葡萄糖和含腺苷分子通过碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)诱导猪脂肪细胞硫氧还蛋白互作蛋白(Txnip)的表达

硫氧还蛋白互作蛋白(Txnip)是一种氧化还原调节蛋白,通过与硫氧还蛋白结合抑制其活性,调节细胞的氧化还原状态,在葡萄糖和脂质稳态中起重要作用。本研究利用从3~7日龄仔猪(Sus scrofa)皮下脂肪组织分离培养的脂肪细胞,应用RNAi沉默碳水化合物反应元件结合蛋白基因(ChREBP)表达,以含0或0.1 mmol/L NAD+的葡萄糖浓度分别为0、5和15 mmol/L的培养液培养,采用实时荧光定量PCR检测Txnip及ChREBP mRNA表达,以探讨葡萄糖和含腺苷分子对猪脂肪细胞Txnip表达的影响及其转录调控途径。结果表明,葡萄糖以浓度依赖方式促进猪脂肪细胞Txnip和ChREBP mRNA表达,无糖条件下NAD+对Txnip mRNA表达没有明显影响,但葡萄糖存在时显著促进其表达。siRNA沉默脂肪细胞ChREBP表达后,葡萄糖对Txnip mRNA表达的促进作用比相同条件下培养的对照细胞有较大幅度降低;以NAD+处理后,Txnip表达在葡萄糖浓度为5和15 mmol/L时分别较对照细胞降低了91%和93%。由此说明,NAD+诱导猪脂肪细胞Txnip转录表达依赖于葡萄糖的参与,ChREBP介导葡萄糖和NAD+对Txnip mRNA表达的诱导作用。研究结果为进一步探讨ChREBP在葡萄糖和脂质稳态中的作用提供了基础。     

五个地方绵羊品种FAS基因3'-UTR区单核苷酸多态性研究

[目的]探究脂肪酸合成酶(FAS)基因3'端非翻译区(3'-U7R)在绵羊地方品种中的遗传多态性,为进一步揭示地方绵羊品种间遗传分化、开展肉质性状的关联分析和表达调控等研究提供依据.[方法]采用PCR-SSCP和DNA测序技术对兰州大尾羊(38只)、滩羊(58只)、甘加羊(40只)、欧拉羊(30只)和乔科羊(39只)五个地方绵羊品种205只个体的脂肪酸合成酶(FAS)基因3'-UTR进行单核苷酸多态性(SNPs)检测和遗传多态性分析.[结果]在这五个地方绵羊品种的FAS基因3'-UTR区中,有951位点和1005位点2个多态位点;两位点分别存在AA、Aa、aa和EE、Ee、ee各三种基因型,而aa和ee基因型未检测到;AA和EE基因型频率高于Aa和Ee基因型频率,基因型AA和EE为优势基因型;A和E两个等位基因频率高于a和e等位基因频率,为优势等位基因,适合性检验表明,这5个地方绵羊品种在951位点和1005位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态.独立性检验表明:在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.010.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P>0.05).测序结果表明,951位点在FAS基因在其转录产物Mrna的951位所对应处有一处C→T突变;1005位点在FAS基因在其转录产物Mrna的1005位所对应处有一处A→G突变.FAS基因Mrna二级结构预测结果显示:951位点的突变能导致其二级结构发生了明显的改变,而1005突变不会改变其二级结构.[结论]五个地方绵羊品种在FAS基因3'-UTR区有951位点(C→T)和1005位点(A→G)两个SNPs,2位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;基因型频率分布的独立性检验结果表明,在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.010.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P>0.05).     

黄霉素和瘤胃素对肉牛血液生理生化指标的影响

本研究旨在探讨黄霉素和瘤胃素用作饲料添加剂时,对肉牛血液生理生化指标的影响。选择年龄、体重相近(305±26.54kg)的40头健康未去势公牛作为试验动物,随机分为4组,第一组饲喂300mg/d.头黄霉素,第二组饲喂300 mg/d.头瘤胃素,第三组饲喂300 mg黄霉素+300mg瘤胃素/d.头,第四组为对照组。结果表明:瘤胃素和黄霉素对肉牛血液生理指标没有显著的影响。     

应用Excel设计奶牛最低成本日粮配方

以特定生理、生产条件下奶牛的营养需要量为依据,设计符合其消化生理特点、各种营养素在数量和比例上都能满足需要的最低成本日粮配方,是提高奶牛生产经济效益的基础。为此,利用Excel软件的函数计算、引用及规划求解等功能,制作了奶牛最低成本日粮配方设计电子数据表。该数据表由饲料营养成分表、营养需要量计算表、日粮配方计算表和输出打印4个工作表组成,可根据奶牛的生产水平、生理及环境条件,快捷地计算出符合饲养标准的营养需要量,设计出奶牛最低成本日粮配方。     

褪黑素受体在牦牛子宫中的表达分析

为探究褪黑素受体（MTNR）在牦牛子宫中的定位及表达与妊娠的关系,本研究利用免疫组织化学技术（S-P法）分别检测未妊娠、妊娠25~45 d、妊娠50~85 d、妊娠90~110 d牦牛子宫中MTNR的表达情况。结果表明：MTNR免疫阳性产物在牦牛子宫腺上皮细胞、腔上皮细胞、基质细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肌层平滑肌细胞均有表达;不同妊娠阶段牦牛子宫中的基质细胞和肌层平滑肌细胞中均有MTNR的表达,但其差异性不显著（P〉0.05）;血管内皮细胞和血管平滑肌细胞中的MTNR表达强度随着妊娠阶段时间的增加且差异性显著（P〈0.05）;腺上皮细胞中的MTNR在妊娠后期表达强度增加且差异极显著（P〈0.01）;腔上皮细胞的MTNR在妊娠后期表达强度降低（P〈0.01）。     

光照及温度对小鼠卵母细胞体外成熟培养的影响

为给卵母细胞的体外成熟培养提供参考资料,以完整卵丘卵母细胞为研究对象,进行了光照及温度对小鼠卵母细胞体外成熟培养的影响试验。结果表明,不同温度对小鼠卵母细胞体外成熟培养无显著差异,但以36.5～37℃为宜,成熟率为71.4%～75%;正相光照(先12 h光照培养,后12 h无光照培养)可以提高卵母细胞的体外成熟率,为75%。     

红景天甙体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡研究

【目的】探讨红景天甙(Salidroside)体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】-以体外培养的人肝癌QGY-7703细胞作为研究对象，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测红景天甙对QGY-7703细胞生长的抑制作用，采用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术，分析红景天甙对QGY-7703细胞凋亡的诱导作用；采用Western blot免疫印迹法探讨红景天甙诱导QGY-7703细胞凋亡的可能机制。【结果】-MTT比色法试验结果表明，0.01，0.1，1，10和100 μg/mL红景天甙对QGY-7703细胞生长均有不同程度的抑制作用，细胞生长抑制率分别为13.2%，21.9%，31.4%，46.8%和60.9%，半数抑制质量浓度(IC₅₀)为18.56 μg/mL；用10 μg/mL 红景天甙处理QGY-7703细胞48 h，AO/EB荧光双染后，可观察到个别QGY7703细胞呈现亮绿色或橘红色，表明细胞发生了凋亡；琼脂糖凝胶电泳结果显示，10 μg/mL红景天甙作用QGY-7703细胞24，48 和72 h均可导致细胞核内DNA产生有序断裂，形成DNA梯形带；流式细胞术试验结果表明，10 μg/mL红景天甙的加入量为100 和200 μL时，QGY-7703细胞凋亡数分别为178和331个，相应的凋亡率分别为1.8%和3.5%，阴性对照组（10 μg/mL红景天甙加入量为0 μL）凋亡细胞数为105个，凋亡率仅为1.1％；Western blot免疫印迹分析结果表明，红景天甙下调了Bcl-2和PCNA蛋白的表达量，而使凋亡活化基因Bax与肿瘤抑制基因p53的蛋白表达量增高。【结论】 红景天甙对体外培养的QGY-7703细胞具有明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用，其诱导凋亡作用与Bcl-2家族成员、p53、Bax和PCNA基因调控有关。     

五个地方绵羊品种FAS基因3′-UTR区单核苷酸多态性研究

【目的】探究脂肪酸合成酶(FAS)基因3′端非翻译区(3′-UTR)在绵羊地方品种中的遗传多态性,为进一步揭示地方绵羊品种间遗传分化、开展肉质性状的关联分析和表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-SSCP和DNA测序技术对兰州大尾羊(38只)、滩羊(58只)、甘加羊(40只)、欧拉羊(30只)和乔科羊(39只)五个地方绵羊品种205只个体的脂肪酸合成酶(FAS)基因3′-UTR进行单核苷酸多态性(SNPs)检测和遗传多态性分析。【结果】在这五个地方绵羊品种的FAS基因3′-UTR区中,有951位点和1005位点2个多态位点;两位点分别存在AA、Aa、aa和EE、Ee、ee各三种基因型,而aa和ee基因型未检测到;AA和EE基因型频率高于Aa和Ee基因型频率,基因型AA和EE为优势基因型;A和E两个等位基因频率高于a和e等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明,这5个地方绵羊品种在951位点和1005位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。独立性检验表明:在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.01P0.05);滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著(P0.01);欧拉羊、甘加羊和乔科羊,甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著(P0.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P0.05)。测序结果表明,951位点在FAS基因在其转录产物mRNA的951位所对应处有一处C→T突变;1005位点在FAS基因在其转录产物mRNA的1005位所对应处有一处A→G突变。FAS基因mRNA二级结构预测结果显示:951位点的突变能导致其二级结构发生了明显的改变,而1005突变不会改变其二级结构。【结论】五个地方绵羊品种在FAS基因3′-UTR区有951位点(C→T)和1005位点(A→G)两个SNPs,2位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;基因型频率分布的独立性检验结果表明,在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.01P0.05);滩羊与欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异极显著(P0.01);欧拉羊与甘加羊和乔科羊、甘加羊与乔科羊均表现为差异不显著(P0.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P0.05)。     

真空冷冻干燥对食线虫真菌谷粒培养物含水量的影响

本研究旨在评估食线虫真菌Duddingtonia flagrans当地分离株(SDH035)在培养25 d后,经真空冷冻干燥后获得其谷粒培养物的水分含量水平。利用实验室已保存的当地分离的SDH035分离株,先用2%液体培养基中进行发酵培养,180 r/min,28℃培养7 d后终止培养。然后采用玉米和小麦谷粒联合培养基,进行厚垣孢子培养。终止培养后,测定谷粒培养物初始的水分含量,然后在-20℃条件下进行预冻处理12 h,最后置于真空冷冻干燥箱(冷阱温度为-55℃)中分别冷冻干燥3 h、4 h、5 h、6 h、7 h、8 h、9 h、10 h,在对其分别进行称重并计算水分含量。试验结果表明,上述谷粒培养物经真空冷冻干燥后,其含水量分别为48.26%、41.26%、38.16%、35.18%、30.49%、25.49%、21.06%和18.26%。