分光光度法测定小球藻数量的方法研究

[目的]确定用分光光度法测定小球藻藻液浓度的适宜波长。[方法]在不同波长下对不同浓度普通小球藻藻液的吸光度进行测定,对有关数据进行生物统计分析。[结果]在8．7×10^6～8．7×10^8个／ml的浓度范围内,小球藻藻液的最大吸收波长在680nm左右,较高浓度小球藻藻液的吸光度超出了测定范围。显著性测验表明,9种波长下小球藻藻液浓度与藻液吸光度呈极显著直线相关。680nm波长下的测定灵敏度最高,其最高藻液浓度最低,为3．79×10^8个／ml;700nm波长下的测定灵敏度最低,其最高藻液浓度最高,为7．7×10^8个／ml;560nm波长下的测定灵敏度仅高于700nm波长下的,其最高藻液浓度为6．9×10^8个／ml;540nm波长下的测定灵敏度高于560nm波长下的,其最高藻液浓度为6．5×10^8个／ml。[结论]在680nm波长下测定小球藻藻液浓度,其灵敏度高、数据更精确。     

丁基罗丹明B氧化褪色光度法测定食盐中的碘含量

[目的]研究利用丁基罗丹明B氧化褪色光度法测定食盐中碘含量的方法。[方法]根据碘酸根使丁基罗丹明B的吸光度下降的程度与碘酸根的量有关的原理,建立了测定食盐中碘含量的分光光度法,并用该法测定了食盐中碘的最大吸收波长和表观摩尔吸光系数。[结果]当丁基罗丹明B用量为1.0ml时,ΔA最大。当KBr用量为1.5ml时,ΔA最大且体系稳定。在30～70℃内,ΔA变化不大。ΔA对浓度的标准曲线显示,在0～400μg/L范围内,碘含量与ΔA呈良好的线性关系,其线性回归方程为:ΔA=0.731C-0.0054,r=0.9916,计算得表观摩尔吸光系数ε560=9.27×104L/(mol·cm)。平行测定10次空白和含碘标准溶液的吸光度,其相对标准偏差分别为0.57%和1.60%,最大吸收波长均为560nm。[结论]样品分析结果RSD为0.66%～0.83%,平均回收率为100.5%,符合微量分析要求。     

雪莲果中绿原酸含量的测定

[目的]为雪莲果的开发利用提供理论依据。[方法]称取10．0g雪莲果,洗净、切碎,加入40％的乙醇180ml,回流提取其中的绿原酸,自然冷却后过滤。波谱定性检验选择适宜的测定波长,以95％乙醇为参比溶液,用配制好的一系列不同浓度的绿原酸标准溶液绘制标准曲线,测定提取液的吸光度,计算滤液中绿原酸的含量。[结果]绿原酸标准品和雪莲果样品提取液在330nm处有特征吸收峰,故选定330nm为最大吸收波长,测定雪莲果样品液的吸光度。雪莲果中绿原酸的平均吸光度值为1．105,含量为0．052％。采用分光光度法测得雪莲果中绿原酸的RSD值为3．07％,平均回收率为105．85％。[结论]雪莲果中绿原酸的含量为0．052％。     

甲磺酸加替沙星-Al(III)荧光体系的研究及应用

[目的]研究铝（Ⅲ）-甲磺酸加替沙星荧光体系测定微量铝（Ⅲ）方法的建立与应用。[方法]在C6H4CO2HCO2K-NaOH介质中,铝与甲磺酸加替沙星形成络合物使甲磺酸加替沙星的荧光强度（ΔF）显著增敏,由此建立了测定铝的新方法,并研究不同溶液酸度、表面活性剂、甲磺酸加替沙星用量、试剂加入顺序对该体系ΔF的影响。[结果]荧光光谱图显示,该体系的最大激发波长λex=365 nm,最大发射波长λem=470 nm。溶液的酸度对该体系的ΔF有较大影响,pH值在5.50～6.50时可使该体系的增敏作用达到最大且较稳定。加入表面活性剂对ΔF均无较明显的影响。该体系中铝的浓度在1.58×10^-8～4.24×10^-6mol/L范围内与ΔF=F-F0具有良好的线性关系,最低检出限为8.36×10^-9mol/L,回收率为99.4%～101.4%。[结论]该方法用于测定食品中微量铝的含量可获得灵敏度较高和选择性较好的结果。     

3, 5-二硝基水杨酸比色法测定荠菜多糖含量的研究

[目的]为荠菜多糖的开发提供一定的理论依据。[方法]采用3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法测定了荠菜还原糖的含量并通过单因素试验研究确定了其最佳测定条件。[结果]在0．5～1．5ml的范围内,吸光度随着DNS用量的增加而增大;当DNS的用量大于1．5m1时,吸光度基本不变。在4～6min内,吸光度随着加热时间的延长而显著增大;6min后吸光度基本稳定。在70～90℃内,吸光度随着反应温度的升高而显著增大;反应温度超过90℃后,吸光度随着反应温度的升高而趋于稳定。放置20min后吸光度达到最大。3,5-二硝基水杨酸比色法测定的荠菜还原糖含量为1．002％,总糖含量为7．3393％,多糖含量为6．3373％。[结论]该试验确定的DNS比色法的最佳测定波长为510nm,最佳DNS用量为1．5ml,最佳反应温度为90℃,最佳反应时间为6min,最佳放置时间为20min。     

山楂红色素提取及稳定性研究

[目的]探讨山楂红色素的提取方法和稳定性。[方法]用UV-754紫外可见分光光度计测定山楂红色素在不同波长下的吸光度值,确定其最大吸收波长,再用721分光光度计在该波长下测定不同色素溶液的吸光度值。[结果]液泛提取法是提取山楂红色素的最佳方法,其色素的色价和收率均高于另外2种方法,提取时间短,溶剂用量相对较少。山楂红色素的最大吸收波长为533nm,温度上限约为50℃,其在酸性溶液中有良好的稳定性,浸提液在室内比较稳定,对阳光较敏感。K+对色素没有明显影响,Ca2+对色素的吸光值有一些增强作用,而少量Fe3+会对色素产生严重影响。[结论]以0.1%HCl-95%乙醇为浸提液,采用液泛法提取山楂红色素能提高色素的色价和收率。     

紫外-可见分光光度法测定单质碘含量

建立了紫外-可见分光光度法测定单质碘含量的新方法.结果表明,I2在KI水溶液、丙酮、无水乙醇及三氯甲烷中的最大吸收波长（λmax）分别为287.5 nm、363.5 nm、446.5 nm和511.0 nm,且其光吸收特性符合朗伯比尔定律;I2在不同溶剂中贮液吸光度的稳定性大小依次为：三氯甲烷=无水乙醇〉KI水溶液〉丙酮;加入适量盐酸能显著提高丙酮溶液中I2的吸光度和贮液稳定性,当CHCl=2.88×10-5mol/L时,其分析灵敏度εmax可提高32.2%;在所选用的4种溶剂中,I2的平均回收率均达99.3%以上,相对标准误差均小于1.0%,检出限在9×10-7～4×10-6mol/L之间,虽然εmax存在差异,但其回收率、灵敏度和准确度均能满足微量组分分析的要求.     

曙红Y褪色光度法测定盐酸普罗帕酮

在pH=3.2的HCl-NaAc缓冲溶液中,曙红Y(EY)与盐酸普罗帕酮(PPF)形成1∶1的离子缔合物,导致溶液的吸收光谱变化,在518 nm处产生明显的褪色作用,并在550 nm处出现新的吸收峰.PPF的质量浓度在0.2～4.0 μg/mL范围内与褪色波长处的吸光度变化值呈良好的线性关系,据此建立一种测定PPF的分光光度新方法.方法简便快捷,灵敏度较高,摩尔吸光系数(ε)为4.16×104 L/(mol·cm).研究了适宜的反应条件和影响因素,并考察了共存物质的影响,表明方法具有较好的选择性,可用于PPF片剂含量测定.     

补益药中微量铜的微波消解光度法测定

[目的]为中药材中微量Cu的测定和样品处理建立一种新的理论和方法。[方法]研究了有机试剂硝基磺酚C与Cu（Ⅱ）的光谱变化、反应条件、表面活性剂及共存物质的影响,并研究了样品处理和测定的方法。[结果]在pH值2.8的Britton-Robinon缓冲介质中,紫红色的硝基磺酚C能与Cu（Ⅱ）形成蓝色配合物,λmax为665nm,比试剂本身红移115nm。Cu含量在0～1.28μg/ml范围内符合Beer定律,表观摩尔吸光系数为2.13×104L/（mol.cm）,乙醇存在有增敏作用。[结论]建立了微波消解样品,微量Cu测定的光度新方法。建立的方法简便,灵敏度高,用于中草药中Cu含量的测定,取得了满意的结果。     

苦参药材中总生物碱含量的测定

[目的]用酸性染料比色法测定不同产地苦参药材中总生物碱的含量。[方法]苦参总生物碱的浓度50%乙醇溶液,加一定pH值的缓冲溶液溴麝香草酚蓝指示液振摇后,氯仿萃取,萃取液于一定波长处测定吸光度A。[结果]氧化苦参碱检测浓度在0.013~0.026mg/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.997 1)。用氧化苦参碱作为对照品,在pH值7.0的条件下加入2.0 ml的溴麝香草酚蓝溶液,在417 nm处有最大吸光度,该条件下可准确地测定苦参药材中总生物碱的含量。试验测得不同产地苦参药材中总生物碱含量差异较大,其中所购得的陕西、甘肃苦参药材中总生物碱含量较高,分别为1.801、1.778 mg/kg。[结论]该试验所采用的方法操作简便、准确,可通过总生物碱的含量客观全面地评价苦参药材的质量。     

高效液相色谱法测定茶叶中的咖啡因

[目的]建立HPLC法快速测定茶叶中的咖啡因。[方法]色谱柱Zorbax-C8（4.6 mm×250.0 mm,5.0μm）;流动相为0.04 mol/L柠檬酸水溶液∶N,N-二甲基甲酰胺（DMF）∶四氢呋喃（THF）=90∶16∶4;流速为1.00 ml/min;柱温60℃;检测波长280 nm;进样量为10μl。[结果]咖啡因在20~100μg/ml时,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,加标回收率为98.9%~102.3%,相对标准偏差RSD为0.23%。[结论]该方法简单、快速、准确,适用于茶叶和茶饮料中咖啡因含量的测定。     

微波消解-硝基磺酚C光度法测定杂粮中痕量铜的研究

[目的]寻找测定杂粮中痕量铜的新方法。[方法]研究样品的微波消解条件、硝基磺酚C与Cu（Ⅱ）的光谱变化及反应条件以及表面活性剂、共存离子的影响和乙醇的增敏作用。[结果]在pH值2.35～3.30的Britton-Robison缓冲介质中,紫红色染料硝基磺酚C可与Cu（Ⅱ）形成蓝色配合物,λmax为660nm,比试剂的λmax550nm红移达110nm。铜含量在0～1.28μg/ml范围内符合比尔定律,表观摩尔吸收系数为1.71×10^4L/（mol.cm）。[结论]该方法操作简便,重现性好,用于杂粮中Cu（Ⅱ）含量测定结果令人满意。     

青刺果总黄酮定性分析及含量测定

[目的]建立青刺果（Prinsepia utilis Royle）黄酮鉴别与含量测定的方法。[方法]采用乙醇回流法从青刺果油粕中提取总黄酮,通过颜色反应和薄层层析对青刺果黄酮进行理化鉴别,并用Al（NO3）3-NaCO2络合比色法测定其含量。[结果]供试品溶液的最大吸收波长为510nm,在15min内稳定。芦丁对照品溶液浓度（x）与吸光度值（y）的线性回归方程式：y=-2.571×10-3＋13.163x,r=0.9998,线性关系良好;加样回收率在98.00%～104.00%,平均为101.16%,RSD=2.15。测得青刺果粗品中总黄酮含量为7.20%～7.30%,平均为7.25%±0.05%,RSD=0.69%;青刺果油粕中总黄酮含量为0.37%～0.38%,平均为0.38%±0.01%,RSD=1.54%;总黄酮得率为5.17%～5.25%,平均为5.20%±0.04%,RSD=0.80%。[结论]该研究建立的紫外分光光度法简便、快速、准确、可靠,可用于青刺果总黄酮含量的测定。     

火焰原子吸收法快速测定安康紫阳富硒茶中的微量硒

[目的]为获得生物态有机硒提供依据。[方法]建立火焰原子吸收法测定安康紫阳富硒茶中微量硒含量的新方法。[结果]紫阳富硒茶中硒含量为2.033~2.885 mg/kg,高于普通茶叶,但其分布不均匀。以硫酸为空白对照,吸取不同浓度的样品溶液,在波长196.09nm处测定其吸光度,其回归方程为y=0.004x+0.002(R=0.997 8),其线性范围为0~40.00 mg/L。直接添加100 ml混酸HNO3-HClO4作为分解剂,湿法硝化分解安康市紫阳地区富硒茶叶效果显著。在样品中加入基体改进剂Ni(NO3)2,可使吸光度和稳定性明显提高,并排除Fe、Mg、K、NaS、O42-的干扰。[结论]使用该方法测定茶叶中的硒含硒量,结果准确可靠,对其在生产中的应用具有指导作用。     

茶叶中儿茶素的提取研究

[目的]为了研究溶剂萃取法提取茶叶中儿茶素的优化条件。[方法]以乙醇为浸提液,采用香草醛-盐酸法测定茶叶中儿茶素的含量,并通过正交实验确定提取茶叶中儿茶素的最佳工艺条件。[结果]儿茶素溶液的最大吸收波长为505 nm。儿茶素浓度与吸光度间的回归方程为:A=0.017 5X+0.044 7(R2=0.999 7)。正交实验结果表明,儿茶素的最佳提取和纯化条件为:以80%的乙醇为溶剂浸提2次,60℃下浸提35 min,料液比为1∶13。影响儿茶素含量的因素依次为:乙醇浓度>浸提时间>提取温度>料液比。[结论]该研究为儿茶素的应用奠定了基础。     

高效毛细管电泳法测定鸡蛋中环丙沙星的研究

[目的]建立高效毛细管电泳测定鸡蛋中环丙沙星含量的方法。[方法]通过对电泳缓冲液类型、离子浓度和pH值、样品溶剂种类、分离电压、分离温度和冲洗程序等电泳条件进行考察,确立测定鸡蛋中环丙沙星的高效毛细管电泳法,并测定电泳参数对检测结果的影响。[结果]在检测波长为277 nm时,最佳电泳条件为:电泳缓冲液为30 mmol/LNa2B4O7-10 mmol/LKH2PO4溶液(pH值8.53),未涂层石英毛细管(50μm×47 cm,有效长度38.5 cm)为分离通道,分离电压为18 kV。在鸡蛋中对环丙沙星的检测结果显示,在最佳电泳条件下,环丙沙星在11 min内实现基线分离,在0.25～80.00μg/ml浓度范围内其浓度和峰面积呈良好的线性关系(R2=0.999 2),平均加标回收率为101.48%,平均RSD为2.466 4%(n=5)。[结论]该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于鸡蛋中环丙沙星含量的测定。     

锰-铬天青S-邻菲罗啉-溴化十六烷基三甲铵四元络合物光度法测定茶叶中的锰

[目的]探讨采用四元络合物分光光度法测定茶叶中的微量锰含量的效果与特点。[方法]通过铬天青S（CAS）、1,10-邻菲罗啉（Phen）、溴化十六烷基三甲铵（CTMAB）与锰形成四元络合物,采用分光光度法测定茶叶中锰的含量。[结果]Mn—CAS—phen-CTMAB四元络合物的最大吸收波长为618nm;锰含量在0～1．2μg/ml的范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0．9984,摩尔吸光系数为ε618=7．4×10^4L／（mol·cm）,方法的检出限为0．062μg/ml;回收率为98．1％～103．1％,测定结果的相对标准偏差为2．0％～2．6％。[结论]该测定法加大了缓冲溶液的用量,保证了测定体系的pH值,确定最佳显色时间为35min,消除干扰离子影响的最佳掩蔽剂为5％KF2．0ml＋饱和硫脲1．0ml。该方法具有较高的选择性和灵敏度,是一种测定茶叶消化液中微量锰的准确可靠的方法。     

紫外分光光度法测定发酵液中卑霉素的含量

[目的]介绍利用紫外分光光度法测定发酵液中卑霉素含量的方法。[方法]以乙酸乙酯为提取剂,扫描卑霉素的乙酸乙酯溶液在200～400 nm的吸收峰,准确配制出系列浓度的卑霉素乙酸乙酯溶液,绘制标准曲线,在最佳波长下进行测定,然后对发酵样品进行3次离心处理得到样品溶液,再对样品液进行重现性、稳定性的研究和回收率的计算,用抑菌圈法验证样品的抑菌效果。[结果]选择275nm波长作定量峰,卑霉素的乙酸乙酯溶液浓度在0.5～12.0 mg/L范围内、pH值为4.6的条件下,其吸收度与浓度的线性关系良好,线性回归方程y=15.968 0x＋0.030 7,相关系数为0.995 5。样品溶液在室温条件下放置24 h保持仍稳定,平均回收率为102.13%。[结论]试验证明,用紫外分光光度计法检测发酵液中的卑霉素含量是可行的。