EDS76SD—1株油乳剂灭活苗免疫试验

ＥＤＳ７６ＳＤ—１株油乳剂灭活苗免疫试验钱凤芹，胡贞延（山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南２５０１００）某养鸡场４０００只罗曼商品代蛋鸡，经流行病学调查，血清学检测确诊为鸡产蛋下降综合症。利用自制的ＥＤＳ７６ＳＤ－１毒株制成的油乳剂灭活苗与标准毒株Ｅ...     

陕西关中地区鸡产蛋下降综合征的调查

对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感，疫苗注射对该病的发生     

鸡产蛋下降综合征的研究及防制

ＥＤＳ７６是近几年传入我国引起蛋鸡产蛋下降的主要原因。研究结果表明：该病由腺病毒引起，可通过垂直和多种水平途径传播，对２６－４３周龄产蛋鸡影响最大，只产薄壳蛋、无壳蛋，卵巢和输卵管是该病侵害的主要部位，从鸡体分离鉴定的３个毒株经血清学交叉试验证明，与ＥＤＳ７６ＡＶ１２７标准株密切相关，而与其它禽腺病毒无关，用ＡＶ１２７特异性单抗建立的荚心ＥＬＩＳＡ特异，灵敏。筛选的Ｈ９１－１毒株制备的油乳剂灭活苗     

鸡新城疫和减蛋综合症异源二联油乳剂灭活疫苗的研制

将鸭源鸡新城疫（ＮＤ）病毒Ｄ１０株和鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）病毒ＧＣ２株同时接种于同一鸭胚内复制，增殖 ９６ ｈ收取尿囊液，用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。简化了生产工艺、降低了制苗成本。经试用表明，该疫苗可有效地预防ＮＤ和ＥＤＳ－７６的发生。     

鸡产蛋下降综合症（EDS76）地方毒株的分离与鉴定

鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）地方毒株的分离与鉴定钱凤芹，胡贞延，秦长川（山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南２５０１００）（山东省费县畜牧局）山东省某鸡场罗曼商品蛋鸡在１９９３年１～２月份发生了某一种以产蛋量大幅度下降和蛋质低劣为特征的疾病。利用病鸡...     

陕西关中地区鸡产蛋下降综合征的调查

对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清（其中非免疫鸡群３２３份，免疫鸡群１８２份）用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感；疫苗注射对该病的发生具有很好的预防作用     

鸡减蛋综合症——新城疫二联苗的研制与应用

用减蛋综合症（ＥＤＳ‘７６）ＡＶ－１２７和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ毒株，分别接鸭胚和鸡胚，收获尿囊液，福尔马林灭活，用白油佐剂乳化成二联灭活疫苗。本苗接种产量鸡后１４天产生ＮＤ和ＥＤＳ’７６抗体，１个月持续升高，而ＮＤＨＩ抗体产生时间略早。二联苗物单苗有相同的免疫效果，两者无干扰性，免疫剂量以０．５ｍｌ／只为宜。接种后９个月ＨＩ抗体仍维持在较高水平，并能经受强毒的入击，疫苗在４－８℃条件下贮存１     

鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

产蛋下降综合症H_（91）病毒基因组DNA的酶切分析

从发病鸡群中分离的产蛋下降综合症病毒（ＥＤＳ＿（－７６））Ｈ＿（９１）株接种鹅胚收获的尿囊液，用氯化铯密度梯度离心等方法纯化了ＥＤＳ病毒。电镜下观察到病毒无囊膜，大小为７０～８５ｎｍ。从纯化的病毒悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现一条分子量为３４ｋｂ、背景清晰的核酸带。用６种限制性内切酶对其基因组ＤＮＡ进行了酶切分析，各种酶消化分别产生４，４，９，９，１１和３条片段。将此结果与ＥＤＳ标准株ＡＶ＿（－１２７）株基因组ＤＮＡ由相同的内切酶消化的结果进行比较发现，由ＨｉｎｄⅢ和ＳｍａⅠ消化２个病毒基因组ＤＮＡ产生的片段数及大小有些差异。     

间接Dot—ELISA检测EDS—76病毒抗原的研究

本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）用于检测ＥＤＳ－７６病毒抗原的标准化程序。对纯化ＥＤＳ－７６病毒抗原的最低检出量为１ｎｇ／Ｄｏｔ,其敏感性约为ＨＡ的１５．６倍。ＥＤＳ－７６阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对ＥＤＳ－７６病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。     

鸡产蛋下降综合征的研究及防制

ＥＤＳ_（７６）是近几年传人我国引起蛋鸡产蛋量严重下降的主要原因。研究结果表明：该病由腺病毒引起，可通过垂直和多种水平途径传播，对２６～４３周龄产蛋鸡影响最大，只产薄壳蛋、无壳蛋，卵巢和输卵管是该病侵害的主要部位。从鸡体分离鉴定的３个毒株经血清学交叉试验证明，与ＥＤＳ＿（７６）ＡＶ＿（１２７）标准株密切相关，而与其它禽腺病毒无关。用ＡＶ＿（１２７）特异性单抗建立的荚心ＥＬＩＳＡ特异、灵敏．筛选的Ｈ＿（９１－１）毒株制备的袖乳剂灭活苗在江苏大面积使用后有效地控制了该病的流行。     

大片吸虫分泌排泄抗原的分析

取广西牛源大片吸虫成虫制备出分泌排泄（ＥＳ）抗原，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝染色显出７条蛋白带，免疫印迹试验（ＥＩＴＢ）测出其主要特异性免疫成分分子量为３６．３，２８．５及２５．５ｋＤ其中２８．５与２５．５ｋＤ与法国肝片吸虫ＥＳ的部分抗原成分相同，两种片形吸虫与抗血清可以交叉使用无特异性，但与日本血吸虫抗原及抗血清均无交叉反应，人工感染大片吸虫２周后的兔血清即能识别此抗原，ＥＳ抗原提取方法     

ND-EDS-76异源二联油苗田间试验研究

鸭源ＮＤＶ－Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２每株混合接种同一鸭胚，培养９６ ｈ收集尿囊液，制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群，在 １０，２０，３０，１８０，３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较，结果差异不显著。在免疫后 ３０，１８０，３６０ ｄ随机取鸡各 ６０只为 １组，用 ＮＤＶ－Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较，结果表明两种疫苗在 ３０，１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％，３６０ ｄ对ＮＤ和ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２％和８７％以上．对临床２００万只开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６强毒的攻击。     

鸡产蛋下降综合症（EDS—76）Z16毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ－Ｚ１６、Ｚ２、Ｗ４、Ｔ１和Ｔ３株。病毒大小７０－８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ＰＨ３－５下稳定，５０～６０℃１小时不被实例灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ－１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ－７６病毒。ＣＡＶ－Ｚ１６株能在鸭胚上繁殖，致死鸭     

ELISA检测BVD－MDV抗体

ＥＬＩＳＡ检测ＢＶＤ－ＭＤＶ抗体王新华，刘守仁，张荣兴（新疆农垦科学院，石河子，８３２０００）（中国科学院上海细胞所）自１９８０年国内首次报道牛病毒性腹泻验（ＥＬＩＳＡ）检测ＢＶＤ－ＭＤＶ抗体，以确定粘膜病（ＢＶＤ－ＭＤ）以来，已有许多地区在小鼠免疫...     

鸡产蛋下降综合症（EDS_（－76））Z_（16）毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。     

减蛋综合征病毒基因文库的构建

采用差速离心法纯化了鸭胚尿囊液中的减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）ＷＰＤＶ２０５病毒并提取了病毒基因组核酸。选用ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ两种限制性内切酶对病毒基因组ＤＮＡ进行双酶切处理，结果产生７个片段，在这７个片段中，只具有ＢａｍＨⅠ酶切位点的片段有２个，只具有ＥｃｏＲⅠ酶切位点的片段有３个，具有双酶切位点的片段有２个。将其中的５个片段分别插入到ｐＵＣ１８相应多克隆位点中，建立了ｐＥＤＳＶＢＥ１、ｐＥＤＳＶＢＥ２、ｐＥＤＳＶＢ１、ｐＥＤＳＶＢ２、ｐＥＤＳＶＥ５个重组子，并对这５个重组子进行了酶切鉴定     

免疫增强剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响

用维生素Ｅ－硒（ＶＥ－Ｓｅ）注射液、中草药１号、硫酸锌、牲血素、胸腺肽和左旋咪唑作免疫增强剂，采用β－微量鸡新城疫血凝抑制试验（ＮＤ－ＨＩ）、醋酸纤维薄膜电泳（测血清丙球蛋白γ－Ｉｇ）以及α－蔡酯酶法（ＡＮＡＥ），检测了参试雏鸡的３种免疫学指标。结果表明：ＶＥ－Ｓｃ注射液对蛋用雏鸡的ＮＤ－ＨＩ抗体、γ－Ｉｇ和ＡＮＡＥ＾＋淋巴细胞均比对照组明显提高，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。中草药１号具有与ＶＥ－     

ND—EDS-76异源二联油乳剂疫苗与普通二联疫苗田间对比试验研究

鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。     

减蛋综合征AQ毒株的分离与鉴定

通过鸭胚接种，从发生产蛋下降、产畸形蛋的鸡群中分离到一株病毒ＡＱ毒株。该病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞上生长，并能引起明显的胚体病变和细胞病变，对鸡红细胞的凝集作用能被ＥＤＳ７６标准阳性血清所抑制；病毒对氯仿不敏感、耐酸（ｐＨ３．０）、对热（５０℃３０ｍｉｎ）稳定，核酸型为ＤＮＡ，电镜观察见直径约７０～７５ｎｍ的圆形病毒颗粒。初步鉴定ＡＱ株是鸡减蛋综合征病毒。