金龟子绿僵菌胞外蛋白酶活性与毒力的相关性

为研究金龟子绿僵菌蛋白酶活性与毒力的关系,以黄粉虫为试虫测定金龟子绿僵菌的毒力,采用Folin-酚试剂法对其胞外蛋白酶活性进行测定,并分析蛋白酶活性与毒力的关系。结果表明,不同菌株的蛋白酶活性差异较大,酶活性与毒力存在一定线性关系。胞外蛋白酶的活性可作为金龟子绿僵菌毒力判定的指标之一。     

10种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响

研究了10种杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响。结果表明,杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发、菌落生长及产孢均有不同程度的影响,且抑制作用随着杀虫剂浓度的下降而减弱。阿维菌素对大部分菌株分生孢子萌发的抑制作用较小。阿维.灭幼脲、灭多威和辛硫磷对菌落生长的抑制作用较小,在低浓度水平上有出现负抑制率,说明低浓度的该3种杀虫剂有促进金龟子绿僵菌菌落生长的可能。辛硫磷对显著抑制多数菌株产孢,而某些低浓度杀虫剂(如联苯菊酯、敌百虫、灭多威、阿维菌素和虫酰肼)对金龟子绿僵菌产孢有负的抑制作用。另外,不同菌株对同一种杀虫剂的敏感度也不一样。Ma208菌株分生孢子对多数杀虫剂较敏感,但对氯氰菊酯较不敏感。Ma336菌株菌落生长受杀虫剂的影响较大,其他菌株受影响较小。Ma202、Ma103菌株的产孢量受杀虫剂的影响较大,而其他菌株受影响程度较低。     

6种杀菌剂对金龟子绿僵菌孢子萌发的影响

测定了6种杀菌剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的抑制作用。结果表明,不同杀菌剂对金龟子绿僵菌的抑制作用不同,且随着杀菌剂浓度的下降而减小。其中以腈菌唑的抑制效果最弱,除Ma103菌株外,对其他菌株抑制率均低于35%。代森锌对Ma202,Ma201和Ma203菌株的平均抑制率都较小。其他几种杀菌剂都明显抑制绿僵菌大部分菌株分生孢子的萌发,特别是百菌清和甲基托布津对Ma103,Ma205,Ma207和Ma208菌株的平均抑制率都为100%。2种药剂也强烈抑制其他菌株分生孢子的萌发。因此,应该尽量避免百菌清和甲基托布津与金龟子绿僵菌同时同地使用,否则会明显影响金龟子绿僵菌制剂的应用效果。     

2种方法防治金龟子的药效研究

[目的]探究化学和生物杀虫剂对青海省金龟子的防治效果。[方法]研究了生物杀虫剂绿僵菌(粉剂和水剂)以及化学杀虫剂50%辛硫磷对青海省金龟子的防治效果。[结果]绿僵菌粉剂防治效果达到80%以上,且对牧草和益虫安全;而50%辛硫磷的防治效果很差。[结论]生物杀虫剂将适宜在青海省大面积防治金龟子中推广应用。     

台湾黑僵菌F061菌株孢外酶活性及其对柑橘粉蚧毒力的相关性

室内测定台湾黑僵菌F061菌株的孢外酶活性及其对柑橘粉蚧的毒力,并通过线性回归分析探讨两者的相关性。结果表明:供试菌株的2种胞外酶活性均在1.00×10~8和1.00×107孢子·mL~(-1)2个处理时较高,其中蛋白酶活性达7.63U·mL~(-1)和7.61U·mL~(-1),几丁质酶活性达5.45U·mL~(-1)和5.67U·mL~(-1);供试菌株对柑橘粉蚧的LT50也在1.00×10~8和1.00×107孢子·mL~(-1)2个处理时较短,分别为4.98d和5.39d;线性回归分析表明,供试菌株对柑橘粉蚧的LT50与菌株蛋白酶活性呈显著负相关,与菌株几丁质酶活性呈中度负相关。可见,台湾黑僵菌F061菌株蛋白酶活性比几丁质酶活性强,在侵染柑橘粉蚧过程中起更直接的作用。     

12种化学杀虫剂对3种虫生真菌孢子萌发影响的研究

本文报道了１２种化学杀虫剂对１４株球孢白僵菌、１株金龟子绿僵菌和２株粉拟青霉分生孢子发芽的影响,发现种种上杀虫剂皆对孢子发芽有程度不同的抑制,浓度愈高,影响愈大,总的来看,对绿僵菌影响最大,白僵菌次之,对拟青霉影响最小,灭幼脲３号对白僵菌和绿僵菌孢子萌发抑制作用最小,是菌药混用的较好候选杀虫剂。     

金龟子绿僵菌致病的分子机理研究进展

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一类重要的昆虫病原真菌,在害虫生物防治中起着重要作用.与化学农药相比,昆虫病原真菌开发的真菌杀虫剂作用时间持久、无环境污染、对非靶标生物安全,但存在致死时间长,杀虫效率低,防效不稳定等缺点,严重阻碍了真菌杀虫剂的广泛应用,为解决这一问题,从分子水平揭示昆虫病原真菌的致病机理尤为重要.从分子水平阐述了金龟子绿僵菌对寄主的识别与粘附、绿僵菌侵染寄主过程中附着胞的形成、绿僵菌对寄主体壁的穿透机制和绿僵菌进入寄主血淋巴后的适应机制.     

绿僵菌农药助剂的筛选及混配防治荔枝蝽蟓的研究

[目的]探讨化学杀虫剂与绿僵菌菌株MA4、JF-813的相容性以及菌药混用的增效作用。[方法]以荔枝蝽蟓为供试昆虫,绿僵菌MA4、JF-813为供试菌株,研究5种化学杀虫剂对绿僵菌孢子萌发的影响以及菌药混用防治荔枝蝽蟓的效果。[结果]供试的5种化学药剂对MA4、JF-813菌株孢子萌发均有一定的抑制作用。20％乳油氰戊菊酯与MA4、JF-813菌株的相容性最好,低剂量20％乳油氰戊菊酯对菌落抑制作用明显低于其他4种化学药剂。低剂量的农药与绿僵菌混合使用对绿僵菌的致病力具有协同增效作用。绿僵菌JF-813和次亚致死剂量的2．5％溴氰菊酯混用效果最佳,绿僵菌MA4和4．5％高效氯氰菊酯混用效果最佳。[结论]该研究为绿僵菌混合制剂的生产应用提供了参考依据。     

不同绿僵菌菌株在玉米根际的定殖及对玉米生长的影响

【目的】绿僵菌(Metarhizium spp.)是我国及全世界应用较广泛且研究较多的一类昆虫病原真菌,除能寄生杀死靶标昆虫外,部分绿僵菌菌株能够在植物根部定殖并促进宿主植物生长。通过探明不同绿僵菌菌株促进宿主植物生长能力的强弱,为进一步开发兼具杀虫与促进植物生长的新型真菌制剂奠定基础。【方法】以贵州省主要粮食作物玉米为材料,通过检测不同来源绿僵菌菌株在玉米根部的定殖能力和促进植株生长能力,筛选对玉米生长增效的绿僵菌菌株。【结果】M.robertsii(Mr2575,Mr23和Mr1046)、M.anisopliae(Ma808,Ma932和Ma939)、M.brunneum(Mb820,Mb1187和Mb2974)及M.acridum(Mac324)等绿僵菌均能定殖玉米根部,但Mac324与Mb1187定殖能力最弱;除此2个菌株外其余绿僵菌菌株均显著促进宿主玉米植株的营养生长。其中,菌株Mb820、Ma939对玉米幼苗叶片发育增效最高达42.8%,Mr23对玉米茎秆生长增效最高达15.7%。所有测试菌株对玉米种子萌发和幼苗叶片叶绿素合成无影响。【结论】菌株Mr23、Ma939和Mb820促进宿主植株生长的能力较优,可作为候选菌株进一步进行毒力测试从而筛选出具有良好杀虫与植物生长增效于一体的绿僵菌生防菌株。     

绿僵菌相容性杀虫剂筛选及混用防治椰心叶甲

根据6种常用杀虫剂的常规使用浓度、亚致死浓度、次亚致死浓度对金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae M09菌株菌落生长的影响结果,筛选了与绿僵菌相容的杀虫剂,并选用适当剂量的杀虫剂与绿僵菌混用,防治椰心叶甲Brontispa longissima.结果表明,供试的6种杀虫剂对绿僵菌生长有不同程度的抑制作用,其中杀虫单的抑制作用最弱,亚致死剂量药剂5 d后对菌落生长的抑制率为15%,10 d后下降到5.90%,次亚致死剂量5 d和10 d对菌落生长的抑制率均低于5%,与绿僵菌有较好的相容性.低剂量杀虫单与绿僵菌混用防治椰心叶甲成虫具有协同作用,亚致死剂量和次亚致死剂量的杀虫单和绿僵菌混用,防治椰心叶甲的致死率分别达93.33%和81.11%,要明显高于单独使用绿僵菌(75.56%)和单独使用亚致死和次亚致死剂量杀虫单(10%～30%),具有较好的应用前景.     

1株产几丁质酶绿僵菌的筛选及其产酶特性

为了提高绿僵菌产几丁质酶的酶活力,在自然条件下,从患病蜱体表分离到10株绿僵菌与8株白僵菌,通过筛选,得到1株绿僵菌Ma002。对该菌液体深层发酵产几丁质酶进行了测定,结果表明:几丁质酶的最佳产酶条件:碳源为胶体几丁质,氮源为蛋白胨,接种种龄为24h,以瓶体积的12%为装基量,在温度26℃,起始pH值7.5～8.0,搅拌速度180r/min,产酶时程96h,酶活力可达2.63U/mL,比原基础培养基上的酶活力(1.67U/mL)提高57%。     

15种杀虫剂对3种虫生真菌孢子萌发的影响

选择了15种杀虫剂来测验布氏白僵菌、球孢白僵菌和绿僵菌孢子萌发的影响,结果表明,所有杀虫剂对真菌的分生孢子萌发均有不同程度的抑制作用,浓度愈高,抑制作用越大.总的来看,对球孢白僵菌影响最大,布氏白僵菌次之,绿僵菌影响最小.混配农药绿保1号对3种虫生真菌的影响最小,其次是乙酰甲胺磷和甲胺磷.另外,不同真菌对同一种杀虫剂的敏感性亦有较大差异.因此,在田间进行菌药混用防治害虫前,应进行严格的试验.     

化学杀虫剂对绿僵菌的影响及菌药混用研究

研究 6种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的影响 ,结果表明 6种化学杀虫剂皆对绿僵菌分生孢子有程度不同的抑制作用 ,浓度愈高 ,抑制作用愈强 ,但氧化乐果对绿僵菌孢子萌发抑制作用最小 .对马尾松毛虫的生物测定结果表明 :绿僵菌 (含孢量为 1 .9× 1 0 10个· L-1)与敌杀死 ( 1∶ 60 0 0 0 ) ,辛硫磷 ( 1∶ 1 0 0 0 0 ) ,灭杀毙 ( 1∶ 2 5 0 0 0 )和灭幼脲 ( 1∶ 1 5 0 0 0 )混用有明显的增效作用 ,其 LT50 值比单用绿僵菌 (含孢量为 1 .9× 1 0 10个· L-1)分别提前了 7、6、5和 3d     

5种药剂对甘薯地下害虫的防治效果研究

为了筛选出适合防治地下害虫的杀虫剂,以甘薯普薯32为试材,在河南郑州和洛阳地下害虫发生严重的地块,研究5种药剂对地下害虫的防治效果。结果表明：0.5%噻虫胺（颗粒）90 kg/hm²和金龟子绿僵菌2亿/g（颗粒）90 kg/hm²,防治效果较好,防治效果最高分别是82.77%和79.48%,商品率最高分别为92.51%和91.06%,平均产量比对照增产最高分别是10.49%和9.57%。噻虫胺和金龟子绿僵菌分别代表化学药剂和生物药剂在甘薯地下害虫防治上表现较好。     

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GST在大肠杆菌中的高效融合表达

使用RT-PCR方法,从高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae HN1中,克隆得到一个全长为1275bp的几丁质酶基因,经Blast分析此基因序列与M．anisopliae E6的chil基因（AF02749）同源率为96％。将此基因克隆到pGEX-6p-1载体上,使之与载体上一个约26kD大小的谷胱甘肽S-转移酶（GST）相连,构建pGEX-chi融合表达载体,转化到大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中,经SDS-PAGE结果分析显示：表达出的融合蛋白大小为68kD,此目的蛋白占表达总量的64．5％。经破碎处理后可检测到几丁质酶活性。     

几种化学杀虫剂对绿僵菌和拟青霉孢子萌发及生长的影响

研究了9种化学杀虫剂对绿僵菌和粉拟青霉两种虫生真菌孢子萌发率和菌落生长速率的影响。结果表明:其对绿僵菌抑制力降低顺序依次为:辛硫磷>1605微胶囊剂>溴氢菊酯>乐果>甲基1605>氧化乐果>久效磷>杀螟松>甲基异柳磷。4种化学杀虫剂对粉拟青霉抑菌力降低顺序为:辛硫磷>甲基异柳磷>甲基1605>1605微胶囊剂。