水茄组织培养技术体系的建立

[目的]本文旨在建立高效的水茄下胚轴组织培养愈伤诱导和再生植株体系。[方法]以水茄下胚轴为外植体,采用组织培养技术,通过对25个激素组合的分析,研究了愈伤组织诱导与芽分化、继代和生根培养3个技术环节的激素配比,同时对愈伤诱导植株再生过程中的潮霉素筛选压进行了测定。[结果]结果表明,以MS为基础培养基,下胚轴愈伤组织诱导和芽分化以6-BA 2 mg·L~(-1)+IAA 0.1 mg·L~(-1)为宜,增殖系数达6.62;在继代培养中,使用MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+IAA 0.1 mg·L~(-1)即可维持较高的增殖系数6.62;生根培养最佳培养基为1/2MS,培养2周后生根率达90%。8 mg·L~(-1)是水茄外植体再生较为合适的潮霉素筛选压浓度。[结论]本研究以优化激素配方6-BA 2 mg·L~(-1)+IAA 0.1 mg·L~(-1)作为基础培养基成分,为进一步建立农杆菌介导的遗传转化研究奠定了基础。     

陵川板蓝根离体快繁体系的建立

实验选用山西省陵川县板蓝根种子幼苗为材料,取幼苗的茎段为外植体进行离体快繁。选用MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的激素组合,使用控制单一变量的方法,筛选得到各阶段最佳的培养基配方。由实验可知:板蓝根茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)2,4-D+1.0 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织最大诱导率为60.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+0.8 mg·L~(-1)NAA+1.0 mg·L~(-1)6-BA,最大分化率为53.3%;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg·L~(-1)NAA+0.3 mg·L~(-1)IAA,根的最大诱导率为:75.3%。     

绿玉菊离体培养与快速繁殖

用绿玉菊叶片、不带腋芽茎段、带腋芽茎段和茎尖为外植体进行离体培养研究,分析了影响愈伤组织形成的因素及分化困难的原因.研究结果表明:在愈伤组织诱导时,不带腋芽茎段较嫩叶易产生愈伤组织,是首选外植体;6-BA1. 0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1的激素配比对茎段愈伤组织诱导有利,诱导率高达100%;在MS基本培养基中,pH值为5.4较适宜愈伤组织的分化,且6-BA3.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1对愈伤组织分化不定芽的效果较好,分化不定芽均数达11.10个.茎尖及带腋芽茎段在MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1的培养基上,能直接诱导出大量生长健壮的丛生芽,生根在MS+NAA0.05mg·L-1的培养基上进行,生根率高达100%,根多而壮,植株长势好.     

新疆野生枸杞愈伤组织分化及植株再生

以新疆枸杞的叶片、茎尖基部为外植体,分别诱导愈伤组织、继代培养和诱导分化,结果表明:①不同外植体愈伤分化率有明显差异:叶片愈伤组织分化率最高为100%,茎尖基部愈伤组织分化率最高为80%。每块愈伤的芽分化数最多可达15～20个。②激素组合影响愈伤分化。诱导分化最适培养基为6 BA2.0mg·L-1 IAA0.5mg·L-1,KT0.5mg·L-1 NAA1.0mg·L-1。③将分化出的无根苗转接到MS无激素培养基上,生根率可达到85%以上。因此叶片为诱导愈伤组织分化的最适外植体。     

金花茶离体培养体系的建立

[目的]通过愈伤组织发生途径建立金花茶(Camellia nitidissima)的离体培养体系,为金花茶的快速繁殖和种质资源保存提供理论和技术支持.[方法]在金花茶种子萌发阶段以沙子替代培养基进行无菌萌发,以其成熟植株的茎尖、茎段和叶片为外植体,在WPM培养基上添加不同种类和浓度激素进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化及生根培养.[结果]金花茶成熟种子去壳、去皮、取出胚乳后在添加无菌液的湿润沙子中培养,平均萌发率为95.40%,平均萌发时间为19.10 d;WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D是金花茶子叶、胚轴愈伤组织诱导的适宜培养基;WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA是愈伤组织分化的适宜培养基,分化系数为4.56;1/2WPM+0.50~1.00 mg/L IBA是金花茶生根的适宜培养基,生根率为45.40%~54.00%,生根时间为19.80~20.90 d.[结论]金花茶离体培养可通过胚轴诱导产生愈伤组织进而分化成完整植株.     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

绥农10号大豆的再生体系研究

为了建立大豆的愈伤组织再生体系,以大豆绥农10号的破坏生长点的茎尖、子叶、真叶、胚轴为外植体,研究了不同激素种类、浓度对大豆愈伤组织形成和芽的再生及生根的影响.结果表明,6-BA对大豆愈伤组织的形成有抑制作用,其中对真叶的抑制作用最大,对破坏生长点的茎尖外植体抑制作用最小:6-BA诱导的大豆芽分化率均较低,其中在2～3...     

旱半夏组织培养体系优化

为研究旱半夏组织培养体系的最优激素配比,本试验以旱半夏块茎为材料,以MS为基础培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA激素,设置9个处理,筛选诱导愈伤组织、不定芽分化以及生根最适培养基。研究了不同激素以及不同的浓度配比对半夏组织培养的影响。结果表明:6-BA、NAA两种激素以及不同浓度配比均对半夏愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根有显著影响,其中添加0.8mg·L~(-1)6-BA和0.4mg·L~(-1) NAA时出芽数最多,出芽率达到90%;生根培养中,添加1.0mg·L~(-1) NAA时生根数最多,平均根长达到6.4cm。因此,半夏最佳愈伤组织诱导以及不定芽分化的条件为:MS+0.8mg·L~(-1) 6-BA+0.4mg·L~(-1) NAA;最佳生根培养基为:1/2 MS+1.0mg·L~(-1) NAA。     

彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。     

欧洲卫矛愈伤组织分化及其生理生化特性

以欧洲卫矛生长健壮的叶片愈伤组织为材料,通过不同激素配比筛选出适宜其分化的培养基,将愈伤组织置于不同条件下培养。结果表明,适宜欧洲卫矛愈伤组织分化的培养基为MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA;欧洲卫矛愈伤组织适宜在光照条件下进行培养,生长周期为28 d,28 d后愈伤组织出现不同程度的褐化;可溶性糖含量先升后降;SOD和POD活性均出现2个峰值,可溶性蛋白变化趋势与POD变化趋势基本一致;可溶性蛋白在分化中起重要作用,且光照条件下,可溶性糖和可溶性蛋白含量、SOD和POD活性均高于黑暗条件下,PPO在培养后期活性下降,可能与愈伤组织褐化有一定关系。     

乌头酸对尖孢镰刀菌百合专化型抑制作用分析

乌头酸是兰州百合一种重要的根系分泌物,为探究乌头酸对尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）百合专化型的作用效果,测定外源乌头酸对F.oxysporum生长及抗氧化酶活性基因表达量的影响。结果表明,浓度为1.175~1 175 mg·L^-1时,乌头酸对F.oxysporum的生长具有抑制作用,且随着浓度增加,抑菌作用显著。浓度为1 175 mg·L^-1时,与CK相比,乌头酸对F.oxysporum抑菌率、产孢量抑制率和孢子萌发抑制率分别达到91.95%、77%、93%。乌头酸处理引起菌丝体电导率增大,随着浓度和时间的增加,SOD、POD活性呈现先增加后降低的趋势。SOD酶合成基因在转录水平上于11.75~1 175 mg·L^-1处理下调表达, 1.175 mg·L^-1处理时SOD酶合成基因出现上调,与CK差异不显著。POD酶合成基因在转录水平上所有处理均下调表达。可见,乌头酸可以作为化感抑制剂应用于植物土传病害的防治。     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

省沽油嫩枝扦插研究

以省沽油嫩枝作为扦插材料,以园土、河沙+蛭石、轻基质为基质类型,以分别处理0.5 h 的100 mg·kg-1 NAA、200 mg·kg-1 NAA和清水作为处理的激素浓度,以枝条上部、枝条中部、枝条下部为插穗类型来设计正交试验,旨在探讨基质类型、激素浓度、插穗类型等因素对省沽油嫩枝扦插的影响.通过对成活率、生根量和根长度等指标分析比较得知,以轻基质为扦插基质,200 mg·kg-1的NAA处理带叶片的上部插穗0.5 h,扦插效果最佳,其生根率高达89%,插穗的根系平均生根量达到23.7条,平均根长达到13.7㎝.     

南抗杨叶片快速繁殖体系的建立

以南抗杨叶片为材料,对其快繁体系进行研究。选用9种分化培养基、4种增殖培养基和6种生根培养基,研究不同激素组合对快速繁殖体系建立的影响。结果表明,适宜的诱导分化培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1;丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 1.2 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1。     

建莲茎尖离体培养研究初报

选用不同品种的“建莲”地下茎茎尖为外植体进行离体再生研究 .结果表明 :对“建莲”地下茎茎尖培养 ,品种间存在一定差异 ;筛选出了适合于“建莲”地下茎茎尖离体培养的分化培养基 ,即 MS+2 mg·L- 1 ZT+0 .5 mg· L- 1 GA3;增殖培养基为 MS+3 mg· L- 1 BA+0 .5 mg· L- 1 NAA;生根培养基为 MS+0 .5 mg· L- 1 BA+0 .1 mg· L- 1 IBA+1 .0 mg· L- 1 NAA,并对已生根的试管芽苗进行了成功的移栽     

杂种黄秋葵茎尖及试管苗培养的研究

采用茎尖和试管苗培养的方法,以黄秋葵生长点为材料,进行了生长点的生长、分化芽的生根和试管苗的生根继代增殖培养,以及试管苗的移栽与定植的研究。结果表明:1/2MS+ZT0.2mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点伸长生长的理想培养基;MS+6-BA0.7mg·L-1+AgNO30.8mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是生长芽分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT0.6mg·L-1+蔗糖10g·L-1+IAA0.4mg·L-1是分化芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基。试管苗移栽成活率为94.7%;定植成活率为97.4%;定植的试管苗保持了杂种黄秋葵的杂种优势。     

激素对金鱼草茎尖快繁及对后期叶序形成的影响

采用组织培养技术,在金鱼草生长至第四或第五节位时取茎尖作为外植体,探讨不同激素对金鱼草快繁及叶序发育的影响。结果表明：（1）配方为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA的增殖培养基能诱导出大量丛生芽;（2）在不添加激素的1/2MS培养基上,蔗糖浓度为20 g·L^-1时,丛生芽的根系质量最好;（3）外源激素可以调控金鱼草对生叶原基转换为互生叶原基。     

绒毛狼尾草幼穗的愈伤组织诱导与植株再生

以绒毛狼尾草幼嫩花穗为材料,研究了培养基种类和2,4-D对愈伤组织诱导以及6-BA对分化的影响。结果表明,MS较N6培养基适合绒毛狼尾草的组织培养。在附加3 mg·L-1 2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100%。分化培养基以附加1.0 mg·L-1 6-BA的MS培养基为最佳,分化率为44.0%。在1/2MS培养基中附加0.5 mg·L-1 NAA和0.3 mg·L-1活性炭进行生根培养,根系生长健壮,生根率达100%。     

丰花月季再生体系的建立

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导及植株再生的研究。结果表明,丰花月季诱导愈伤组织最佳激素浓度配比是1/2MS+2,4D 5 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;所得到的愈伤组织在MS+6-BA1 mg.L-1+2,4D 2.5 mg.L-1+GA3 1 mg.L-1的培养基上继代保存两个月后于MS+NAA 0.02 mg.L-1+TDZ 1.8 mg.L-1+KT1 mg.L-1上分化出不定芽;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg.L-1上的生根率为91.25%。