开发生产微生物肥料的探讨

探讨鸡粪作为微生物肥料载体的可行性.以干燥或发酵处理的鸡粪为载体经辐照处理后,分别接种固氮菌、解磷巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和枯草芽孢杆菌制作微生物肥料.以煤渣为载体设对照组,通过测定有效活菌数和杂菌率,优化鸡粪处理的最佳方法;从保存时间、温度、光照、pH值几个因素探讨微生物肥料的稳定性.结果表明,经堆肥腐熟并辐照处理的鸡粪作载体效果最佳,固氮菌肥和硅酸盐细菌肥料的保质期在6个月,磷菌肥和枯草杆菌肥的保质期在9个月;阳光直射处保存3个月的菌肥有效活菌数低,杂菌率高,而室内暗处保存的活菌数高,杂菌率低;菌肥的保存温度超过30℃时,有效活菌数急剧下降,杂菌率上升;将菌肥的pH值调至7时,有利于提高有效活菌数.可见鸡粪可用作微生物肥料的载体,保存在避光阴凉干燥处可有效提高菌肥的有效活菌数,从而延长产品的保存期.     

苗床添加微生物菌肥对烟草农艺性状和经济性状的影响

微生物菌肥作为生物防治的重要手段广泛应用于作物的生产实践,烟草育苗基质环境较为简单、稳定且可控,宜于微生物的定殖,有利于微生物菌肥发挥其作用。采用不同添加量(5%、10%、15%)的EM(Effective Microorganisms)菌肥和胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)菌肥及其组合物均匀拌入苗床育苗基质的方式,研究了2种菌肥的不同添加比例和其组合菌肥对红花大金元(Honghuadajinyuan)和云烟85(Yunyan 85)在田间的应用效果,以期为微生物菌肥在烟草育苗基质上的应用提供科学依据和应用参考。结果表明：苗床添加不同用量菌肥改善了红花大金元和云烟85田间成熟期农艺性状,具体表现在增加了2种烟草的株高、节间距、茎围和叶面积系数;同时不同程度提高了2种烟草的经济性状,具体表现在提高了其产量、产值和中上等烟比例,尤以改善中上等烟叶比例和产值效果显著。总体看来,红花大金元以添加15%EM菌肥或胶质芽孢杆菌菌肥,云烟85以添加10% EM菌肥或胶质芽孢杆菌菌肥时烤烟的促生效果较好,建议在生产中推广应用。     

钾细菌制剂不同剂型对存活菌数的影响

用泥炭土、米糠、发酵液、菜园土、锯木屑、蒙脱土分别作吸附剂吸附钾细菌发酵液,进行不同剂型存放试验,结果表明,泥炭剂、米糠剂、菜园土剂存放时间都超过9个月,有实用价值,但综合生态和经济效益,以泥炭最好,成本最低,存放时间约为18个月,钾细菌存活率达92％,短期应用（3个月）也可直接使用发酵液作为最终产品。     

微生物菌组合对烟叶病残体的消毒效应研究

 为探索田间废弃鲜烟叶的处理途径,实现烤烟田间清洁生产,研究了采用微生物菌组合对携带烟草花叶病毒（TMV）的烟叶病残体进行发酵处理的技术。该技术的处理效果用ELISA检测、枯斑检测和烟苗浇根试验进行检验。结果表明,在含有TMV的废弃鲜烟叶发酵处理中,添加“乳酸菌+光合细菌+放线菌+地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌+胶质芽孢杆菌”的微生物菌组合,不仅能够有效地降解或破坏烟叶病残体中的TMV,抑制TMV的侵染活性,还对烟株生长发育有一定的促进作用,这对田间废弃鲜烟叶处理具有重要的参考价值。     

微生物肥料对植物生长的影响

人工选育的植物有益细菌作为生物肥料 ,对植物生长量和体内有效营养积累有一定的影响。研究结果表明 ,固氮细菌、解磷细菌、解钾细菌对玉米生长都能起到促进作用 ,都能提高玉米体内有效营养的积累量和N ,P ,K元素的释放 ,其中固氮细菌释放增长率为N =16 5% ,P =10 8% ,K=8 3% ,解磷细菌释放增长率为N =19 4% ,P =58 7% ,K =6 6 % ,解钾细菌释放增长率为N =13 0 % ,P =2 1 6 % ,K =2 1 6 %。解磷细菌效果最为明显 ,解钾细菌次之     

一株地衣芽孢杆菌的性质研究及发酵培养基优化

[目的]研究实验室自分离的地衣芽孢杆菌KL6作为微生物饲料添加剂的可行性,并对其发酵培养基进行优化,确定最佳培养条件,为工业化发酵提供依据。[方法]运用表型试验对其进行生理生化评价及产酶评价;运用4因素3水平正交试验和单因素试验对其培养基进行改进,并对其发酵条件进行优化。[结果]地衣芽孢杆菌KL6的D-葡萄糖产酸试验、硝酸盐还原试验、淀粉水解试验等均呈阳性;4种因素对活菌数影响的显著性次序为:MnSO4>NaCl>酵母粉>蛋白胨,对芽孢数影响的显著性次序为:MnSO4>蛋白胨>酵罐放大培养,最佳放罐时间应在14～16 h,获得的菌体数量约101.63×109个/ml,芽孢率为97.11%。[结论]体外评价试验表明,地衣芽孢杆菌KL6具有作为微生物饲料添加剂的潜力;发酵培养基及条件优化试验表明,地衣芽孢杆菌KL6能够适于高密度液体发酵。该试验为以KL6为基础的微生物饲料添加剂的开发和大规模发酵培养提供了理论依据。     

猪用复合微生态制剂制备及保存期内活菌数研究

为了确定两种猪肠道益生菌的同体发酵效果,以及复合微生态制剂在不同保存条件下的活菌数变化.对猪肠道益生菌干酪乳杆菌、罗伊氏乳酸杆菌进行同体发酵,测定其活菌数,然后按照一定比例将两种益生菌与液体发酵的纳豆芽孢杆菌冻干菌粉混合制成复合微生态制剂;测定该制剂在4℃和室温保存状态下14 d内及半年内益生菌活菌数量的变化.保存14...     

微生物菌群之间配比协调关系的研究

对乳酸杆菌、乳酸球菌、枯草芽胞杆菌、酵母菌、大肠杆菌等菌种进行单独培养和不同比例的混合培养,测定了发酵过程中pH值、活菌数量及光密度的变化情况。结果表明,与含有25%混合菌液的发酵麸皮相比,含50%混合菌液的发酵麸皮,在发酵24 h后的需氧或厌氧活菌总数都有升高趋势(P>0.05),发酵1周后其pH值的下降趋势明显(P<0.05),说明乳酸菌数越多使pH下降越大。利用需氧(LB)和厌氧(MRS)培养液分别交叉培养需氧菌和厌氧菌,均能在相应的培养基上生长。充分说明厌氧菌和需氧菌混合培养在理论上是可行的。但是,如果用滤菌膜过滤后的培养过乳酸菌的MRS培养基来培养需氧菌时,这些菌种均不能在滤液中生长。     

复合微生物菌剂中各菌株间的拮抗试验及培养条件的筛选

采用牛津杯法和平板涂布法对复合微生物菌剂中各菌株的拮抗作用及培养条件进行了研究。结果表明：各菌株之间存在一定的拮抗作用,可以通过调整菌种配比来降低各个菌株间的拮抗作用。拮抗作用较小的菌种配比为：嗜酸乳杆菌∶酿酒酵母∶枯草芽孢杆菌∶地衣芽孢杆菌∶胶冻样芽孢杆菌∶蜡样芽孢杆菌∶解淀粉芽孢杆菌∶黑曲霉∶米曲霉∶细黄链霉菌=6∶3∶2∶2∶6∶2∶2∶3∶2∶2。所选定的培养基为Ⅰ类培养基,pH 6.5。根据菌种习性、生长环境以及快速活菌计数结果确定制备复合微生物菌剂的添加顺序为嗜酸乳杆菌→酿酒酵母→芽孢杆菌→细黄链霉菌→真菌类。     

化学肥料-有机物-微生物肥料菌剂相互作用的研究

三种微生物肥料菌剂与有机物腐熟并粉碎的玉米和小麦秸秆按一定的比例混合后，加人3浓度4种组合的化肥，充分混合后24h、120h和350h取样检测微生物的数量。结果表明：化肥和有机物混合物中化肥和微生物制剂接触时间对微生物活性的影响，因化肥浓度的不同而异，固氮菌在低浓度时随时间的延长活菌数反而增加；解磷和解钾菌都具有中间活菌减少后期增加的现象。在一定化肥浓度范围内，化肥浓度越高固氮菌活菌数越低，化肥浓度较低时，无机养分可以促进固氮菌的生长；化肥的浓度影响解磷菌的活性，但是，不如化肥接种时间和化肥品种影响显著；化肥浓度显著影响解钾菌的活性．化肥在低浓度时能够促进解钾菌的生长。化肥的组成对固氮菌、解磷菌和解钾菌存活和生长的影响比较复杂，而且影响显著。     

胶质芽孢杆菌工业化发酵研究进展

土壤是一个天然钾库,蕴藏着丰富的硅酸盐矿物,但它们主要以稳定的硅铝酸盐和磷灰石状态存在,不能直接为作物吸收利用胶质芽孢杆菌是一类具有溶磷解钾功能的硅酸盐细菌,释放出硅酸盐矿物中的磷、钾等元素,直接供给植物生长利用分析论述了胶质芽孢杆菌对硅酸盐矿物的分解及其作用机理,在微生物菌肥生产发酵方面,从工业化生产角度出发,对如何降低发酵液黏稠度和获得高芽孢产量为目的的培养工艺等方面进行论述