我国试制Rose Bengal平板抗原用于绵羊布氏杆菌病诊断结果的分析

本文报道以布氏杆菌虎红平板凝集试验与标准布氏杆菌玻板凝集试验、试管凝集试验和补体结合试验对照,对1097份绵羊血清进行布氏杆菌病阳性率和符合率的观察。试验证明:虎红平板试验的阳性率与玻板和补反试验的阳性率相近,而与试管凝集试验的阳性率差异较大.同时与对照试验的阳性符合率均为低下.     

贵州省家畜布氏杆菌病血清学检测

为了解贵州省各地区布氏杆菌病流行情况,采用试管凝集试验对部分地区牛血清(706份)、羊血清(180份)、猪血清(720份)共计1606份进行了试验检测.结果表明:牛阳性血清7份,阳性率0.99%(7/706);羊阳性血清2份,阳性率1.11%(2/180);猪阳性血清3份,阳性率0.42%(3/720).贵州部分地区存在布氏杆菌病感染的可能.     

石林县山羊布氏杆菌病血清学检测

[目的]了解山羊布氏杆菌病在石林县的流行状况。[方法]通过虎红平板凝集试验和试管凝集试验于2006～2011年对石林县山羊血清进行布氏杆菌血清学检测。[结果]2006～2007年石林县山羊布氏杆菌阳性检出率较高,分别为3.41%和3.51%。2009～2011年石林县山羊布氏杆菌阳性检出率分别为0.50%、0.28%和0.38%。[结论]石林县属于山羊布病控制区。     

奶牛乳清和血清中布氏杆菌抗体的检测

为探索动物布氏杆菌病自然感染与人工免疫的鉴别诊断方法,从免疫奶牛群采集血清和鲜乳,以半胱氨酸或2-巯基乙醇处理血清样本,以20%的胃蛋白酶消化分离乳清样本,用试管凝集试验检测布氏杆菌抗体,结果表明:血清和乳清样本的布氏杆菌抗体水平存在明显差异,血清抗体阳性率高迭61.7%(37/60),而乳清抗体阳性率仅为10.0%(6/60);乳清中布氏杆菌抗体效价比血清的低1～3个滴度.     

昌吉地区天山马鹿布氏杆菌病血清学调查

为了调查某鹿场天山马鹿布氏杆菌病的感染情况,应用平板凝集试验和试管凝集试验对该鹿场布氏杆菌病的感染情况进行调查,结果表明该鹿场无布氏杆菌病。     

牛布鲁氏菌病的防制及探讨

牛布鲁氏菌病通常是由流产布氏杆菌引起的,少数由马耳他布氏杆菌引起,偶尔由猪种布氏杆菌引起。其症状主要是流产,从子宫排泄物和乳汁中排出病原微生物,本病的诊断方法主要是通过实验室虎红平板凝集试验,试管试验进行确诊,也可从流产物、乳腺分泌物成从死胎所取组织中分离到布氏杆菌以确诊。本病是人畜共患病,一经发生,将给畜牧业和人类带来严重后果,因而加强对本病的防制非常重要。     

奶牛布鲁氏菌病试管凝集试验与补体结合实验结果差异的分析

布鲁氏菌病(brucellosis),是由布鲁氏菌属的细菌引起的以感染家畜为主的人畜共患传染病,是二类动物疫病。虎红平板凝集试验(RBPT)及试管凝集试验(SAT)等常规血清学方法为人畜布鲁氏菌病血清学诊断常用方法。试管凝集试验和补体结合试验是2种不同的试验方法,所判定的结果不同,如果把补体结合试验做为奶牛布病监测的最终判定结果,将有35.9%试管凝集试验阳性奶牛被漏判为阴性。在布鲁氏菌病防治工作中,应采取试管凝集试验和补体结合试验相结合的原则。     

新疆天山马鹿布氏杆菌病流行病学调查

采用平板凝集试验、试管凝集试验对采自新疆3个集约化养殖鹿场、1个散养鹿群的410份血清样本进行布氏杆菌特异性抗体检测;采用分子生物学方法,根据Gen Bank公布的布氏杆菌外膜蛋白Omp25c的基因序列设计特异性引物,对疑似布氏杆菌阳性的10份羊水病料进行PCR扩增,并将扩增产物克隆到p GEM-T Easy Vector进行测序。结果表明,血清稀释比例为1∶25时,平板凝集试验、试管凝集试验的抗体阳性率分别为15.1%、14.6%,4份羊水样本的PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上均观察到预期149 bp大小的扩增条带,BLAST比对分析显示该扩增序列与布氏杆菌基因组的核苷酸序列同源性为100%,从而判定新疆集约化养殖的天山马鹿存在布氏杆菌病的感染。     

牛布鲁氏菌病快速检测卡的应用

为鉴定牛布鲁氏菌病快速检测卡的准确性。采用真空采血管对未免疫过布鲁氏菌病疫苗的动物采血(血清和抗凝血),采用快速检测卡和虎红平板凝集实验方法对分离的血清和全血进行检测。结果表明,在有限的样本量里,虎红平板凝集实验和快速检测卡检测结果完全一致。鉴定结果:在养殖场引种时,应经过布鲁氏菌病快速检测卡进行检测后再进行引种。     

某农林局家畜布氏杆菌病的监测与净化

为诊断某农林局家畜布氏杆菌病的感染情况及净化,采集各种家畜血样701份（其中：巴音布鲁克羊550份、黄牛79份、天山马鹿72份）,使用布鲁氏菌病虎红平板凝集试验,检测布病的感染情况：家畜阳性率为7.85%（55/701）,其中巴音布鲁克羊感染率7.81%（43/550）、黄牛1.27%（1/79）、天山马鹿15.28%（11/72）。监测结果显示该农林局家畜布病感染普遍,需要采取防控和净化的措施。     

用PPA-ELISA等5种方法检测布病抗体敏感性

以布病S_2苗免疫猪,7,21和35天采血,血清457份。以4种常规方法检测,RBPT和SAT两法的检出率高于其他方法。血清置-80℃冰箱冻存2个月后,取84份,用PPA-ELISA及4种常规方法检测,SAT的阳性率为90.5％,高于其他方法,差异显著(P<0.05)。PPA-ELISA和RBPT分别居第2位(87.2％)和第3位(85.7％)。PAT和CFT阳性率最低。检出抗体滴度比较,SAT高于PPA-ELISA,而后者又高于PAT。SAT、PPA-ELISA和RBPT三者之间符合率均较高(88％)。PPA,ELISA检测猪布病免疫抗体的敏感性低于SAT而高于其他方法。本文还探讨了5种方法的优缺点。     

犬猫布病的流行病学调查

为了解北京地区宠物布鲁氏杆菌病的流行情况。2011年1月-8月,在北京市27家大中型动物医院随机采取犬、猫血清样本600份,采取虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)相结合的方法进行布病牛羊型和犬型的血清学检测,结果表明,现北京部分地区已存在宠物犬猫血清阳性样本。     

牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的研制及初步评价

为了建立一种检测牛日本血吸虫病的快速诊断技术,试验以乳胶微球标记的兔抗牛IgG抗体作为免疫探针,以血吸虫可溶性抗原为检测线,羊抗兔IgG为质控线,研制了牛日本血吸虫病抗体检测试纸条。对该试纸条进行了效价、敏感性、特异性、非特异性、保存期、批内批间可重复性及符合率等各项试验,结果表明试纸条的效价为1∶2;对于实验感染日本血吸虫28 d和 35～56 d的病牛血清,试纸条的敏感性分别为20%（2/10—检出阳性份数/检测数）和100%（30/30）;用于检测健康牛血清的特异性为100%（20/20—检出阴性份数/检测数）,检测东毕吸虫、肝片吸虫、锥虫病牛血清,未见交叉反应现象;对于粪孵确诊为血吸虫病阴、阳性的牛血清,试纸条与粪孵法的阴阳性符合率均为100%;与IHA阴阳性符合率也均为100%;试纸条批内批间可重复性好,2～8℃保存的试纸条有效期达15个月。用试纸条检测实验感染血吸虫牛治疗前后体内不同时期血清抗体的水平,发现牛感染血吸虫后第5周的血清均可检测出血吸虫抗体,在治疗后第16～24周血吸虫抗体消失。     

云南省猪布鲁氏杆菌病血清学调查

采用虎红平板凝集试验与试管凝集试验相结合的方法,对云南省部分养殖场和屠宰厂采集的猪血清样本进行布病血清学检测,检测血清样本302份。经虎红平板凝集试验筛选,共检出阳性血清样本30例,检出率为9.934%。阳性者通过试管凝集试验证实,最终检出阳性血清样本14例,检出率为4.636%。其中屠宰厂检出率为6.091%,养殖场检出率为1.905%,屠宰场的检出率高于养殖场。     

牛DGAT1基因K232A取代对3个品种奶牛群体部分经济性状的影响

利用单链构向多态性方法检测了牛DGAT1基因第8外元AA→GC碱基突变,分析了该突变在三河牛、中国荷斯坦奶牛和中国西门塔尔奶牛中等位基因的分布频率,以及该突变对这3个品种奶牛群体产奶量、乳脂和乳蛋白含量的影响,并分析了该突变在鲁西牛、晋南牛、秦川牛和南阳牛中等位基因分布频率。结果表明,编码赖氨酸的等位基因K在三河牛、中国荷斯坦牛和中国西门塔尔牛中的分布频率分别为0.17,0.33和0.04,在鲁西牛、晋南牛、秦川牛和南阳牛4个中国地方品种中的分布频率分别为0.72,0.39,0.46和0.83;K232A取代与三河牛的平均乳脂率相关(P=0.017),KK和KA基因型个体的平均乳脂率分别较AA基因型个体高0.80%和0.41%。     

银白杨×白榆亲子核型分析

对银白杨（Populus alba）×［白榆（Ulmus pumila)+新疆杨（P.alba var.pyramidalis）失活花粉］的亲本和子代进行了核型分析。结果表明:银白杨,2n=38=1M+30m(1SAT)+4sm+1st+2t;银榆杨（P.× alba L.‘yinyu’）1号,2n=38=1M+30m(1SAT)+4sm+1st+2t; 银榆杨2号,2n=38=1M+30m(2SAT)+4sm+1st+2t。白榆的染色体2n=28。银白杨和银榆杨的染色体数目相同,核型差异很小。随体的数量可能与银榆杨和银白杨表型不同有关。推测,银白杨×白榆的杂种胚在发育时先形成了以银白杨染色体为主的单倍体,后经染色体自然加倍形成二倍体银榆杨。     

新疆牛巴贝斯虫病的流行病学调查

[目的]2006～2008年对全疆14个地州的牛巴贝斯虫病进行流行病学调查.[方法]使用已建立的牛巴贝斯虫病间接ELISA检测方法,以纯化的重组蛋白GST - MSA -2作为抗原.[结果](1)新疆存在着牛巴贝斯虫病.在2006年采集的278份牛血清样品中,阳性血清7份,感染率为2.52;.在2007年的532份牛血清样品中检出阳性血清32份,感染率为3.13;.在2008年的530份牛血清中检出阳性血清43份,感染率为5.28;.(2)2008年在地方流行性疫病区牛巴贝斯虫感染率高达28;.(3)牛巴贝斯虫病所在的地州由2006年的5个扩大到2008年的11个.[结论]新疆牛巴贝斯虫病的感染率逐年上升,疫区面积不断扩大,流行区内感染率激增,牛巴贝斯虫病的防治不容忽视.这是新疆首次利用血清学方法对全疆牛巴贝斯虫病进行大规模的流行病学调查.     

牛冠状病毒核衣壳蛋白原核表达及鉴定

【目的】 诊断致犊牛腹泻冠状病毒。【方法】采集石河子、沙湾、奎屯等10个规模化奶牛场141份腹泻犊牛粪样,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行冠状病毒检测,PCR方法进行核酸复检。同时根据GenBank登录的牛冠状病毒 N基因序列,设计特异性引物,对Mebus分离株N基因进行扩增,克隆到PMD 19-T载体后,将测序正确的基因片段经EcoRI和HindIII双酶切后连接到PET-28a和PET-32a载体中,构建重组表达载体PET-28a-N和PET-32a-N,进行测序,亚克隆入BL21(DE₃)表达载体,用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。【结果】所采集141份腹泻犊牛粪便中,用ELISA检测阳性率70.21%;再用RT-PCR检测出阳性率为61.7%同时,克隆了牛冠状病毒N基因,片段大小为1 400 bp,双酶切鉴定目的条带正确,测序结果与标准序列的进行比对同源性达到98.22%,通过SDS-PAGE分析证实表达的重组蛋白PET-28a-N-DE₃相对分子质量为54KD;重组蛋白BCV-32a-N-DE₃相对分子质量为70KD,Western blot分析表明该重组蛋白BCV-32a-N-DE₃和BCV-28a-N-DE₃和可以与牛冠状病毒阳性血清发生特异性反应。【结论】犊牛冠状病毒是导致石河子、沙湾、奎屯等10个规模化奶牛场和部分肉牛场犊牛腹泻的主要病原;ELISA方法和RT-PCR方法结合应用检测犊牛冠状病毒效果具有参考意义。获得的牛冠状病毒N蛋白具有很好的免疫反应性,为牛冠状病毒诊断试剂研发奠定基础。     

中国3个牛种cytb基因多态性及其系统发育研究

基于mtDNA cyt b基因全长序列,对中国黄牛、牦牛和水牛的遗传多态性和系统发育关系进行了分析。结果表明,中国黄牛、牦牛和水牛cyt b基因序列中碱基A和T的含量均比较高,A T的平均含量分别为56.6%,58.2%和56.0%。黄牛在cyt b基因全长序列具有较丰富的核苷酸多样性(Pi=0.016 84),水牛的核苷酸多样性相对贫乏(Pi=0.003 51),牦牛的核苷酸多样性介于二者之间(Pi=0.012 28)。中国黄牛与牦牛和欧洲野牛之间的亲缘关系相对较近,而与水牛间的亲缘关系则相对较远,黄牛有普通牛和瘤牛2个母系起源;中国牦牛和斑腾牛以及羯牛的亲缘关系相对较近;中国水牛和沼泽型水牛具有较近的亲缘关系,也可能有2个或者2个以上的母系起源。     

牛瘤胃臌胀诊治新法初报

应用澄清石灰水、加入已炸开的花生油（菜油）、烟丝、大蒜、食用醋等药品结合瘤胃放气法治疗瘤胃臌胀,通过几年的临床实验,在东兴、思思镇发现及治疗瘤胃臌胀病45头,治愈42头,治愈率达93．3％,表明该法是个简单、快速、高效的治疗方法。