东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

洋水仙Dutch Master愈伤组织的诱导、分化及植株再生

以洋水仙品种Dutch Master的鳞茎、叶、花葶及无菌苗叶片作为外植体,选用MS为基本培养基,分别添加不同质量浓度的NAA(0.5,1.0,1.5mg·L~(-1))、IBA(0,0.5,1.0mg·L~(-1))、2,4-D(0,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mg·L~(-1))、6-BA(0.5,1.0,1.5,2.0,3.0mg·L~(-1))和KT(0.1,0.3,0.5mg·L~(-1)),研究不同外植体和不同外源激素配比对小鳞茎的诱导,愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响。结果表明:在Dutch Master初代培养阶段,6-BA的影响效应最大,随着6-BA质量浓度的升高,诱导率呈上升趋势,最适宜的初代培养基配比为:MS+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+2,4-D 0.2mg·L~(-1);以带鳞茎盘的双鳞片作为外植体诱导小鳞茎效果最好,诱导率达76.7%;鳞片部位以鳞茎外层鳞片的培养效果最好,分化率达97.5%;在Dutch Master愈伤组织诱导阶段,2,4-D的影响效应最大,当2,4-D浓度为1mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率的均值(K2)为峰值,最适宜的愈伤组织诱导培养基配比为:MS+2,4-D 1mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1),Dutch Master无菌苗叶片愈伤组织诱导率可以达到81.3%;在Dutch Master愈伤组织继代培养阶段,最适宜的继代培养基配比为:MS+2,4-D 0.5mg·L~(-1)+6-BA 1mg·L~(-1),可以增殖分化得到没有玻璃化的小植株。     

东方百合Tiger Woods离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Tiger Woods的组培快繁技术,以其花器官为外植体获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片和叶片为次级外植体诱导不定芽形成,通过扩繁、生根获得完整植株,炼苗后移栽。结果表明:花梗与花丝诱导能力较强,其最适诱导培养基分别为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)与MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)。无菌苗鳞片、叶片直接诱导产生不定芽的最适培养基为MS+TDZ 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)与MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1),诱导率为100%和93.33%,诱导系数为4.48和2.88;而上述两种外植体间接诱导愈伤组织的最适培养基为MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)与MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),愈伤诱导率为93.33%和96.67%,分化系数为4.53和3.63。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖75g·L~(-1),生根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1),移栽最佳基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1∶1∶1,成活率达91.11%。     

野生湖北百合不定芽诱导及再生植株的建立

为了加强野生湖北百合资源保存与利用,选用黔东南州野生湖北百合为材料,鳞茎及茎段为外植体,探讨不同浓度激素配比对其不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明:诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,但茎段诱导不定芽高于鳞片,出芽率分别为66.67%和59.63%,单块外植体出芽个数分别为2和1,且茎段污染率比鳞片的污染率低。茎段诱导最佳增殖培养基为MS+0.1mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) NAA,增殖率为83.33%,平均增殖系数为2.11,其生长状况良好,为最佳增殖培养基。茎段诱导最佳生根培养基为1/2MS+0.3mg·L~(-1) NAA,诱导生根率高达93.33%,平均生根数为3.18。     

纳米碳对平陆百合脱毒苗鳞片分化的影响

[目的]研究不同浓度纳米碳对平陆百合鳞片分化的影响,旨在优化筛选分化培养基的同时,为纳米碳应用于植物组织培养提供参考依据。[方法]以平陆百合脱毒苗鳞片为外植体,采用正交试验设计法研究了植物激素与不同浓度纳米碳配比对诱导平陆百鳞片分化的影响。[结果]6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和不同浓度纳米碳配比时,鳞片分化的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+纳米碳800 mg·L~(-1),分化率达98.09%;玉米素(ZT)、吲哚丁酸(IBA)和不同浓度纳米碳配比时,鳞片分化的最佳培养基为MS+ZT 0.8mg·L~(-1)+IBA 0.3mg·L~(-1)+纳米碳600mg·L~(-1),分化率达91.43%。[结论]培养基中添加不同浓度的纳米碳均可促进百合鳞片的分化,不同浓度纳米碳对鳞片分化的影响程度不同,其最适宜添加浓度为600~800mg·L~(-1)。     

南川百合种子萌发及组织培养快繁技术研究

研究不同温度以及不同浓度赤霉素对南川百合种子萌发的影响,并以南川百合的鳞片和叶片作为外植体探究南川百合组培快繁技术,探究无机盐浓度对南川百合外植体分化的影响。结果表明:处理条件为16℃加200mg·L~(-1)赤霉素时南川百合种子萌发率最高,萌发速度也最快,温度对南川百合种子萌发率的影响具有显著性;当用南川百合的鳞片作为外植体时,MS加2. 0mg·L~(-1)6-BA加0. 1mg·L~(-1)NAA为最佳诱导分化培养基,无机盐和有机物浓度高鳞片外植体分化率也较高;当用南川百合叶片作为外植体时,MS加1. 0mg·L~(-1)6-BA加0. 1mg·L~(-1)NAA为最佳诱导分化培养基,无机盐和有机物浓度越高外植体分化率越低。     

新疆百合鳞片离体培养研究

以新疆百合鳞片为外植体,建立新疆百合鳞片组织培养再生体系。结果表明,新疆百合鳞片最佳消毒方法为70%酒精处理30 s后0.1%HgCl_2浸泡15 min;最适诱导培养基为MS+1 mg·L~(-1)6-BA+1 mg·L~(-1)NAA;不同部位鳞片诱导率为内层中层外层、中部下部上部。最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,增殖系数达3.46;最适生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L~(-1)NAA+0.2 mg·L~(-1)IBA,生根率达100%。     

马铃薯延薯4号再生体系建立

为了建立马铃薯高效、稳定离体再生体系,以延薯4号无菌试管苗茎段为材料,通过对茎段再生体系的筛选,优化了培养基内最佳激素配比浓度。结果表明:马铃薯延薯4号无菌试管苗茎段诱导愈伤组织最适培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA1.0 mg·L~(-1)。茎段丛生芽分化的最适培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.20mg·L~(-1)+G A_31.0mg·L~(-1)。     

苹果砧木M26和M9-T337组培快繁体系的建立

研究旨在建立苹果砧木M26和M9-T337组培快繁体系,为工厂化育苗奠定基础。通过对苹果砧木M26和M9-T337离体培养,筛选出两种砧木较适宜的外植体消毒方法以及初代、增殖和生根培养基。研究结果表明,M26和M9-T337最佳的外植体消毒方法为0.1%HgCl_2处理8 min;M26外植体建立最适宜的激素组合为6-BA1.0 mg·L~(-1)+NAA0.025 mg·L~(-1),M9-T337最适宜的激素组合为6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1);M26最佳的继代培养激素配比为6-BA0.5 mg·L~(-1)+NAA0.05 mg·L~(-1),M9-T337最佳的继代培养激素配比为6-BA 0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1);两个品种最适宜的生根培养基1/2WPM+IAA0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1)。     

用正交试验法优化香水百合试管鳞茎的诱导

通过正交试验研究了不同浓度(0～0.5 mg/L) NAA、不同浓度(0.5～2.0 mg/L) 6-BA、不同鳞片层次(外层、中层、内层)及不同鳞片部位(上部、中部、基部)对香水百合试管鳞茎诱导的影响,并优化了诱导试管鳞茎的组织培养条件。结果表明:各因素对诱导试管鳞茎的影响大小为NAA6-BA鳞片层次鳞片部位;试管鳞茎诱导的最佳组合条件是MS基本培养基+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA+中层鳞片+鳞片中部部位,在此条件下诱导香水百合试管鳞茎,诱导率达到100%,平均分化数达到4.89。     

矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)组织培养技术研究

实验以矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)的花瓣为培养材料,在MS培养基中附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA),进行矮牵牛快速繁殖技术研究。结果表明,MS+6-BA(2.0 mg.L-1)+NAA(0.1mg.L-1)培养基愈伤组织发生的较早,数量多,培养基为最佳分化培养基,不定芽发生早,粗壮,数量多,玻璃化程度很小;诱导不定根时,1/2 MS+NAA(0.5 mg.L-1)培养基诱导生根的时间较早,不定根发生率达100%。     

草莓(Fragaria ananassa Duch)茎段组织培养的研究

实验在草莓茎段的组织培养过程中,对外植体不同消毒时间,最佳诱导培养基、分化培养基与生根培养基进行了筛选。结果表明,0.1%升汞对茎段消毒2min时效果最好;诱导愈伤的最佳培养基为:MS+1.5mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA;最佳分化的培养基为:MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA;最佳生根培养基为:MS+0.25mg·L-16-BA。     

大花萱草组织培养研究

采取大花萱草茎尖为外植体接种在不同培养基上,研究了不同浓度的NAA和6-BA对于外植体生长的影响,并探索了最适于产生愈伤组织和生根的培养基配方。结果表明,有利于外植体产生愈伤组织的培养基配方是MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+30g糖+8g琼脂;适合愈伤组织诱导生芽培养基配方是MS+6-BA1.0mg·L-1+30g糖+8g琼脂;适合幼苗生根的培养基配方是1/2MS+NAA0.5mg·L-1+30g糖+8g琼脂。     

小型西瓜离体培养技术研究

试验为组培诱导四倍体育成无籽小西瓜提供基础条件,进行小型西瓜离体培养技术体系研究.结果表明,无菌苗子叶近轴端为小型西瓜组培诱导丛生芽最佳外植体,最适丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1;丛生芽在培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg·L-1上增殖系数高;分化的小型西瓜不定芽在1/2MS+KT 0.2 mg·L-1+IAA 0.01 mg·L-1的培养基上苗伸长好且苗壮,经壮苗培养的小型西瓜幼苗在1/2MS+IBA 0.3 mg·L-1生根效果最好.     

东方百合组培快繁试验

采用东方百合Tiber品种的多种外植体分别进行了组培试验,结果表明,Tiber百合各外植体形成愈伤组织的能力有差异,其能力大小依次为:小鳞茎>花托>鳞片>叶柄>叶片;Tiber百合最佳诱导分化培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,继代最佳培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L。     

水晶花烛的无菌播种和组培快繁技术研究

无菌播种水晶花烛Anthurium crystallinum种子获得无菌苗,取该无菌苗的带节茎段、叶片、叶柄为外植体,研究不同诱导培养基组成对水晶花烛愈伤组织诱导分化的影响,同时对影响水晶花烛芽体增殖和壮苗生根的主要因子进行研究。结果表明:水晶花烛种子较好的灭菌方法:种子经去果皮处理+0.1%升汞消毒8min;外植体愈伤诱导分化以带节茎段为宜,培养基为1/3MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.3mg·L~(-1);芽体增殖培养基:MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1);壮苗生根培养基:MS+NAA 0.2mg·L~(-1),其移栽成活率可达95%以上。     

‘黄河蜜3号’高效再生体系的建立

以厚皮甜瓜‘黄河蜜3号’近轴端、远轴端子叶以及下胚轴作为外植体,在多种激素配比组合的培养基上进行分化诱导不定芽试验,并对发生的不定芽伸长和无根苗发根进行培养基的筛选.结果表明:适合‘黄河蜜’不定芽诱导的外植体材料为近轴端子叶,培养基激素组合为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IAA;伸长培养基激素组合为MS+0.1 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IAA;生根培养基为1/3MS.     

香彩雀组织培养及快繁技术的研究

采用香彩雀的茎尖、茎段、叶片作为外植体,并进行常规消毒后接种在MS固体培养基上,诱导出愈伤组织或不定芽。在不同激素配比的培养基上,表现出不同的分化状态。结果表明,MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.02mg·L-1为最佳诱导培养基和继代培养基,约15～20d后便可诱导出大量的丛生芽;1/2MS+NAA0.5mg·L-1为最佳生根培养基,约10d后便可开始生根。叶片是香彩雀组织培养的最佳外植体。     

北青兰(Dracocephalum argunense)叶片组织培养的研究

对北青兰叶片的组织培养过程中的外植体不同消毒时间 ,愈伤诱导及芽丛形成、生根培养基进行筛选。结果表明 ,用 0 .10 %升汞对叶片消毒 3m in效果最好 ,污染率为 2 6 .70 % ,并且萌发率达到 90 %以上 ;最佳愈伤诱导培养基为 MS+2 .0 0 mg· L- 1 6 - BA +0 .5 0 m g· L- 1 NAA;最佳分化与增殖培养基为 MS+2 .0 0 mg· L- 1 6 - BA +0 .2 0mg· L- 1 NAA;最佳生根培养基为 1/2 MS+0 .0 5 m g· L- 1 NAA