桦褐孔菌多糖的提取工艺优化 及对人肝癌细胞HepG2脂肪堆积的影响

通过L_9(3~4)正交试验,通过MTT法选取桦褐孔菌多糖对HepG2细胞的安全浓度,检测不同浓度的桦褐孔菌多糖对胞内TG蛋白的影响,及桦褐孔菌多糖减轻细胞内脂质堆积的作用。结果表明,桦褐孔菌多糖最佳条件为1 g∶15 mL的料液比,在温度30℃下提取30 min,超声功率为480 W。桦褐孔菌多糖可明显减轻HepG2细胞内脂质堆积,显著降低细胞中TG的含量,其中600 mg/L桦褐孔菌多糖对TG的清除率达24.57%,脂滴数量明显减少。说明桦褐孔菌多糖具有良好的体外降脂活性,对脂肪肝有较好的预防效果。     

桦褐孔菌不同提取物抗弓形虫效果的比较

为了探讨桦褐孔菌不同提取物抗弓形虫的效果,对桦褐孔菌水煎剂、多糖、白桦脂醇的体外抗弓形虫作用和对感染弓形虫小白鼠的治疗效果进行了比较。结果表明,体外试验中3种提取物均能抑制弓形虫的生长和繁殖,其中多糖组的抗虫效果优于其他2组,但试药组均弱于阳性对照组;在染虫试验中,桦褐孔菌多糖组中小白鼠平均存活天数与阳性对照组比较无显著性差异,表明桦褐孔菌多糖体内抗虫效果较好。     

桦褐孔菌多糖的提取及含量测定方法的研究

采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖,并利用苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为标准品,测定桦褐孔菌菌核及其粗多糖中多糖的含量.结果表明,桦褐孔菌粗多糖得率为17%,桦褐孔菌菌核中多糖含量为2.068%,桦褐孔菌粗多糖中的多糖含量为22.43%.该方法桦褐孔菌粗多糖得率高,加样回收率在99%以上,且5 h内显色稳定,重现性好,适合用于中药桦褐孔菌多糖的提取及含量测定.     

桦褐孔菌粗多糖对急性弓形虫感染雄性小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

[目的]探讨桦褐孔菌粗多糖对弓形虫感染小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。[方法]用3种剂量桦褐孔菌粗多糖治疗弓形虫感染所致的睾丸生精障碍小鼠,使用流式细胞仪检测生精细胞凋亡率,并设立空白对照组、阴性对照组和阳性对照组进行对比。[结果]与阴性对照组比较,桦褐孔菌粗多糖高剂量组的睾丸生精细胞凋亡率极显著降低（P〈0.01）中剂量组及阳性对照组的睾丸生精细胞凋亡率显著降低（P〈0.05）。[结论]桦褐孔菌粗多糖具有修复睾丸病理损伤并降低睾丸生精细胞凋亡率的作用。     

桦褐孔菌碱溶多糖提取工艺条件优化研究

[目的]优化桦褐孔菌碱溶多糖的提取工艺。[方法]以桦褐孔菌为原料,通过稀碱法提取碱溶多糖,以多糖得率为指标,采用单因素分析和正交试验测定碱溶多糖的最佳提取工艺条件。[结果]试验得出,桦褐孔菌碱溶多糖的最佳提取工艺为碱液浓度0.5mol/L、料液比1∶30 g/ml、提取温度80℃,在此条件下,桦褐孔菌多糖得率可达3.83%。[结论]研究可为桦褐孔菌的开发利用提供理论依据。     

超声-微波辅助提取桦褐孔菌多糖的工艺研究

[目的]探讨超声-微波辅助技术提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺条件。[方法]以水作为提取溶剂,用超声-微波辅助提取桦褐孔菌多糖,通过响应面分析法考察微波功率、微波处理时间和料水比对桦褐孔菌多糖得率和纯度的影响,优化超声-微波提取桦褐孔菌多糖的工艺参数,并和传统水浴浸提法进行比较。[结果]超声-微波辅助技术提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺条件为:提取时间18.45～24.50 min,料液比1∶20,微波功率88.3～96.7 W。与传统的水浴浸提法相比,超声-微波提取法可大大缩短提取时间,得率由2.12%增加到3.25%,纯度由64.03%增加到73.16%。[结论]与传统的水浴浸提法相比,超声-微波提取法不仅缩短了提取时间,而且提高了桦褐孔菌多糖的得率和纯度。     

桑树提取物对高脂肪饲喂小鼠的脂肪肝和胰岛素抵抗的作用

非酒精性脂肪肝是肥胖的最常见并发症之一。桑树提取物作为一种重要植物提取物资源,含有大量抗氧化物质,如花青素、酚类和黄酮类化合物。试验旨在探索桑树提取物(MEE)对高脂饮食诱导的脂肪肝和胰岛素抵抗小鼠代谢紊乱的影响作用。将雄性C57BL/6J小鼠36只随机分为3组,分别饲喂低脂、高脂和添加MEE饲料。结果表明,饲料中添加MEE可降低饮食引起的体增重,改善高脂饮食诱导的脂肪肝和脂肪增加,降低胰岛素抵抗,改善糖代谢。肝脏基因表达分析表明,MEE组改变了脂质和胆固醇代谢方面的基因表达。试验表明,饲料中补充MEE可减轻高脂饮食小鼠产生的肥胖、脂肪肝和胰岛素抵抗情况。此外,MEE作用与脂肪酸氧化有关,可降低脂肪酸和胆固醇的生物合成。     

饲料中添加发酵大蒜提取物对高脂饮食诱导肝脂肪变性小鼠的影响

试验旨在探讨植物乳杆菌BL2发酵大蒜提取物(FGE)对高脂饮食(HFD)诱导产生的肝细胞脂肪变性的影响。FGE可提高胰岛素敏感性,降低血脂水平。与非发酵的大蒜提取物(NFGE)相比,饲料中添加FGE可有效降低肝脏脂质水平,减少脂肪肝。FGE的功能的实现主要通过AMPK途径,通过上调PPARα刺激肝脏脂肪分解,抑制肝脏脂肪合成,部分通过下调SREBP-1c、FAS和SCD-1表达实现。FGE通过提高有机硫化合物、环蒜氨酸和SAC的抗氧化活性,显著改善高脂饮食诱导的脂肪变性,改善肝脏氧化还原状态和氧化损伤。试验结果表明,FGE可对非酒精性脂肪肝有预防及治疗作用。     

桦褐孔菌发酵条件的优化及体外降糖作用的研究

[目的]研究桦褐孔菌的潜在应用价值,并分析其菌丝体多糖的降糖作用.[方法]以生物量和粗多糖含量为指标,通过单因素试验与正交试验设计方法对其发酵条件进行优化.将桦褐孔菌菌丝多糖对糖尿病模型小鼠进行灌胃,测定小鼠血糖变化.[结果]促进该菌株发酵生长的最佳碳源、氮源分别为葡萄糖和牛肉膏;最佳培养基组成为葡萄糖30 g/L,蛋白胨4 g/L,牛肉膏8 g/L.摇床培养条件为pH 7.0,装液量90 mL/250 mL,接种量15％,发酵时间12 d.与模型组相比,桦褐孔菌菌丝多糖能显著降低糖尿病小鼠血糖.[结论]该研究可为工业化生产桦褐孔菌多糖及实际应用提供参考.     

柞蚕雄蛾浓缩液改善高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝

本研究以柞蚕雄蛾为原料,用低温浸提方法得到柞蚕雄蛾浓缩液,并通过小鼠实验,探讨其对高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的影响。结果表明,浓缩液能够降低模型小鼠的血脂四项、减少肝脏脂肪堆积及病变,改善小鼠非酒精性脂肪肝的情况。本研究结果可为柞蚕的综合开发利用提供理论依据,并为开发预防和治疗NAFLD的产品做探索性研究。     

黄果槲寄生果实多糖对急性酒精肝损伤小鼠的保护作用

探讨黄果槲寄生果实多糖(VCFP)对急性酒精性肝细胞损伤小鼠的保护作用。通过一次性高浓度酒精灌胃建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,之后将KM小鼠随机分为VCFP低、中、高剂量组和酒精模型组,同时设正常对照组。VCFP组连续灌胃多糖28 d,酒精模型组及正常对照组灌胃等量生理盐水,动态观察生长情况和肝组织形态学结构的变化。结果显示,小鼠酒精灌胃后,模型组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平、丙二醛(MDA)含量、CAT及GSH-Px活力与正常对照组相比显著升高(P0.01),体重、肝脏指数和SOD活力显著(P0.01)降低;VCFP组连续灌胃多糖28 d后,均能显著提高小鼠体重、肝脏指数和SOD活力,降低ALT、AST、TC、TG水平、MDA含量、CAT及GSH-Px活力,肝组织逐渐得到明显修复。研究表明,黄果槲寄生果实多糖可通过提高抗氧化酶活性,清除氧自由基减轻膜脂质过氧化反应,对肝细胞起到保护作用。     

一种非酒精性脂肪肝小鼠模型的建立方法

[目的]建立一种由高脂高糖膳食导致小鼠患非酒精性脂肪肝病的方法,具体症状为伴有严重血脂异常、肝功能受损和炎症反应.[方法]选用SPF级雄性C57BL/6J小鼠,7～8周龄,采用随机数字法分为正常组和模型组,每组20只,模型组灌胃高脂高糖肠内营养液,正常组灌胃PBS,试验期间自由摄食基础饲料和水.于第10、12、14、16周分别处死3只小鼠,检测是否达到NAFLD脂变程度;16周后,处死全部小鼠进行常规血脂4项和肝功能检测;观察肝脏的外观,测定肝脏中TG和TC含量;另取肝脏、脾脏和腹部脂肪分别进行HE染色;测定血清中IL-6和TNF-α水平.[结果]随着灌胃时间的增加,模型组肝脏系数、TG、TC含量均呈逐渐增加的趋势,正常组对应指标变化不明显;当灌胃时间达到12周时,模型组肝脏TC含量显著高于正常组;14周时,模型组中TG、TC含量与正常组相比均显著增加;通过HE染色发现,灌胃16周时模型组肝细胞排序混乱,肝细胞脂肪严重;血液中炎症因子和肝功能水平显著高于正常组,说明灌胃高脂高糖肠内营养液16周,模型组内肝脂变严重,肝细胞损伤并出现明显的炎性病变.[结论]该研究建立NAFLD小鼠模型操作简便,检测的指标稳定性好、可重复性高且更接近模拟人类该疾病的自然发病规律,为建立深入研究NAFLD发病机制、相关防治措施和治疗药物的筛选提供了可靠的动物模型.     

软枣猕猴桃多糖对高脂食小鼠脂代谢的影响

为研究软枣猕猴桃多糖对高脂食小鼠脂代谢的影响,也为软枣猕猴桃多糖调节脂代谢作用方式及机理研究奠定工作基础,本试验选取雄性小鼠36只,随机分为3组,即空白对照组、高脂模型组、高脂+多糖组,每组12只。空白对照组每天喂食基础饲料,高脂模型组每天喂食高脂饲料,高脂+多糖组每天喂食高脂饲料同时每天灌胃300mg·kg~(-1)体重的软枣猕猴桃多糖溶液。60d后测定小鼠体重、肝重、血清脂质水平、肝脏脂质水平、肝脏病理变化以及粪便中的脂质水平。结果表明:与高脂对照组相比,软枣猕猴桃多糖能显著降低小鼠血清和肝脏中总胆固醇和甘油三酯的含量,提高肝脏中高密度脂蛋白胆固醇水平。肝脏组织病理观察结果表明,软枣猕猴桃多糖能够明显改善并缓解肝脏脂肪高血脂症状。小鼠粪便脂质水平测定结果表明,软枣猕猴桃多糖能显著提高高脂小鼠粪便中的总脂、胆固醇和甘油三酯含量,说明软枣猕猴桃多糖能够起到降低胆固醇水平的作用是通过促进胆固醇排泄途径来实现的。     

山楂原花青素改善肥胖小鼠糖脂代谢紊乱及脂肪肝的研究

为了探讨山楂原花青素提取物(Hawthorn proantho cyanidins, HPC)对高脂饮食诱导的肥胖小鼠糖脂代谢紊乱与脂肪肝的影响,将60只雌性C57BL/6J小鼠随机分为5组:溶剂对照组、高脂模型组、HpC低(50mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组,每组12只。除溶剂对照组外4组喂高脂饲料,同时3个干预组动物每日灌胃给与不同剂量的HpC连续8周。以小鼠血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量和空腹血糖值(Glu)为检测指标,评估HpC对高脂诱导小鼠高血脂和高血糖的改善作用。并采集小鼠肝脏组织,石蜡切片,HE染色,进行组织学观察。结果表明,HpC可抑制高脂饮食导致的肥胖,与模型对照组相比,降低了肥胖小鼠的体质量与体脂含量,并改善肥胖小鼠肝脏变性程度。同时HpC可显著降低小鼠TC、TG、LDL-C和Glu值,不同程度地提高了HDL-C水平。试验证明HpC具有改善高脂诱导肥胖小鼠的血脂和血糖异常,降低脂肪肝的功效。     

应用茶树菇(As-1)多糖评价小鼠高脂模型的建立

[目的]建立小鼠高脂模型,应用茶树菇多糖的降脂功效评价该模型。[方法]喂饲高脂饲料,检测小鼠生化生理指标以及肝组织变化。[结果]饲喂高脂饲料7d后,小鼠肝脏体积明显增大,其体重、甘油三酯（TG）和胆固醇（TCH）等指标都呈现显著差异（P〈0.05）,由此确认小鼠高脂模型成功建立。茶树菇多糖降脂功能评价表明,高脂模型组在体重、Lee’s指数和脂肪质量等方面与基础组间差异显著（P〈0.01）,并且茶树菇多糖降脂效果在高脂模型组中更为突出。[结论]茶树菇多糖降脂效果明显。     

不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响

[目的]研究不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响。[方法]采用水煮醇沉法和碱液醇沉法提取粗多糖;采用三氯乙酸法纯化水溶和碱溶粗多糖;采用羟基自由基清除试验和超氧阴离子自由基清除试验进行抗氧化活性对比研究。[结果]水溶粗多糖、碱溶粗多糖、水溶纯多糖、碱溶纯多糖的多糖得率分别为14.0%、27.7%、7.0%、6.2%。对羟基自由基的清除,水溶粗多糖在0.9 mg/ml时有最大清除率,为54.3%,碱溶纯多糖在0.06 mg/ml时有最大清除率,为10.9%;对超氧阴离子自由基的清除,水溶粗多糖在0.1mg/ml时有最大清除率,为24.2%,水溶纯多糖在0.07 mg/ml时有最大清除率,为27.2%。[结论]水溶多糖比碱溶多糖抗氧化能力强,桦褐孔菌可成为一种新的高效天然抗氧化药用真菌。     

苏子提取物治疗兔非酒精性脂肪肝病的试验研究

观察苏子提取物(Extractions of Perilla Seed,EPS)抗高脂血症引起的非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)的作用。采用高脂饮食复制家兔NAFLD模型,分别测定正常对照组(NC)、高脂模型组(HLM)、苏子提取物组(EPS 0.1 g/mL)血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT、AST。肝组织用中性福尔马林固定,石蜡包埋,切片,H.E.染色,光学显微镜下观察,评估脂肪变性程度。结果显示,跟高脂模型组相比,EPS能显著降低血清中TC、TG、LDL-C、ALT、AST含量,提高HDL-C的含量(P<0.01或P<0.05);减轻肝组织脂肪变性程度(P<0.01)。说明EPS具有抗高脂血症引起的家兔非酒精性脂肪肝病的作用。其机制可能与调节血脂代谢紊乱以及抑制肝脏脂质沉积有关。     

营养条件对桦褐孔菌菌丝生长及多糖含量的影响

进行了不同碳源、氮源、微量元素对桦褐孔菌菌丝生长及多糖含量影响的试验．结果表明，桦褐孔菌菌丝生长的最适碳源为麦芽糖和葡萄糖，不同氮源和微量元素对菌丝生长均无明显影响；选用麦芽糖、Ca（NO3）2或蛋白胨、CuSO4或MnSO4的培养基菌丝多糖含量最高．     

大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

利用不同高脂饲料配方建立大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,为非酒精性脂肪肝的研究提供参考依据。大鼠饲喂单纯高脂饲料以及分别含有去氧胆酸、丙基硫氧嘧啶的高脂高胆固醇饲料,经6周的实验周期。结果显示,单纯饲喂高脂饲料大鼠(H6)呈现出显著的体重增加以及肝脏脂肪浸润。饲喂添加去氧胆酸盐的高脂饲料后大鼠肝脏胆固醇水平显著降低,但血液丙氨酸转氨酶(ALT)和丙氨酸转氨酶(AST)水平显著高于H6大鼠。丙基硫氧嘧啶介导甲状腺机能减退脂肪肝模型(HP6)组大鼠呈现前期体重生长缓慢后期的体重减轻且高的血清甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、ALT。四环素刺激下的甲状腺机能减退大鼠(HPT6)呈现严重肝脏病变以及低下肝脏脂肪蓄积和高水平的血清ALT。表明HP6大鼠存在进行性非酒精性脂肪肝的发生。而在四环素刺激下,甲状腺机能减退大鼠存在进行性肝纤维化以及肝脏疾病晚期的可能。为非酒精性脂肪肝研究提供了有力的基础数据。     

超声波辅助提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的研究

[目的]优化桦褐孔菌中三萜类物质的超声波辅助提取工艺。[方法]以异丙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取法提取桦褐孔菌中三萜类物质,以不同处理条件、超声功率、超声次数和超声处理时间为试验因素,以三萜的提取率为评价指标进行单因素试验,筛选最佳提取工艺。[结果]超声辅助技术提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的最佳工艺条件为超声功率400 W、超声次数30次、超声时间15 min;在此条件下,三萜得率为1.06%。[结论]超声波辅助提取法是一种有效的桦褐孔菌三萜类物质提取方法。