恒河猴卡耶哈岛一氧化氮合酶阳性神经元形态学观察

目的:研究恒河猴卡耶哈岛一氧化氮合酶阳性神经元的分布。方法:用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶(NADPH-d)组织化学和免疫组织化学法。结果:卡耶哈岛各部均分布有NADPH-d组化和nNOS免疫组化反应呈阳性的NOS神经元,胞体呈锥体形和卵圆形,突起阳性,中等大小,胞体直径13.6μm。结论:恒河猴卡耶哈岛内分布有形态和大小较一致的一氧化氮合酶阳性神经元。     

神经型一氧化氮合酶在大菱鲆脑组织中的分布及定位

[目的]探明神经型一氧化氮合酶(nNOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(N0)的生理功能提供形态学资料.[方法]分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的nNOS进行定位研究.[结果]NADPH-d组织化学染色结果显示,大菱鲆大脑皮质中有蓝色的神经元和神经纤维存在.神经元呈梭形、锥形等形状,神经纤维呈串珠状且无序交织;小脑中NOS阳性神经元在分子层分布稀疏,在颗粒层分布密集,浦肯野细胞胞核淡染.经免疫组织化学法染色后,可观察到大脑皮质中nNOS免疫组化反应阳性物质呈深棕色;小脑皮质的分子层、颗粒层及浦肯野细胞层均有nNOS阳性神经元分布,浦肯野细胞呈免疫组织化学阳性反应.[结论]大菱鲆脑组织中的NOS类型主要限于nNOS,且nNOS在神经活动中发挥重要作用,也进一步证实N0在不同物种中具有一些共同的作用,但不同物种或相同物种不同组织中NO分布及含量存在差异.     

兔脑nNOS阳性神经元的形态、结构和分布规律

利用SABC免疫组织化学方法，对兔脑神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的形态、结构及分布规律进行了系统研究，结果表明：① nNOS阳性神经元呈深棕色，着色主要在胞质内，细胞核处较为浅淡；神经元胞体形态多种多样，有三角形、圆形、椭圆形、梭形等，神经元突起有一个或者数个；nNOS阳性神经纤维大多呈棕色串珠样，有些区域的阳性纤维交错分布，相互交织成网状。②家兔的各个脑区均有nNOS阳性神经元和神经纤维出现,其中在大脑皮质、小脑、丘脑下部、中脑和脑桥广泛分布，延髓分布极少。③nNOS阳性神经元，在仔兔时就已基本发育到成年兔水平，以后随着年龄增长逐渐发育成熟至衰老，到2岁龄（老年兔）时就出现了显著的衰老变化，即密度减小，表达强度减弱，第一级突起数减少，最长突起长度变短等。结果提示：nNOS阳性神经元及其催化产生的NO在家兔神经系统的发育和神经调控中起重要作用。     

点带石斑鱼脑组织和视网膜中神经型一氧化氮合成酶的分布与定位

【目的】研究点带石斑鱼脑组织和视网膜中的一氧化氮（NO）含量及神经型一氧化氮合成酶（nNOS）分布与活性,为深入揭示NO在点带石斑鱼神经系统中的作用机制打下基础。【方法】采用NADPH-d组织化学染色法、免疫组织化学法、蛋白免疫印迹（Western blotting）及Griess试剂法,对点带石斑鱼脑组织和视网膜中nNOS的分布与活性及NO含量进行分析。【结果】经NADPH-d组织化学染色后,一氧化氮合成酶（NOS）阳性物质呈蓝色。在点带石斑鱼大脑中,NOS阳性物质位于神经元和神经纤维;在小脑中,NOS分布在颗粒层的颗粒细胞、分子层的神经纤维和浦肯野细胞层的浦肯野细胞;在视网膜中,NOS分布于色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。经免疫组织化学染色后,nNOS阳性物质呈深棕色。在大脑中,nNOS存在于神经元和神经纤维;在小脑中,nNOS分布在颗粒层、分子层和浦肯野细胞层;在视网膜中,nNOS分布在色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。Western blotting检测结果显示,点带石斑鱼脑组织和视网膜中的nNOS在显色后的硝酸纤维素膜上均出现3条免疫印迹条带,对应分子量分别为80、120和130kD。NO含量在点带石斑鱼脑组织和视网膜中分别为17.601±1.743和13.624±1.249μmol/L,nNOS活性在脑组织和视网膜中分别为38.070±3.047和23.748±2.860U/mg。【结论】在点带石斑鱼脑组织和视网膜中均存在nNOS,推测nNOS在点带石斑鱼脑神经及视神经系统生理活动中发挥重要作用。脑组织中的NO含量和nNOS活性均显著高于视网膜,是由于脑组织作为重要的中枢神经,对机体生理功能起重要调节作用。     

应激大鼠视上核一氧化氮阳性神经元的变化及其针刺的影响

目的:观察应激致血压升高大鼠视上核一氧化氮合酶阳性神经元的变化及针刺足三里的影响,以探讨应激升压和针刺降压的中枢机制.方法:SD雄性大鼠,随机分为空白对照组、应激组和针刺组,每组30只.选用刺激脉冲随机变动的足底电击结合噪声刺激建立应激动物模型,对针刺组大鼠行疏密两种波针刺足三里.观察和比较各组大鼠下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性细胞的形态、分布并进行计数.结果:应激降低大鼠视上核一氧化氮阳性神经元数量,视上核内一氧化氮合酶阳性细胞数在针刺组明显高于应激组(P＜0.05).结论:应激使大鼠血压升高,视上核一氧化氮阳性神经元数量减少,针刺可能通过增加应激大鼠视上核一氧化氮阳性神经元数量而产生降压作用.     

一氧化氮信号通路关键酶在猪肌肉系统中的定位

以猪的整个肌肉系统为试验对象,采用常规免疫组化法,用神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的α1及β1亚基的多抗检测心肌、平滑肌和不同部位的骨骼肌(膈肌、背最长肌和腰大肌),以进行nNOS、sGCα1及sGCβ1在整个肌肉系统中的分布定位。结果发现:nNOS在各类型肌肉中均有表达,但分布状态因肌肉类型不同而有差异;除心肌不表达sGCα1外,其他肌肉组织均表达,并且表达部位相似;sGCβ1在3种类型肌肉中表达均呈阳性,表达定位与sGCα1极为相似。     

青年奶山羊下丘脑GnRH神经元的分布特点

为了探讨促性腺激素释放激素(gonadotrop in re leas ing horm one,G nRH)在青年奶山羊下丘脑的表达特点,采用灵敏度较高的免疫组化SP法研究了G nRH神经元在6~8月龄青年奶山羊下丘脑中的分布。结果表明,分泌G nRH的神经元主要分布在视上核、下丘脑前核、室旁核和弓状核,其次是视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、下丘脑外侧区、视上弥散核、腹内侧核、腹外侧核及乳头体各核团,前连合核、终纹床核、穹窿周核、环核、视前交叉上核和背内侧核分布较少。G nRH阳性神经元的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性神经元还具有明显的突起;圆形和三角形细胞直径为7~27μm,卵圆形和梭形细胞短轴和长轴分别为7~21和10~48μm;G nRH阳性神经纤维仅见于视前内侧核、视前外侧核、弓状核、乳头体后核、乳头体内侧核等核团,在正中隆起和第三脑室室周也可见中等数量的阳性纤维。结果提示,G nRH神经元在青年奶山羊下丘脑分布广泛。     

生殖系统的一氧化氮研究方法

一氧化氮(nitric oxide)是L—精氨酸在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化下产生的一种自由基,与NO同时生成的还有L—胍氨酸。NOS是在特定mRNA指导下由粗面内质网合成的一种蛋白质,包括神经元性NOS(neuronal nitric ox-ide synthase,nNOS)。诱导型NOS(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与内皮细胞     

一氧化氮研究方法评析

本文介绍目前国内外研究一氧化氮(NO)的主要方法,包括电子顺磁共振成像技术(EPR Imaging technique)、液内分光光度检测法、NADPH-d 组织化学法、一氧化氮合酶—Ⅰ(NOS-Ⅰ)免疫细胞化学法及 NOS-Ⅰ免疫荧光技术等。     

GnRH神经元在发情期奶山羊下丘脑中的免疫组化定位

为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)在发情期奶山羊下丘脑中的表达特点,采用超敏的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法研究GnRH免疫反应神经元在发情期山羊下丘脑中的分布。结果显示,GnRH免疫反应阳性细胞主要分布在视上核、视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、丘脑外侧区、室旁核后部、弓状核、腹外侧核、结节乳头体核、乳头体内侧核、乳头体外侧核等核团。阳性细胞的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性细胞还具有明显的突起。圆形和三角形细胞直径的大小为5~35μm,卵圆形和梭形细胞短轴和长轴大小分别为5~27μm、15~58μm。免疫反应阳性产物还分布于部分纤维束中,如视束、正中中隆起等。根据细胞中阳性反应的强弱可分为强阳性,如交叉上核;中等阳性,如乳头体内侧核;弱阳性,如前穹窿周核。上述研究结果表明,GnRH在成年奶山羊下丘脑广泛存在。     

Functional specialization in rhesus monkey auditory cortex

Neurons in the lateral belt areas of rhesus monkey auditory cortex prefer complex sounds to pure tones, but functional specializations of these multiple maps in the superior temporal region have not been determined. We tested the specificity of neurons in the lateral belt with species-specific communication calls presented at different azimuth positions. We found that neurons in the anterior belt are more selective for the type of call, whereas neurons in the caudal belt consistently show the greatest spatial selectivity. These results suggest that cortical processing of auditory spatial and pattern information is performed in specialized streams rather than one homogeneously distributed system.     

恒河猴胸腺的显微与超微结构观察

应用组织学、组织化学和透射电镜技术观察表明，恒河猴胸腺外包被膜，被膜结缔组织伸入其内部形成许多小隔，将胸腺实质分成许多小叶，小叶又由皮质和髓质组成，大部分的髓质彼此相连，被膜和小叶间隔内含有较多的肥大细胞。皮质主要由幼稚T细胞和皮皮细胞构成，另有少量的巨噬细胞和肥大细胞等；皮人还可见典型的血－胸腺屏障。髓质主要由成熟T细胞和上皮细胞组成，另有较多的肥大细胞和少量的巨噬细胞、交错突细胞、B淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞、肌样细胞以及一些胸腺小体和胸腺小囊。     

恒河猴免疫器官中肥大细胞的组织化学与电镜研究

应用甲苯胺蓝，阿尔辛蓝-藏红组化染色法和透射电镜观察表明，恒河猴胸腺，淋巴结和脾脏中的肥大细胞在形态，大小，染色特性和超微结构等方面存在异质性，胸腺实质和间质中的肥大细胞均为大小不一，形态多样，淋巴结和脾脏间质中的肥大细胞也为大小不一，形态多样；但其实质中的肥大细胞多呈小圆形，这些器官中的肥大细胞，甲苯胺蓝染色均表现出异染性；但阿尔辛蓝-藏红染色绝大多数呈蓝色（阿尔辛蓝阳性），偶见呈红色（藏红阳性）或红蓝混合色的（双阳性），电镜下，细胞表面光滑或有少许突起，胞质内含较丰富的细胞器，以及均质状高电子密度和中等电子密度的分泌颗粒。     

中国水牛肾上腺光镜和电镜观察

对成年的湖南滨湖水牛肾上腺光镜和电镜观察结果表明，肾上腺外面被覆一层较厚的被膜，内分皮质部和髓质部．四周为皮质部，呈深黄色，约占肾上腺７０％，中央为髓质部，呈灰白色，约占肾上腺３０％．Ｈ－Ｅ染色法将皮质部分为３个小区，即球状区，束状区和网状区．球状区薄，细胞染色较深；束状区厚，胞质呈蜂窝状，细胞染色浅；网状区细胞与髓质交界参差不齐，胞核呈退化变性现象，染色较深．髓质部比皮质部染色浅，常分为外区和内区．外区细胞大，呈高柱状，主要由肾上腺素细胞组成；内区细胞较小，呈立方或多边形，由去甲肾上腺素细胞和肾上腺素细胞组成，去甲肾上腺素细胞分散于肾上腺素细胞之间．髓质部还有少数分散的大型交感神经节细胞，且内区比外区多．     

食蟹猴-猪异种体细胞核移植胚胎的构建

[目的]探索食蟹猴—猪异种核移植胚胎的发育能力,为食蟹猴异种核移植胚胎干细胞的构建奠定基础.[方法]以食蟹猴和猪胎儿的耳部成纤维细胞为供体,猪MⅡ期去核卵母细胞为受体,构建异种核移植重构胚,并从核移植融合/激活方式、培养液两个方面进行优化.[结果]70枚食蟹猴—猪异种核移植胚胎中,有49枚分裂（70.0％）,与猪同种核移植胚胎的分裂率（76.6％）无显著差异;使用微卫星引物D15S823对食蟹猴—猪异种核移植胚胎进行遗传学鉴定,均能扩增获得D15S823条带（350 bp）;食蟹猴—猪异种核移植胚胎融合后1h的染色体早熟凝集率（24.2％）显著低于猪同种核移植胚胎（44.7％）和猪孤雌激活胚胎（100.0％）,通过使用无Ca2＋融合液能够显著提高染色体早熟凝集率（48.2％）;在PZM-3、HECM-10和HECM-10＋10％ FBS 3种培养液中,食蟹猴—猪异种核移植胚胎的分裂率无显著差异.[结论]食蟹猴体细胞核能够在猪MⅡ期去核卵母细胞胞质中发生核重塑,并发育到8-细胞阶段.     

Brain lesions in an infant rhesus monkey treated with monsodium glutamate

In an infant rhesus monkey brain damage resulted from subcutaneously administered monosodium glutamate. Although a relatively high dose of monosodium glutamate was used, the infant was asymptomatic for a 3-hour observation period during which time hypothalamic neurons were undergoing a process of acute cell death. With the electron microscope it was observed that dendrites and cell bodies of neurons are the tissue components primarily affected in brain damage induced by monosodium glutamate.     

Neurons containing NADPH-diaphorase are selectively resistant to quinolinate toxicity

Exposure of cultures of cortical cells from mouse to either of the endogenous excitatory neurotoxins quinolinate or glutamate resulted in widespread neuronal destruction; but only in the cultures exposed to quinolinate, an N-methyl-D-aspartate agonist, was there a striking preservation of the subpopulation of neurons containing the enzyme nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase (NADPH-d). Further investigation revealed that neurons containing NADPH-d were also resistant to the toxicity of N-methyl-D-aspartate itself but were selectively vulnerable to the toxicity of either kainate or quisqualate. Thus, neurons containing NADPH-d may have an unusual distribution of receptors for excitatory amino acids, with a relative lack of N-methyl-D-aspartate receptors and a relative preponderance of kainate or quisqualate receptors. Since selective sparing of neurons containing NADPH-d is a hallmark of Huntington's disease, the results support the hypothesis that the disease may be caused by excess exposure to quinolinate or some other endogenous N-methyl-D-aspartate agonist.