绵羊染色体Ag-NORs分布位置初探

以凉山半细毛羊、山谷型藏绵羊为研究对象,以微量全血培养法制备染色体标本,采用Howell和Black(1980)的方法获得染色体Ag-NORs带,并对其进行比较。结果表明:在存在分歧的4、6号染色体间,依据染色体相对长度对染色体进行排序,将染色体NOR位点定位于4号染色体上;两品种羊NORs位点除分布在已报道的1p、2q、3q和4、25号染色体末端外,还分布在1、2号中着丝粒染色体的染色体臂上以及另外1或3条端着丝粒染色体臂上;并就Ag- NORs数目的多态性与生产性能相关性进行了探讨。     

3个新疆地方品种绵羊体重与体尺性能的比较研究

为了探讨策勒黑羊、阿勒泰羊、柯尔克孜羊3个新疆地方品种绵羊体重与体尺的相关关系,建立体重与体尺指标之间的最优回归方程,为将来的绵羊品种选育提供可靠的数据支持与理论参考依据。试验随机选择并测量周岁策勒黑羊、阿勒泰羊与柯尔克孜羊的体重(Y)、体高(X1)、体长(X2)、胸围(X3)、管围(X4),运用数据分析软件SPSS19.0分别对3个品种羊的体重与体尺进行分析。结果表明,3个不同品种绵羊的体重与体高(X1)、体长(X2)、胸围(X3)、管围(X4)均呈极显著正相关(P<0.01),最优线性回归方程分别为Y=0.641X3+0.233X2+0.846X4-30.604(R2=0.771,P<0.01),Y=0.450X3+0.401X2+1.262X4-25.087(R2=0.799,P<0.01),Y=0.416X1+0.303X3+0.659X4+0.155X2-27.785(R2=0.870,P<0.01)。     

4个绵羊品种PTGS2基因部分片段的多态性分析

设计2对引物,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP技术检测前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因在小尾寒羊、湖羊、多赛特羊、萨福克羊4个绵羊品种304个个体中的单核苷酸多态性.结果表明,PTGS2基因引物1扩增片段在4个绵羊品种中不存在PCR-SSCP多态性.引物2扩增片段存在PCR-RFLP多态性,在4个绵羊品种中都检测到2种基因型(AA、AB),都没有检测到BB基因型.A等位基因频率明显高于B等位基因频率.小尾寒羊与多赛特羊、萨福克羊、湖羊之间PTGS2基因型分布差异显著(P＜0.05),其余品种之间PTGS2基因型分布差异都不显著(P＞0.05).     

7个绵羊品种PGR基因第4外显子多态性分析

为探索绵羊PGR基因第4外显子的多态性,采用PCR-SSCP技术,对‘德克塞尔羊’、‘无角陶赛特羊’、‘小尾寒羊’、‘蒙古羊’、‘德国美利奴羊’、‘滩羊’和‘藏羊’7个绵羊品种共计414个个体的PGR基因第4外显子进行了遗传多态性检测分析.结果表明:绵羊PGR基因第4外显子存在多态性,发现了AA、BB和AB 3种基因型.不同基因型PCR产物测序结果显示,该多态的产生是由于PGR基因第4外显子扩增序列的第227bp处发生了C→T的碱基突变.基因型和基因频率统计结果表明,‘小尾寒羊’同时存在AA、BB和AB 3种基因型,‘无角陶赛特羊’和‘德国美利奴羊’只存在AA基因型,而其他品种存在AA和AB 2种基因型;在所检测的品种中,AA基因型为优势基因型,A等位基因均为优势等位基因.χ2适合性检验结果表明,7个绵羊品种在该基因座位都处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05).不同基因型在7个绵羊品种间分布的独立性检验结果表明,在该位点,‘无角陶赛特羊’与‘藏羊’之间表现为差异极显著(P<0.01);‘无角陶赛特羊’与‘蒙古羊’和‘滩羊’之间,‘德国美利奴羊’与‘滩羊’和‘藏羊’之间均表现为差异显著(P<0.05);‘无角陶赛特羊’与‘德国美利奴羊’只发现同一种基因型,不存在差异;其他绵羊品种之间均表现为差异不显著(P>0.05).多态信息含量(PIC)分析结果表明,‘无角陶赛特羊’和‘德国美利奴羊’在该位点没有多态,其他属低度多态.     

河南绵羊品种种群被毛品质的研究

利用SPSS10.0软件对小尾寒羊、大尾寒羊、豫西脂尾羊的羊毛物理特性进行了分析.结果表明:小尾寒羊、大尾寒羊、豫西脂尾羊的无髓毛质量比分别为(74.88±12.12)%、(85.05±13.93)%和(64.32±8.87)%,差异显著(P<0.05).3个绵羊品种的无髓毛根数比分别为(82.36±2.97)%、(8...     

六个绵羊品种遗传距离的微卫星分析

利用30个微卫星DNA标记对乌珠穆沁羊、苏尼特羊、内蒙古细毛羊、宁夏滩羊、小尾寒羊和无角多赛特羊共237个体进行遗传距离分析,结果表明：（1）苏尼特羊和乌珠穆沁羊遗传距离为0．0833最小,无角多赛特羊与其它5个绵羊品种的遗传距离在1．0146-1．2876之间,滩羊、内蒙古细毛羊和小尾寒羊彼此之问及与乌珠穆沁羊和苏尼特羊的遗传距离为0．3623-0．6020;（2）聚类图将6个绵羊品种划分为4个分支,即苏尼特羊和乌珠穆沁羊,内蒙古细毛羊和小尾寒羊,宁夏滩羊,无角多赛特羊。（3）6个绵羊品种间遗传距离和聚类图与品种的历史演化和资料记载基本符合,为绵羊种质资源的利用和保护提供了科学依据。     

5个绵羊品种CAST基因多态性及其与肉品质的相关性

为从分子水平研究甘肃境内典型养殖模式下甘肃高山细毛羊、小尾寒羊、藏羊、蒙古羊和滩羊5个绵羊品种的CAST基因多态性与肉品质的相关性,探讨以CAST为候选基因,提高绵羊肉品质的可能性。采用PCR SSCP技术对5个绵羊品种的CAST基因内含子3多态性进行检测,并就CAST基因多态性与9月龄肉品质进行相关性分析。根据比对结果发现,与等位基因A相比,等位基因B发现G62T以及C110T突变,等位基因C发现C92T突变,形成AA、AB、BB和AC 4种基因型;经检验表明,5个绵羊品种均处于非 Hardy Weinberg 平衡状态;群体遗传多态性分析表明,5个绵羊品种的多态信息含量均为中度多态;关联分析表明,5个绵羊品种 CAST基因变异位点的4个基因型间失水率AC基因型显著高于其他基因型（P<005）,对于剪切力AC基因型显著低于其他3种基因型（P<005）;不同绵羊品种间基因型分析表明,对于5个绵羊品种AC基因型的失水率显著高于其他3种基因型,除蒙古羊外,AC基因型的剪切力显著低于其他基因型;变异对眼肌面积没有显著性影响。这些关联说明CAST 基因可作为候选基因用于绵羊产肉性能和肉品质的分子标记辅助选择。     

4个绵羊品种的遗传多样性分析

采用5个微卫星位点对4个绵羊品种(小尾寒羊、多浪羊、新疆细毛羊、阿勒泰羊)的遗传多样性进行了分析。结果表明,5个微卫星位点在4个绵羊品种中的平均等位基因数分别为7,6.4,6和6个;多态信息含量分别为0.774 7,0.761 6,0.720 3和0.703 2;有效等位基因数分别为4.978 5,4.835 6,4.182 2和3.935 0;杂合度分别为0.814 4,0.806 2,0.719 7和0.716 7;信息熵分别为1.701 1,1.699 3,1.554 1和1.509 8。     

国内主要绵羊品种基于染色体核型进化距离的聚类分析

收集国内10个主要绵羊品种包括藏系绵羊、乌珠穆沁羊、青海细毛羊、河南小尾寒羊、蒙古羊、东北细毛羊、同羊、兰州大尾羊、湖羊、滩羊(贺兰山及盐池)等的染色体核型数据,进行核型进化距离的计算,并采用最短距离聚类分析法进行聚类分析.结果表明:10个绵羊品种可分为2大类群,即蒙古羊系和藏羊系,两大类群在最短距离为1.131 2处相聚.归人蒙古羊系的有8个品种.蒙古羊与兰州大尾羊在最短距离为0.095 2处首先聚为一类;贺兰山滩羊、盐池滩羊、河南小尾寒羊在最短距离为0.120 0处相聚;湖羊在最短距离为0.242 4处与前述品种相聚而成为一小类,东北细毛羊、同羊、乌珠穆沁羊分别在最短距离为0.339 8、0.339 8、0.568 7处与前述品种聚为一大类.归入藏羊系的有青海细毛羊和藏系绵羊,青海细毛羊在最短距离为0.967 5处与藏系绵羊聚为一大类.所得结果与品种起源进化、产地分布大致相同,为国内主要绵羊品种的分类和演化提供了细胞学依据.     

绵羊抑制素A基因外显子1多态性及其与高繁殖力关系的研究

采用PCR-SSCP技术检测抑制素A（inhibin A,INHA）基因外显子1在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊和湖羊）和低繁殖力绵羊品种（多赛特羊、特克塞尔羊和德国肉用美利奴羊）中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明,在所有5个绵羊品种中都存在2种基因型（AA和AB）。高繁殖力的小尾寒羊和湖羊等位基因B的频率分别为0.21和 0.47,低繁殖力的多赛特、特克塞尔和德国肉用美利奴3个绵羊品种B等位基因频率分别为0.07、0.10和0.02。测序表明AB型和AA型相比在INHA基因外显子1中第877位发生T→C的碱基突变。独立性检验表明高繁殖力绵羊品种与低繁殖力绵羊品种之间INHA基因型分布差异显著（P<0.05）。AB型小尾寒羊平均产羔数比AA型多0.57只（P<0.01）。     

蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊随机扩增多态DNA分析

从 2 4个随机引物中筛选出 5个引物 ,对蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊 3个绵羊品种共计 89个个体进行了随机扩增多态 DNA分析 ,根据扩增片段计算了蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊扩增 DNA指纹条带的平均带纹数分别为 5 .32 ,5 .2 8和 5 .78;平均带纹相似率分别为 0 .5 9,0 .6 0和 0 .6 2 ;平均杂合度分别为 0 .75 ,0 .78和 0 .77。用 Nei氏片段共享度公式计算了 3个群体的遗传距离 ,构建了其关系图 ,聚类分析结果表明 ,蒙古羊与兰州大尾羊的遗传距离最小 (0 .0 34) ,彼此亲缘关系较近。相对而言 ,兰州大尾羊与哈萨克羊的遗传距离最大(0 .10 4 ) ,彼此亲缘关系较远。     

五个地方绵羊品种FAS基因3′-UTR区单核苷酸多态性研究#br#

【目的】探究脂肪酸合成酶（FAS）基因3′端非翻译区（3′-UTR）在绵羊地方品种中的遗传多态性,为进一步揭示地方绵羊品种间遗传分化、开展肉质性状的关联分析和表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-SSCP和DNA测序技术对兰州大尾羊（38只）、滩羊（58只）、甘加羊（40只）、欧拉羊（30只）和乔科羊（39只）五个地方绵羊品种205只个体的脂肪酸合成酶（FAS）基因3′-UTR进行单核苷酸多态性（SNPs）检测和遗传多态性分析。【结果】在这五个地方绵羊品种的FAS基因3′-UTR区中,有951位点和1 005位点2个多态位点;两位点分别存在AA、Aa、aa和EE、Ee、ee各三种基因型,而aa和ee基因型未检测到;AA和EE基因型频率高于Aa和Ee基因型频率,基因型AA和EE为优势基因型;A和E两个等位基因频率高于a和e等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明,这5个地方绵羊品种在951位点和1 005位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。独立性检验表明：在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著（0.01＜P＜0.05）;滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著（P＜0.01）;欧拉羊、甘加羊和乔科羊,甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著（P＞0.05）;在1 005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著（P＞0.05）。测序结果表明,951位点在FAS基因在其转录产物mRNA的 951位所对应处有一处C→T突变;1 005位点在FAS基因在其转录产物mRNA的1 005位所对应处有一处A→G突变。FAS基因mRNA二级结构预测结果显示：951位点的突变能导致其二级结构发生了明显的改变,而1 005突变不会改变其二级结构。【结论】五个地方绵羊品种在FAS基因3′-UTR区有951位点（C→T）和1 005位点（A→G）两个SNPs,2位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;基因型频率分布的独立性检验结果表明,在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著（0.01＜P＜0.05）;滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著（P＜0.01）;欧拉羊与甘加羊和乔科羊、甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著（P＞0.05）;在1 005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著（P＞0.05）。     

猪的Ag-NORs与其肥育性能相关研究

对猪的Ag—NOR_s与其肥育性能相关分析结果表明,二者间呈显著负相关。猪品种的Ag—NOR_s均数、8Ag—NOR_s~+平均染色体型频率与日增重和瘦肉率间的相关系数分别为-0.5968(P<0.01)和一0.6235(P<0.005);-0.6550(P<0.005)和-0.7036(P<0.001);个体的Ag—NOR_s均数、8Ag—NOR_s~+染色体型频率与日增重的相关亦高达-0.6591(P<0.05)和-0.4984(0.1>P>0.05)。Ag—NOR_s有可能作为一项选种指标,用于猪肥育性能的选择。     

河西地区规模化羊场全舍饲条件下绵羊、山羊饲养繁育的研究

在规模化羊场舍饲条件下,对９个品系的绵羊、山羊的饲养繁育进行了初步的观察和研究,结果表明：全舍饲条件下饲养管理条件得到了很大的改善;夏洛来羊在所研究品种中初生重最大达（４５６±０３０）ｋｇ;３月龄体重达（２２３４±１２５）ｋｇ;从初生到３月龄的生长速度,无角陶赛特表现最快。研究组中山羊出生重最重的是安哥拉山羊,为（２３７±０２５）ｋｇ;对胸围、臀围等体尺进行的测量表明,其中夏洛来为最大,中卫山羊在山羊组中最大;血红蛋白的常规指标测定结果为,蒙古羊和中卫山羊基本表现正常,其他品种则表现较低,白细胞数量在所有品种中表现正常;采食行为中采食时间夏洛来、无角陶塞特、萨福克羊较其他品种短而反刍时间则较长;性成熟时间山羊晚于绵羊,舍饲绵羊、山羊在生产质量方面明显优于放牧羊。     

五个地方绵羊品种FAS基因3′-UTR区单核苷酸多态性研究

【目的】探究脂肪酸合成酶(FAS)基因3′端非翻译区(3′-UTR)在绵羊地方品种中的遗传多态性,为进一步揭示地方绵羊品种间遗传分化、开展肉质性状的关联分析和表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-SSCP和DNA测序技术对兰州大尾羊(38只)、滩羊(58只)、甘加羊(40只)、欧拉羊(30只)和乔科羊(39只)五个地方绵羊品种205只个体的脂肪酸合成酶(FAS)基因3′-UTR进行单核苷酸多态性(SNPs)检测和遗传多态性分析。【结果】在这五个地方绵羊品种的FAS基因3′-UTR区中,有951位点和1005位点2个多态位点;两位点分别存在AA、Aa、aa和EE、Ee、ee各三种基因型,而aa和ee基因型未检测到;AA和EE基因型频率高于Aa和Ee基因型频率,基因型AA和EE为优势基因型;A和E两个等位基因频率高于a和e等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明,这5个地方绵羊品种在951位点和1005位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。独立性检验表明:在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.01P0.05);滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著(P0.01);欧拉羊、甘加羊和乔科羊,甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著(P0.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P0.05)。测序结果表明,951位点在FAS基因在其转录产物mRNA的951位所对应处有一处C→T突变;1005位点在FAS基因在其转录产物mRNA的1005位所对应处有一处A→G突变。FAS基因mRNA二级结构预测结果显示:951位点的突变能导致其二级结构发生了明显的改变,而1005突变不会改变其二级结构。【结论】五个地方绵羊品种在FAS基因3′-UTR区有951位点(C→T)和1005位点(A→G)两个SNPs,2位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;基因型频率分布的独立性检验结果表明,在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.01P0.05);滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著(P0.01);欧拉羊与甘加羊和乔科羊、甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著(P0.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P0.05)。     

白萨福克羊和特克塞尔羊季节性生理生化指标比较分析

对甘肃永昌肉用种羊场的白萨福克羊(White Suffolk)和特克塞尔羊(Texel)全年16项生理生化指标进行了全面测定.2种羊在同一时间引入,但是在不同季节,2种羊的表现不同.夏季所有羊的体温和呼吸频率都显著增加,其中白萨福克公羊的体温(39.76±0.40)℃和呼吸频率(67.33±5.96)次/min最高,秋季特克塞尔公羊体温(39.22±0.29)℃和呼吸频率(30.00±5.39)次/min最高;除特克塞尔羊只夏季的红细胞数偏低外,其余季节2种羊血液生理指标均在正常范围内;2个品种羊的钙、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶含量均较高,表现出对高海拔地区的代谢适应性.     

家兔核仁组成区的银染多态性及其与品种间血缘关系的研究

对青紫蓝兔、加利福尼亚兔、大耳白兔、新西兰白兔,德系安哥拉兔等5个家兔品种。采用外周血淋巴细胞培养技术制备早中期染色体。并利用Ag-As、Ag-Ⅰ及1-stcp等3种方法进行Ag-NORs数目和频率分布的研究,分析各品种间亲缘关系。结果表明:本实验中制备的染色体其长度较长,可以被准确编号,并通过G-带分析支持了上述结论。在3种银染方法中,以1-step法最为满意。家兔的Ag-NORs定位于第13、16、20号染色体短臂和第21号染色体长臂端部。家兔Ag-NORs在细胞间、个体间、品种间均有差异,上述品种的Ag-NORs均数分别为3.27、2.97、3.53、2.93、2.67,品种间差异显著大于品种内个体间差异,说明Ag-NORs具有品种特征。并且以Ag-NORs的数目和频率分布进行聚类分析结果表明,新西兰白兔、青紫蓝兔、加利福尼亚兔、德系安哥拉兔为一个类群,而大耳白兔为另一个类群。证实Ag-NORs作为遗传指标,具有品种特征,可用于研究家兔各品种间的亲缘关系。     

波德代、陶赛特与蒙古羊的高代杂种血液生化指标比较

对波德代、陶赛特与蒙古羊的高代杂种5个品种12项血液生化指标进行了测定.结果表明:5个品种血清钙含量依次为蒙古羊(M)(2.58±0.98)mmol/L,陶赛特×蒙古羊杂种二代(DMF2)(1.95±0.24)mmol/L,波德代×蒙古羊杂种二代(BMF2)(1.99±0.17)mmol/L,陶赛特×蒙古羊杂种三代(DMF3)(1.84±0.21)mmol/L,波德代×蒙古羊杂种三代(BMF3)(1.89±0.32)mmol/L,均低于正常值(3.91±0.17)mmol/L;血清磷含量依次为M(1.83±0.70)mmol/L,DMF2(3.28±0.96)mmol/L,BMF2(2.73±1.01)mmol/L,DMF3(2.64±0.85)mmol/L,BMF3(3.01±0.56)mmol/L,均高于正常值(1.16±0.28)mmol/L,其它生化指标都在正常值范围内或与正常值相近.而与生产性能有关的血清总蛋白、白蛋白、钠含量高代杂交羊均高于当地蒙古羊,表明高代杂交羊对当地自然生态环境和饲养管理条件有较好的适应性,能较好地发挥其肉用遗传潜力.     

染色体Ag-NORs多态性与家兔品种间亲缘关系的研究

以家兔为实验动物,采用外周血淋巴细胞培养技术制备染色体标本,进行染色体Ag-NORs多态性研究.结果表明,Ag-NORs在细胞间、个体间以及每个家兔品种间数目变化范围均有差异;5个品种间差异显着大于品种内个体间差异.新西兰白兔、加利福尼亚兔、德系安哥拉兔、青紫兰兔、大耳白兔Ag-NORs均数分别为3.31、3.05、2.67、2.96和3.62,说明Ag-NORs具有品种间特性,作为遗传指标,可用于研究家兔各品种间的亲缘关系.