玉米接种黄曲霉菌影响因素的研究

以马齿型玉米品种苏玉12号、硬粒型玉米品种苏玉16号作为试验材料，对完整无破损种子、纵向切去一半的籽粒和切去胚部的籽粒用4种孢于悬浮液浓度人工接种黄曲霉菌不同的生理小种。结果表明：不同玉米品种以及不同破损程度的种子受黄曲霉菌侵染的程度不同；黄曲霉菌的不同生理小种对玉米籽粒的侵染能力之间存在权显著的差异；同一生理小种孢于悬浮液的浓度对玉米籽粒的发病程度影响不大。     

3种小麦纹枯病病原菌接种方法的比较

为使小麦纹枯病鉴定方法简单、科学、可靠，选用3种接种纹枯病菌的方法，即沟带接种法、土表接种法、牙签嵌入接种法，比较了不同抗性水平品种、不同接种方法之间发病率、病情指数的差异。结果表明：不同接种方法之间、不同品种之间发病率、病情指数存在显著差异。沟带接种法简单、粗放，受环境的影响较大，可以用于大量材料的初选。牙签嵌入接种法的发病率最高，平均发病率在90％以上，重复之间差异不显著，接种容易成功，重复性好，但试验鉴定要求细致、繁琐，工作量大。土表接菌法最为简单、方便，通过适当控制试验条件，可以获得满意的接种效果。在实际研究过程中，可根据自身条件和试验要求选择合适的接种方式。     

小麦赤霉病人工接种与发病关系的研究

在４个对赤现表现抗感不同的冬春麦品种上，利用赤霉病菌分生孢子进行人工接种试验，结果表明，采用不同孢子浓度和不同接种次数接种以使小麦群体产生不同严重程度的赤霉病病情，是有效的方法，同时得到了接种菌量和赤霉病发生程度的定量结果。     

玉米弯孢菌叶斑病侵染概率测定

试验采用人工接种方法，初步测定了室内和田间条件下玉米不同生育期的病害侵染概率。结果表明，玉米弯孢菌侵染概率界于0.0101-0.2628之间，其中玉米拔节期室内离体叶保湿接种侵染概率平均值为0．1627，而玉米拔节期田间雨天 接种侵染概率平均值为0．1543；玉米开花期室内离体叶保湿接种侵染概率平均值为0．2628；而玉米开花期田间干旱条件下接种，侵染概率平均值仅为0.0101。玉米在开花期比拔节期抗病性差，同时湿度是影响侵染概率高低的主要因素。试验为玉米弯孢菌叶斑病流行模型的组建提供了理论依据。     

玉米矮花叶病毒株系、寄主范围及辅助成分的研究

对纯化的玉米矮花叶病毒进行株系鉴定，因人工接种约翰逊草不侵染，故定为MDMV-B株系；4科36种植物的接种试验表明。19种禾本科植物可作为其其寄主，以不同病毒汁液进行的蚜虫薄膜饲毒试验表明，存在不同于Con A的一种辅助成分。     

油菜抗(耐)菌核病的人工接种鉴定技术研究

采用人工接种鉴定和田间自然发病鉴定的方法,通过对61个国内外油菜品种抗(耐)油菜菌核病的差异性的比较,评价不同的方法在不同的时期鉴定油菜抗(耐)病性的优缺点.试验结果表明:2种人工接种方法鉴定结果均显示出品种间的抗(耐)性差异显著,在不同的生育期间油菜对菌核病的抗侵染和抗扩展的能力不一致,青角期人工接种法鉴定结果与田间自然发病鉴定结果呈相关性正显著.     

人工接种PVY病毒鉴定马铃薯植株抗性的研究

本试验以马铃薯品种中薯5号的脱毒苗和试验室用黄苗榆烟保存的PVY病毒为材料，设计了人工接种病毒鉴定马铃薯植株抗性的正交试验。结果表明：在20～28℃温度条件下，马铃薯人工接种PVY病毒的最适宜条件是：植株第4片完全叶展开时，用稀释10倍的病毒汁液进行两次接种，两次接种间隔的最佳时间为3d。     

西瓜炭疽病人工接种鉴定的新方法──离体叶接种和AD评价法

对具有不同抗性水平的３个西瓜品种进行了离体叶人工接种炭疽病抗性鉴定方法的研究。结果表明，离体叶与幼苗人工接种同样能够真实地反映西瓜品种固有的抗病性，且能节省菌液、劳力、试材和费用，并对环境条件更易控制，简便易行，可以广泛采用。该法用注射器悬滴接种，菌液浓度为１×１０￣６孢子／ｍＬ。接种叶片的叶龄为１５～２０ｄ，接种后３ｄ开始发病，第６ｄ调查统计病情指数。品种抗病性可以用平均病斑直径（ＡＤ），（发病病斑直径）／接种总滴数］和病情指数（ＤＩ）两种标准进行评价，其中用ＡＤ进行品种抗病性评价减少病级划分中的人为误差，更为客观简便，可以取代ＤＩ在离体叶人工接种西瓜炭疽病抗性鉴定中广泛采用。     

不同梨品种对黑斑病抗性鉴定

采用田间自然发病和人工接种鉴定两种方法,研究16个梨品种对黑斑病的抗性。结果表明:不同梨品种对黑斑病的感染程度不同,无论是田间自然发病还是人工接种鉴定,华酥、黄花、早美酥、丰水抗性均最强;爱宕、金水2号抗性最弱。在田间自然条件下,一些表现为高抗、中抗、感病的品种,在人工接种黑斑病孢子悬浮液后,分别表现为抗病、感病、高感,说明自然选择压不同,品种的抗性表现也随之不同。不同梨品种在接种病菌后,对病菌的抗扩展能力也不同,华酥、黄花、早美酥、丰水抗扩展能力最强,富源黄、爱宕、金水2号、七月酥抗扩展能力最弱。     

小麦品种对人工接种吸浆虫的抗性反应

麦红吸浆虫严重影响小麦产量和品质,不同抗性小麦品种对虫害反应的差异显著。为了解不同小麦品种对人工接种下虫害反应的差异,本研究以高抗和高感吸浆虫小麦品种为材料,用吸浆虫幼虫存活率为指标,比较了不同抗性小麦品种对人工接种虫卵、初期幼虫和中龄幼虫的反应。结果表明:吸浆虫被人工接种至不同小麦品种穗部时,能够以不同比率存活下来,但感虫小麦品种中的幼虫存活率较高;当以不同虫龄(卵)进行接种时,以直接接虫卵的效果较好,该方法能够较准确地鉴定小麦不同品种对吸浆虫的抗性。     

甜瓜蔓枯病离体接种方法初步研究

以感病品系"白皮脆"和抗源"PI 140471"的离体叶片为试验材料,初步研究甜瓜蔓枯病离体接种方法.离体接种后将叶片置于26±1℃、16 h光照/8 h黑暗及90;的相对湿度条件下培养,2 d后感病品系的离体叶片出现褐化病斑,发病率达60;左右,4 d后病斑开始扩大,离体叶片发病率为100;;抗病材料和对照则没有被浸染,未出现病斑.采用离体叶片和苗期活体两种接种方法,对10个厚皮甜瓜新品种进行蔓枯病抗性鉴定筛选,结果表明两种方法接种后的发病率和病情指数均呈正相关,病情指数的相关系数达0.44,两种方法的鉴定结果基本一致.因此,离体叶片接种方法可用于快速鉴定甜瓜蔓枯病抗病性.     

寄主生育期、接种条件对玉米弯孢菌叶斑病发生的影响

为了明确不同因子对玉米弯孢菌叶斑病发生的定量影响,采用室内离体叶片及田间接种方法,通过人工控制不同生育期及接种条件,定量研究了不同因子对玉米弯孢菌叶斑病发生的影响。结果表明,玉米感病性随生育期的延长而增加,单位面积叶片上的病斑数随接种浓度的增大而增加,并随接种浓度呈直线增长。当叶面保湿时间大于8 h时,叶面保湿时间越长病斑数越多,其变化呈逻辑斯蒂模型趋势。温度对病害的潜育期有重要影响,在10~35℃时,温度越高潜育期越短。不同接种量对玉米弯孢菌叶斑病的病情发展动态有重要作用,低浓度下接种,病害的病情发展曲线近似为直线,增长较为平缓;高接种量条件下,病情增长较为迅速,接近S型曲线。     

玉米不同品种接种MDMV后叶片内过氧化物酶及其同工酶的变化

对4个感病程度不同的玉米品种接种玉米矮化花叶病毒（MDMV）7d后植株叶片内过氧化物酶（PO）活性经研究表明：玉米接种病毒后PO活性均有提高,但提高幅度不同且酶活变化波形差异大。抗病品种接毒前酶活低且波形变化平稳,接毒后第2天酶活急剧增高且波形变化大,而感病品种接毒后酶活变化不大且波形一致。玉米PO同工酶酶谱简单,与对照比较,接毒后抗、感品种带纹数目变化不大,但带纹浓重而重叠。抗病品种接毒后第2天带纹突然加重,且持续增加,而感病品种有持续减弱趋势。     

转CP基因线辣椒对CMV的抗病性组分研究

以转化 CMV外壳蛋白基因 ( CP基因 )的线辣椒 ( Capsicum annuum var. longunt)为试材 ,系统研究了 CP基因介导抗病性的组分和表达特点。摩擦接种黄瓜花叶病毒 ( CMV,浓度 2 0μg/ ml)后 ,转基因线辣椒显症延迟 4～ 1 0 d,显症率和严重度大幅减低 ,仅部分植株表现轻度花叶。接种叶片上 CMV侵入位点数目比未转化对照品种减少 6 7.0 %～ 86 .4 %。接种后第 9天 ,转基因株系接种叶中 CMV含量仅为未转化对照的32 .4 %～ 37.3%。病毒由接种叶向邻叶转出始期 ,比未转化对照晚 9～ 1 5h。接种后 3d,转基因株系 1 6— 1 3的未接种叶中未能检出 CMV,而同期未转化对照已有 4片邻叶检出了 CMV。接种后 6 d,1 6— 1 3仅上下位相邻叶检出了 CMV,此时对照已全株带毒。转基因株系接种后 6 d,整株 CMV含量为未转化对照的 4 2 .5%。这表明线辣椒 CP基因介导的抗病性是多组分的 ,包括对病毒的抗侵入、抗扩展和抗增殖     

马铃薯Y病毒（PVY）对晚疫病（Phytophthora infestans）的影响

在温室条件下,以脱毒马铃薯为试材,研究了PVY对晚疫病的影响。结果表明：PVY汁液接种脱毒马铃薯28d后,用晚疫病菌接种,其孢子囊悬浮液浓度为1．0×104个·mL-1时,PVY对晚疫病的抑制作用最明显;马铃薯植株体内PVY的浓度与晚疫病的发病率、病斑大小及病情指数呈负相关。说明马铃薯感染PVY后诱导了植株对晚疫病的抗性,不同因子影响降低了马铃薯感Y病毒叶片对晚疫病菌的感病性。     

甘蓝型油菜硫甙含量对接种菌核病的反应

研究了甘蓝型油菜硫苷含量与人工接种菌核病的互作关系。在油菜五叶期,人工接种菌核病菌丝体,然后在接种当天和接种后第１、第３和第７ｄ分析接种叶片和其它叶片的硫苷变化,所有参试「抗（耐）病和感病」品系都对人工接种菌核病菌丝体反应强烈,在接种第３叶,硫苷含量显著增加。但是抗（耐）病品系的硫苷增加不仅仅限于接种叶片,品系０１４硫苷增加在接种后第７ｄ的非接种叶片最幼嫩的第７叶片最为明显。品系０２０硫苷增加在接     

β-氨基丁酸诱导马铃薯对晚疫病的抗性组织化学及信号传导途径分析

【目的】β-氨基丁酸（BABA）田间或离体叶片喷洒能够有效诱导马铃薯防卫反应,增强对晚疫病的抗性。研究从组织化学层面进一步探究BABA诱导马铃薯晚疫病抗性过程中诱发的防卫反应及相关信号途径,为深入研究BABA诱导马铃薯产生晚疫病抗性的可能机制奠定基础。【方法】用4 mmol?L-1 BABA或蒸馏水（对照,Mock）喷洒马铃薯植株叶片,3 d后取离体叶片接种晚疫病菌（Phytophthora infestans）,接种后不同时间用打孔器取接种点叶盘用于织化学染色和过敏反应（HR）观察。采用二氨基联苯胺（DAB）组织化学染色方法检测接种点周围活性氧（H2O2）累积情况;叶盘用苯胺蓝（aniline blue）染色,然后在荧光显微镜下观察接种点周围胼胝质积累和表皮细胞HR发生情况;利用干涉了StCOI1（阻断了茉莉酸JA信号传导途径）和超量表达细菌水杨酸羟化酶基因NahG（阻断了水杨酸SA信号传导途径）的转基因马铃薯株系为材料,通过研究BABA能否在这些特殊马铃薯材料上有效诱导晚疫病抗性,进而推断BABA诱导马铃薯晚疫病抗性可能参与的信号途径。【结果】用清水作为空白接种时,Mock和BABA预处理叶片各时间点均未观察到H2O2积累,而病原菌接种处理24 h后,Mock和BABA预处理叶片接种点周围都出现H2O2积累,随着病原诱导时间的延长,H2O2积累增强。但是,BABA预处理叶盘中接种点周围H2O2累积比对照提前12 h,且累积量显著强于对照。苯胺蓝染显示Mock和BABA预处理叶片在接种清水时检测不到胼胝质的沉积,而接种晚疫病菌24 h后,Mock和BABA预处理叶片上均观察到胼胝质的沉积,BABA预处理叶片在侵染点及其附近胼胝质积累量要显著高于对照。荧光显微观察结果显示,BABA预处理和Mock叶片晚疫病接种点周围表皮细胞均有HR发生,BABA预处理叶片早在接种24 h后,接种点周围就已出现HR反应;接种48 h时,BABA预处理85%叶盘的接种点周围表皮细胞出现HR,而Mock叶片只有30%叶盘上观察到HR,BABA预处理叶片HR发生频率比Mock叶片高出55%。BABA不能在超量表达NahG的马铃薯叶片上有效诱发抗性,但能够在干涉了StCOI1的马铃薯叶片上正常诱导产生抗性。【结论】BABA能够从H2O2和胼胝质累积以及HR发生多个层面有效诱发马铃薯基础防御反应,BABA预处理能够在病原菌侵染点周围显著提高胼胝质和H2O2积累水平,诱发接种点发生较高频率的HR,从而提高马铃薯对晚疫病的抗性;BABA诱导马铃薯对晚疫病的抗性依赖水杨酸信号传导途径,但不依赖茉莉酸信号传导途径。     

木薯叶片组织结构及生理生化特征与其抗细菌性枯萎病的关系

本试验选取对细菌性枯萎病具有高抗、中抗、高感的6个木薯品种,在苗期对它们叶片的组织结构进行显微观察,并对接种病原菌后叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性和可溶性蛋白质含量变化进行测定。结果表明:不同抗性品种叶片的气孔密度和蜡质含量差异显著,与品种抗病性呈正相关;高抗品种叶片的栅栏组织细胞和海绵组织细胞排列较感病品种更整齐紧密,中抗品种和感病品种的海绵组织中则出现较多的空隙,结构比较疏松;接种病原菌后,叶片中POD和PPO的活性与木薯抗病性成正相关;可溶性蛋白质含量也有较显著的变化。     

锈粉宁浸种对小麦白粉病菌侵染叶部过程的影响

供试小麦种子用50%锈粉宁500和1000倍药液浸种,出苗后一叶期用小麦白粉病菌(Erysiphe graminis f.sp.tritici)接种。用特种蛋白质染料柯马氏亮兰(Coomassie Brilliant Blue R-250)叶片快速透明染色法系统研究了锈粉宁对小麦白粉病菌侵染叶部过程的影响。结果表明,在浸种植株叶片中,小麦白粉病菌从分生孢子萌发到吸器形成严重受抑制,接种48h 后,附着胞、菌丝分枝和吸器不再形成,96h 后分枝菌丝变形消解。这些组织病理学的特征表明,锈粉宁主要是通过抑制小麦白粉病菌菌丝的分枝和扩展来减少吸器形成的数量,达到控制病菌扩展的目的。