鸡树突状细胞的间接免疫荧光制片方法比较

【目的】比较分析骨髓源鸡树突状细胞两种间接免疫荧光制片方法（细胞爬片法和细胞滴片法），以进一步提高研究树突状细胞生物学的实验技术和方法。【方法】以鸡胚为试验素材，分离原代细胞，定向诱导分化获得未成熟的树突状细胞，并利用新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）lasota 株激活细胞。监测内源性蛋白 ROBO2（Roundabout）和外源性蛋白 NDV 表达情况，鸡源 NDV 抗体与小鼠源 ROBO2 单克隆抗体混合孵育，结合荧光素二抗进行标记。应用激光共聚焦扫描显微镜（laser scanning confocal microscopy, LSCM）对树突状细胞进行荧光成像并捕抓图像数据，多方位分析对比细胞爬片法和细胞滴片法。【结果】细胞滴片制作过程繁琐且耗时长；细胞爬片则操作简单可缩短实验时间。两种制片方法的 NDV 和 ROBO2 单阳性和阴性分别存在极显著差异，双阳性存在荧光反应性显著差异。【结论】滴片法蛋白免疫反应性更优，适合标记目的蛋白进行亚细胞定位。爬片法始终维持细胞形态学特征和保持蛋白特性，利于两抗体荧光重叠，综合显色性更强。     

小麦叶片原生质体微管骨架的免疫荧光标记及其影响因素

以小麦叶肉细胞原生质体为材料，利用免疫荧光标记并辅以共聚焦激光扫描显微镜检术（Confocal la-ser scanning microscopy,CLSM)观察，对含有叶绿体较多的小麦叶肉细胞微管骨架的标记方法及其影响因素进行了探索。结果表明，来自未完全展开叶片的原生质体中，微管的数量多且骨架的排列方式较复杂，而从完全展开的叶片获得的原生质体中，微管数量很少，实验中发现，外加Ca^2 离子浓度的增加，使微管的稳定性降低，并确定了导致微管解聚的Ca^2 浓度。     

几种植物组织石蜡制片技术的探讨

[目的]近年来植物切片技术出现多种方法,无论是在方法还是步骤的改进,都是以省工省时、节约药剂或减少环境污染以及安全为目的.[方法]以常用的几种植物制片技术为理论依据,对这些方法及各步骤加以讨论,了解各种方法的利弊.[结果]使用蛋白甘油和铬钒明胶2种粘片剂,结果表明后者的效果较好.[结论]这为以往植物制片时脱片问题提供一个可靠的方法.     

旱衣对秧苗生长的影响

以“汕优６３”为材料，用旨切片法观察细胞和光合、蒸腾分析系统地片光合速率与蒸腾速率，研究旱育对 结构、生理的影响，主要结果如下；（１）旱育使秧苗生长变得迟缓。（２）旱育使植株中淀粉含量增高。（３）旱秧栽后发根出蘖快，光合速率高。     

冰冻切片技术在高山红景天细胞学研究中的应用

为了解决利用普通石蜡切片观察植物样品需要进行脱水、浸透、包埋操作且耗时长的问题,以高山红景天为试材,对其根和茎进行冰冻切片,过程简单有效且图版清晰,在1d内即可获得高质量图片。冰冻切片的关键步骤是选择合适的甘油浓度、切片时采用的温度及展片技术。     

荧光抗体在热带作物小粒种咖啡的C3／C4属性鉴别中的应用

用从烟草提纯的1，5－二磷酸核酮糖RuBP羧化酶抗体，并以异硫氰酸盐荧光素（FITC）标记抗体。采用直接免疫荧光法对典型C3植物水稻、C4植物甘蔗和小粒种咖啡等进行了RuBP羧化酶的组织化学定位。结果表明：C3和C4植物叶切片中RuBP羧化酶的分布明显不同；C3植物的特异荧光位于叶肉细胞，C4植物的特异荧光绝大部分位于维管束鞘细胞；小粒种咖啡的特异荧光分布在叶肉细胞。因此认为，小粒种咖啡应属C3植物。     

应用免疫电镜技术检测植物病毒的研究

免疫电镜技术可概括两个方面:一是观察超薄切片材料中病毒粒子的免疫反应技术;二是观察悬浮状态的病毒粒体与抗体在电镜载网膜上直接反应的技术.前者多用各种易识别的电子致密产物标记抗原与抗体,常用的标记物有铁蛋白、胶体金、免疫酶标记的碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等.由于方法复杂,要求严格,在植物病毒检测及鉴定上的应用,报道较少.     

Cep70的细胞定位分析及在微管聚合中的作用研究

[目的]本试验旨在研究Cep70的细胞定位及其在微管聚合中的调节作用。[方法]利用原核表达质粒p MALp2TCep70,在细菌中诱导表达融合蛋白MBP-Cep70。用融合蛋白免疫小鼠,获得特异性的抗Cep70抗体。首先用该抗体对细胞进行免疫荧光显微分析,检测Cep70在细胞内的定位,再利用荧光标记的微管体外组装试剂盒研究Cep70在体外微管聚合中对微管形态的调节,最后利用微管混浊度试验,验证Cep70对微管聚合的功能影响。[结果]通过从细菌中诱导纯化蛋白,获得了大量高纯度的融合蛋白MBP-Cep70。纯化蛋白免疫小鼠后得到了靶向Cep70的抗体。免疫荧光显微分析发现Cep70定位在微管组织中心(MTOC),即中心体上。通过对荧光标记的微管蛋白进行体外组装分析,发现Cep70增加了体外聚合微管的长度。进一步通过微管浑浊度试验,发现Cep70促进了体外微管的聚合。[结论]Cep70在细胞内定位在微管组织中心上,且在体外微管聚合上具有一定促进作用。     

肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌原生质体融合的耐药性遗传标记的选择

为了对肠型点状产气单胞菌58－20－9菌株和鱼害粘球菌G4菌株的融合子进行选择鉴定，应用定性和定量药物敏感性试验，对两种蓖原生质体融合的遗传标记进行了筛选，结果表明，这两种细菌对红霉素和庆大霉素交叉耐药，在此基础上，测定了红霉素和庆大霉素在选择培养基中的适用浓度，筛选出肠型点状气单胞菌58－20－9菌株的遗传标记为Em^r（红霉素抗性），鱼害粘球菌G4菌株的遗传标记Gm^r（庆大霉素抗性）。     

樟子松松针石蜡切片制备

[目的]以樟子松松针为材料,探索一套适合樟子松松针制备石蜡切片的条件。[方法]在传统植物石蜡切片技术的基础上,结合松针的结构特点,对固定、脱水、粘片、染色等环节进行了系列摸索。[结果]FAA固定剂配比中采用70%乙醇;粘片时材料置于40℃水浴锅中展开,用防脱载玻片捞取,置35℃烘箱24 h;松针切8μm厚度,染色条件为伊红5 min,苏木精1 min。[结论]获得的条件可强化固定和脱水效果,粘片操作简便,不易脱片,染色效果较好。     

PEG胁迫下水稻根外皮层厚壁细胞的解剖学研究

通过PEG模拟干旱胁迫,采用Spurr树脂半薄切片结合显微观察的方法,比较水稻和旱稻根外皮层边缘厚壁细胞的形态差异,研究根外皮层边缘厚壁细胞加厚的规律.结果表明: 随PEG浓度的升高,水稻(扬稻6号)根外皮层边缘厚壁细胞的胞壁宽度明显增加;旱稻(中旱3号)对低浓度PEG胁迫不太敏感,当PEG浓度达50 g·L-1以上时,根外层厚壁细胞表现出明显加厚的趋势,且随PEG胁迫时间延长,厚壁细胞栓质化程度变高.推测水稻根系在干旱胁迫条件下具有一定的缓冲能力,外皮层边缘厚壁细胞在根外层导水率方面发挥显著的质外体屏障作用,可有效地防止水分丧失,保护根组织免受干旱的伤害.     

大断面欧洲赤松的真空变定—高频干燥

对大断面欧洲赤松(Pinus sylvestris)进行真空变定/真空高频干燥及高温变定/高温干燥,对比研究木材表面变定对干燥材含水率分布、颜色变化及开裂的影响。结果表明:与高温变定/高温干燥相比,真空变定/真空高频干燥后木材含水率在长度及厚度方向分布均匀,但厚度方向上与高温干燥相反,呈现心层低、表层高的趋势。总处理时间基本一致,但高频真空干燥时间比高温干燥少9 h,干燥速度更快。高温干燥的L*、a*、b*及ΔE*的变化幅度分别是高频真空干燥的2.9、1.8、3.0及2.9倍,高频真空干燥后木材变色小,干燥后表面开裂宽度及长度比均小于高温干燥。干燥后木材含水率及开裂符合GB/T 6491—2012Ⅲ级室外建筑用材标准,对大断面木材做真空变定/真空高频干燥是一种更为优良的干燥方法。     

温室白粉虱抗药性成虫粘胶皿测定法

将不同浓度的杀虫剂丙酮液与粘蝇胶按１：１（Ｖ／Ｗ）混合涂于直径４５ｍｍ培养皿的皿底上,粘着温室白粉虱成虫,测定其抗药性程度。结果表明,对照死亡率一般不超过５％,每种药剂经２－３次独立试验证明,结果稳定,溴氰菊酯、氰戊菊酯、乐果、氧乐果和马拉硫磷对番茄上白粉虱的毒力（ＬＣ５０）分别为２３．７２６,１９７．４３９,０．８９５和０．４４６ｍｇ．ｇ＾－１胶,与喷雾法进行了比较,毒性比值,溴氰菊酯、氰戊菊酯     

氢氧化钠溶液预处理提高胶结强度机理的研究

分析和讨论了椴木单板经氢氧化钠溶液预处理后其胶合板的胶结强度提高的机理。本试验采用了浸液高度法测定了经氢氧化钠溶液预处理或未经预处理的椴木单板表面润湿性;利用研究用万能显微镜观察了预处理前后椴木导管分子和木纤维细胞壁的形态变化;借助于化学分析光电子能谱仪(ESCA)、红外和傅里叶变换红外光谱仪(IR和FTIR)探查了单板表面化学结构的变化。结果表明,经氢氧化钠溶液预处理后椴木单板表面的润湿性提高;木材细胞壁厚度明显增大;单板表面的疏水性抽提物迁移,氧碳比率增加。这些表面物理和表面化学性质的变化,均有利于改善胶合环境和提高界面胶结强度。     

不同树种薄木对API胶粘剂贴面性能的影响

[目的]研究API胶对不同薄木的粘贴强度。[方法]用API胶分别对基材为16 mm厚的刨花板及薄木厚度为0.5 mm的椴木、水曲柳、新西兰松、胡桃木进行表面胶合、耐水蒸气、耐高温及装饰板的浸渍剥离试验,研究树种及其密度、湿润性和含水率对薄木胶接性能的影响。[结果]表面胶合试验结果表明,椴木的胶接性能最好,胶合强度达1.21 KN,胡桃木的胶接性能最差,胶合强度仅为0.63KN;耐水蒸气试验中,胡桃木被破坏最严重,水曲柳被破坏较轻;浸渍剥离试验中,水曲柳的剥离率最大,剥离长度总和达47 mm,新西兰松的剥离率最小。[结论]胡桃木的综合胶接性能最差。     

隔条导向装置的研制

介绍了隔条导向装置研制的必要性、设计过程、生产试验及结果．生产试验证明：该装置结构简单,性能可靠,减少了顺弯,缩短了干燥周期．     

多种高分子材料制备氟苯尼考固体分散体及其对比分析

利用高分子材料制备固体分散体是当前最有效最便捷的改变非水溶性药物的水溶解度和生物利用度的方法之一。为探究临床常见药用高分子材料载体的优越性和差异性,利用聚乙二醇(PEG)6000、PEG4000、聚维酮(PVP)k30、PVPk15、泊洛沙姆188等高分子材料为载体,采用熔融法、溶剂法和溶剂熔融法制备氟苯尼考固体分散体,溶出速率法验证固体分散体,比较氟为尼考原料、物理混合物及固体分散体的溶解度和累积溶出率。结果表明：几种固体分散体均可提高氟苯尼考药物的溶解度和体外溶出速率,其增溶效果为PEG6000>PEG4000>PVPk30>PVPk15>188,氟苯尼考与PEG6000配比在1∶4时溶解度和体外溶出速率均最优,是最佳配比。5种不同高分子材料制备氟苯尼考固体分散体,制备方法简便易操作、质量可控,能提高药物的溶解度,其中PEG6000增溶效果最优,可广泛应用。     

甘蔗茎尖细胞有丝分裂过程中微管骨架的变化（英文）

In order to understand the microtubule change of monocotyls stem-tip during mitosis,the arrangement,transformation of microtubule array and its relation with chromosome movement during mitosis were studied with freezing microtome,indirect immunofluorescence,DAPI staining and fluorescence microscopy.The results showed that nucleolus was intact when the cortical microtubules formed;cortical microtubules were changed into phramoplast microtubule bands at mitosis prophase.When phramoplast microtubule came into being,nuclear membrane was ruptured and chromosome was arranged at the position of cell plate;subsequently,phramoplast microtubules were changed into phragmoplast microtubules,phramoplast microtubules were shortening and microtubules on the sides of cell plate were increasing gradually,during this course sister chromatid was separated by microtubules at cell plate and tract to the two poles,forming phragmoplast microtubules.Then the nucleolus of two daughter cells formed and separated in the end with the increase of cells numbers.Therefore,cell division orientation could be judged from the arrangement of cell microtubules in different periods in order to understand its growth status.     

水分胁迫对粳型巨胚稻种子萌发和成苗的影响

为探索提高粳型巨胚稻种子发芽率方法,给粳型巨胚稻育秧技术的改进提供理论参考,采用PEG-6000对粳型巨胚稻西巨胚1号种子进行不同方式浸种.结果表明,采用清水引发PEG液培养的水分胁迫处理方法降低了种子的活力,不利于种子萌发,随着PEG浓度的升高,发芽率降低,开始发芽的时间延后,群体发芽所需的时间延长;采用PEG引发清水培养的水分胁迫处理方法在PEG质量浓度15％以下时对种子的萌发有一定的促进作用,大干15％反起抑制作用.