绿原酸对鸡肉腐败菌的抑菌机理

以鸡肉腐败菌荧光假单胞菌和腐生葡萄球菌作为指示菌,研究绿原酸的抑菌机理,为绿原酸的开发利用提供理论依据。结果发现,绿原酸对2种指示菌的最小抑菌质量浓度、最小杀菌质量浓度为5 mg/ml;根据扫描电镜观察发现经过绿原酸处理后,2种指示菌表面有明显凹陷,细胞受损严重;通过对胞外ATP、蛋白质质量浓度的检测发现经过绿原酸处理后2种指示菌ATP、蛋白质发生明显泄漏;膜电位以及激光扫描共聚焦显微镜的结果也表明绿原酸使2种指示菌细胞膜受损,膜电位被破坏。由此看出,绿原酸是通过作用于细胞膜,使细胞膜受损严重,从而导致膜电位被破坏,胞内大分子物质泄漏从而达到抑菌作用。     

亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性研究

[目的]研究亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性。[方法]以亚香棒虫草分离筛选的内生真菌为菌种,液体转化发酵产虫草多糖,经过分离提取得胞内和胞外多糖,并探讨其对3株癌细胞(肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞)的生长抑制效果。[结果]随着时间和浓度的增大,胞内多糖对癌细胞的抑制率逐渐增大,且差异较为明显,在培养72 h的条件下,BN-H多糖(0.096 6 mg/mL)对肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞的抑制率分别为97%、71%、97%,比其他浓度的胞内外多糖抑制效果更好。[结论]BN-H(0.096 6mg/mL)的亚香棒虫草多糖对肺腺癌、乳腺癌和神经母癌细胞具有极显著抑制作用(P<0.01),具有较强的时间和浓度依赖性,且胞内多糖对癌细胞的抑制效果好于胞外多糖。     

酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌的致死效应

【目的】研究酸性电解水（AEW）能否有效控制肉源性荧光假单胞菌,探究处理后菌体变化,为新型杀菌剂的开发提供思路。【方法】使用不同有效氯浓度酸性电解水（20、40和60 mg?L ^-1）将肉源性荧光假单胞菌分别处理5、10、15、20、25和30 min后,通过平板计数检测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌的致死效果;收集未处理及20、40和60 mg?L ^-1酸性电解水各处理5 min后菌液,利用扫描电子显微镜观测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌细胞形态的影响;利用多种荧光探针检测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌细胞膜完整性、胞内pH、胞内ATP浓度、膜电位的影响;提取胞外聚合物（EPS）探究酸性电解水与EPS的相互作用。 【结果】20、40和60 mg?L ^-1的酸性电解水均可在5 min内杀死10 ⁷CFU/mL肉源性荧光假单胞菌,酸性电解水浓度大于40 mg·L ^-1时对肉源性荧光假单胞菌的杀菌效果没有显著影响（P>0.05）,10 min处理后均已无活菌检出。扫描电子显微镜结果表明3种浓度酸性电解水的处理均可使肉源性荧光假单胞菌菌体干瘪皱缩,失去原本饱满的细胞形态,60 mg·L ^-1电解水处理下破损程度最大。酸性电解水可显著降低肉源性荧光假单胞菌的膜完整性、胞内pH、膜电位、胞内ATP浓度和EPS含量（P<0.05）。20、40和60 mg·L ^-1酸性电解水处理后菌体膜完整性分别降低到2.26%、1.87%和1.20%,膜电位分别消散40%、50%和50%,胞内pH由7.50分别降低到6.53、5.90和5.83,3种浓度处理后胞内ATP浓度已降至最低。杀菌效果显著依赖于酸性电解水浓度的升高,当处理浓度高于40 mg?L ^-1时,胞内pH、膜电位和胞内ATP浓度的降低无显著差异。酸性电解水处理下EPS中蛋白、总糖含量显著降低,松散胞外聚合物 （L-EPS）中蛋白和总糖分别降低71.08%和62.23%,而紧密胞外聚合物（B-EPS）中蛋白和总糖分别降低99.32%和40.62%。当EPS反向添加到酸性电解水中时则可显著降低酸性电解水氧化还原电位（ORP）（P<0.05）,但对有效氯浓度（ACC）和pH没有显著影响（P>0.05）。 【结论】酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌具有良好的杀菌效果,可破坏肉源性荧光假单胞菌细胞膜,同时EPS对酸性电解水杀菌效果具有一定的阻碍作用。     

人低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞膜电位及其形成的离子机制

用玻璃微电极细胞内记录方法,对体外培养的人低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞膜电位及其形成机制的研究结果表明:CNE-2Z细胞膜电位与正常鼻咽上皮细胞相比,负值明显增大(P<0.01),变异系数也大,且分布弥散。CNE-2Z细胞膜电位负值与培养液K~+浓度对数值接近呈反比关系。而培养液Na~+、Ca~(2+)、Cl~-浓度提高时,膜电位无显著改变。提示K~+外流是形成CNE-2Z细胞膜电位的主要离子基础。     

二氢杨梅素诱导MDA-MB-231细胞凋亡

为了探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的机制,利用倒置显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞仪检测DMY对MDA-MB-231细胞的致凋亡能力和细胞内钙离子浓度和线粒体膜电位(ΔΨm)的改变,用蛋白质印迹(Western blotting)分析检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的变化。结果表明:MDA-MB-231细胞随DMY质量浓度加大而变圆变小,细胞存活数减少;流式细胞仪检测显示随DMY质量浓度的增加,DMY对MDA-MB-231细胞有促凋亡作用,胞内钙离子浓度逐渐增加,而线粒体跨膜电位(ΔΨm)逐渐减少;Western blotting结果显示DMY可诱导MDA-MB-231细胞中caspase-3和caspase-9蛋白质活化,并呈现浓度依赖关系。表明DMY可通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡。     

槲皮素对CBRH-7919细胞增殖及线粒体膜电位的影响(英文)

[目的]探讨槲皮素对肝癌细胞株CBRH-7919增殖及线粒体膜电位的影响。[方法]体外培养肝癌CBRH-7919细胞,以不同浓度槲皮素处理细胞后,采用酸性磷酸酶(APA)法检测OD405nm;倒置显微镜观测CBRH-7919细胞形态变化;Rhodamine123染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)变化。[结果]槲皮素对肝癌CBRH-7919细胞有明显的增殖抑制作用,并与剂量和时间成正比。光学显微镜下可见槲皮素作用后细胞密度明显降低。经10μg/ml槲皮素作用12、24、48h后,流式细胞术检测到Rhodamine123染色弱荧光细胞百分比逐步增加,线粒体膜电位下降。[结论]槲皮素体外能抑制肝癌细胞株CBRH-7919增殖,引起线粒体膜电位下降。     

槲皮素对CBRH-7919细胞增殖及线粒体膜电位的影响

[目的]探讨槲皮素对肝癌细胞株CBRH-7919增殖及线粒体膜电位的影响。[方法]体外培养肝癌CBRH-7919细胞,以不同浓度槲皮素处理细胞后,采用酸性磷酸酶(APA)法检测OD405;倒置显微镜观测CBRH-7919细胞形态变化;Rhodamine 123染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)变化。[结果]槲皮素对肝癌CBRH-7919细胞有明显的增殖抑制作用,并与剂量和作用时间成正比;光学显微镜下可见槲皮素作用后细胞密度明显降低;经10μg/ml槲皮素作用122、4、48 h后,流式细胞术检测到Rhodamine 123染色弱荧光细胞百分比逐步增加,线粒体膜电位下降。[结论]槲皮素体外能抑制肝癌细胞株CBRH-7919增殖,引起线粒体膜电位下降。     

赪桐提取物抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机理

[目的]揭示赪桐提取物(Extracts from Clerodendrum japonicum,EFC)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌机理,为临床抗病原菌感染药及植物杀菌剂的研发提供理论依据.[方法]采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌对EFC的敏感性,明确EFC的抗菌活性;通过试剂盒、流式细胞仪及扫描电镜等测定EFC作用后金黄色葡萄球菌细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环、可溶性蛋白、胞内活性氧(ROS)水平、细胞凋亡及形态结构的变化,研究EFC的抗菌机理.[结果]EFC对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌3种供试细菌均具有抗菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强,其抑菌圈(IZ)、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为19.04 mm、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL.经EFC作用10h后,金黄色葡萄球菌的乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子(K+)及碱性磷酸酶(AKP)外泄分别显著增加72.0%、43.0%和78.0%(P<0.05,下同),琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性分别显著下降80.0%和36.4%.金黄色葡萄球菌经EFC作用24 h后,与对照组相比,5MIC(2.50 mg/mL)、10MIC(5.00 mg/mL)和20MIC(10.00 mg/mL)组的胞外蛋白含量分别上升28.6%、41.8%和61.5%,胞内蛋白含量分别下降40.9%、61.3%和82.5%,胞内ROS水平分别增加9.1%、33.5%和51.0%,细胞凋亡率分别增加24.0%、50.6%和72.8%.经EFC作用24 h后,扫描电镜下的菌体形态结构不规则、萎缩、畸形.[结论]EFC通过破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜的完整性及通透性,影响蛋白合成,导致TCA循环减慢而发挥抑菌作用.     

小鼠早期胚胎细胞膜电位的测定及胚胎早期分化诱因的探讨

目的:调查早期胚胎细胞分化的诱因。方法:使用Patch clamp7型膜电位测定仪,测定ICR小鼠4、8、16、32细胞期胚胎的细胞膜电位。结果:①细胞位置无差异时,胚胎细胞的膜电位差异不显著;②早期胚胎的细胞膜电位存在个体差异;③早期胚胎的细胞在不同发育阶段具有不同的膜电位,且其膜电位值显著下降;④同—胚胎的周边细胞与内部细胞之间,细胞膜电位存在显著性差异。结论:早期胚胎分化的诱因是不同位置的细胞受到"胚胎场"的影响不同,"胚胎场"是指构成胚胎的细胞,因其具有的膜电位因素在相互之间形成的影响力。     

镉对水稻幼苗根系细胞膜电位和膜透性的影响

镉(Cd)对膜透性、跨膜电势差等膜性质所产生的直接影响是造成Cd胁迫下植物对营养元素吸收异常的重要原因。以对Cd2+敏感性不同的两个水稻品种(淮稻11号和扬稻6号)作为试验材料,采用玻璃微电极技术原位考察了水稻幼苗根细胞膜电位对Cd2+胁迫的响应,同时分析了Cd2+对水稻根系细胞膜透性的影响。结果表明,Cd2+可使根表皮细胞膜电位在短时间内发生明显的去极化,去极化程度随Cd2+浓度提高而增加;相同浓度Cd2+所诱导的膜电位去极化程度与水稻品种有关,扬稻6号幼苗根系膜电位的去极化程度明显高于淮稻11号;在迅速的去极化之后,随后的30min内是否发生复极化与水稻品种和Cd2+浓度有关;就更长时间(0～12h)来看,膜电位在经过了去极化阶段后仍有缓慢的恢复,淮稻11号在1.0mmo1·L-1Cd2+处理6h后已接近初始的膜电位值,而扬稻6号在处理12h后仍不能恢复到处理前的水平;Cd2+处理增大了水稻根细胞膜透性,且扬稻6号比淮稻11号膜透性增加的程度要大。     

IP_3敏感的钙离子通透性通道参与茉莉酸诱导的钙动员

[目的]研究茉莉酸诱导的钙动员通往IP3敏感的钙离子通透性通道的作用。[方法]以低温导入法将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶片细胞中,利用LASAF（Leica Application Suite-Advanced Fluorescence）软件记录肝素对茉莉酸（JA）诱导的胞内钙离子荧光强度的变化。[结果]经不同浓度的肝素预处理后,拟南芥叶细胞中胞内钙离子的荧光强度降低,再用100μmol/LJA处理时,其荧光强度升高,但仅与未经肝素处理的荧光强度相当。[结论]肝素预处理可抑制JA诱导的胞内钙离子浓度的升高。     

Residual calcium ions depress activation of calcium-dependent current

Calcium ions enter and accumulate during depolarization of some cells, activating a potassium current, IK(Ca), that depends on the cytoplasmic concentration of calcium ions, [Ca]i. However, elevation of [Ca]i can depress IK(Ca) elicited by a subsequent membrane depolarization. The depression of IK(Ca) is ascribed here to a [Ca]i-mediated inactivation of the voltage-gated calcium conductance, which causes a net reduction in calcium ions available for the activation of IK(Ca). This suggests that other processes dependent on gated calcium entry may also be depressed by small background elevations in cytosolic free calcium ions.     

Muscle postjunctional membrane: changes in chemosensitivity produced by calcium

Increases in the extracellular concentration of calcium ions above 1.8 millimoles per liter caused a reversible decrease in the sensitivity of tmuscle postiunctional membrane to carbamylcholine. A quantitative study of the inhibitory effect of calcium ions on membrane depolarization produced by carbamylcholine indicates that calcium ions compete with carbamylcholine for some common binding sites on the postjunctional membrane. Calcium ions (20 millimoles per liter) caused a neuromuscular block wherein prolonged end plate potentials were produced after nerve stimulation. Calcium ions applied ionophoretically to the postjunctional membrane decreased the amplitude and prolonged the time course of the transient depolarization produced by ionophoretically applied carbamylcholine.     

Oscillations of cytosolic sodium during calcium oscillations in exocrine acinar cells

In acinar cells from rat salivary glands, cholinergic agonists cause oscillations in cytoplasmic free calcium concentration, which then drive oscillations of cell volume that reflect oscillating cell solute content and fluid secretion. By quantitative fluorescence ratio microscopy of an intracellular indicator dye for sodium, it has now been shown that large amplitude oscillations of sodium concentration were associated with the calcium and cell volume oscillations. Both calcium and sodium oscillations were dependent on the continued presence of calcium in the extracellular medium and were abolished by the specific sodium-potassium adenosine triphosphatase inhibitor ouabain. Thus, calcium oscillations in salivary acinar cells, by modulating the activities of ion transport pathways in the plasma membrane, can cause significant oscillations of monovalent ions that may in turn feed back to regulate calcium oscillations and fluid secretion.     

稀土离子对枯草杆菌超氧阴离子自由基含量的影响

[目的]通过研究Nd3+、Er3+、Gd3+和La3+对枯草芽孢杆菌在生长过程中细胞内超氧阴离子自由基含量的影响,探讨稀土可能会导致生物体发生氧化损伤。[方法]采用荧光探针法,测定其细胞中超氧阴离子自由基的含量。[结果]4种稀土培养基培养后的枯草芽孢杆菌超氧阴离子自由基的含量均增加。[结论]一定浓度的稀土离子很有可能会导致生物体发生氧化损伤。4种稀土离子浓度的影响有所不同。稀土离子的浓度越大,对枯草杆菌细胞中超氧阴离子自由基的含量影响越显著,损伤毒性作用越强。     

亚心形四爿藻对重金属离子污染物的净化作用

[目的]探讨利用亚心形四爿藻对海水中重金属离子进行生态净化的可行性。[方法]以亚心形四爿藻为原料,在其培养液中加入Pb(NO_3)_2、HgCl_2、K_2Cr_2O_7、CdO 4种重金属离子,通过观察亚心形四爿藻的生长状况和重金属离子的浓度变化情况,研究最适宜的亚心形四爿藻净化浓度。[结果]当亚心形四爿藻浓度达到104个/mL时,藻体基本能够正常生长。在4种离子中,HgCl_2对亚心形四爿藻毒性最小,且其对HgCl_2的净化效果较为理想。[结论]该研究可为净化污染海水提供科学依据。     

微分电位溶出法测定饮用水中砷含量

[目的]为砷的检测寻求一种快速、简便的新方法。[方法]研究在铜离子存在条件下,通过玻碳悬汞电极测定饮用水中砷含量,考查了电沉积电位、电沉积时间、平衡电位、平衡时间对测定结果的影响。[结果]铜离子浓度范围为42.8-57.145 ng/ml;随着电沉积电位、平衡电位的增大,底液空白和加标液的峰高及差比值先增大后减小;随着电沉积时间、平衡时间的增加,底液空白和加标液的峰高先增大后趋向平缓,而其差比值先增大后减小;当电沉积电位为-1.1 V、电沉积时间为100 s、平衡电位为-0.7 V、平衡时间为30 s时,测定结果最好。测定砷的线性范围为0-200 ng,回收率为93.2%-105.4%,相对标准偏差为2.35%。[结论]该法操作快速、简便,结果准确、可靠。     

Control of membrane N+ permeability in a hyperpolarizing photoreceptor: similar effect of light and metabolic inhibitors

In the hyperpolarizing photoreceptors of the scallop Pecten irradians the metabolic inhibitors cyani 'e and 2,4-dinitrophenol cause a rapid hyperpolarization and increase in membrane permeability to potassium ions, similar to the effect of light. Cellular metabolism appears important in maintaining the low permeability to potassium ions necessary to keep the membrane depolarized in darkness, possibly by regulating the intracellular calcium ion concentration.     

紫草的乙醇提取及其紫外可见光谱研究

[目的]用乙醇提取紫草中乙醇可溶成分,研究其紫外可见光谱性质。[方法]以95%乙醇为溶剂,室温浸提紫草,旋转蒸发浓缩,得紫草乙醇提取物,薄层色谱分析成分。定性研究浓度、酸碱度、氧化剂、自由基、紫外光、溶剂、温度和时间等对乙醇提取物的紫外可见光谱的影响。[结果]薄层色谱分析获得5种主要成分,紫外可见光谱分析有4个特征吸收峰,溶液温度及加热时间、紫外光照射、自由基、氧化剂、酸度对该提取物特征吸收峰位置没有明显影响;碱度和金属离子改变了其特征吸收峰位置。[结论]该研究为紫草的应用提供了一定的理论依据。     

Pb~(2+)·Cd~(2+)及其复合污染对云和雪梨树苗生理生化指标的影响

[目的]研究Pb2+、Cd2+及其复合处理对云和雪梨树苗生理生化指标的影响,为种苗生产提供参考。[方法]采用因子分析法,研究Pb2+、Cd2+及其复合污染对云和雪梨苗生理机能的影响。[结果]Pb2+、Cd2+污染抑制树苗的生长,影响梨苗叶绿素的含量,抑制超氧化物歧化酶(SOD)活性,提高梨苗丙二醛(MDA)和可溶性蛋白质含量,刺激谷胱甘肽(GSH)合成,Pb2+、Cd2+之间的相互作用复杂。[结论]Pb2+、Cd2+污染云和雪梨苗,抑制叶绿素的合成,增强超养阴离子自由基(O2-.)对植株的毒害性,使膜脂过氧化损伤程度高,受重金属污染植株启动保护酶系统,以增强植株的抗氧化性。Pb2+、Cd2+相互作用机制复杂。