Zeylenone对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Zeylenone体外抗急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)效应及作用的可能机制。方法应用MTT法比较Zeylenone对肿瘤细胞、正常细胞增殖的影响;AO/EB染色观察其对ALL细胞(Reh、RS4;11)凋亡形态学的改变;流式细胞仪检测药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 Zeylenone对多种细胞呈现增殖抑制作用,且对ALL细胞株呈现更高的敏感性,而对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)抑制作用较小,抑制Reh、RS4;11细胞增殖呈时间依赖性和剂量依赖性;Zeylenone能够诱导ALL细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。结论 Zeylenone体外具有抗ALL细胞增殖的作用,其作用与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期相关。     

Vc对黑色素癌细胞A375生长抑制作用的研究

[目的]探讨Vc对黑色素癌细胞A375的生长抑制作用。[方法]利用MTT法分析不同剂量组的Vc对A375增殖的影响,并通过荧光染色和荧光显微镜观察A375细胞的形态学变化,用流式细胞术检测Vc对各组A375的细胞周期变化。[结果]流式方法测定的结果显示,Vc对黑色素癌细胞A375的增殖具有抑制作用;Vc能以浓度依赖和时间依赖方式阻滞黑色素癌细胞A375细胞于G0/G1期,抑制其生长并诱导凋亡。[结论]Vc对黑色素癌细胞的生长有明显抑制作用。     

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀(SIM)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM体外增殖的抑制作用。方法MTT法检测SIM对HO-8910PM细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析SIM对细胞周期的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变。结果SIM抑制HO-8910PM细胞的增殖,细胞被阻滞在G0/G1期;荧光染色法显示经SIM作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体。结论SIM在体外能有效地抑制癌细胞的增殖,其作用可能是通过诱导其凋亡产生的。     

健脾解毒方对大肠癌细胞mTOR信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨健脾解毒方对大肠癌细胞增殖的影响及可能作用机制。方法 采用水提法制作健脾解毒方提取物,利用超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方的主要成分,MTT法检测健脾解毒方对大肠癌细胞增殖的影响,Graphpad Prism5软件计算IC₅₀值,流式细胞术检测细胞周期,Western Blot技术检测Phospho-mTOR、Phospho-P53和P21的蛋白表达。结果 健脾解毒方能够抑制大肠癌细胞增殖,处理24、48、72 h后四种大肠癌细胞系的IC₅₀值分别为HCT116（6.894、5.668、3.648 mg/mL）、LoVo（14.65、8.737、7.849 mg/mL）、SW48（8.029、7.026、5.740 mg/mL）及HT29（13.06、9.646、8.448 mg/mL）;健脾解毒方使大肠癌细胞周期阻滞在G1期;并能够下调Phospho-mTOR蛋白表达（P<0.05）,上调Phospho-P53和P21蛋白的表达（P<0.05）,使大肠癌细胞周期阻滞在G1期。结论 健脾解毒方可能通过mTOR-P53-P21途径抑制大肠癌细胞的增殖,这可能是健脾解毒方治疗大肠癌的作用机制之一。     

预处理方法对番茄红素提取的影响

[目的]比较不同预处理方法对番茄红素提取的影响，优化其预处理工艺。[方法]采用离心脱水、冷冻、干燥、乙醇处理等方法对番茄浆样进行预处理。研究预处理方法对番茄红素提取的影响。[结果]提取液在444、472和502nm处各有1个吸收峰，其最大吸收在472nm。各预处理番茄浆的番茄红素提取率高低为：离心脱水处理〉冷冻处理〉45℃烘干、粉碎〉60℃烘干、粉碎。无水乙醇处理稍低于不处理番茄浆。番茄浆经离心脱水和冷冻处理后用石油醚：丙酮=1：1提取1h，提取液的吸光度变化较小，番茄浆经干燥处理再用有机溶剂提取1h。提取液的吸光度变化较大。料液比为1：6时，番茄红素的提取效果较好。[结论]番茄果实打浆后，离心脱水处理或冷冻处理均可提高提取率，缩短提取时间。     

雌激素对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期变化规律的影响

目的 研究雌激素对乳腺上皮细胞增殖及细胞生长周期变化规律的影响。方法 选取扩增生长状态良好的乳腺上皮细胞,添加0、50、100、200 μmol/L雌激素孵育乳腺上皮细胞后,分别在0、12、24、48、72 h后检测各组细胞增殖及细胞周期。结果 培养12 h时,50 μmoL/L雌激素组的OD值显著高于对照组及100 μmoL/L雌激素组(P＜0.05),且极显著高于200 μmoL/L雌激素添加组(P＜0.01);培养至12 h时,对照组及添加50 μmoL/L雌激素组其G1期极显著高于其他两组(P＜0.01),对照组S期极显著高于其他各组(P＜0.01),添加100 μmoL/L雌激素组其G2期极显著高于其他各组(P＜0.01)。结论 添加雌激素可以促进乳腺上皮细胞的增殖,且50 μmoL/L、12 h时雌激素促进乳腺上皮细胞的增殖效果最好。添加雌激素不影响乳腺上皮细胞在各时期时细胞生长的基本规律,各雌激素添加组在12 h时的细胞周期由G1、S期向G2期转化较快。     

番茄红素萃取工艺条件研究

[目的]确定番茄红素的提取工艺。[方法]采用正交试验,研究液料比、提取温度、提取时间及提取次数对番茄红素提取率的影响。[结果]乙酸乙酯的浸提效果最好,故选用乙酸乙酯作为浸提溶剂。随着液料比的升高,番茄红素提取率增加,当液料比大于4∶1(ml/g)时,色素提取率增加缓慢。当pH值小于6时,随着pH值的增大,色素提取率增加;当pH值大于6时,随着pH值的增大,色素提取率降低。各因素对番茄红素提取率的影响由大到小依次为:液料比>提取次数>提取时间>提取温度。[结论]番茄红素的最佳提取工艺为:液料比为4∶1(ml/g),提取时间50 min,提取温度45℃,提取次数3次,该条件下,番茄红素的提取率在85%以上。     

G1 events and regulation of cell proliferation

Cells prepare for S phase during the G1 phase of the cell cycle. Cell biological methods have provided knowledge of cycle kinetics and of substages of G1 that are determined by extracellular signals. Through the use of biochemical and molecular biological techniques to study effects of growth factors, oncogenes, and inhibitors, intracellular events during G1 that lead to DNA synthesis are rapidly being discovered. Many cells in vivo are in a quiescent state (G0), with unduplicated DNA. Cells can be activated to reenter the cycle during G1. Similarly, cells in culture can be shifted between G0 and G1. These switches in and out of G1 are the main determinants of post-embryonic cell proliferation rate and are defectively controlled in cancer cells.     

正交试验优选西瓜中番茄红素的提取工艺

[目的]寻求西瓜中番茄红素的最佳提取工艺。[方法]以新鲜成熟西瓜为材料,用不同有机溶剂提取其中的番茄红素,筛选最佳提取剂;在此基础上采用单因素试验研究提取温度、提取时间、料液比、pH值对番茄红素提取效果的影响,然后采用正交试验对该色素的提取工艺进行优化。[结果]乙酸乙酯为西瓜中番茄红素的最佳提取剂;各因素对番茄红素提取效果的影响由大到小依次为：提取温度〉提取时间〉料液比〉pH值。[结论]番茄红素的优化提取工艺为：料液比1∶1,pH值4.0,提取温度30 ℃,提取时间1.5 h。     

Interleukin-2 induction of T-cell G1 progression and c-myb expression

In studies to determine the biochemical mechanisms responsible for cell proliferation, synchronized T cells were used as a model for cellular growth control. By metabolic and morphologic criteria, it was found that activation of the T-cell antigen receptor rendered the cells responsive to interleukin-2 (IL-2), but did not move them through the cell cycle. Instead, IL-2 stimulated G1 progression to S phase, or lymphocyte "blastic transformation." During IL-2-promoted G1 progression, expression of the cellular proto-oncogene c-myb was induced transiently at six to seven times basal levels, maximal levels occurring at the midpoint of G1.     

Effects of Ligustrazine Combined with Cisdichlorodiamine Platinum on Anti-proliferation,Cell Cycle and Apoptosis of Human Gastric Carcinoma SGC-7901 Cell Lines

[Objective] This study aimed to investigate the combination effects of ligustrazine and cis-dichlorodiamine platinum(DDP) on anti-proliferation, cell cycle and apoptosis of SGC-7901 cell lines in vitro. [Method] SGC-7901 cells were treated with ligustrazine and DDP alone or combined for 48 h for morphology assay.Anti-proliferative effects with the same treatment for 24, 48 and 72 h were assayed by MTT method, respectively. Cell cycle distribution and apoptosis assay of treated cells were performed in flow cytometry. Zhengjun Jin's protocol was used to assay the effect of drug combination. [Result] Ligustrazine significantly increased the proliferation inhibition rate of DDP on SGC-7901 cells in combination with DDP, comparing with the effects of ligustrazine or DDP alone, and exhibited synergistic antitumor effect. The combination drug treatment induced cell cycle arrest occurred in S and G2 phase of the cell cycle and increased the apoptosis rate significantly.[Conclusion] Our results indicate that ligustrazine, as a low-toxic and natural herbal component, can significantly increase the anti-proliferative effect and apoptosis rate of antitumor drug DDP on human gastric carcinoma SGC-7901 cells.     

基于三孢布拉霉菌番茄红素的提取工艺研究进展

番茄红素是一种天然的类胡萝卜素,具有很强的抗氧化、抗癌抑癌、提高免疫力、延缓衰老和预防心血管疾病等功效,是目前国际上功能食品成分研究的热点。微生物发酵法生产番茄红素是工业化生产的趋势,其提取方法也日趋成熟,并以连续提取番茄红素最具有工业发展前景。介绍了番茄红素的物化性质及生理功能,综述了几种以三孢布拉霉菌菌丝体为原料的提取方法。     

GRIM-19基因对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用

目的探讨GRIM-19基因对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用,并分析相关机制．方法将构建成功的pGRIM-19重组质粒转染DU145细胞株,应用MTT法检测其对细胞增殖能力的影响,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡率,应用半定量RT-PCR检测GRIM-19及caspase-3 mRNA转录水平．结果流式细胞术结果显示：与对照组比较,pGRIM-19重组质粒明显抑制DU145细胞增殖,并使细胞周期发生改变,多数细胞抑制在G0／G1期,细胞凋亡率增加明显;通过RT—PCR电泳结果证实：pGRIM-19重组质粒明显促进GRIM-19的表达,同时激活caspase-3．结论重组质粒pGRIM-19可明显抑制DU145细胞增殖,并促进其凋亡,其凋亡的发生机制与激活caspase-3有关．     

紫草素等8种植物提取物对体外Hela细胞增殖的影响

将不同浓度的6种新疆地产植物提取物：枸杞多糖、紫草素、番茄红素、辣椒红素、红花红素和红花黄素,以及紫杉醇和香菇多糖加入Hela细胞培养液中,研究其对人Hela细胞增殖的影响。结果表明,在低于250μg/mL浓度时,只有紫杉醇和紫草素对体外Hela细胞的增殖有显著的抑制作用。加入紫杉醇（3.9μg/mL）或紫草素（62.5μg/mL）培养72 h后,细胞全部消失。而枸杞多糖、番茄红素、辣椒红素、红花红素、红花黄素、香菇多糖对Hela细胞的增殖无明显影响。     

白藜芦醇对肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用

[目的]探讨白藜芦醇对人肝癌细胞SMMC-7721体外生长的影响和作用机制。[方法]利用MTT法检测不同剂量组的白藜芦醇对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,通过Hoechst染色和荧光显微镜观察肝癌细胞SMMC-7721细胞核的形态学变化,流式细胞仪测定各浓度组白藜芦醇对肝癌细胞SMMC-7721作用的周期变化与凋亡分析。[结果]白藜芦醇对人体肝癌细胞SMMC-7721的增殖具有抑制作用,且有浓度和时间依赖性;在荧光显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态特征;流式方法测定的结果显示,白藜芦醇阻滞肝癌细胞SMMC-7721于S期。[结论]白藜芦醇对人体肝癌细胞SMMC-7721生长具有抑制作用,使其细胞周期阻滞于S期并诱导其凋亡。     

2, 4-D浓度对胡萝卜悬浮细胞茄红素合成的影响

从茄红素含量，细胞总鲜重及茄红素总产量三方面，研究了培养基中，2，4－D浓度对胡萝卜悬浮培养细胞茄红素合成的影响。结果表明：2，4－D浓度在0．0－5．0mg/L，范围内，随着浓度升高单位鲜重细胞中茄红素含量增加，浓度为5.0mg/L时，含量最高，高于5.0mg/L时，茄红素含量急剧下降，2，4－D浓度在0.0-0.1mg/L范围内，浓度增加有利于细胞鲜重和茄红素总产量的提高，浓度高于0.1mg/L对两者都有抑制作用。     

番茄红素萃取优化工艺条件研究

[目的]考察番茄红素提取率的影响因素,优化其提取工艺。[方法]采用溶剂法萃取番茄红素,通过单因素试验考察了提取溶剂种类和用量、提取温度、提取时间和pH对番茄红素提取率的影响。[结果]以氯仿-丙酮（2∶1）混合液为提取剂提取番茄红素的提取率最高,石油醚为提取剂提取番茄红素的提取率最低。提取温度低于70℃,随着温度升高番茄红素的提取率明显增加,高于70℃时,其提取率趋于恒定。在提取初始阶段,番茄红素提取率随时间延长而增加8,0 min以后其提取率趋于稳定。当pH=6.0时,番茄红素提取率最高。当液料比小于4∶1时,番茄红素提取率随液料比的增大而显著增加;当液料比大于4∶1时,番茄红素的提取率反而下降。[结论]以氯仿-丙酮（2∶1）混合液为提取剂,液料比为4∶1,提取温度为70℃,提取时间为80 min,pH=6.0时,番茄红素的提取效果最佳。     

柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期的影响

目的 探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响.方法 (1)常规培养人肝癌HepG2细胞;(2)噻唑蓝(MTT)实验观察不同质量浓度SSd处理HepG2细胞72 h后以及10mg/L的SSd作用HepG2细胞不同时间对HepG2细胞生长指数的影响;(3)流式细胞术(FCM)检测SSd处理HepG2细胞48h后细胞周期的分布.结果 SSd能明显抑制HepG2细胞的增殖,以10mg/L的SSd作用48h的抑制作用最明显.FCM检测显示SSd作用48h后实验组处于S期的细胞数较对照组明显减少(P<0.01).结论 SSd对人肝癌HepG2细胞的体外增殖具有抑制作用,并能使细胞周期中处于S期的细胞数减少.     

超临界二氧化碳萃取三孢布拉霉中的番茄红素

[目的]介绍三孢布拉霉中番茄红素的萃取新工艺。[方法]采用超临界二氧化碳流体萃取技术萃取三孢布拉霉中的番茄红素,研究萃取时间、萃取温度、萃取压力及二氧化碳流量对萃取率的影响。[结果]过滤后的发酵液用95%乙醇预处理后萃取3 h时番茄红素的萃取率最高;萃取温度为45℃时番茄红素的萃取率最高,之后随温度升高番茄红素的萃取率下降;最佳萃取压力为45 MPa;最佳二氧化碳流量为20 L/h。[结论]超临界二氧化碳萃取三孢布拉霉中番茄红素的最佳工艺为：压力45 MPa,温度45℃,二氧化碳流量20L/h,此条件下番茄红素的得率可达76%。