气相色谱法测定蝉花中角鲨烯的含量

[目的]建立毛细管气相色谱(GC)测定蝉花中角鲨烯含量的方法。[方法]采用气相色谱法测定蝉花中角鲨烯,并对不同部位天然蝉花的角鲨烯含量进行比较,确定蝉花中角鲨烯含量测定的最佳条件。[结果]1 g蝉花经超声波提取后,经1 m L 0.5 mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液40℃皂化5 min,再经正已烷萃取净化,采用GC法测定角鲨烯含量。该方法在角鲨烯质量浓度为21.43~214.30μg/m L(r=0.999 2)范围内线性关系良好,方法精密度良好(RSD=3.71%),加标回收率为77.80%~97.32%,平均加标回收率(n=9)为88.10%。[结论]气相色谱法简单快速,污染小,检测灵敏度高,可用于蝉花中角鲨烯含量的测定。     

不同测定方法测定小蓟中绿原酸含量的研究

[目的]选用分光光度法与HPLC法同时测定青海小蓟中绿原酸的含量,以寻找既迅速快捷又廉价的检测方法。[方法]采用甲醇对小蓟中绿原酸进行提取,①采用酚类物质中酚羟基与三氯化铁的显色反应,进行绿原酸含量的比色测定;②用高效液相色谱仪（HPLC）对小蓟中的绿原酸含量进行测定。[结果]小蓟中绿原酸含量以HLPC法测出的值较高。[结论]这两种测定方法简单、快捷,均可用于小蓟中绿原酸含量的检测与评价。     

不同黄精材料中多糖含量的比较

[目的]比较黄精愈伤组织、新鲜黄精和炮制黄精中多糖的含量,为黄精多糖的工业化生产奠定基础。[方法]采用超声细胞粉碎法提取组织培养黄精愈伤组织、新鲜黄精和炮制黄精中的多糖。[结果]新鲜黄精中多糖含量最高,愈伤组织中其含量与新鲜黄精接近,炮制黄精中多糖含量最低。[结论]该研究为黄精多糖的开发利用及工业化生产奠定了基础。     

不同培养条件对草麻黄愈伤组织麻黄碱含量的影响

[目的]探寻适宜草麻黄愈伤组织麻黄碱生成的最佳培养条件。[方法]采用乙醚抽提法提取麻黄碱,用紫外分光光度计测定麻黄碱含量,分别试验水解酪蛋白浓度、基本培养基、取材时间、摇床转速对麻黄碱含量的影响。[结果]适宜草麻黄愈伤组织麻黄碱生成的条件为以MS为基本培养基,以继代培养25 d的愈伤组织为材料,添加300.0 mg/L的水解酪蛋白,在转速110 r/min的摇床上悬浮培养。[结论]该研究为麻黄碱的植物细胞体外工厂化生产奠定了基础。     

光质对苋菜愈伤组织生长及甜菜色素和类胡萝卜素合成的影响

为探究光质对苋菜愈伤组织中甜菜色素及类胡萝卜素合成的影响,研究蓝光、白光、绿光、红光、远红光、黑暗对苋菜愈伤组织生长状态及类胡萝卜素和甜菜色素含量的影响,并将苋菜愈伤组织中类胡萝卜素提取条件进行优化。结果表明,只有蓝光和白光可以诱导分化出红色愈伤组织,其他光质下苋菜愈伤组织呈黄色或白色;与黑暗相比,蓝光最有利于苋菜愈伤组织中甜菜色素、类胡萝卜素的合成,白光次之,其他光质无法合成甜菜色素;筛选出类胡萝卜素最佳提取条件是:采用丙酮与石油醚比为1∶1混合提取液,苋菜愈伤组织与提取液比为1∶100,提取时间8 h。     

马铃薯茎、叶中茄尼醇皂化研究

[目的]建立一种用Na OH皂化马铃薯茎、叶中茄尼醇的方法,并考察浓度、温度、时间等因素对皂化的影响。[方法]采用加热回流提取法从马铃薯茎、叶中提取得到茄尼醇浓缩液,再用Na OH对茄尼醇酯进行皂化,得到更多游离茄尼醇。[结果]Na OH皂化的条件为Na OH浓度0.75 mol/L、皂化时间0.5 h、皂化温度40℃,经皂化后可使溶液中茄尼醇含量增加37%。[结论]该方法操作简便、合理,可行性强,有利于提高茄尼醇含量。     

新疆雪莲芽分化过程蛋白质·可溶性糖含量及淀粉酶活性变化

[目的]研究新疆雪莲分化过程中的生理生化变化。[方法]将以雪莲无菌苗的叶片为外植体诱导的雪莲胚性愈伤组织置于MS+2 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA(pH值为5.85~5.90)培养基上进行培养,对培养过程中雪莲细胞可溶性蛋白含量、可溶性糖、淀粉酶等参数进行测定分析。[结果]在新疆雪莲整个培养阶段,胚性愈伤组织中的蛋白质含量高于非胚性愈伤组织,可溶性糖保持稳定,仅在芽分化阶段有一定的上升,α-淀粉酶活性保持稳定。胚性愈伤组织中的β-淀粉酶的活性均高于非胚性愈伤组织,这说明β-淀粉酶与细胞的分化过程密切相关。β-淀粉酶在整个培养过程中呈现双峰曲线。第1个峰出现在培养的开始阶段,第2个峰出现在芽分化时期。[结论]该研究对研究新疆雪莲的高频再生具有重要的指导意义。     

中药白芍愈伤组织的培养及其中芍药苷的测定

[目的]建立中药白芍愈伤组织培养的方法,并测定其中芍药苷的含量。[方法]以白芍叶、茎为外植体,接种于不同的愈伤诱导培养基和继代培养基上培养愈伤组织,并提取愈伤组织中的芍药苷,用TLC和HPLC法测定愈伤组织中芍药苷的含量。[结果]适合白芍茎的诱导愈伤培养基是1/2MS+0.2 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,叶的最适诱导培养基是1/2MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA,白芍愈伤继代培养适合培养基为1/2MS+0.1 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA。经HPLC测定每克干白芍愈伤组织中的芍药苷含量为0.068 9 mg。[结论]中药白芍的叶和茎可诱导形成愈伤组织,且形成的愈伤组织中含有芍药苷。     

继代次数对吉粳88愈伤组织生理生化指标及细胞形态的影响

[目的]研究继代次数对吉粳88愈伤组织生理生化指标及细胞形态的影响。[方法]以继代次数为单因素变量,测定吉粳88愈伤组织中可溶性蛋白含量、过氧化物酶活性、可溶性糖含量以及丙二醛含量,并通过临时装片观察细胞形态。[结果]随着继代次数的增加,愈伤组织的分化率和再生率呈下降趋势;可溶性蛋白含量基本保持在2.92 mg/g FW左右,无明显变化。MDA含量呈先增加后减少的趋势。POD活性和可溶性糖含量与愈伤分化率极显著相关。细胞形态观察发现,随着继代次数增加愈伤组织逐渐由胚性愈伤转化为非胚性愈伤。[结论]在悬浮培养体系建立时,以D4、D5、D63代为宜,为吉粳88再生体系的建立和优化指明了方向。     

决明子叶愈伤组织中大黄素与大黄酚含量的测定

[目的]通过愈伤组织的诱导培养,提高决明材料中大黄素或大黄酚的含量。[方法]用MS培养基萌发决明幼苗、诱导子叶愈伤组织,用HPLC法测定子叶愈伤组织中大黄素、大黄酚的含量。[结果]子叶愈伤组织中大黄素含量为0.099%,大黄酚含量为0.132%;决明子中的大黄素含量为0.029%,大黄酚含量为0.190%。[结论]诱导子叶愈伤组织的方法有助于提高决明材料中的大黄素含量。     

青蒿鲨烯合酶cDNA的克隆与序列分析

[目的]对青蒿鲨烯合酶进行cDNA克隆,并进行序列分析。[方法]根据GenBank上已发表的鲨烯合酶cDNA基因序列设计1对特异性引物,提取青蒿细胞总RNA,运用RT-PCR扩增出鲨烯合酶基因。将其与pMD19-T载体连接,并对克隆片段序列进行分析。[结果]SS基因全长1257bp,编码418个氨基酸;同源性分析表明,青蒿SS基因序列与人参、积雪草、金铁锁、大豆、辣椒、百脉根、远志、玉米、褐家鼠、小鼠以及人相应序列的同源性分别为77.21%、76.11%、75.66%、74.62%、73.83%、74.46%、73.03%、64.39%、52.22%、50.51%和50.12%;氨基酸同源性分别为79.43%、79.00%、75.84%、79.43%、77.27%、77.27%、77.03%、66.03%、40.65%、40.19%和40.09%。[结论]青蒿鲨烯合酶cDNA的成功克隆,为进一步研究SS基因结构、基因表达与调控提供了重要依据。     

青蒿鲨烯合酶cDNA的克隆与序列分析(英文)

[目的]对青蒿鲨烯合酶进行cDNA克隆,并进行其序列分析。[方法]根据GenBank上已发表的鲨烯合酶cDNA基因序列设计1对特异性引物,提取青蒿细胞总RNA,运用RT-PCR扩增出鲨烯合酶基因。将其与pMD19-T载体连接,并通过DNAman、NCBI Blast、ExPASy ProtParam等工具,对克隆片段序列进行分析。[结果]SS基因全长1257bp,编码418个氨基酸;同源性分析表明,青蒿SS基因序列与人参、积雪草、金铁锁、大豆、辣椒、百脉根、远志、玉米、褐家鼠、小鼠以及人相应序列的同源性分别为77.21%、76.11%、75.66%、74.62%、73.83%、74.46%、73.03%、64.39%、52.22%、50.51%和50.12%;氨基酸同源性分别为79.43%、79.00%、75.84%、79.43%、77.27%、77.03%、66.03%、40.65%、40.19%和40.09%。由SS基因翻译出来的蛋白质分子量为47.8394KDa,理论等电点为8.57,无信号肽。疏水性分析表明,在400~417区域疏水性较强。跨膜区分析表明有3处跨膜区域,分别为170～186位的17个氨基酸、282～305位的24个氨基酸、387～407位的21个氨基酸。通过NCBI的BLAST程序分析指出,该基因编码的氨基酸序列含有Trans_IPPS_HH的保守区域,也具有与Mg2+结合有关的活性中心——富含天门冬氨酸的区域(DXXDD)。2级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。[结论]青蒿鲨烯合酶cDNA的成功克隆,为进一步研究SS基因结构、基因表达与调控提供了重要依据。     

白木香愈伤组织与叶片DNA快速提取方法的确定

[目的]确定白木香愈伤组织与叶片DNA的快速提取方法.[方法]用TE、ES1、ES2 3种提取液及相应的方法提取叶片和愈伤组织总DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测提取产物,通过普通PCR及荧光定量PCR检查DNA的可用性,并将PCR产物经克隆测序验证.[结果] ES1法提取的叶片和愈伤DNA条带清晰,纯度较高;普通PCR和荧光定量PCR可扩增出200和600bp左右的目的条带.ES2法提取液电泳不能检测到DNA条带,但PCR可扩增出愈伤组织200bp左右目的条带.TE法得到的提取液检测不到DNA条带且PCR不能得到目的条带.[结论] ES1提取液及相应的提取方法可用于白木香愈伤和叶片DNA高通量快速提取,为沉香属植物种质研究和分子研究奠定基础.     

苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑制及机理研究

通过测定苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌活性、菌液的OD600nm值、电导率、蛋白质含量、保护酶和呼吸代谢途径酶活性,探索苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌机理。结果表明:苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的室内平板抑菌圈直径在15 mm以上,最低抑菌质量浓度MIC为3.68 mg/m L;苋菜乙酸乙酯提取物不仅延迟了病原菌进入对数生长期的时间,而且使其电导率增加了15%;苋菜乙酸乙酯提取物对过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)的酶活力的抑制率分别为78.43%、68.63%、63.14%、68.00%。扫描电镜观察发现,苋菜乙酸乙酯提取物使柑橘溃疡病菌的菌体细胞膜遭受损伤,菌体发生裂解;透射电镜观察发现,苋菜乙酸乙酯提取物使柑橘溃疡病菌的细胞壁和细胞膜结构受损,胞内空白面积增大,细胞质外泄,菌体裂解。     

铜对苋菜气孔气体交换的影响

[目的]探究铜胁迫对苋菜生理过程的影响。[方法]用土培的方法,研究铜对苋菜幼苗气孔气体交换和光合色素的影响及铜在植物体的分布。[结果]0.5 mmol/kg铜处理对苋菜生长有利;随着铜浓度的增加,苋菜净光合速率明显降低,主要归因于非气孔限制;蒸腾速率、光饱和点、表观量子效率和光合色素含量下降,光补偿点升高;暗呼吸速率在0.5~2.0 mmol/kg下升高,在4.0 mmol/kg下降低;苋菜根系铜含量远高于叶片,且随着铜处理浓度的升高,根系和叶片铜含量明显增加。[结论]该研究为苋菜种植和探讨铜对植物毒害的生理机制提供依据。     

黄芩单细胞克隆愈伤组织生物量积累变化曲线的建立与分析

[目的]筛选黄芩单细胞克隆优良品系。[方法]选取第10代黄芩单细胞克隆（HQSC）6个品系的愈伤组织作为试验材料,并以黄芩根亲本细胞愈伤组织（0号）为对照（CK）,继代后比较不同样本的净增长量。[结果]1～30d培养期内,HQSC各品系愈伤组织生物量积累均呈＂S＂形曲线变化,其中7、7S号愈伤组织生物量积累速度较快;HQSC各品系愈伤组织延迟增长期为培养后5～8d,对数增长期为培养后9～23d,稳定期为培养后24～30d;在对数增长期内,7S号HQSC愈伤组织的增长量最大,1号HQSC愈伤组织的增长量最小;在稳定增长期内,7号HQSC愈伤组织的增长量最大,1号HQSC愈伤组织的增长量最小。[结论]7、7S号HQSC愈伤组织的增长速度较快。     

蕾期授粉对三色堇结实的影响

[目的]探究蕾期授粉对三色堇结实的影响。[方法]对LRR(丽人红)和STR(神童红)2个品种花蕾的长度进行连续调查,每个品种选10朵健康的小花蕾进行试验。[结果]结果表明:三色堇蕾期的时间一般为10 d左右,LRR和STR 2个品种均在蕾期6~7 d时授粉时结实率达到最高,幼嫩和接近开花的花蕾蕾期授粉均未得到种子。[结论]在三色堇的栽培选育过程中授粉时期和授粉方式等都会对其结实产生影响。成熟度高的花蕾,柱头识别花粉的能力强,自交不亲和的抑制能力也强;反之亦然。     

正交试验法优选反枝苋粗多糖的提取工艺

[目的]优化适合生产的反枝苋粗多糖的提取工艺条件.[方法]以药用植物反枝苋为原料,以粗多糖的提取量为指标,用水提取反枝苋粗多糖,通过正交试验,研究料液比、提取时间及提取次数(C)对反枝苋多糖得率的影响,确定多糖的最佳提取工艺.[结果]影响反枝苋粗多糖提取率的因素主次关系是提取时间＞提取次数＞料液比.最佳提取工艺为A1B2C3,即料液比1:10 g/ml,提取时间2h,提取次数为3次,在该工艺条件下,反枝苋多糖得率为2.102％.[结论]该试验优选出的反枝苋多糖提取工艺操作简单、工艺稳定、经济可行.     

酶法辅助提取工艺对橄榄油品质的影响

[目的]研究酶法辅助提取对橄榄油理化性质和营养成分的影响,为陇南油橄榄的合理开发利用提供科学依据。[方法]以陇南油橄榄为原料,采用纤维素酶辅助法提取橄榄油,将酶法提取与未经酶处理提取的橄榄油作气相色谱-质谱联用仪分析,以及理化指标测定。[结果]通过酶法辅助技术,橄榄油得率可提高3.48%,脂肪酸组分主要为油酸(81.78%)、棕榈酸(9.04%)、硬脂酸(1.50%)、亚油酸(7.01%)、棕榈油酸(0.52%),其中不饱和脂肪酸含量超过了89%;酶法提取对橄榄油脂肪酸组分含量影响不大。橄榄油的酸价、碘值、皂化值、过氧化值4种指标符合国际食用油标准,纤维素酶辅助提取的橄榄油碘值高于未加酶提取的,其他3个指标基本相同。[结论]酶法辅助提取橄榄油具有良好的应用前景和经济价值。