DNA的酯酶催化活性研究

应用萘酯坚固蓝反应显色法对ＤＮＡ的酯酶催化活性进行了研究。结果表明，辣椒ＤＮＡ、鲱鱼精ＤＮＡ具有分解萘酯的活性；反应混合物中鲱鱼精ＤＮＡ浓度为０．００３４ｍｇ／ｍＬ时，ＤＮＡ仍有分解萘酯的活性；随着ＤＮＡ浓度增加，ＤＮＡ的催化活性增强。６种寡聚核苷酸均具有催化萘酯水解的能力，但活性强弱不同；４种ｄＮＴＰ均不能催化萘酯水解。双链ＤＮＡ、单链ＤＮＡ的显色反应完全来自ＤＮＡ的催化萘酯水解反应     

DNA的酯酶催化剂活性研究

应用萘酯坚固蓝反应显色法对ＤＮＡ的酯酶催化活性进行了研究。结果表明，辣椒ＤＮＡ、鲱鱼精ＤＮＡ具有分解萘酯的活性；反应混合物中鲱鱼精ＤＮＡ浓度为０．００３４ｍｇ／ｍＬ时，ＤＮＡ仍有分解萘酯的活性；随着ＤＮＡ浓度增加，ＤＮＡ的催化活性增强。６种寡聚核苷酸均具有催化萘酯水解的能力，但活性强弱不同；４种ｄＮＴＰ均不能催化萘酯水解。双链ＤＮＡ、单链ＤＮＡ的显色反应完全来处ＤＮＡ的催化萘酯水解反应。     

辣椒基因组DNA提取与RAPD分析

采用液氮－ＳＤＳ法、ＳＤＳ法和氯化苄法对辣椒的ＤＮＡ进行了提取。结果表明：液氮－ＳＤＳ法提取的ＤＮＡ具有典型的天然ＤＮＡ分子的标准紫外吸收光谱,其Ａ２６０／Ａ２８０在１．６０～１．７０之间,Ａ２６０／Ａ２３０在１．５～１．８之间,１００ｍｇ叶子ＤＮＡ产量为６０～９０μｇ。用该法提取的辣椒ＤＮＡ适于进行ＲＡＰＤ分析。ＳＤＳ法、氯化苄法不适于辣椒ＤＮＡ的提取。     

分子遗传标记及其在猪育种中的应用

概要地介绍了ＲＦＬＰ标记、小卫星ＤＮＡ标记、微卫星ＤＮＡ标记、随机扩增ＤＮＡ多态性标记以及其它ＤＮＡ多态性标记的研究及应用概况,并对遗传标记应用于猪的不同品系或品种的等位基因之组合、核心群内的标记辅助选择,以及其它在猪育种中新用途进行了综述,同时也对应用现状、前景作了分析。     

被子植物叶绿体基因及其表达

本文简要综述了叶绿体ＤＮＡ分子结构、叶绿体基因的功能及其表达产物。着重阐述了被子植物叶绿体ＤＮＡ与细胞质雄性不育的关系；借助ｃｐＤＮＡ限制性片段分析，许多学者认为由于ｃｐＤＮＡ分子的缺失、突变或插入，叶绿体ＤＮＡ可能涉及到ＣＭＳ的产生，为了得到ｃｐＤＮＡ在ＣＭＳ中起作用的肯定性结论和在分子水平上解释被子植物细胞质雄性不育的机理，作者提出了应该进一步采取的措施。     

DNA催化活性的研究：Ⅱ.DNA分子催化机理探讨

通过乙酸萘酯水解产物的显色反应，研究了ＤＮＡ分子二级结构对催化萘酯水解活性的重要性，结果表明：双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）分子具有良好催化乙酸－α－萘酯、乙酸－β－萘酯水解的活性，而单链ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）则完全不具备这种活性，ＤＮＡ完全酶解产物也不能使α－萘酯产生显色反应。因此认为，ＤＮＡ分子是具有催化活性的生物高分子。从ＤＮＡ二级结构角度探讨了其催化萘酯水解的反应机理。     

利用线粒体DNA(mtDNA)鉴别玉米各类不育胞质种子的研究

提取黑暗中培养的玉米雄性不育胞质材料Ｔ群、Ｃ群、Ｓ群、ＹⅡ－１型和正常可育胞质的黄化苗体内的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）,通过琼脂糖凝胶电泳分析未经酶切和酶切（限制性核酸内切酶分别为ｘｈｏＩ和ＢａｍＨＩ）的ｍｔＤＮＡ的电泳特性。发现：Ｔ群、Ｃ群、Ｓ群以及ＹⅡ－１型彼此ｍｔＤＮＡ组成上都存在差异。据此,可用ｍｔＤＮＡ鉴别玉米各类不育胞质种子。     

一种改进的高效高保真的PCR合成鸡球虫总cDNA方法

本研究改进了用ＰＣＲ合成ｃＤＮＡ的方法。先用具有长链合成能力的高效反转录酶合成第一链ｃＤＮＡ,用多种ＲＮＡ酶去除ＲＮＡ后,在第一链ｃＤＮＡ３’端用末商转移酶特异性加上多个ｄＧＴＰ,再用具高保真和长链合成能力的耐高温ＤＮＡ聚合酶ＰＣＲ扩增总ｃＤＮＡ。总ｃＤＮＡ长度分析试验结果表明本法合成的总ｃＤＮＡ质量高。     

鸡毒支原体DNA提取和纯化的研究

本文报道了鸡毒支原体ＤＮＡ提取和纯化过程。应用不同方法自鸡毒支原体培养物中共提取１０批鸡毒支原体ＤＮＡ。ＤＮＡ片段大小均一,在琼脂糖凝胶电泳中呈一条带,ＤＮＡ溶液的ＯＤ２６０／ＯＤ２８０接近１．８。用限制性核酸内场酶ＢａｍＨＩ切割,呈清晰的ＤＮＡ条带。     

一种改良的提取猫细小病毒基因重组质粒（pEH20）DNA方法

通过对碱变性和ＰＥＧ法提取纯化质粒ＤＮＡ的改进，成功地进行了ｐＥＨ２０ＤＮＡ的制备，得到了高纯度的质粒ＤＮＡ。改进的方法使碱变性法与ＰＥＧ法有机地衔接起来，具有经济、省时、简便、可靠的特点，可用于相关质粒ＤＮＡ的大量制备。     

DNA分子标记在植物上的应用进展

本文介绍了常用DNA分子标记在植物中的最新应用。大多数DNA分子标记应用于植物分子遗传图谱的构建、植物遗传多样性分析与种质鉴定、重要农艺性状基因定位与图位克隆、分子标记辅助育种等方面。也有少数分子标记有特殊的用途,并介绍了几种分子标记在植物中联合应用的例子。     

分子标记技术在疫霉菌上的应用

对分子标记在疫霉菌遗传多样性、抗性基因、分离菌株分子鉴定、基因定位克隆及DNA指纹图谱构建、亲缘关系分析、线粒体遗传等方面的应用进行了综述。     

槟榔基因组DNA的高效提取方法

以槟榔叶片为植物材料,采用改良的SDS-CTAB方法提取其基因组DNA。结果表明,以水饱和酚代替Tris饱和酚对样品进行抽提的SDS-CTAB法可以获得纯度高(OD260/OD280在1.7~1.9、OD260/OD230大于2)、一级结构完整、分子量大于23 kb的DNA,产率在50~120μg/g。该法所提DNA成功用于后续的分子生物学研究,并在花生、香蕉等植物上得到应用。     

DNA标准分子量参照物的制备

采用较简便的方法制备了1130～500bp的DNA标准分子量参照物（NAmarker）。经电泳检测,所制备的DNAmarker与商品化的DNAmarker质量相当,可用于分子生物学试验。     

天津海底淤泥微生物DNA的提取方法研究

[目的]探索一种快速、高效提取海底淤泥中微生物DNA的最佳方法,为开展海底淤泥微生物的分子生物学研究奠定基础。[方法]分析了不同DNA提取液浓度和不同的腐植酸去除方法对淤泥中微生物DNA提取的产率、纯度的影响,探讨天津市海底淤泥中微生物DNA提取的最佳方法。[结果]海底淤泥用焦磷酸钠和氢氧化钠混合浸提剂提取腐植酸后,再用蒸馏水洗去浸提液,用4 ml DNA提取液提取,所得DNA的产率及纯度均优于对照组。[结论]该试验结果为海底淤泥微生物的分子生物学研究奠定了基础。     

醋酸铵法提取卵形鲳鲹基因组DNA

建立了一种简便、安全、经济的提取卵形鲳鲹基因组DNA的方法,即醋酸铵法。该方法采用7.5mol·L~(-1)醋酸铵代替酚、氯仿,通过高盐-SDS去除蛋白和多糖,异丙醇在一定浓度醋酸铵存在条件下选择性沉淀DNA,而不沉淀蛋白,并通过酶切和AFLP验证该法抽提的DNA纯度。该法提取的DNA质量较高,无蛋白质和RNA污染,较酚/氯仿法和试剂盒法抽提得到量多,酶切和AFLP试验结果表明,提取的DNA可用于酶切分析和分子标记等试验。此法安全、简便、经济,该方法更适合于对大量样品的提取。     

DNA分子标记在月季中的应用

遗传标记的发展促进了植物遗传育种的研究,DNA分子标记是继形态标记、细胞学标记、生化标记之后发展起来的一种新的更为理想的遗传标记,它在月季遗传育种研究方面发挥了重要作用。DNA分子标记包括限制性片断长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片断长度多态性(AFLP)、简单重复序列(SSR)、单核苷酸多态性(SNP)等。对DNA分子标记的分类、原理、特点及其在月季亲缘关系分析、基因定位、品种鉴定和遗传图谱的构建等方面的研究进行概述。     

分子生物技术在蜜蜂育种研究上的应用

综述了应用微卫星 DNA技术、线粒体 DNA(mt DNA)技术、随机扩增多态性 DNA(RAPD)、聚合酶链式反应 (PCR)和 DNA指纹等分子生物技术所进行的蜜蜂育种研究现状 .其应用主要包括估计蜂群内亚家系(父系 )的组成数目和分析工蜂间的遗传相关 ,推断蜂王的多雄水平和鉴定蜜蜂种性 ,构建连锁图和区别数量性状位点 ,鉴定基因型和区别全胞、半胞姐妹以及分析精子受精力的倾向性等     

棉花DNA提取方法的优化及SSR标记在多态筛选的应用

对棉花DNA的提取方法进行了优化,通过改良方法所提取的棉花总DNA的质量得以提高.为了进一步证实改良的总DNA提取方法的效果,对所构建的抗黄萎病QTL定位群体的双亲进行了SSR-PCR检测,得到了清晰的多态性SSR标记,为研究分子标记在棉花育种的应用打下了基础.     

蓖麻DNA的提取方法综述

介于蓖麻叶片富合多糖、多酚等大分子物质,DNA的提取比较困难,文中总结性介绍了近年来提取蓖麻基因组DNA的几种主要方法：CTAB法、SDS法、磁性微球法、试剂盒法和酚一氯仿法等,并叙述了对现有的方法进行优化改进所取得的良好效果,为蓖麻的分子生物学研究提供参考。