草鱼3个6-磷酸葡萄糖酶催化亚基的基因表达分析及高糖饲料对其表达的影响

为了探讨6-磷酸葡萄糖酶催化亚基(glucose-6-phosphatase catalytic subunit,G6PC)在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)糖代谢中的作用,采用同源序列比对的方式,在草鱼基因组中获取了3个g6pc基因的序列,通过序列比对和进化树分析,将其分别命名为g6pca、g6pcb1和g6pcb2,其编码的氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)和人(Homo sapiens)具有较高的同源性,相似度分别为85%～94%、64%～83%和54%～66%。同线性分析表明g6pc在草鱼染色体上的分布与斑马鱼等高度相似,表明草鱼g6pc基因在进化中具有较高的保守性。利用RT-PCR检测3个基因在鳃、脂肪、脑、心脏、肝、肾、前肠、中肠、后肠和肌肉10个组织中的表达,结果显示, g6pca在脑和肝中表达量较高,脂肪组织次之; g6pcb1在肝中表达量最高,中肠次之; g6pcb2在心脏表达量最高,其次为脂肪组织。同时探讨了高糖饲料对草鱼不同g6pc亚型转录水平的影响,以及不同浓度葡萄糖和胰岛素刺激草鱼肝细胞(L8824)后对g6pca转录水平的影响。结果显示,饲喂高糖饲料(7周)后,与对照组相比,草鱼肝脏g6pca mRNA水平显著升高, g6pcb1和g6pcb2 mRNA水平无显著变化。离体情况,与5 mmol/L葡萄糖组相比,15 mmol/L葡萄糖显著增加了L8824的g6pca mRNA水平,且1 mol/L胰岛素可以抑制这种作用; 30 mmol/L葡萄糖对L8824 g6pca mRNA水平无显著性影响。本研究表明,草鱼g6pc发生加倍后存在功能分化,高糖可以诱导g6pca mRNA的表达,而对g6pcb1和g6pcb2的转录水平无影响,其具体功能还需进一步研究。     

辽宁绒山羊皮肤毛囊mir-1298-5p靶基因预测及表达载体构建

探讨辽宁绒山羊皮肤毛囊不同发育时期mir-1298-5p的调控作用及其与靶基因的潜在关系,为mir-1298-5p与其靶基因对皮肤毛囊发育作用提供理论依据。以辽宁绒山羊皮肤毛囊组织为材料,通过mi RNA的分离、表达、靶基因预测筛选及靶位点3'UTR表达载体构建,采用RT-PCR进行表达检测,在线靶基因预测软件预测mir-1298-5p的靶基因,并对其靶基因TGF-βR1的靶位点进行克隆测序、缺失突变。结果表明:靶基因预测发现TGF-βR1的3'UTR存在mir-1298-5p种子区结合位点,且mir-1298-5p及其靶基因TGF-βR1均在皮肤毛囊不同发育时期呈现差异性表达。mir-1298-5p对皮肤毛囊周期性发育可能起到一定的调控作用,并成功构建了TGF-βR1 3'UTR表达载体,为后期过表达转染体系的建立和功能基因的验证奠定了基础。     

单芯电力电缆护层过电压保护

随着我国电力行业的不断发展，对单芯电力电缆护层过电压进行保护已经成为相关工作人员的重要工作内容。这项工作具有较强的系统性，因此，要求工作人员从对电压保护器以及接地电阻等方面入手，来对单芯电力电缆护层过电压保护技术进行分析和研究。以期达到用电安全，减少故障的目标。     

高速公路山区段边坡防护整修工程存在的问题及对策

<正>边坡防护是保证边坡强度和稳定性的重要措施之一,由于受到山区的地形、地貌以及地质结构的影响,由岩土体填挖而成的边坡,改变了原地层的天然平衡状态,且暴露于自然环境中,长期受各种自然因素的影响,岩土体的物理力学性质会发生较大的变化,引起岩土体变形、移动,破坏边坡的稳定,甚至导致一系列环境地质问题和生态环境问题,如崩塌、滑坡、泥石流、土壤侵蚀和植被破坏等。因此采用生态措施对边坡进行治理,利用植物防治边坡的水土流失,可以提高公路     

经典案例分析——吉林首华律师事务所一起时隔十七年的伤害案件的成功辩护

<正>案件基本情况:1997年7月2日,时任梨树乡梨树村主任的被告人江某带工修筑梨树市北环城公路。上午10时许,民工修完路下段后到梨树乡小锅菜饭店吃饭喝酒。12时许,被告人江某、王某、李某、许某以及梨树村的民工约十五六人,坐一台四轮车沿梨树市的公路回梨树村。四轮车行驶到耿家村耿某家门口时,江某让停车,江某要从耿某家院里过,去给     

我国饲料质量标准体系及重点标准解读

正我国饲料工业已形成了以国家标准和行业标准为主的较为完整的饲料行业标准体系框架。目前,我国饲料工业现有现行有效的国家标准和行业标准共510项:基础标准8项,卫生标准4项,产品标准191项,方法标准278项,其他相关标准30项。近年,我国陆续发布了修订的饲料相关标准,尤其是2017年和2018年共发布国家和行业饲料标准     

GPC结合超高效液相色谱-串联质谱法测定韭菜中50种农药残留

利用GPC结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测韭菜中50种农药残留。样品用1%乙酸乙腈震荡提取,经凝胶色谱净化,收集9~21min的流出液,在线浓缩近干并用乙腈∶水(1∶3)溶解定容至2ml,收集于2ml样品瓶中,过0.22μm滤膜,以Waters BEHC18色谱柱分离,采用多反应检测模式进行检测,外标法定量。加标水平为0.05mg/kg和0.1mg/kg时,回收率在65.2%~102.1%之间,相对标准偏差小于20%。农药在线性范围内相关系数均大于0.99。方法具有提取效率高,净化效果好,准确度高、灵敏等优点,适用于韭菜中多农药残留检测。     

甘草绿豆糕点的开发

以绿豆为主要原料,对甘草绿豆糕点的加工配方进行优化。研究了低筋面粉、白砂糖、植物油、甘草添加量对甘草绿豆糕色泽、表现状态、口味的影响,通过单因素试验和正交试验确定甘草绿豆糕点的最佳配方为绿豆糊用量1 kg,白砂糖添加量16%,低筋面粉添加量24%,植物油添加量4%,甘草粉添加量1.6%,在此条件下加工的甘草绿豆糕品质最好。     

垂直绿化拓展城市绿地空间TU985

空间拓展是园林设计的重要课题之一，垂直绿化是空间拓展的实现方式。文章从城市实施垂直绿化的意义及定位出发，介绍了在城市空间开拓中垂直绿化的主要方式，包括屋顶绿化、城市围墙透绿绿化、立体花园、绿门、绿廊。