不同地理株大型艾美耳球虫单卵囊分离及卵囊产量的比较

目的为组成1个遗传变异较大的大型艾美尔球虫株作为早熟选育的背景。方法从河北省无极县、河北省张家口市、浙江省舟山市、江苏省南京市、四川省乐山市、云南省昆明市6个不同地区的兔场采集兔粪,收集卵囊,培养至孢子化。根据大型艾美尔球虫的形态特征,采用改进的琼脂板法单卵囊分离技术将混合兔球虫种分离开,单卵囊接种无球虫兔,当有大量卵囊排出时分别收集不同地理株的卵囊,孵化后接种无球虫兔,1×10~4卵囊/只,在接种后6～16 d的排卵期间,每天収粪、计数,并记录每只兔的排卵量。结果单卵囊接种的成功率为88.9%;用1×10~4个卵囊接种无球虫兔后,不同地理株的卵囊产量,张家口株最多,依次为无极株、南京株、乐山株、昆明株,舟山株最少。结论单卵囊分离的成功率较高,不同地理株排卵量不同。     

尿素溶液对兔球虫卵囊作用效果对比试验

利用尿素溶液、饱和食盐水、硫酸镁溶液和砂糖溶液作漂浮液,通过漂浮、离心方法收集兔球虫卵囊,在相同条件下进行3个试验比较。其一,不同漂浮液对浮集兔球虫卵囊作用比较;结果表明利用尿素溶液浮集效果最好(2.872 51×105个),其次是硫酸镁溶液(2.184 25×105个),最低的是砂糖溶液(1.792 81×105个)。其二,不同漂浮液对兔球虫卵囊破坏作用比较;结果表明20 m in时硫酸镁溶液对卵囊破坏率最低,破坏率最大的是饱和食盐水,随着时间延长各种破坏作用增大,60 m in时饱和食盐水和尿素溶液中有极少卵囊破损和卵囊变形现象。其三,不同漂浮液对兔球虫卵囊发育影响作用比较;结果表明硫酸镁溶液影响率最小(4.94%)最大的是饱和食盐水(7.47%)。     

肉兔球虫病的综合防治

球虫病是家兔的主要疾病之一,常以地方流行病的形式发生,家兔球虫病是由艾美尔科艾美尔属的多种球虫寄生于兔的肠道(斯氏艾美尔球虫寄生于胆管上皮细胞)上皮细胞内引起的.兔球虫卵囊在湿度55%～75%、温度20℃的外界环境中经过2～3d即可发育成熟而具有感染性.家兔感染球虫病,是由于家兔吃到了孢子化卵囊而引起的.断奶、变换饲料、营养不良、兔笼卫生差、饲料和饮水常被兔粪污染等都能促使球虫病的发生和散布.鼠类和苍蝇也可机械地搬运卵囊而散布病原、各个品种和不同年龄的家兔都容易感染球虫病,但以1.5～4月龄的幼兔最容易发病,死亡率也高.成年兔发病轻微,家兔耐过球虫病后无免疫性,且可长期带虫而不显症状,成为感染源.     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

探讨兔球虫病的诊断方法,为兔球虫病的诊断和防治提供理论依据.对河南省新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,以及对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定.结果发现,粪便中检出大量球虫卵囊,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,因此,确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病.     

中草药对兔球虫卵囊体外发育的影响

为探讨白头翁、常山、南瓜子、青蒿、柴胡、绞股蓝、秦皮、石榴皮、板蓝根、黄柏、槟榔、马齿苋等12味中草药水煎剂对兔球虫卵囊孢子化的影响,选用100%、50%、25%不同浓度的单味药物对未孢子化的兔球虫进行体外抑制试验,于第3、5d 分别计数。然后,洗去中药组的药液,加等量2.5%的重铬酸钾溶液,继续培养3天,计算每组卵囊的孢子化率。结果表明,所选用的12种中草药中白头翁、南瓜子、柴胡、绞股蓝的3个浓度均可以明显抑制卵囊的孢子化；而石榴皮、马齿苋、板蓝根仅100%浓度抑制球虫卵囊有一定效果；常山、青蒿、秦皮、黄柏、槟榔抑制球虫卵囊孢子化的作用效果不明显。洗去中药后,只有100%、50%浓度的绞股蓝有部分卵囊没有孢子化,白头翁、南瓜子、柴胡、马齿苋组兔球虫在重铬酸钾环境中仍可继续生长,这说明单味中药对卵囊只能抑制其发育而不能有效杀灭,即脱离开中药环境,兔球虫仍可继续发育。     

单味中药对兔球虫卵囊孢子化抑制效果的研究

研究单味中药在不同时间及不同浓度下对兔球虫卵囊孢子化抑制效果。首先,在同浓度单味中药培养的条件下进行观察,发现随着时间的延长,除鸦胆子中卵囊孢子化率没有升高外,其余中药球虫卵囊孢子化率均有不同程度的升高;鸦胆子对兔球虫卵囊孢子化有显著的抑制作用,仙鹤草、常山、青蒿、马鞭草、使君子和柴胡有一定的抑制作用;各组洗去中药继续培养3 d,发现各组卵囊孢子化率均呈上升趋势。这表明,虽然有些中药对兔球虫孢子化有一定的抑制作用,却不能杀灭卵囊。不同浓度中药抑制实验结果表明,仙鹤草、常山、青蒿、鸦胆子随浓度增高孢子化率改变明显,100%浓度抑制球虫卵囊孢子化的效果优于50%和25%浓度,而马鞭草、使君子、柴胡随浓度变化改变不明显。     

兔球虫病的防治

负．球虫病是家兔中最常见而且危害最严重的一种寄生虫病。该病多发生在潮湿多雨的梅雨季节．特别是4月龄内的幼兔感染最为严重。感染了球虫病的兔，一般体重可减轻10%-30%，死亡率高达80％以上，未死的耐过兔生长发育受到严重影响，造成极大损失。病兔和带虫兔的粪便中的卵囊是该病的传染源。饲养管理不好可使卵囊广泛散布，因而污染饲料、饮水、饲具、用具和环境。     

8种中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材的抗球虫卵囊孢子化作用,为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材不同浓度(25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL)水提物对兔球虫卵处理不同时间(2h、4h、16h),观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响。【结果】8味中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用,大部分中药材浓度越高,抑制效果越好,与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵囊孢子化的效果与药材种类有关,蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关,土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率,125mg/mL土荆皮作用16h效果最好,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%;125mg/mL川楝子作用16h的效果最差,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

家兔大型艾美尔球虫四川株的致病性和免疫原性研究

【目的】为调查兔大型艾美尔球虫四川株的致病性和免疫原性。【方法】本研究利用实验室分离到的大型艾美尔球虫四川株进行了动物感染试验。【结果】5×10~3和5×10~4个卵囊组的SPF兔在接种后第4~9天,出现轻微的食欲减少症状;5×10~5组在接种后第6~8天持续中度腹泻,第8天体重与对照组有明显差异(P≤0.05),但均无死亡现象。感染剂量为5×10~3时卵囊产量最多,为2.31×10~8;免疫原性实验中,7×10~5个卵囊攻毒后,5×10~3卵囊免疫组卵囊排出最少,为6.28×10~4,各组体重与对照组相比无明显差异。【结论】大型艾美尔球虫四川株致病性较弱,但免疫原性良好,可作为兔球虫疫苗的备选组分。     

8种中药水提物对兔球虫卵孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药的抗球虫卵囊孢子化作用，为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药不同浓度（25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL）水提物对兔球虫卵处理不同时间（2h、4h、16h），观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响，筛选对兔球虫卵孢子化抑制效果好的中药。【结果】所选用的8味中药水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用，大部分中药浓度越高，抑制效果越好，与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵孢子化的效果与药材种类有关，蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关，土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率，125mg/mL土荆皮作用16h效果最好，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%；125mg/mL川楝子作用16h的效果最差，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

为探讨兔球虫病的诊断方法,对新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,并对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定。在粪便中检出大量的球虫卵囊,经鉴定,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,最后确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病。     

猪等孢球虫纯种株的建立及其生物学特性研究

从哺乳仔猪的腹泻粪样中分离出等孢球虫卵囊,感染仔猪建立球虫纯种株.通过卵囊形态结构观察与18S rRNA PCR鉴定,鉴定该球虫分离株为猪等孢球虫.将6只24日龄断奶仔猪分为2组,分别感染4×102和104个孢子化卵囊,观察仔猪的临床表现及虫株的潜伏期、显露期和卵囊产量.结果表明,感染4×102个卵囊后仔猪未出现腹泻症状,感染104个卵囊后仔猪出现腹泻且持续6 d.感染4×102个孢子化卵囊时,潜隐期为5 d,显露期为7 d,每个卵囊产出5.72×103个卵囊;感染104个孢子化卵囊时,潜隐期为5 d,显露期18 d,每个卵囊产出6.41×102个卵囊.由此可见,该株猪等孢球虫对仔猪具有致病性,可用于构建猪等孢球虫病动物模型及其疾病学研究.     

水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立

为了建立检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法,分别用50,500个环孢子虫卵囊对环孢子虫卵囊阴性的新鲜果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox,0.1%雕牌,0.1%立白、0.1%白猫的4种洗涤液和去离子水,在摇床中洗脱样品;然后,反复离心3次收集卵囊并提取卵囊DNA;最后,基于环孢子虫18S rRNA基因位点对卵囊DNA样品进行巢式PCR扩增.结果表明,卵囊污染吸附最佳时间为24 h,样品洗脱最佳时间为30 min.其中,只用去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的检测敏感性可达到50个卵囊,而西红柿可达到500个卵囊;当用不同洗涤剂时,各样品的检测敏感性均可达到50个卵囊.不同洗涤剂之间检测敏感性无显著差异.该研究初步建立检测水果、蔬菜污染环孢子虫卵囊的技术,采用此方法可特异、敏感、快速的检测果蔬表面环孢子虫卵囊,为食源性环孢子虫病暴发溯源提供技术支持.     

家兔感染黄艾美耳球虫的病理学变化及卵囊形成的观察

用２０００个孢子化的黄艾美耳球虫卵囊灌胃感染无球虫兔，２４０ｈ手术后取肠道样品，制片，光镜观察，结果表明，黄艾美耳球虫为家兔的强致病种，感染后盲肠的组织病理学变化最严重；盲肠基部是卵囊形成的主要部位．圆小囊，蚓突，结肠是卵囊形成的次要部位。     

中草药防治兔球虫病

兔球虫病是一种常见的寄生虫病 ,主要感染幼兔 ,可使病兔大批死亡。病兔即使症状消失 ,其生长发育也会停滞。本病常呈地方性流行 ,传染途径是经消化道。在饲料、水源、用具等被卵囊污染后 ,可以传播本病。鼠类、蝇类等也可散布病原。病兔常表现消瘦 ,贫血 ,下痢与便秘交替发生     

猪等孢球虫纯种卵囊扩增及生物学特性研究

应用单卵囊分离技术,获得猪等孢球虫纯种卵囊,给6头3日龄长大二元仔猪每头经口一次人工感染30个纯种猪等孢球虫孢子化卵囊,收集纯种后代,再对6头3日龄长大二元仔猪每头人工感染2 000个孢子化卵囊继代扩增.观察人工感染仔猪的排卵囊规律包括潜隐期、显露期、排卵囊高峰期及每克粪便中卵囊数（OPG值）和仔猪感染后的临床症状,进行了扩增卵囊的孢子化过程及形态结构观察和显微照像.结果表明,感染30个猪等孢球虫孢子化卵囊的仔猪最早在感染后第8d（8 days post-inoculation,DPI 8）从粪中检出卵囊,排卵囊高峰期在DPI 17～21,持续4～5 d,显露期15～18 d;感染2 000个猪等孢球虫孢子化卵囊的仔猪最早在DPI 5从粪中检出卵囊,排卵囊高峰期在DPI 8～13,持续4～6 d,显露期7～13 d.潜隐期、显露期、OPG值与感染剂量存在相关关系,即感染剂量越小,潜隐期越长,显露期越长,OPG值越小;反之亦然.感染30个卵囊的仔猪无临床可见病征;感染2000个卵囊的仔猪呈现腹泻甚至黄色水样腹泻等明显症状.常规培养新收集的猪等孢球虫卵囊,2 h时胚孢子开始分裂,8 h分裂成2团,12 h形成2个孢子囊,20h开始形成子孢子并可见内残体,最早26 h卵囊完全孢子化;72 h时孢子化率达50%,96 h达80%.本试验扩增和继代扩增所获球虫卵囊,与亲本和文献报道的猪等孢球虫生物学特性相一致.     

化学致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株免疫性能研究

采用化学致弱剂致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株卵囊.将致弱的卵囊分别饲喂3组7日龄从肉仔鸡进行免疫,免疫剂量分别为4×103,8 × 103,16×103个/只.首免7日龄,二免14日龄,二免剂量与首免相同.二免后第7 d用吉林野毒株卵囊进行攻虫,剂量为5 × 104个/只.攻虫后第7 d以存活率、相对增重率、病变值、抗球虫指数(ACI)、卵囊值、粪便计分等指标测定化学致弱剂致弱卵囊后免疫性能.结果表明:采用化学致弱剂致弱杂交F2株卵囊后的免疫效果明显高于非致弱免疫组和对照组,尤其免疫剂量为8×103个/只时致弱杂交F2株卵囊免疫效果最佳.     

柔嫩艾美尔球虫库尔勒株免疫原性初步研究

本实验采用单卵囊分离技术,得到1株柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella),对该株E.tenella的免疫原性做了初步研究,分别用100个卵囊/只,1,000个卵囊/只,10,000个卵囊/只的剂量免疫,以100,000个卵囊/只的剂量攻毒,结果显示,1000个卵囊/只的剂量免疫效果最好。     

11株巨型艾美耳球虫的免疫原性分析

用平均增重和病变记分或卵囊减少率等为试验指标,对11株巨型艾美耳球虫的免疫原性进行了分析.结果显示,各虫株每鸡免疫感染100个卵囊后,不仅对攻击1×105个同源株卵囊均产生大于70%的病变记分降低率,而且使每鸡攻击1×104个同源株卵囊时的卵囊产量均减少97.42%以上,在各虫株间无显著差异.各虫株对异源株的交叉免疫力程度不一致,美国株对国内10个虫株的卵囊减少率为20.09%～82.44%,仅3株大于75%,而国内10个虫株对美国株的卵囊减少率为27.43%～95.26%,有5株大于75%;扬州株、南通株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株间的相互卵囊减少率为-1.72%～96.67%,其中南通株对扬州株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株的卵囊减少率均大于75%,上海株对扬州株、南通株、凤阳株与广州株的卵囊减少率为-1.72%～57.69%.     

化学药物抑杀兔球虫卵囊试验

本文报告了几种化学药物对兔粪中球虫卯囊的抑杀作用,并比较了两种不同试验方法的效果差异。认为粪球经药物浸泡一定时间,取出水洗,再以饱和盐水漂浮法收集卵囊进行培养以观察药效的方法,既切合实际又能找出药物显效的准确时间。并初步认为5%的氨水可用于养兔个体户及专业户兔舍的消毒。