废啤酒酵母中β-1,3-葡聚糖的提取及成分分析

在酵母β-1,3-葡聚糖现有3种提取工艺的基础上,提出了白溶一酚碱法提取废啤酒酵母中β-1,3-葡聚糖的工艺,并采用紫外光谱、红外光谱、气相色谱法研究了所获提取物的组成。结果表明,采用白溶-酶-碱法提取的多糖色泽乳白,得率高达10．8％,其多糖含量为87．7％、总氮含量为0．07%、水分含量为6．72％、灰分含量为1.05％。提取物纯度高,不含核酸和蛋白质,由葡萄糖通过β-糖苷键连接而成。     

Bacillus subtilis LC-9产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质与催化特性研究

[目的]系统研究Bacillus subtilis LC-9所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质,探讨其在催化应用上的可行性。[方法]采用两步阴离子交换层析法对B.subtilis LC-9发酵液中的β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行纯化,用SDS-PAGE检测其纯度,研究纯酶的酶学性质及该酶对β-葡聚糖和地衣多糖的降解特性,并采用TLC法检测其水解液中糖的成分。[结果]从自行筛选的糖苷酶产生菌B.subtilis LC-9的发酵液中经两步纯化,得到电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,其比活力达3 502 U/mg,表观分子量为28 kDa;酶的最适反应pH和温度分别为6.5和45℃,且在45℃下稳定;该酶催化地衣多糖的Km值和Vmax分别为4.13 mg/ml和1 238μmol/min/mg,催化大麦β-葡聚糖的Km值和Vmax分别为3.84 mg/ml和1 427μmol/min/mg;该酶降解大麦β-葡聚糖产生寡聚糖,最终产物主要为三糖和四糖,而降解地衣多糖终产物主要为三糖。[结论]从Bacillus subtilis LC-9发酵液中纯化获得了电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,性质研究表明该酶是专一性的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,有望用于啤酒、饲料等领域。     

不同提取方法对水龟虫多糖含量的影响

[目的]研究水龟虫多糖的提取条件。[方法]分别采用3种方法对水龟虫多糖进行了提取,采用苯酚-硫酸法进行多糖含量测定,对比不同提取方法中多糖的含量差异。[结果]热水浸提、碱提法和酶解法3种方法对水龟虫多糖提取所得多糖的含量分别为1.53%、2.61%、2.66%。[结论]通过试验确定了酶解法为水龟虫多糖的提取最佳方法。     

桑天牛内切β-1，4-葡聚糖酶活性分析及其基因CDs区的克隆与表达

[目的]研究陕南地区桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因,为构建高效分解纤维素的工程菌奠定基础,[方法]用质量分数为1%的羟甲基纤维素钠(CMC-Na)测定桑天牛幼虫内切β-1,4-葡聚糖酶活性,Trizol法提取桑天牛肠道总mRNA,扩增其内切β-1,4-葡聚糖酶基因,用DNAStar和NCBI上的BLAST进行序列分...     

啤酒废酵母蛋白的提取工艺研究

[目的]探讨啤酒废酵母中蛋白质的最佳提取方法及工艺条件。[方法]采用超声波法、冻融法、盐热法、碱热法4种提取方法。[结果]超声波法、冻融法、盐热法、碱热法在最佳工艺条件组合时,蛋白质提取率分别为3.47%、4.15%、5.66%、22.81%。啤酒废酵母蛋白质的提取以碱热法最佳,其最佳条件组合为：菌液比3∶10,氢氧化钠浓度1%,提取时间1 h,提取温度60℃。[结论]该研究为啤酒废酵母工业化大量提取提供了理论和试验依据。     

啤酒废酵母综合利用的研究

本文对利用啤酒废酵母联产高品质酵母抽提物和碱不溶性葡聚糖的工艺条件进行了研究,结果表明:采用外源双蛋白酶和核酸酶的方法,酵母抽提物中氨基氮的含量和5′—核苷酸的含量分别为5.31mg/mL和9.04 mg/mL,酵母抽提物风味醇厚,产率达到60.18%。采用碱法从制备抽提物后的酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖,通过正交试验确定出优化条件为:碱浓度1.00 mol/L,添加量6:1(v/w),作用温度90℃,作用时间5h。此优化条件下,制得的碱不溶性葡聚糖得率为9.70%,其中多糖含量为92.35%,蛋白质残留量为0.68%。     

天麻多糖的提取工艺及含量测定研究

[目的]对天麻多糖的提取工艺进行研究并测定其各组分中多糖、蛋白质和糖醛酸的含量。[方法]用正交试验对天麻多糖的提取工艺进行优选,然后采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法和考马斯亮兰法分别测定天麻多糖及其各组分中总糖、糖醛酸和蛋白质的含量。[结果]最佳提取工艺条件为A2B2C3,即:提取温度为70℃,提取时间为2.5 h,提取次数为3次;在此条件下,多糖提取率达13.15%。天麻多糖及其各组分中糖含量分别为65.8%、84.6%和87.3%,蛋白质含量分别为2.9%、0.28%和2.7%,糖醛酸含量分别为29.7%、26.3%和39.6%。[结论]该方法简便、快速、准确,灵敏度高,为天麻多糖生产的质量控制提供了依据。     

大麦β-葡聚糖的研究现状与展望

大麦β-葡聚糖是大麦籽粒细胞壁中的一种多糖,大麦中β-葡聚糖含量在2％～9％之间.在制麦芽和酿造啤酒过程中,β-葡聚糖含量过高,不能完全降解,会使麦汁黏度增加,降低啤酒品质.大麦在饲用过程中,β-葡聚糖含量过高,会降低营养吸收率,是抗营养因子.β-葡聚糖具有降低胆固醇、降血脂、调节血糖、提高免疫力等保健功能,可提取加工保健品.大麦β-葡聚糖含量受品种基因型和环境因素共同影响,我国西藏青稞β-葡聚糖含量在各栽培大麦中最高.大麦成熟期间,高温和干旱条件能促进大麦β-葡聚糖的合成.     

微波-超声波提取与常规法提取红芪多糖的比较研究

[目的]比较常规法和微波-超声波提取红芪多糖的差异。[方法]以红芪药材为试材,利用常规法和微波-超声波法提取红芪多糖,通过苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,比较两种提取方法的差异。[结果]两种提取方法得到的多糖含量差别较大,常规法得多糖含量为4.19%,微波-超声波法得多糖含量为8.98%。微波-超声波法提取红芪多糖有较大的优势:提取时间大大缩短,可避免红芪多糖的分解;所用仪器简单,操作方便。[结论]微波-超声波法提取中药成分的效率高于常规提取法。     

DPPH检测碱提香菇菌丝体多糖的抗氧化性能研究

[目的]探讨碱提香菇菌丝体粗多糖抗氧化能力的影响因素。[方法]按Sevag法去除粗多糖中蛋白质,以考马斯亮蓝法、苯酚-硫酸法和DPPH法分别测定碱提香菇菌丝体粗多糖在脱蛋白过程中多糖含量、蛋白含量和清除自由基能力的变化。[结果]碱提香菇菌丝体水溶性多糖经Sevag洗脱后,多糖含量降低了33.10%;蛋白含量降低了97.08%;自由基清除率降低了74.38%。[结论]碱提香菇菌丝体多糖具有较高的抗氧化能力,并与其糖蛋白浓度成正相关,过分脱除香菇菌丝体多糖提取物结合态蛋白会降低其抗氧化活性。     

苎麻纤维中β-葡聚糖酶活力测定条件的比较研究

[目的]为了获得苎麻纤维β-葡聚糖活力测定的最佳条件,比较苎麻纤维和饲料添加剂中β-葡聚糖酶测定方法的异同点。[方法]采用DNS法,对苎麻纤维中β-葡聚糖酶活性的测定条件进行比较研究。[结果]测定苎麻纤维中β-葡聚糖酶活力的最佳条件为:50℃条件下反应30 min后沸水浴10 min。[结论]该方法可以为苎麻纤维中β-葡聚糖酶的酶活力测定提供借鉴。     

大麦β-葡聚糖的制备研究

采用酶解的方法对大麦中β葡聚糖进行分离制备,β葡聚糖的提取率为2%。DNS法和考马斯亮蓝法检测提取品无还原糖和蛋白质。与标准的β葡聚糖进行比较,可作为底物对β葡聚糖酶活性测定。     

啤酒酵母泥中酵母多糖提取工艺研究

在酵母多糖现有3种提取工艺的基础上,提出了自溶—酶—碱法提取啤酒酵母泥中酵母多糖的工艺,结果表明:采用自溶—酶—碱法提取的多糖色泽乳白、得率高达12.3%,其多糖含量为92.72%、总氮含量为0.07%、水分含量为6.04%、灰分含量为1.24%。薄层层析表明,酵母多糖的主要成分为葡萄糖和甘露糖。     

不同提取方法研究甘青青兰中多糖含量

[目的]对比不同提取方法对甘青青兰中多糖含量的影响。[方法]采用不同提取方法提取甘青青兰中的多糖,用硫酸-苯酚法测定多糖的含量。[结果]利用超声提取得到的甘青青兰中多糖含量最高,为15.6%;其次是回流得到的多糖含量,为10.4%;最后是浸渍法所得的多糖,含量为4.2%。[结论]利用超声提取甘青青兰中的多糖,含量高于传统的浸渍法提取的量,为进一步研究甘青青兰的最佳提取工艺奠定了试验基础。     

β-葡聚糖在对虾养殖中的应用

β-葡聚糖广泛分布于微生物和植物体内,是构成生物细胞壁的主要材料。不同来源的β-葡聚糖的结构存在着许多差异[1],同时也使其表现出不同的生物学作用。在对虾养殖中应用的主要是从微生物提取的β-1,3和1,6葡聚糖。现结合β-葡聚糖的结构与活性、对虾的免疫机制等,探讨了β-葡聚糖在对虾养殖中的应用。1β-葡聚糖的结构β-葡聚糖结构的主链是β-1,3糖苷键和β-1,6糖苷键的结合物[2]。从微生物中提取的β-葡聚糖还具有侧链,从不同菌体中提取的β-葡聚糖的侧链虽然都是由β-葡聚糖的1个残基构成,但是因菌的种类不同而存在很大的分歧度,并且残…     

重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化及部分酶学性质研究

[目的]研究重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质。[方法]由重组大肠杆菌制备重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵液,经乙醇分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析分离纯化后进行SDS-PAGE纯度鉴定,最后分析纯化后重组酶的酶学性质。[结果]SDS-PAGE分析表明纯化后得到了较纯的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶,比活力达13 437 U/mg,纯化倍数为19.85倍,回收率为20.60%,分子量约30 kDa。纯化后重组酶的最适pH值为6.0,pH值4.5~6.0较稳定;最适温度为50℃,40~50℃较稳定;Cu2+和Fe2+对其活力有显著的抑制作用,Mg2+、Zn2+和Mn2+对其活力有抑制作用,比较适合在啤酒酿造上使用。[结论]该研究为重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的工业化应用奠定了基础。     

源于Paecilomyces sp. FLH30内切β-1,3(4)葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

[目的]β-1,3(4)-葡聚糖酶是一种重要的工业用酶,广泛地应用于饲料业、酿造业及纺织业.[方法]以来源于Paecilomyces sp.FLH30的葡聚糖酶基因为研究对象.据毕赤酵母GS115对密码子的简并性和偏爱性,对来源于淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)β-1,3(4)-葡聚糖酶基因进行了优化,通过全基因技术合成了全长基因GLUnm并构建重组酵母表达载体pPIC9K-GLUnm,用SacI线性化重组质粒pHC9K-GLUnn,电击转化至毕赤酵母GS115中进行表达.[结果]通过表型筛选,遗传霉素抗性筛选,经PCR鉴定表明,葡聚糖酶基因整合至酵母染色体DNA中.在试管中经甲醇诱导表达,并测定葡聚糖酶酶活性.在试管水平表达的酶活性是0.68 IU/mL,即可以认为在摇瓶表达水平的初始酶活性为0.68 IU/mL,将此菌株在摇瓶水平表达,酶活性在表达84h为最高,是11.26 IU/mL.[结论]重组β-1,3(4)-葡聚糖酶的最适pH为5.0,最适反应温度为50℃,在pH 5.0 ～8.0,温度37～50℃的条件下较稳定.     

猴头菌子实体与菌丝体粗多糖理化性质及抗胃粘膜细胞氧化活性比较

[目的]比较猴头菌子实体、菌丝体粗提物理化性质,以及2组粗多糖对胃粘膜上皮细胞氧化模型保护能力的差异。[方法]采用水提醇沉法提取粗多糖,用苯酚-浓硫酸法测定葡萄糖含量、间羟基联苯法测糖醛酸含量、BCA法测量蛋白质含量。每组分别加入一定浓度的含粗多糖的培养基,分别培养12、24、48 h后加入含过氧化氢培养基。用MTT法测细胞活度。[结果]猴头菌菌丝体、子实体粗多糖中葡萄糖含量分别为49.5%、44.5%,糖醛酸含量分别为22.01%、29.23%,蛋白质含量分别为27.69%、23.54%。菌丝体组12、24、48h抑制率分别为75.1%、68.1%、16.9%;子实体组分别为70.2%、61.8%、16.7%。[结论]猴头菌菌丝体与子实体粗多糖中糖醛酸、葡萄糖、蛋白质含量相近。子实体粗多糖比菌丝体粗多糖抗氧化活性短时间内略强,长时间无差异。     

不同提取方法测定桑叶黄酮和多糖的含量

[目的]通过不同提取方法测定桑叶中黄酮和多糖的含量,探讨最佳提取方法。[方法]分别采用超声波提取法、碱水提取法和煎煮法3种方法提取桑叶中多糖和黄酮,利用分光光度计法测定桑叶中多糖和黄酮的含量。[结果]超声波法测得黄酮含量最高,为1.702%;煎煮法测得多糖含量最高,为2.437%;碱水法测得黄酮和多糖均为3种方法最低的。[结论]利用不同提取方法,桑叶中黄酮和多糖测定结果差异较大,黄酮测定用超声波法效果最佳,多糖测定用煎煮法效果最佳。     

新鲜和盐渍F21金针菇的主要成分测定

[目的]研究新鲜和盐渍F21金针菇主要成分的含量。[方法]选取F21金针菇的新鲜和盐渍品,用凯氏定氮法、索氏脂肪提取法等方法对其蛋白质、脂肪、多糖和磷元素进行了测定。[结果]F21金针菇新鲜干品和盐渍品的蛋白质的含量分别为21.63%、15.04%,脂肪含量分别为4.70%、7.94%,多糖含量分别为33.70%、45.28%,总磷含量分别为0.2837%、0.1591%。F21金针菇新鲜干品的蛋白质和磷元素含量均高于其盐渍品,分别高出30.46%、43.91%,而脂肪和多糖的含量则低于其盐渍品,分别减少68.93%、34.36%。[结论]盐渍金针菇是金针菇生产加工的有效途径。