中药结核康体外抗结核分支杆菌活性的实验研究

目的观察中药结核康在体外对结核分支杆菌的抑制和杀灭作用．方法采用改良罗氏法和7H9液体培养基中测定中药结核康的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度．结果结核康在7H9液体培养基中最小抑菌浓度4（MIC）为40mg／L,在改良罗氏培养基中最小杀菌浓度为（MBC）800mg／L．结论结核康在体外对结核分支杆菌具有抑制和杀灭作用．     

非典型分支杆菌的分类鉴定方法研究进展

非典型分支杆菌与结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)复合群、麻风分支杆菌(M.leprae)同属于分支杆菌属(Mycobacterium).随着对结核杆菌的深入研究,非典型分支杆菌也逐渐引起了人们的关注.为了对非典型分支杆菌进行系统的了解和分类鉴定,就国内外常用的分类鉴定方法进行了综述.     

肉牛常见疾病及其防治

<正>1结核病结核病是由分支杆菌属的几种细菌引起人和畜禽共患的一种慢性传染病。以被感染的组织和器官形成特征性结核结节和干酪样坏死为特征。牛结核病主要是由牛分支杆菌也可由结核分支杆菌及禽分支杆菌引起。牛分支杆菌可引起人和多种主要家畜的结核病,但不能使家禽和鹦鹉类发病。患病动物是主要的传染源。病菌可随鼻液、痰液、粪、尿、乳和生殖道分泌物等排除体外,污染空气、饮水、     

抗结核药物及其应用研究

近年来,结核病重新在全球肆虐,艾滋病加速了结核病的流行,对多种药物具有耐药性的结核杆菌的蔓延,迫切需要研制新的高效抗结核药物．对抗结核药物的研究状况进行了论述,简单地回顾了现有的抗结核药物,对新型的抗结核药物进行了介绍,重点阐述了抗结核中药的研究及应用．     

牛分支杆菌ESAT-6基因的克隆与序列分析

从患结核病鹿的肺组织中粗分离牛分支杆菌制备DNA模板,用PCR对牛分支杆菌ESAT-6基因进行了扩增,将扩增的产物连接于测序载体pGEM-TE上克隆,经测序确定无误;并使用分子生物学软件对ESAT-6基因进行了分析。结果显示:ESAT-6基因编码的蛋白有较好的抗原性;ESAT-6基因在结核分支杆菌和牛分支杆菌各基因型中具有高度保守性。本研究为下—步研制重组标记疫苗奠定了基础。     

牛结核分支杆菌MB1916c基因的克隆和原核表达

构建牛结核分支杆菌MB1916 c的原核表达载体,获得了高纯度的融和表达蛋白。以牛结核分支杆菌DNA为模板,利用PCR方法扩增出牛结核分支杆菌MB1916 c基因片段,将回收纯化后的产物克隆到pGEM-T载体,测序分析鉴定为阳性的质粒,经SacⅠ/KpnⅠ双酶切后与同样条件下双酶切后的pET-30a( )载体连接,再转化到E.coliBL21(DE3)表达菌株中,经菌落PCR快速筛选克隆,以SacⅠ/KpnⅠ双酶切和测序分析鉴定。确定正确的阳性菌株IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果显示:以牛结核分支杆菌DNA为模板,PCR后得到了MB1916 c目的基因片段,经克隆、亚克隆、序列分析和SacⅠ/KpnⅠ双酶切鉴定,获得了牛结核分支杆菌MB1916 c原核表达菌株,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约26 ku蛋白表达条带,West-ern-blotting分析证实所获得的蛋白具有牛结核分支杆菌的抗原性。本实验构建了pET-30a( )-MB1916 c原核表达载体,得到融合6个组氨酸残基的MB1916c蛋白纯度大于95%,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。     

猫爪草体外抗结核作用研究

[目的]观察3种猫爪草的醇提物及猫爪草各不同极性部位对标准结核菌株和耐药菌株的体外抑菌效果。[方法]采用绝对浓度法,进行3种猫爪草70%乙醇提取物和猫爪草醇提物经萃取分离得到的4个极性不同部位对结核分支杆菌(H37RV)和耐药菌株的药物敏感试验。[结果]3种猫爪草(4 mg/ml)对标准菌株和耐药菌株均有抑菌作用,且石油醚萃取部位抑菌浓度最低为2 mg/ml。[结论]猫爪草具有明显的体外抗耐药结核作用,以石油醚萃取部位抑菌效果最佳。     

绵羊副结核病的病原学检测与分析

[目的]确诊一例疑似绵羊副结核分枝杆菌感染的病原学特征.[方法]将送检病料(肠系膜淋巴结)涂片、抗酸染色后进行显微镜观察;同时,提取肠系膜淋巴结组织DNA,采用PCR扩增副结核分支杆菌的IS900基因及亚型分型基因,并进行序列测定与分析.[结果]组织涂片染色镜检后可见抗酸染色阳性菌株;IS900基因及亚型分型基因的检测和序列分析结果表明,目标菌株为Ⅱ型(牛型)副结核分支杆菌.[结论]采用镜检及分子检测等手段确定从所送检绵羊肠系膜淋巴结组织为Ⅱ型(牛型)副结核分支杆菌感染样本.     

牛结核病的诊断与防治

结核病是由结核分支杆菌引起的人畜共患的一种慢性传染病。特别是在机体组织中形成结核结节性肉芽肿和干酪样钙化的坏死病变。     

施帕沙星制备工艺研究

施帕沙星是近年开发成功的氟代喹喏酮类新品种之一,它与环丙沙星、氧氟沙星等同类药物相比,不仅对革兰氏阴性需氧菌和革兰氏阳性厌氧菌抗菌活性强,而且对支原体、衣原体以及结核分支杆菌效果更优。药理试验和临床使用情况都证实施帕沙星是一个广谱高效的抗菌药物,世界上开发和使用本品的国家越来越多。施帕沙星于1989年在美国发表专利,其专利号为4 795 751。1993年该品种     

野生牛蒡根提取物的抑菌作用研究

[目的]研究野生牛蒡（Arctum lappa L.）根提取物的抑菌作用,为其开发应用提供理论依据。[方法]采用琼脂打孔扩散法和最低抑菌浓度法研究了野生牛蒡根水提物和70%乙醇提取物的抑菌活性。[结果]2种提取物对供试金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus.）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）和大肠杆菌（Escherichia coli）都具有抑菌效果。70%乙醇提取物的抑菌效果优于水提取物,其对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌的最低抑菌浓度皆为31.25 mg/ml,对普通变形杆菌的最低抑菌浓度为62.50mg/ml,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为250.00 mg/ml;水提物和乙醇提取物对啤酒酵母（Saccharomyces erevisiae）和白色念珠菌（Monilia albican）均未表现出抑菌作用。[结论]野生牛蒡根水提物和乙醇提取物都具有较好的抑制细菌的作用,但无抑制酵母菌的作用,70%乙醇提取物抑制细菌的效果优于水提物。     

凤仙花叶不同提取物对细菌的抑制作用

为研究粉红色凤仙花叶的三种不同提取物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种三种细菌的抑制作用,用水、75%乙醇和75%丙酮分别提取凤仙花鲜花叶,获得凤仙花叶的粗提物。采用平板稀释涂布法对粗提物对三种细菌的抑菌效果进行检测,记录观察菌落数,计算抑菌率。结果表明:凤仙花叶的水提取物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌抑制作用比枯草杆菌黑色变种强,且浓度越高,抑制性越强。当浓度为0.2 g/mL时,对三种细菌的抑菌率均达到最大,分别为99.92%、99.99%、99.98%。凤仙花叶的75%丙酮提取物和75%乙醇提取物对三种细菌的最低抑菌浓度(MIC)均为0.05 g/mL。综上所述,同种提取物的不同浓度对同种细菌的抑制作用存在明显的差异性,对三种细菌的抑制作用差异不明显。凤仙花叶不同提取物的抑菌效果存在差异,75%丙酮提取物和75%乙醇提取物均比水提取物作用强。     

29种中草药提取物对嗜水气单胞菌的抑菌活性研究

[目的]筛选对嗜水气单胞菌具有较强抑制作用的中草药,为该菌引起的爆发性鱼病防治提供用药依据。[方法]采用水提法和醇提法分别提取29种中草药的有效成分,并研究了29种中草药对嗜水气单胞菌的体外抑菌作用。[结果]12种中草药提取物对嗜水气单胞菌有不同程度的抑制作用,其中诃子的水提物和醇提物的抑菌效果较好,其醇提物的最小抑菌浓度(MIC)为1.2 g/L。博落回、白屈菜、五倍子对嗜水气单胞菌也有较强的抑制作用,当其浓度为10.0 g/L时,抑菌圈直径均大于10 mm,其醇提物的最小抑菌浓度分别为2.4、4.8和4.8 g/L。[结论]博落回、白屈菜、五倍子可作为抗嗜水气单胞菌的筛选药物。     

凤仙花茎不同提取物对细菌的抑制作用

为研究粉红色凤仙花茎的3种不同提取物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种3种细菌的抑制作用,用水、75%乙醇和75%丙酮分别提取凤仙花鲜花茎,获得凤仙花茎的粗提物。采用平板稀释涂布法检测粗提物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种3种细菌的抑菌效果,记录观察菌落数,计算抑菌率。结果表明,凤仙花茎的不同提取物对枯草杆菌黑色变种和金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠埃希氏杆菌,且质量浓度越高,抑制作用越强。当凤仙花茎水提取物质量浓度为0.2g/mL时,水提物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种3种细菌的抑菌率均达到最大,分别为99.95%、99.99%、99.98%;75%乙醇提取物对3种细菌的抑菌率分别为99.94%、100%、99.99%;75%丙酮提取物对3种细菌的最低抑菌浓度(MIC)均为0.1g/mL。综上所述,同一种提取物的不同质量浓度对同一种细菌的抑制作用存在明显的差异,对3种不同细菌的抑制作用差异不明显。凤仙花茎不同提取物的抑菌效果表现为:75%丙酮提取物>75%乙醇提取物>水提取物。     

22种中草药对畜禽常见肠道病原菌的体外抑菌作用

对22种中草药对常见畜禽肠道病原菌的抗菌活性进行了定量分析.采用水煎法提取中草药有效成分,通过体外抑菌试验检测不同提取成分的抑菌活性,确定其体外最小抑菌浓度(MIC).结果表明:对9种常见肠道病原菌(大肠杆菌(O2、O8、O78、O139)、猪伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌)抑菌圈最大的为黄芩、五倍子、乌梅,其抑菌圈直径在15～25mm,其次为诃子、大黄、草河车,其抑菌圈直径在10～20mm;五倍子、诃子、黄芩、乌梅最小抑菌浓度在0.031～0.125g/mL,石榴皮、地榆、黄连、大黄、艾叶最小抑菌浓度在0.031～0.250g/mL.说明22种中草药对上述细菌具有不同程度的抑菌效果,尤以五倍子、诃子、黄芩、地榆、乌梅较其他中草药的抑菌效果更佳(P<0.05).     

舟山野菊花序不同萃取物抑菌活性的研究

对野菊花序采用微波粗提,经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水得萃取物,通过K-B法和倍比稀释法,分别对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的标准、耐药菌株进行体外抑菌活性测试。结果表明：水相的抑菌活性〉正丁醇〉乙酸乙酯,石油醚萃取物无抑菌效果;水相对大肠埃希菌标准、耐药菌株的MIC分别为15.62 mg/mL和7.81 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的标准、耐药菌株的MIC分别为3.90 mg/mL和1.95 mg/mL,正丁醇相的MIC在15.62~31.25 mg/mL之间。水相和正丁醇相呈现较强的广谱抑菌活性,且具有抗耐药菌作用。     

紫茎泽兰乙醇提取物对五龄思茅松毛虫肠道细菌的抑制作用

以思茅松毛虫五龄幼虫肠道细菌为供试菌,采用牛津杯法测定紫茎泽兰不同部位乙醇提取物的抑菌效果。结果表明:紫茎泽兰不同部位乙醇提取物除茎提取物外,对5种思茅松毛虫肠道细菌(共10株)均有不同程度的抑制作用,抑制作用大小顺序为叶>根>茎。在相同质量浓度下,叶提取物对5种肠道细菌的抑菌作用大小顺序为雷金斯堡约克氏菌(Yokenella regensburgei)>弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)>产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)>克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae)>苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),其对雷金斯堡约克氏菌、产酸克雷伯氏杆菌以及弗氏柠檬酸杆菌的最低抑菌质量浓度为0.125g/mL,对其余2种细菌的最低抑菌质量浓度分别为0.25g/mL、0.5g/mL。根提取液对雷金斯堡约克氏菌和克雷伯氏杆菌无抑制作用,在相同质量浓度下,其对其余3种细菌的抑制作用大小顺序与叶提取液相同,最低抑菌质量浓度为0.25g/mL。紫茎泽兰乙醇提取物具有良好的抑菌效果,可用于开发新型的植物源生物农药。     

天门冬的体外抑菌作用

利用水煎法、醇提取法和超声波提取法制备天门冬(Asparagus cochinchinensis(Lour)Merr.)提取液,并通过正交试验对超声波提取工艺进行优化;采用杯碟法测定天门冬提取液的抑菌圈直径;采用液体稀释法测定最低抑菌浓度。结果表明,超声波提取所用条件为70%的乙醇、浸泡时间6 h、提取时间20min和提取温度35℃时,所得天门冬提取液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和黑曲霉(Aspergillus niger)抑制作用最强,对这3种菌的最低抑菌浓度分别为3.13、6.25和12.50 mg/mL。说明天门冬提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黑曲霉有较强的抑制作用,是一种天然抑菌剂。     

蛇含委陵菜提取物对人工感染鸡白痢的治疗效果

[目的]探讨蛇含委陵菜提取物对雏鸡白痢的治疗效果.[方法]采用不同提取方法(水煎法、水煎醇提法、微波提取法、乙酸乙酯提取法、乙醇分级提取法)对蛇含委陵菜进行提取,测定不同极性段提取物的最小抑菌浓度(MIC),筛选出最佳提取方法,然后以蛇含委陵菜水提物自拟高、中、低3个剂量组,经口灌服人工感染鸡白痢沙门氏菌的1日龄雏鸡,以诺氟沙星为药物对照,评价其对雏鸡白痢病的治疗效果.[结果]水煎法获得的蛇含委陵菜水提物对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的抑制效果最佳,MIC分别为5.21和10.41mg/mL;在人工感染治疗试验中,雏鸡在感染鸡白痢沙门氏菌18h后,以每天经口灌服1次蛇含委陵菜水提物(0.75 mL/羽),连续3d,其治疗有效率达86.7%.[结论]蛇含委陵菜水提物对革兰氏阴性菌具有良好的抑制效果,安全低毒,原材料价廉易得,具有较高的研发价值.     

红鱼眼叶水提物·醇提物体外抑菌作用及其化学成分的初步研究

[目的]研究红鱼眼叶水提物和醇提物的体外抑菌作用,并对其化学成分进行鉴定。[方法]采用连续稀释法对红鱼眼叶水提物和醇提物进行最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)研究;采用常规化学反应鉴别方法检测红鱼眼叶的水提物和醇提物,并对其化学成分进行鉴定。[结果]红鱼眼叶水提物和醇提物对金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌耐药株、大肠杆菌、绿脓杆菌和宋内氏痢疾杆菌均有抑制作用,其醇提物的抑菌作用强于水提物;红鱼眼叶中可能含有多肽、糖类、鞣质、有机酸、黄酮类、酚类、香豆素、内酯类、甾体或三萜类和蒽醌类等化学成分。[结论]该研究为红鱼眼叶中具有抑菌活性的化学成分研究提供了科学依据。