莲不同药用部位的体外抑菌作用初探

为比较莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的抑菌作用效果,通过试管二倍稀释法测定各成分金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);绘制光密度-时间曲线,检测药物对细菌生长期的影响,分析莲不同药用部位的抑菌作用效果。结果显示,莲子心提取物、莲房提取物、荷叶提取物对副溶血弧菌的最小抑菌浓度分别为15.625、62.5、500mg/mL;莲房提取物、荷叶提取物对金黄色葡萄球菌的MIC分别为15.625、62.5mg/mL;荷叶提取物对肺炎克雷伯菌的MIC为125mg/mL。莲子心提取物对副溶血弧菌的MBC为其MIC的4倍,莲房和荷叶提取物对3种供试菌的MBC基本上为其MIC的4～8倍。当浓度为1 MIC时,莲子心莲不同药用部位基本上能完全抑制金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的生长。结果表明,莲不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌有一定的抑菌作用,但作用效果不同。     

紫花地丁提取物对三文鱼中副溶血性弧菌的抑制作用

为了获得具有抑菌活性的天然活性物质并应用于食品中,本文以紫花地丁为原料,通过设定乙醇浓度、提取温度、提取时间等不同条件开展L_(16)(4~3)正交实验,分析比较了在这三个不同条件下处理的16种提取物对纯培养副溶血性弧菌和接种到三文鱼时的抑菌效果。结果表明:在40℃下采用75%的乙醇溶液作为提取剂、超声波超声处理20min为最优提取条件,由此得到的提取物对三文鱼中副溶血性弧菌的最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC)和最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)分别为0.50 mg/g和6.25*10-2 mg/g。因此,紫花地丁提取物具有在食品中应用的前景。     

3种四环素药物对创伤弧菌的抗菌活性

拟测定3种四环素类药物对创伤弧菌抗菌活性。在6 400、5 760、5 120、4 480、3 840、3 200、2 560、1 920、1 280、640、256、128、64和51.2 mg/L的盐酸土霉素、金霉素和四环素的液体培养基里分别培养等量创伤弧菌,12 h后通过平板涂布和测量吸光度D600 nm测定3种药物对创伤弧菌的抗菌效果,得到最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,简称MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,简称MBC)。结果显示,金霉素的抑菌浓度范围为51.2~1 280.0μg/m L,最小杀菌浓度为1 920μg/m L;四环素的抑菌浓度范围为51.2~1 920.0μg/m L,最小杀菌浓度为2 560μg/m L,而盐酸土霉素的抑菌浓度范围为51.2~2 560μg/m L,最小杀菌浓度为3 200μg/m L。结果表明,盐酸土霉素、金霉素、四环素对海水创伤弧菌杀菌强度依次为金霉素四环素盐酸土霉素。     

五味子和黄精对副溶血弧菌及其生物膜的体外抑制作用

采用琼脂扩散法,分别测定五味子(Shisandra chinensis)、黄精(Polygonatum sibiricum)对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的体外抑菌作用;选用倍比稀释法确定五味子、黄精对副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用改良微孔板法(MTT)评价两种中草药液对溶藻弧菌生物膜形成的影响。结果表明,两种中草药都有不同程度的抑制副溶血弧菌的作用,五味子对副溶血弧菌的抑菌圈直径为18.67(±0.2)mm,MIC为1.56 mg/m L,MBC为3.125 mg/m L;黄精的抑菌圈直径为11.26(±0.6)mm,MIC和MBC分别为1.56、3.125 mg/m L。当药物浓度达到3.125 mg/m L以上时,五味子和黄精对副溶血弧菌生物膜的形成有极显著抑制作用。     

大黄提取物对嗜水气单胞菌的抑菌效果

测定了大黄提取物对水产养殖中常见病原菌的最小抑菌浓度及其对嗜水气单胞菌体内和体外抑菌效果。结果显示,大黄提取物对水产养殖中的常见病原菌嗜水气单胞菌最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均为250μl/L,点状产气单胞菌、鳗弧菌、苏伯利产气单胞菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌的MIC与MBC均为500μl/L,肠型点状产气单胞菌的MIC与MBC均为1 000μl/L。药敏试验结果发现,大黄提取物对嗜水气单胞菌抑菌圈的直径为(20.4±1.3)mm,氟哌酸的抑菌圈直径为(33.0±1.6)mm,氯霉素为(29.0±2.8)mm。攻毒试验结果显示,在攻毒7 d后,对照组死亡率为40.00%,饲料中添加0.5%大黄提取物的试验组死亡率为6.67%,添加4%的试验组的死亡率为20%,添加1%和2%的试验组没有鱼死亡,表明饲料中添加1%的大黄提取物能有效增强鱼体对嗜水气单胞菌的抵抗能力。本试验结果说明,大黄提取物对水产养殖中常见的病原菌具有良好的抑菌效果,对嗜水气单胞菌的抑菌效果与抗生素类抗菌药物相当,能够增强机体免疫力,对细菌性疾病具有较强的预防作用。     

菠萝皮醇提取物抑菌活性的研究

以菠萝皮为原料,利用醇提法提取活性物质,通过平板打孔法研究该提取物对常见的4种食品污染菌的抑菌作用。实验结果表明：菠萝皮醇提取物对大肠杆菌、黑曲霉、金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用,在测试范围内,其最小抑菌浓度（MIC）分别为40、100、200 g/L;对大肠杆菌、黑曲霉的最低杀菌浓度（MBC）分别为800、1000 g/L,对金黄色葡萄球菌的MBC未在测试范围内;菠萝皮醇提取物对桔青霉则无抑制作用。通过比较介质pH对提取物稳定性的影响,发现菠萝皮醇提取物在酸性条件下有抑菌活性,在碱性条件下则无抑菌活性。     

狼毒大戟水浸液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌体外杀菌效果的研究

[目的]通过对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外药效试验,研究有毒植物狼毒大戟的杀菌效果。[方法]取多年生狼毒大戟的根制成水浸液,用24孔板和平坂培养法对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行药效试验。[结果]狼毒大戟对全黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.7 g/ml;最小杀菌浓度（MBC）为1.17 g/ml。对大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为1.17 g/ml;最小杀菌浓度（MBC）为1.75 g/ml。[结论]狼毒大戟对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有明显的抑杀菌作用。     

细叶小檗不同生长部位生物碱抑菌活性研究

  目的  对细叶小檗不同生长部位（根、茎、叶、果）生物碱抑菌活性进行对比评价，旨在筛选细叶小檗抑菌有效部位和主要抑菌成分，为拓宽其全植株应用领域及研发新型天然食品防腐剂的研究提供理论依据。  方法  以抑菌圈直径、最低抑菌质量浓度和最低杀菌质量浓度为考查指标，采用牛津杯抑菌法，研究各生长部位生物碱对4种食源性致病菌（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌）的抑制作用，采用高效液相色谱法测定生物碱的种类和含量。  结果  纯化前后细叶小檗4种不同生长部位生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌这4种常见食源性致病菌均呈现正相关的剂效关系。其中，纯化前细叶小檗实生物碱的抑菌效果最佳，当其生物碱质量浓度为60 g/L时，抑菌圈直径大于20 mm。通过二倍稀释法研究表明:其对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌质量浓度（MIC）均为1.25 g/L，最低杀菌质量浓度（MBC）均为2.50 g/L，对金黄色葡萄球菌的MIC为2.50 g/L，MBC为5.00 g/L。纯化后细叶小檗根生物碱的抑菌效果最佳，当其生物碱质量浓度为40 g/L时，抑菌圈直径大于20 mm。通过二倍稀释法研究表明:其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC均为0.31 g/L，MBC均为0.63 g/L，对枯草芽孢杆菌、沙门氏菌的MIC为0.63 g/L，MBC为1.25 g/L。液相色谱检测结果显示:纯化后生物碱构成包括小檗碱（0.28 ~ 41.69 g）、药根碱（0.32 ~ 12.67 g）、巴马汀（0.25 ~ 17.09 g）。  结论  细叶小檗根、茎和果这3个部位对供试菌株有较强的抑菌作用，叶抑菌效果稍弱。4个不同生长部位基本生物碱单体种类相同，但含量存在显著差异。当生物碱质量浓度为60 g/L时，纯化前不同部位抑菌作用强弱次序为果 > 根 > 茎 > 叶；纯化后不同部位抑菌作用强弱次序为根 > 茎 > 实 > 叶。      

大黄等5种中草药对两种锯缘青蟹致病菌的体外抑菌活性

[目的]研究大黄、黄芩、金银花、杜仲与大枣及其复方A（大黄.黄芩）、B（大黄·黄芩·金银花）、C（大黄.黄芩.杜仲）和D（大黄.黄芩.杜仲.大枣）对锯缘青蟹（Scylla serrata）常见致病菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）的体外抑菌效果。[方法]通过纸片法测定细菌对药物的敏感性。分别采用稀释法与平皿法测定最小抑菌浓度（MIC）与最低杀菌浓度（MBC）。[结果]副溶血弧菌对单方的的敏感度为黄芩〉金银花〉大黄〉大枣〉杜仲,其复方的抑菌效果为A=B=C〉D。其中,黄芩、A、B、C和D对副溶血弧菌的杀菌作用较强。嗜水气单胞菌对单方的敏感度依次为大黄〉黄芩〉金银花〉大枣〉杜仲,其复方的抑菌效果为A〉B〉C=D。其中,大黄与复方C对嗜水气单胞菌的杀菌作用较强。[结论]大黄、黄芩、金银花、杜仲与大枣及其复方对副溶血弧菌和嗜水气单胞菌有良好的抑菌效果,能用于锯缘青蟹疾病的治疗。     

饲料添加剂甘草多糖对微生物的抑菌效果试验

介绍了甘草多糖的广泛用途及抑菌效果试验方法与试验经过,结果表明：甘草多糖成品对大肠杆菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）均为16万mg/L;对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC均为10万mg/L;其纯品对大肠杆菌的MIC和MBC均为4万mg/L、对金黄葡萄球菌的MIC和MBC均为2万mg/L;纯品对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为5mm和8mm。     

上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌耐药性及其耐药基因检测分析

【目的】掌握上海地区养殖凡纳滨对虾源副溶血弧菌的耐药性及耐药基因携带情况,并明确耐药表型与耐药基因间的相关性,为科学防控凡纳滨对虾副溶血弧菌病及揭示耐药机制提供理论依据。【方法】通过K-B纸片扩散法检测21株上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌对14种常见抗生素的敏感性,采用二倍稀释法测定高度敏感抗生素对副溶血弧菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并以PCR检测其耐药基因的携带情况,包括β-内酰胺类耐药基因blaTEM和blaCARB、磺胺类耐药基因Sul II和Sul III、氨基糖苷类耐药基因strA和str B、四环素类耐药基因tetA及I类整合子inT1基因。【结果】21株上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌对14种常见抗生素表现出不同程度的多重耐药性,六重耐药1株（4.76%）,五重耐药3株（14.29%）,四重耐药5株（23.81%）,三重耐药8株（38.10%）,二重耐药4株（19.05%）;AMP/PG/SMX和PG/SMX为优势耐药菌谱。上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌对恩诺沙星的敏感率最高（90.48%）,对应的MIC为0.10~1.60μg/mL、MBC为3.20~12.80μg/mL。blaTEM、blaCARB、Sul II、Sul III、str B和inT1等耐药基因的检出率分别为23.81%、71.43%、33.33%、19.05%、9.52%和23.81%,未检测出strA和tetA基因。从21株上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌中共检出11种耐药基因型,其优势耐药基因型有blaCARB（28.57%）、blaCARB-blaTEM（14.29%）、blaCARB-Sul II（14.29%）和Sul III-inT1（9.52%）。除str A基因和tetA基因外,其余耐药基因与其对应抗生素耐药表型间均存在相关性,但其相关性不显著（P>0.05）。【结论】上海凡纳滨对虾源副溶血弧菌对14种常见抗生素表现出不同程度的敏感性,对恩诺沙星的敏感性最高,故可考虑将恩诺沙星作为上海地区凡纳滨对虾副溶血弧菌病防控的备选药物。此外,针对对虾源副溶血弧菌日趋严重的多重耐药问题,应同时加强副溶血弧菌耐药基因及整合子携带情况的监测,掌握其流行趋势,以提高对虾副溶血弧菌病的防控策略。     

茴香醛对变异链球菌的抗菌活性和抗生物被膜活性

为研究茴香醛对变异链球菌的抗菌作用并阐明其抗菌机制,通过时间杀菌曲线、细胞膜完整性、细菌疏水性、生物被膜定量和RT-qPCR实验,测定茴香醛对变异链球菌的抗菌活性和抗生物被膜活性。结果表明,（1）茴香醛对变异链球菌的最小抑制浓度 (MIC)和最小杀菌浓度 (MBC)分别为4 g·L?1和8 g·L?1;（2）随着茴香醛浓度的增加,变异链球菌的核酸和蛋白质泄漏量逐渐增加;（3）激光共聚焦显微镜显示茴香醛在1×MIC的浓度下即可增加细菌细胞膜通透性破坏变异链球菌细胞膜的完整性;（4）茴香醛通过改变细菌细胞膜通透性发挥抑菌作用,通过改变变异链球菌的疏水性并下调基因表达发挥抗变异链球菌生物被膜活性。以上结果表明,茴香醛作为天然抗菌剂,具有进一步开发为抗龋齿药物的潜力。     

苦丁茶不同提取物的体外抑菌作用研究

［目的］研究苦丁茶不同粗提物的抑菌效果。［方法］采用试管二倍稀释法和纸片扩散法,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌进行体外抑菌试验,并测定其最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）和抑菌环直径。［结果］粗提物1抑菌效果较强,高于粗提物2和粗提物3,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌的MIC分别为3.91和31.25mg/ml。［结论］苦丁茶的不同粗提物均有不同程度的抑菌作用,为苦丁茶开发成新型、安全的抑菌剂提供参考。     

4种红树植物提取物的体外抗菌活性研究

[目的]探讨4种红树植物无瓣海桑、海桑、黄槿和银叶树提取物对6种常见致病菌的体外抗菌活性。[方法]微波提取法制备植物茎和叶的水提物和醇提物,用纸片扩散法和微孔板2倍稀释法测定了各提取液对各受试菌的抑菌圈、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。[结果]4种红树植物的提取物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑制作用无特异性;水提物和醇提物对受试菌株的抑菌谱不一致。4种植物茎和叶的水提物对金黄色葡萄球菌均有抑菌和杀菌作用,MIC和MBC在2.0～15.6 mg/ml之间。银叶树的叶水提物对金黄色葡萄球菌和表皮金黄色葡萄球菌有明显的抑菌和杀菌活性,但对副伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌和枯草芽胞杆菌有抑菌而无杀菌作用。[结论]银叶树可作为抗菌药物的原植物进行开发利用。     

苦丁茶不同提取物的体外抑菌作用研究（摘要）

[目的]研究苦丁茶不同粗提物的抑菌效果。[方法]制备了3种苦丁苯粗提物。粗提物1：称取苦丁茶50 g,加500 ml去离子水浸泡10 h,加热至沸腾,文火2h,过滤。药渣再加3～5倍去离子水煎煮,方法同上,重复3次。合并3次提取液,用旋转蒸发仪浓缩成50 ml,即每1 ml相当于含生药1.0 g,粗提物2：称取50 g干粉（用中药粉碎机粉碎后过80目）,加500 ml去离子水,水浴80℃恒温振荡3 h,离心,取上清液,浓缩,加3倍体积无水乙醇,离心取沉淀,用去离子水配成50 ml溶液。粗提物3：称取50 g干粉,加500 ml 90%乙醇,采用回流提取法,同流时间3 h,回流次数3次,合并3次提取液,过滤,用旋转蒸发仪浓缩成50 ml。粗提物1、粗提物2、粗提物3分装于棕色试剂瓶,封口,于-20℃冰箱中保存,使用前121℃高压灭菌20 min采用试管二倍稀释法和纸片扩散法,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌进行体外抑菌试验,并测定其最小抑菌浓度（MIC）,最小杀菌浓度（MBC）和抑菌环直径。[结果]粗提物1抑菌效果较强,高于粗提物2和粗提物3,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌的MIC分别为3.91 mg/ml和31.25 mg/ml。粗提物1对金黄色葡萄球菌的抑菌作用效果最好,抑菌能力最强,抑菌作用为高敏,抑菌环直径达（17.46±0.40）mm,对大肠埃希菌的抑菌作用为中敏,但比粗提物2、粗提物3好;粗提物2对这2种菌的抑菌能力都较差,均为低敏,特别是对大肠埃希菌,抑菌环直径只有（6.30±0.16）mm。粗提物3对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用相差不大,都为中敏。粗提物1不但抑菌效果好,且其提取方法、步骤简单,仪器设备价格低,同时不产生废气,可为临床应用上提供支持并带来方便。粗提物3需使用有机溶剂,大量使用容易产生三废,给环境带来一定的危害。考虑到抑菌能力及成本、环保和简便等因素,采用提取粗提物1的方法在生产上比较实用。[结论]苦丁茶的不同粗提物均有不同程度的抑菌作用,为苦丁茶开发成新型、安全的抑菌剂提供了参考。     

聚维酮碘对气单胞菌的抑菌杀菌效果研究

[目的]研究聚维酮碘作为一种水产养殖上常用的消毒剂对气单胞菌的抑菌杀菌效果。[方法]以气单胞菌属标准株ATCC7966和分离自患病鱼及养殖环境的气单胞菌为试验菌株,通过肉汤二倍稀释法研究聚维酮碘的抑菌杀菌作用。[结果]聚维酮碘在低浓度时能抑制气单胞菌的生长增殖,高浓度时杀灭细菌,其对Aeromonas sp.T1、Aeromonas sp.T2、Aeromonas sp.T4菌株的最小抑菌浓度为125.00 mg/L,最小杀菌浓度为4.00 g/L;其对ATCC7966、Aeromonas sp.T3、Aeromonas sp.T5、Aeromonas sp.T6菌株的最小抑菌浓度为250.00 mg/L,最小杀菌浓度为8.00 g/L。[结论]为聚维酮碘的合理使用提供了一定的依据。     

聚维酮碘对气单胞菌的抑菌杀菌效果研究

[目的]研究聚维酮碘作为一种水产养殖上常用的消毒剂对气单胞菌的抑菌杀菌效果。[方法]以气单胞菌属标准株ATCC7966和分离自患病鱼及养殖环境的气单胞菌为试验菌株,通过肉汤二倍稀释法研究聚维酮碘的抑菌杀菌作用。[结果]聚维酮碘在低浓度时能抑制气单胞菌的生长增殖,高浓度时杀灭细菌,其对Aeromonas sp. T1、Aeromonas sp. T2、Aeromonas sp. T4菌株的最小抑菌浓度为125. 00mg/L,最小杀菌浓度为4.00g/L;其对ATCC7966、Aeromonas sp. T3、Aeromonas sp. T5、Aeromonas sp. T6菌株的最小抑菌浓度为250.00 mg/L,最小杀菌浓度为8.00 g/L。[结论]为聚维酮碘的合理使用提供了一定的依据。     

植物提取物对龙眼主要致腐真菌的抑制作用

从低温贮藏的腐烂龙眼果实中分离主要致腐真菌,并以丁香、甘草、花椒和高良姜4种常见药食两用植物为试验材料,对主要致腐真菌进行体外抑菌试验,从中筛选抑菌效果较好的植物提取物及有效的提取方法,然后用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果表明：低温条件下龙眼的致腐真菌主要是龙眼拟茎点霉菌,丁香提取物对该菌抑制效果最好;而且在室温下,用75%乙醇震荡提取48 h所得丁香提取物抑菌效果最佳;丁香提取液的最小抑菌浓度为6.25 mg·mL-1,最小杀菌浓度为12.50 mg·mL-1。