乙醇对右旋糖酐酶酶解作用的影响

现有的右旋糖酐原料药生产工艺中，用乙醇沉淀法将右旋糖酐发酵液中的高分子右旋糖酐分离为粗酐，不经干燥直接溶解为右旋糖酐溶液，盐酸水解分离纯化为药用右旋糖酐，水解液中有乙醇残留。因此用右旋糖酐酶替代盐酸水解右旋糖酐时，必须考虑乙醇对右旋糖酐酶作用的影响。进行了乙醇对右旋糖酐酶酶解反应、稳定性及右旋糖酐酶解的影响的研究。结果表明，在一定条件下，右旋糖酐溶液中乙醇含量30.0%以下对右旋糖酐酶酶解反应本身无影响。低温（4℃）条件下，右旋糖酐酶在30%以下的乙醇溶液中相对稳定。在热的乙醇溶液（50℃）中造成酶蛋白凝聚变性而失活，乙醇浓度越大，这种现象越严重，不同的乙醇浓度，右旋糖酐酶活力损失不同。乙醇对右旋糖酐酶解的影响因乙醇浓度的不同而不同，5.0%以下影响较小，7.5%～15.0%影响在同一水平，17.5%以上影响加剧，但是乙醇对右旋糖酐酶解的影响是可控的。     

右旋糖酐酶解条件研究

高分子右旋糖酐经过水解、分离、纯化制备药用右旋糖酐产品,用右旋糖酐酶代替盐酸水解右旋糖酐,需要对右旋糖酐酶解条件进行研究。结果表明,右旋糖酐酶解条件为,粗酐6%,酶浓度0,1 IU·mL~(-1),温度45～55℃,pH4.6～5.4,时间2.5 h;右旋糖酐酶解制备右旋糖酐40,重均分子量35 000以上,10%小分子大于7 000,10%大分子小于12 000,重均分子量和10%小分子均已达到BP2012(EPS)标准,大大提升了了产品质量,产品收率最高可达35%。     

右旋糖酐水解条件研究

高分子右旋糖酐水解制取右旋糖酐40,从右旋糖酐的粗酐干品、发酵液和粗酐溶液出发进行水解条件研究。结果表明,右旋糖酐粗酐干品的水解条件为,粗酐6%,盐酸0. 10%,温度95～100℃,时间2. 5 h;右旋糖酐发酵液的水解条件为,粗酐6%～8%,盐酸0. 16%,温度95～100℃,时间3. 0 h;右旋糖酐粗酐溶液的水解条件为,粗酐6%～8%,盐酸0. 09%,温度95～100℃,时间2. 5 h。三种粗酐中右旋糖酐的品质不同而产生三种不同的水解条件。     

乙醇沉淀法提取柚皮果胶的工艺研究

[目的]优化乙醇沉淀法提取柚皮果胶的工艺。[方法]采用乙醇沉淀法提取柚皮果胶,探讨柚皮提取液浓缩程度、沉淀用乙醇的浓度和用量、沉淀时间、洗涤用乙醇的浓度和用量、洗涤次数对果胶沉淀得率及产率的影响。[结果]当柚皮浓缩液与原提取液体积比为2∶5时,果胶沉淀得率为75.56%,且产品的表观品质较好。沉淀用乙醇与柚皮提取液体积比以1∶2较合适,沉淀用乙醇浓度取80%。混合体系中果胶浓度为3.678 mg/ml,乙醇与水的体积百分含量分别为44.4%和55.6%。当沉淀时间为30 min时,果胶沉淀得率达98.55%。沉淀粗果胶洗涤1次即可,洗涤用乙醇浓度选40%,洗涤用乙醇与柚皮提取液体积比为1∶5。[结论]在该研究确定的工艺条件下,乙醇沉淀法提取的柚皮果胶的品质较好。     

芦笋茎叶多糖的提取纯化研究

以多糖得率、多糖纯度为指标,对芦笋茎叶多糖提取工艺中料液比、温度、乙醇浓度、沉淀时间等影响因素进行了试验分析,确定芦笋茎叶粗多糖提取的最佳条件为:料液比为1∶20;提取温度为90℃;提取时间为2h;沉淀乙醇浓度为80%;沉淀时间8h。并确定了sevag脱蛋白、多次醇沉的纯化工艺。     

蚕蛹蛋白与大豆分离蛋白酶解比较研究

利用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶及中性蛋白酶水解蚕蛹蛋白及大豆分离蛋白,结果表明不同酶水解得到的水解液其氨基酸含量和构成有较大差别,对中性蛋白酶而言蚕蛹蛋白较大豆分离蛋白更易水解,适宜温度为５０℃,底物浓度为２０％￣３０％,且分次加酶比一次加酶效果更佳。     

灵芝多糖提取纯化及抗氧化研究

采用Sevag法和HCl法研究了灵芝多糖纯化过程中的去蛋白方法,通过不同体积分数乙醇分级醇沉多糖的沉淀量探索了不同来源灵芝多糖的抗氧化性。结果表明,Sevag法和HCl法都可除去灵芝多糖提取液中的杂蛋白,但两种方法的去蛋白效果和多糖损失率差异明显。Sevag法的蛋白去除率(82.41%)高于HCl法(41.60%);同时其多糖损失率(36.03%)也比HCl法(14.41%)大;乙醇分级沉淀灵芝多糖研究表明,40%、65%和80%乙醇沉淀灵芝多糖量比例为0.41∶0.42∶0.17;多糖浓度与清除羟基自由基和超氧阴离子的能力呈正相关,且分级沉淀的多糖在等浓度条件下其抗氧化性也显示出明显差异,总的清除能力为80%乙醇40%乙醇65%乙醇。     

菊芋中菊糖的提取分离研究

[目的]研究菊芋中菊糖的提取分离方法。[方法]菊芋经预处理后粉碎,得到粗菊粉,粗菊粉浸提后,经石灰乳除杂、Sevag法脱蛋白、活性炭脱色、乙醇沉淀等过程进行纯化得到菊糖,测定了总糖、还原糖的含量。[结果]TS4厂家生产的粉末状活性炭对粗菊粉浸提液的脱色效果最好。经纯化处理后,利用热水浸提法得到的菊芋菊糖粗提取液,清澈透明。纯化液经浓缩、乙醇沉淀后,得到黄色的精制菊糖,菊糖的含量为20.23%,纯度为92.60%。[结论]菊芋中菊糖的最佳提取方法为采用热水浸提法,即以固液比1∶15,80℃,浸提90min;再通过石灰乳除杂、Sevag法脱蛋白、活性炭脱色、乙醇沉淀等过程对粗提取液进行纯化。     

枯草芽孢杆菌WHNB 02植酸酶的酶学性质研究

从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WHNB 02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31.5倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的分子量约为43 KD,以植酸钠为底物的Km值为0.5 mmol/L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10 min酶活保存61%,最适pH为7.0,在pH 6.0～10.0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca2+存在.ED-TA,Mn2+,Ba2+(5 mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用.     

DFRKN-1碱性磷酸酶的提取纯化和主要理化性质研究

[目的]提取纯化根结线虫天敌真菌-1(Destroying fungi of root-knot nematode-1,DFRKN-1)的碱性磷酸酶,并对其主要理化性质进行研究。[方法]以DFRKN-1为提酶材料,经正丁醇提取,硫酸铵分级沉淀分离,透析获得酶的粗提取液,用SephadexG-150凝胶过滤柱层析纯化,获得纯化碱性磷酸酶,并测定纯化碱性磷酸酶的理化性质。[结果]酶纯度达到电泳纯,提纯倍数达到15.7倍,比活力达5333 U/mg;该酶的最适pH值为8.9,最适温度为43℃,米氏常数为6.82 mmol/L;K+、Ba2+、Mg2+对该碱性磷酸酶的活性均有激活作用,甲醛、草酸、酒石酸对该碱性磷酸酶均有抑制作用。[结论]试验结果可为进一步深入研究DFRKN-1提供参考。     

油茶炭疽病拮抗放线菌CF17发酵液的抑菌活性及活性成分的分离纯化

采用十字交叉法测定CF17发酵液的抑菌谱,并通过离心、旋转蒸发浓缩、丙酮沉淀、固相萃取以及半制备高效液相色谱法对抑菌物质进行分离纯化和鉴定.结果表明,CF17发酵液对油茶炭疽病、油茶叶枯病、油茶软腐病、杉木炭疽病、核桃壳梭孢、降香黄檀炭疽病、檀香炭疽病等的病原菌均有抑菌效果.50%丙酮分离纯化效果优于乙醇沉淀法与乙酸乙酯沉淀法;在固相萃取中,活性物质主要集中在60%乙腈梯度洗柱样品中,最后经HPLC分离收集到一个有明显抑菌圈的样品.经质谱鉴定抑菌成分为Tetramycin A.     

不同预处理方法对玉米秸秆酶解和乙醇发酵的影响

研究不同预处理方法对玉米秸秆酶解和乙醇发酵的影响。比较玉米秸秆经粉碎、汽爆和水热3种预处理后酶解液葡萄糖含量、酶解率、乙醇得率以及发酵液中抑制物乙酸、糠醛和羟甲基糠醛的含量,对不同预处理方法进行评价。结果表明:水热超细玉米秸秆能有效提高酶解率,在固液比2:10,酶解48h时,生成葡萄糖含量为60.6g.L-1,纤维素酶解率为63.13%,并且产生的乙酸、糠醛和羟甲基糠醛的含量很低;以此水解液发酵生产乙醇,乙醇含量为28.29g.L-1,乙醇得率为46.68%,为理论乙醇得率的91.5%。说明采用水热超细秸秆可有效提高纤维素酶解率和乙醇得率。     

膜生物反应器封闭循环系统中酿酒酵母连续发酵动力学研究

研究了酿酒酵母在封闭循环膜生物反应器中的连续发酵动力学特征。结果表明,当发酵液中乙醇浓度升高时,细胞比生长率,基质比消耗速率和细胞得率系数都呈下降趋势,当细胞得率减小时产物得率倾向于增加。基于细胞生长和基质消耗的不同的线性抑制动力学模型能较好的描述实验结果。拟合数据表明当乙醇浓度超过66 g/L时,细胞生长受到完全抑制,如果超过82 g/L,细胞不再进行代谢活动消耗基质,这与硅橡胶膜生物反应器内观察到的实验现象相似。在长时间封闭循环发酵系统内,细胞最大比生长速率仅为0.022 h^-1,这可能与长期发酵过程副产物累积对细胞的抑制有关,也说明一定时间后系统达到动态平衡状态。     

离子排阻色谱法快速测定益生菌发酵液中7种有机酸含量

运用离子排阻色谱法建立益生菌发酵液中主要有机酸的快速分离与检测方法。采用Aminex HPX-87H分析柱,选用3.5 mmol/L硫酸与乙腈混合液(体积比为99∶1)为流动相,在柱温50℃、流速0.6 m L/min及检测波长为210 nm条件下,对益生菌发酵产品中甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、正丁酸、琥珀酸及柠檬酸7种有机酸进行分离与检测。结果表明:7种有机酸在0.02~22.34 g/L内线性关系较好,回归方程的线性相关系数为0.999 82~0.999 99。利用干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)发酵液检测加标回收率为97.28%~107.33%,精密度为0.47%~2.07%(n=5)。利用该方法实现了对8株益生菌36 h发酵液中主要有机酸含量的快速分析比较。此法简单、快速、准确,适用于益生菌发酵液中主要有机酸的分离与检测。     

用大网格树脂从发酵液中吸附分离乙醇

选用大网格树脂作为吸附剂,研究了用吸附法从发酵液中分离乙醇,以降低乙醇生产的能耗．结果表明ＸＡＤ－４大网格树脂对乙醇有较好的选择吸附性,在乙醇浓度为１０．６％的乙醇发醇液中,其静态吸附量达１０８．３ｍｇ／ｇ;同时探讨了ＸＡＤ－４树脂的静态及动态吸附特性     

木质纤维素产乙醇分步及同步糖化发酵工艺研究

[目的]探究分步糖化发酵和同步糖化发酵工艺在最佳条件下产乙醇的效率。[方法]结合水解、发酵两阶段的最佳条件,设计了分步糖化发酵和同步糖化发酵过程;分步糖化发酵分别采用了水解和发酵过程的最佳条件,同步糖化发酵分别采用了两阶段的最佳温度。[结果]分步糖化发酵过程中,上清液发酵和混合液发酵产乙醇效果无明显差别,其中混合液发酵能更好地发挥酵母菌的活力;同步糖化发酵过程中,35℃条件下乙醇产量更高,其木糖产量高于纯水解过程中的木糖产量。[结论]在试验条件下,同步糖化发酵产乙醇效率高于分步糖化发酵。     

带鱼下脚料水解螯合物制备及其生物特性研究

通过对带鱼下脚料水解物亚铁螯合修饰及其功能性研究,为带鱼下脚料水解物的高效利用奠定理论基础。采用复合酶水解法和亚铁修饰法进行初步研究。未脱脂的带鱼下脚料水解螯合修饰的最适条件为蛋白质水解度为5％、螯合DH为7．0、螯合温度为20℃、螯合时间为15min;经无水乙醇沉淀可获得4种螯合组分,分别为：CA,螯合后产生的沉淀物组分;CB,沉淀于50％无水乙醇中的组分;CC,悬浮于80％无水乙醇中组分;CD,沉淀于80％无水乙醇底部组分。在这4种组分中,CB抗氧化活性最高,其抗氧化活性可达到a-生育酚活性的92％;CD抗菌性最强,它对大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及枯草芽胞杆菌都具有抗菌性。带鱼下脚料水解螫合可作为食品添加剂在食品工业中应用。     

菊芋替代玉米发酵生产乙醇的初步研究

对以果糖基能源植物——菊芋作为唯一碳源,发酵生产乙醇的可行性进行了探讨。结果显示,酿酒酵母BY4742可以良好地利用菊芋水解产物生长和代谢,生物量和乙醇产量和葡萄糖或果糖做底物时相比无明显差异。当底物浓度较高时,菌种对糖化菊芋汁中还原糖的利用率明显下降,但是乙醇产量没有下降,说明菊芋中含有的一些可溶性蛋白、氨基酸和矿物质有可能被菌种代谢利用转化成乙醇。另外,还从经济角度简单分析了菊芋替代玉米发酵生产乙醇的优势和不足。     

NH4^＋浓度对有机废水厌氧发酵产氢的影响

[目的]利用人工有机蔗糖废水通过厌氧发酵产氢气,考察水体中NH4＋浓度（0～8 000 mg/L）对厌氧发酵产氢的影响。[方法]分析废水中糖降解速率,比产氢率和产氢率。[结果]结果表明当NH4＋浓度在1 200～2 400 mg/L时,对微生物的厌氧发酵产氢是有利的,但当NH4＋浓度大于4 800 mg/L时,对厌氧发酵产氢有明显的抑制作用,其中对其发酵液相产物也有明显的影响。