白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

不同基因型黄瓜离体再生及其影响因素的研究

以6个黄瓜(Cucumissativus L.)自交系为试验材料,研究不同的基因型、外植体类型和激素组合等因素对黄瓜离体植株再生的影响。结果表明,不同基因型黄瓜材料的再生能力差别较大;带柄子叶比下胚轴和不带柄子叶的再生率高,是比较理想的外植体材料;较低的6-BA/IAA配比促进黄瓜不定芽的分化;6-BA/IAA配比较高则适合再生芽的伸长;添加0.5mg/LAgNO3可以促进不定芽发生,5～6d苗龄的外植体分化再生频率较高;在供试的6个试验材料中,M8,M10的再生频率较强,分别达到96%和90%。高频率不定芽诱导分化培养基为:MS+IAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L+AgNO30.5mg/L;不定芽伸长的培养基为MS+IAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30.5mg/L;高效生根诱导培养基为MS+IAA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。     

榨菜子叶和带柄子叶再生植株的研究

以榨菜子叶及带柄子叶等为外植体,在添加不同激素的MS培养基上,经不定芽诱导,不定芽伸长,生根等步骤,获得了完整的再生植株.结果表明:4 d苗龄的子叶再生能力最强,带柄子叶的最佳苗龄为5～6 d.子叶和带柄子叶分别在MS BA 2 mg/L NAA 0.4 mg/L AgNO3 5 mg/L和MS BA 2 mg/L NAA 0.2 mg/L AgNO3 5 mg/L的培养基中不定芽分化的效果较好.不同基因型间对子叶外植体的再生影响不大,但对带柄子叶的再生影响较明显.     

京彩甜椒离体培养及植株再生的研究

利用甜椒的下胚轴、子叶、带柄子叶的外植体诱导分化和植株再生。结果表明：带柄子叶的分化能力最强，6-9d苗龄的带柄子叶在MS 5.0mg/L6-BA 0.5-1.0mg/L IAA 4.0mg/L AgNO3培养基上，分化频率最高可达100%。并形成大量的不定芽（1个外植体可产生15-20个以上的芽），幼苗在MS 0.2mg/L IAA培养基上能正常生根，长成健壮的再生植物。     

玫瑰叶片直接再生及其影响因素

以‘唐白’、‘紫枝’、‘唐红’和‘朱龙游空’4个玫瑰品种为试材研究不同的外植体、暗培养时间和激素组合对玫瑰不定芽直接诱导和植株再生的影响。结果表明:4个玫瑰品种在不定芽诱导培养基上黑暗培养10~15d转入光照培养15~20d,而后转入含有0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的MS培养基光下培养,再生效果最好;不同外植体间存在显著差异,未展开小叶的再生能力最好;不同基因型之间存在显著差异,‘唐白’在添加1.0mg/L TDZ、0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,达到70.6%;‘紫枝’和‘唐红’在添加1.5mg/L TDZ、0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,分别为47.9%和36.5%;‘朱龙游空’在添加1.0mg/L BA、0.3mg/L TDZ和0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,达到60%。黑暗培养对不定芽分化有一定的促进作用,但不利于不定芽再生,‘唐白’、‘紫枝’和‘朱龙游空’的最佳暗培养时间为10d,而‘唐红’的最佳暗培养时间为15d。另外,4个玫瑰品种在添加有IBA 0.5mg/L的1/2MS培养基上生根率最高。     

大白菜“早熟5号”不定芽再生体系的优化

选用大白菜品种“早熟5号”为材料,分析了外植体、苗龄、AgN03和植物激素对其不定芽再生的影响.结果表明:不同外植体类型中,采用4～5d苗龄的带柄子叶为外植体再生频率最高,添加AgN03后在3～7 mg/L的浓度范围内外植体分化率大幅度提升,分化率最高达到78.33％,带柄子叶于MS+6- BA 5 mg/L+ NAA 1 mg/L+ AgNO33 mg/L培养基上不定芽分化率最高,达到86.41％.     

低频再生黄瓜离体培养体系的优化

【目的】优化低频再生黄瓜离体培养体系,为黄瓜遗传转化体系的进一步完善奠定基础。【方法】以低频再生黄瓜种质Q24和L66为材料,分别以黄瓜的子叶、子叶节和下胚轴为外植体,研究外植体类型对黄瓜再生频率的影响;在MS培养基中添加不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和脱落酸(ABA),研究激素配比对黄瓜再生频率的影响;将获得的黄瓜子叶节外植体置于1/2 MS培养基上预培养0,1,2,3和4 d,研究预培养处理对黄瓜再生频率的影响。【结果】不同基因型黄瓜再生频率差异显著,其中Q24整体上具有相对较高的再生频率,其子叶节再生频率为54.8%,下胚轴再生频率为50.0%;L66的再生频率相对较低,其子叶节再生频率为36.9%,下胚轴再生频率为16.7%。激素配比显著影响黄瓜子叶节外植体的再生频率,其中1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对Q24子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到60.7%;2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对L66子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到42.9%。预培养处理可显著提高L66子叶节的再生频率,经过1～3 d预培养,其再生频率逐渐增加并达到最高(32.1%),4 d后再生频率开始降低;Q24子叶节经3 d预培养再生频率达到最高,为27.4%,但与对照相比差异不显著。【结论】Q24子叶节外植体最适激素配比为1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后其再生频率可达60.7%;L66子叶节外植体最适激素配比为2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后再生频率可达42.9%。     

芥蓝高频离体再生体系的建立

以'尖叶芥蓝'、'中花粗心芥蓝'和'迟花芥蓝'3个品种为材料,研究苯基噻二唑脲(TDZ)预处理、不同激素配比、基因型和外植体类型对不定芽再生的影响,建立芥蓝离体高频再生体系.结果表明:3个品种中,'中花粗心芥蓝'再生能力最强;不同外植体类型中再生率由大到小依次为:下胚轴、带柄子叶、子叶块;不定芽再生的最佳激素组合为0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA;以此激素组合为基础,下胚轴经0.5 mg·L-1TDZ浸泡30 min预处理接种在分化培养基(MS+0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA+8 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖)上不定芽再生率最高,达98.5%.     

甜瓜自交系离体子叶节再生体系的建立

以4个不同甜瓜自交系为试材,研究基因型,激素(6-BA、IAA)组合、浓度对甜瓜离体子叶节再生的影响。结果表明:不同基因型甜瓜之间的再生频率差异较大,CM-15甜瓜自交系为最佳基因型,在培养基M8(MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA)上再生频率最高,达96.7%,平均每个外植体再生芽数为4;6-BA是甜瓜子叶节再生的必要激素,而IAA是促进子叶节高效再生的激素;MS培养基中添加0.05 mg/L 6-BA能显著促进再生不定芽的伸长。     

大白菜组织培养与植株再生研究

以大白菜3个结球类型的不同品种（自交系）为试材,研究了不同基因型、不同外植体及不同培养基附加成分对植株再生的影响。结果表明：大白菜不同基因型间不定芽分化率有明显差异,以叠抱类型的“秋白19号”和合抱类型的“福山包头”再生率较高,直筒类型大白菜不定芽分化率低;带柄子叶是离体培养较理想的外植体,分化培养的最佳培养基为Ms＋6-BA2mg／L＋NAA0．5mg／L＋AgNO3 4mg／L＋ABA0．3mg／L＋蔗糖3．0％＋琼脂1．0％。建立了大白菜带柄子叶的高频再生系统,从接种到获得再生植株只需55—60d。     

激素TDZ对促进白菜下胚轴不定芽再生的效应分析

以华阳三号(HY)大白菜和苏州青(SZQ)小白菜下胚轴为外植体，MS为基本培养基，将TDZ与NAA配置不同激素浓度组合，观察TDZ对下胚轴不定芽再生的影响，并对各组合的培养效果进行了比较。结果表明，TDZ能较好地促进大白菜下胚轴不定芽再生，在MS 0．5mg／LTDZ 0．5mg／L NAA的培养条件下，HY的不定芽再生频率达到45％，且再生周期短，芽点多，再生芽正常，可以满足植物遗传转化需要。TDZ很难诱导SZQ小白菜下胚轴不定芽再生，只能诱导产生大量愈伤组织。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。     

Tissue Culture System for Different Hybrid of Indica Rice

The effect of varieties and media compositions on callus induction from rice anther and subsequent plant regeneration was studied. The results showed that the callus induction was not significantly different in different media, but mostly depended on genotypes; mean frequency of callus induction on F1 hybrid varieties showed that the medium supplemented with 100 mg · L-1 concentration of the proline was useful for callus induction; when the anther derived callus sub-cultured on MS medium supplemented with B...     

北海道黄杨下胚轴的离体培养及植株再生

 以北海道黄杨(Euonymus japonicus 'Cu zhi')下胚轴为外植体进行离体培养，以MS和B5为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素（6-BA，KT）及生长素（NAA，IBA）诱导下胚轴直接再生不定芽。结果表明，不定芽未经过愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞；不同的激素浓度和组合以及不同的培养基对不定芽的分化有影响；下胚轴的不同部位不定芽的分化能力差异显著。适宜不定芽分化的最佳培养体系为MS+1.5 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1NAA，最佳外植体为靠近子叶端的下胚轴部分，其分化率最高达63.64%；不定芽增殖培养基为MS+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA，增殖系数为3～5；1/2MS+1.0 mg·L-1IBA+100 mg·L-1活性炭适于再生幼苗的生根，生根苗经移栽成活。     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用 9 个辣椒品种(Capsicum annuum L.)的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上,对苗龄、基因型、不同外植体、激素组合和 AgNO3等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明,苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响;AgNO3的加入可使芽分化率平均提高 20 %～30 %,并缩短外植体再生时间;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率的提高。通过结果比较,筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为 MB5+5 mg/L、6-BA+0.5 mg/L、IAA+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;芽伸长培养基为 MB5+3 mg/L、6-BA+1 mg/L、IAA+2 mg/L、GA3+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;生根培养基为 1/2 MS+0.2 mg/L、IAA+0.1 mg/L NAA。     

Plant Regeneration from In Vitro Cultured Hypocotyl Explants of Euonymus japonicus Cu zhi

Adventitious shoots were successfully regenerated from hypocotyl explants of in vitro cultures of Euonymus japonicus Cu zhi. Hypocotyl slices were cultured on Murashige and Skoog （MS） and B5 basal medium supplemented with varied concentration of different plant growth-regulators, e.g., α-naphthaleneacetic acid （NAA） and indole-3-butyric acid （IBA） in combination with 6-benzylaminopurine （6-BA） and kinetin. The study showed that shoots could be directly regenerated from hypocotyl explants without the intervening callus phase; MS medium was more suitable for adventitious shoots regeneration. The ability of hypocotyls segments to produce shoots varied depending upon their position on the seedlings. The highest regeneration rate was obtained with hypocotyl segments near to the cotyledon cultured on MS basal medium supplemented with 1.5 mg L^-1 6-BA and 0.05 mg L^-1 NAA （63.64%）. The regenerated shoots were readily elongated on the same medium as used for multiplication and rooted on half-strength MS basal medium supplemented with 1.0 mg L^-1 IBA and 100 mg L^-1 activated carbon. After being transferred to greenhouse conditions, 96% of the plantlets were successfully acclimatized. This regeneration system is applied for genetic transformation now.     

新疆甘蓝型油菜下胚轴的组织培养和植株再生研究

以新疆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)1khp11品系下胚轴为外植体,不同浓度6-BA与NAA激素组合的分化培养基诱导芽苗的分化,研究发现下胚轴在不同激素及浓度的6-BA与NAA组合中再生频率、分化率存在显著差异.通过种子实生无菌苗苗龄、诱导分化,4-D的预培养、添加AgNO3等因素的系统分析:五日无菌种子实生苗的下胚轴通过3d短时间的预培养,在最适分化培养基MS0+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+3.5mg/LAgNO3中,再生频率和分化率分别为35;和122.5;,初步建立了甘蓝型油菜1khp11品系下胚轴的高频率再生植株体系,为开展优良性状甘蓝型油菜的生物技术育种工作提供了条件保证.     

茄子组织培养再生体系研究初报

以茄子的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素组合对外植体分化的影响,建立茄子下胚轴高效再生体系,并初步探讨了温度对植株再分化的影响.结果表明:下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS NAA 0.2 mg/L 6-BA 2.5 mg/L,芽诱导率为46%;子叶不定芽诱导的最适培养基为MS NAA 0.2 mg/L KT 2.0 mg/L,芽诱导率为37%.     

大白菜高效稳定遗传转化体系的建立

以无菌苗下胚轴为外植体,建立了大白菜高效、稳定再生和遗传转化体系,获得了转基因抗性芽。结果表明,转化效率最高的基因型为Seoul,最佳筛选培养基为MS＋2mg／L6-BA＋1mg／LNAA＋2mg／LAgN03＋300mg／L Car＋10mg／LHyg,共培养基pH5．2,完全黑暗培养,侵染液浓度OD600=0．5,侵染时间为10min,在此条件下转化效果最好。GUS染色结果表明,GUS基因已整合到抗性芽细胞的染色体中,能够稳定表达。     

紫花苜蓿两种再生体系的优化及比较

紫花苜蓿高频再生体系的建立有助于促进其遗传转化的研究。以陇东、阿尔冈金以及甘农4号紫花苜蓿为实验材料,比较了体细胞胚胎和丛生芽再生途径对于紫花苜蓿再生周期及频率的影响。并通过利用不同外植体、不同植物生长调节剂配比,以实现对这两种再生途径的进一步优化。实验结果表明：在三个苜蓿品种中,甘农4号的再生效果较好,下胚轴的再生频率较高,在愈伤诱导阶段添加2 mg/L 2,4-D、1 mg/L KT,胚状体诱导阶段添加1 mg/L KT、0.5 mg/L NAA可以达到较好的再生效果;在培养基中添加1 mg/L 6-BA、1 mg/L TDZ,则直接诱导丛生芽的效果最好;对比发现,丛生芽再生途径显示出较强的优越性,其再生时间仅10周,是紫花苜蓿再生体系建立的一种可选方式。