球孢白僵菌分子生物学研究进展

目前,球孢白僵菌已被广泛应用于农林害虫的生物防治,但球孢白僵菌及其制剂存在击倒害虫时间长、受环境影响较大和防效不稳定等弊端.分别从球孢白僵菌入侵害虫过程中相关酶类(蛋白酶、几丁质酶)基因的克隆与功能分析、转基因菌株构建、抗逆分子生物学等方面对球孢白僵菌的分子生物学最新研究进展进行了阐述,并对其未来发展进行了展望.     

白僵菌防治花生地蛴螬研究综述

文章综述了目前国内外在白僵菌高毒力菌株筛选领域的研究报道以及花生地蛴螬的防治现状,讨论了白僵菌菌株毒力退化和环境因素对药效的影响等问题;提出加强白僵菌对蛴螬致病机理、白僵菌毒素作用机制、白僵菌制剂稳定性方面的研究,以延缓白僵菌退化,提高其稳定性和防效;指出结合花生地的土壤环境条件和蛴螬的为害习性,研究白僵菌病的流行动态与环境因素对白僵菌病传染的作用,是利用该菌防治蛴螬应用研究的一个新方向。     

真菌杀虫毒素的研究

 就昆虫病原真菌所产生的真菌毒素在农业害虫防治上的应用作了简要的论述。对白僵菌、绿僵菌、镰刀菌、曲霉菌、拟青霉菌等真菌所产生的具有杀虫活性的物质作了介绍，其中某些杀虫毒素如白僵菌素、破坏素等对害虫具有多种毒杀作用，具有广阔的应用前景。     

一株丝状真菌的分类鉴定

对分离出的一种丝状真菌Mars菌株进行菌落特征、产孢细胞形态、产孢轴发育过程、孢子形态、菌丝生长特征等形态指标进行观察,并与标准菌球孢白僵菌3.4428菌株进行比较.鉴定结果表明,该菌株属于半知菌亚门丝孢纲丛梗孢目丛梗孢科白僵菌属球孢白僵菌.     

继代培养球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫毒力和产孢量的影响及菌株复壮研究

【目的】明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)在连续继代培养过程中对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)二龄幼虫毒力、产孢量的影响,并进行菌种复壮研究,为进一步利用球孢白僵菌对斜纹夜蛾的生物防治提供参考。【方法】将球孢白僵菌SCAUJH19继代培养10代,得到F₁～F₁₀代菌株并测定产孢量。采用浸虫法分别用F₁～F₁₀代菌株处理斜纹夜蛾二龄幼虫,测定其对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力;建立模型分析球孢白僵菌继代培养代数、毒力与产孢量的关系及毒力退化规律。采用活虫复壮法对F₄、F₆、F₈、F₁₀代菌株进行复壮,比较复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力效果,并测定产孢量。【结果】球孢白僵菌F₁～F₅代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫毒力无显著差异,处理7 d时校正死亡率为42.44%～45.22%,而F₆、F₈、F_1...     

一株虫生真菌的分离鉴定及杀虫活性初探

[目的]为虫生真菌在害虫防治中的应用提供参考。[方法]以从罹病昆虫体表分离的虫生真菌Ekks1为供试菌种,对其进行形态鉴定;以ITS4和ITS5为引物,对Ekks1的ITS序列进行PCR扩增、电泳检测和序列分析,并检测Ekks1对小菜蛾和豆蚜虫的杀虫效果。[结果]经形态鉴定,Ekks1为半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丝孢科,白僵菌属,球孢白僵菌（Beauveria.bassiana）;经PCR扩增,成功获得了Ekks1菌株的ITS1-5.8s-ITS5 rDNA序列,经分析,ITS1-5.8s-ITS5序列为555 bp,菌株Ekks1与GenBank中B.bassiana（EF672309）的同源性为99%;菌株Ekks1在孢子浓度为1.5×10^7个/ml时,感染8 d后小菜蛾的校正死亡率为76%,感染72 h后豆蚜虫的校正死亡率为61%。[结论]Ekks1为白僵菌属真菌,其孢子浓度为1.5×10^7个/ml时,对小菜蛾和豆蚜虫均具有一定的致死效果。     

球孢白僵菌菌种退化及其对马尾松毛虫防治的影响

球孢白僵菌继代培养中通过菌落局变产生不同类型分离株。本试验检测结果显示此类分离株多表现为产孢量下降、速率增加,毒力降低等与生产性善良爱化类似的变异现象,少数产孢量高,毒力强的分离株,因其生长速率慢即在培养中被掩盖而消失,并据此推断出继代培养次数对该菌退化速率的影响,提出了控制该菌菌种退化的有效措施。     

宁夏天牛病原真菌的种类和致病力研究

从宁夏回族自治区的土壤和野外感病死亡昆虫体上分离培养了１３ 种（ 菌株） 天牛病原真菌,利用其中１２ 个菌种（ 菌株） 对光肩星天牛幼虫进行致病力测定,初步筛选出了球孢白僵菌和金龟子绿僵菌等５ 个对光肩星天牛幼虫具有较强致病力的菌种（ 菌株） ,其中球孢白僵菌最高致病死亡率达１００ ％ ,金龟子绿僵菌致病死亡率为７０ ％ ．利用球孢白僵菌和引进的日本布氏白僵菌,对光肩星天牛的成虫进行致病力测定,日本布氏白僵菌致病死亡率达７８ ．３ ％ ．利用无纺布培养布氏白僵菌,网箱内防治光肩星天牛成虫的试验显示,带菌无纺布枝挂法对成虫的感染率为１２ ．５ ％ ．影响其效果的因素较多,其中湿度、无纺布上菌种分生孢子产生的数量是影响感染试验的主要因素．     

苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂研制及杀虫毒力测定

以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助 剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混 配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3:1,润 湿分散剂为1%Morwet EFW、3% SDS、9% Morwet D425、9% TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3% 黄原胶,以凹凸 棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%, 润湿时间1 min, 平均粒度为13.76 m。苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂中各指标符合商品制剂的标准,对黄褐天幕毛虫毒力分别 高于苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂单剂,是一种具有高杀虫活性、持效期长、环境友好型绿色农药。      

球孢白僵菌与苦参碱混配对烟粉虱的毒力与田间防效

旨在探讨球孢白僵菌与8种杀虫剂的相容性以及球孢白僵菌与苦参碱混配对温室烟粉虱的防治效果。首先进行8种杀虫剂与球孢白僵菌的相容性试验,然后选择相容性较高的苦参碱与球孢白僵菌的LC_(50)浓度以9∶1、4∶1、1∶1、1∶4和1∶9体积比进行混配,以共毒系数对其毒力进行评价。结果表明:苦参碱与球孢白僵菌的相容性最好,尤其在10倍稀释度下,苦参碱对球孢白僵菌孢子萌发、菌丝生长及产孢抑制率分别为14.44%、10.17%和12.63%。苦参碱与球孢白僵菌体积比为4∶1时,共毒系数为293,增效作用最明显。综上所述,苦参碱与球孢白僵菌在LC_(50)浓度下以4∶1体积比混配具有极显著的增效作用。     

白僵菌对烟蚜的致病性研究

[目的]探讨白僵菌（Beauveria bassiana）对烟蚜的致病性。[方法]以4株球孢白僵菌（B-1、B-2、B-3和B-4）为供试菌株,测定其对烟草蚜虫的致病性。[结果]受测的4株白僵菌菌株对烟草蚜虫均有不同程度的杀虫效果。其中,B-3处理烟草蚜虫的校正死亡率达到95%以上,B-1、B-2菌株的分生孢子处理烟草蚜虫的校正死亡率超过80%,其菌丝对蚜虫也有较高的致病率;4株菌株的代谢产物对烟草蚜虫均有较强的触杀作用,施用48 h后其烟草蚜虫的校正死亡率均超过85%。[结论]为烟草蚜虫的微生物防治研究提供了参考。     

不同化性苜蓿切叶蜂(Megachile rotundata F.)成蜂对白僵菌敏感性的差异

室内测定了不同化性苜蓿切叶蜂成蜂对球孢白僵菌(Beauveria bassiana(Balsamo))的敏感性。在28℃,RH60%的条件下,喷施白僵菌后二化种群死亡速度较快,72h后死亡率为67%,而一化种群72h后死亡率为38%。结果表明,成蜂对白僵菌的敏感性在化性间存在差异,二化种群成蜂对球孢白僵菌具有较高的敏感性(P<0.05),抗性较差。     

白僵菌超低容量悬浮剂的研制

[目的]研制高效、环保、用于超低容量喷雾的白僵菌悬浮剂。[方法]从6种溶剂中筛选出1种溶剂和2种复配溶剂作为白僵菌的溶剂,从9种助悬剂中筛选出性能最好的ZX6号助悬剂,配制出用于超低容量喷雾的白僵菌悬浮剂,测定其低温相溶性。[结果]助悬剂对白僵菌悬浮剂的悬浮性、再悬浮性有影响,对毒力的稳定性、闪点、挥发性、低温相溶性基本没有影响,而溶剂的选择对剂型的配制有极大的关系。复配溶剂1+ZX6号助悬剂制成的样品,-5℃存放120 h后分层,在挥发性、闪点、粘度和低温存放等性状及成本上有显著优势,是最佳选择。[结论]该研究为开发粘度低、价格低廉的白僵菌悬浮剂提供了依据。     

10株白僵菌菌株形态学与分子鉴定

对10株白僵菌属菌株的菌落形态、产孢结构和分生孢子形状、大小作了观察与测量,形态学鉴定为球孢白僵菌。同时对此10株球孢白僵菌核糖体DNA-ITS进行了测序分析,与NCBI数据库中的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)多个菌株的同源性达99.10%～99.64%。依此,10株白僵菌菌株分子鉴定结果为球孢白僵菌(Beauveria bassiana)。     

不同球孢白僵菌菌株生物学特性与其对家蚕致病力的关系

[目的]探讨球孢白僵菌菌株的生物学特性与其对家蚕致病力的关系,为家蚕白僵病的防治提供科学依据。[方法]从我国各地收集6个白僵菌杀虫剂,并从广西养蚕区采集3个僵蚕样品,对从中分离纯化的菌株进行形态观察和分子鉴定,同时对家蚕进行致病力测定,比较各菌株菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等生物学特征指标的差异。[结果]获得的9个分离菌株均为球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuillemin);各菌株对家蚕都有较强致病力,且致病力有一定差异;各菌株菌落生长直径、产孢量及胞外蛋白酶活性均存在较大差异,并与其对家蚕的致病力之间存在相关关系。[结论]各菌株产孢量和胞外蛋白酶活性与其对家蚕的致病力之间存在显著正相关。     

白僵菌对沙棘木蠹蛾幼虫的致病力及其生物学特性研究

为了有效的防治沙棘木蠹蛾(Holcocerus hippophaecolus),减少化学防治对环境的污染,本试验在温度(25±1)℃,相对湿度(80±10)%的试验条件下,用浓度1×108个/mL的8株白僵菌孢子悬浮液,测定了其对10~12龄沙棘木蠹蛾幼虫的致病力,并对筛选出的高致病力菌株生物学特性进行了初步研究。试验表明:8株菌株均能感染沙棘木蠹蛾幼虫,其中Z-006菌株为高致病力菌株,致死率达到67%,LT50为19.6 d;在不同培养基上测定了Z-006的生长量、产孢量,表明Z-006菌株在PDA培养基上的生长情况最佳。     

宿主湿度环境对球孢白僵菌致病力的影响

【目的】研究宿主湿度环境对球孢白僵菌致病力的影响,为采取适当防治措施以减少白僵病对蚕茧生产的危害提供参考依据。【方法】以广西象州蚕区球孢白僵菌感染家蚕获得的白僵病蚕尸体,观察不同湿度环境中白僵病蚕尸体形态的变化情况,并每隔15d进行一次分生孢子致病力测试。【结果】在25℃下的3种湿度环境（60%RH、75%RH和90%RH）中,白僵病蚕尸体在同一宿存时间内,球孢白僵菌活力与宿存湿度关系密切,在60%RH中宿存的蚕体保存较完好,60d后仍然可见淡黄白色的分生孢子,尸体质硬;随湿度增加,宿存病原活力逐渐降低。3种湿度条件下球孢白僵菌在2龄病蚕尸体中宿存30d内,对家蚕仍有很强的致病性,其半致死时间（LT50）分别为2.915、3.071和5.222d;在60%~75%RH条件下,宿存45~60d的球孢白僵菌对家蚕仍具有一定的致病力;而在90%RH条件下,宿存45d后球孢白僵菌分生孢子数量急剧下降,无法测定其致病力。【结论】球孢白僵菌在病蚕体中宿存60d内对家蚕的致死率仍然很高,因此及时清除病蚕尸体并使尸体病原性灭活,可降低白僵菌的二次感染。     

不同球孢白僵菌菌株生物学特性与其对家蚕致病力的关系(英文)

[目的]探讨球孢白僵菌菌株的生物学特性与其对家蚕致病力的关系,为家蚕白僵病的防治提供科学依据。[方法]从我国各地收集6个白僵菌杀虫剂,并以广西养蚕区采集3个僵蚕样品,对从中分离纯化的菌株进行形态观察和分子鉴定,同时对家蚕进行致病力测定,比较各菌株菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等生物学特征指标的差异。[结果]获得的9个分离菌株均为球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuillemin);各菌株对家蚕都有较强致病力,且致病力有一定差异;各菌株菌落生长直径、产孢量及胞外蛋白酶活性均存在较大差异,并与其对家蚕的致病力之间存在相关关系。[结论]各菌株产孢量和胞外蛋白酶活性与其对家蚕的致病力之间存在显著正相关。     

球孢白僵菌孢子悬乳剂及其混配剂在甘蓝叶面的残留分析*

 采用生化检测法（酶快速检测）和生物检测法（敏感家蝇检测）检测分析了球孢白僵菌孢子悬乳剂、孢子悬乳剂与1%（W/V）10%吡虫啉可湿性粉剂混配剂（EM1）、孢子悬乳剂与3%（W/V）10%吡虫啉可湿性粉剂混配剂（EM2）、10%吡虫啉可湿性粉剂、2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威在田间甘蓝叶片上的残留。抑制率检测结果表明,纯菌剂处理后的抑制率低于2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威化学农药的抑制率。敏感家蝇法检测结果表明,纯菌剂、混配剂I(EM1)饲喂后家蝇幼虫的累积死亡率之间无显著差异,但2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威、3%(W/V)吡虫啉(10%可湿性粉剂)、混配剂II(EM2)饲喂后家蝇的累积死亡率则略高于其纯菌剂。因此,在菌药混用中,低剂量药剂的加入对残留的影响不明显,而高剂量的化学农药的加入则会引起残留的出现。由此表明,球孢白僵菌孢子乳悬剂及其与低剂量的吡虫啉混配剂在蔬菜上无残留现象存在,符合无公害蔬菜生产的要求。