雪莲组培过程对潮霉素敏感性的研究

以雪莲叶片为外植体,研究了不同浓度的潮霉素对雪莲愈伤组织诱导、生长及分化的影响,结果表明:8.0 mg/L浓度的潮霉素为雪莲叶盘转化筛选的最佳质量浓度,不同浓度(5 ～50 mg/L)潮霉素对MS+ NAA 2.00 mg/L+ 6-BA 1.00mg/L培养基下雪莲愈伤组织的诱导与生长均有明显的抑制作用,随着潮霉素浓度的升高,毒害程度加深,当潮霉素浓度为20 mg/L时表现为生长的愈伤组织块较小、褐化、甚至死亡.同时,低浓度(0.5 ～2.0 mg/L)的潮霉素可以提高雪莲愈伤组织的分化率,其中0.5 mg/L潮霉素的质量浓度的诱导培养基内,雪莲愈伤组织的出芽率平均可达98.33％.     

薄壳山核桃愈伤组织诱导的优化

本研究以薄壳山核桃品种苗‘波尼’幼嫩叶片为外植体,设置不同消毒方法、不同蔗糖浓度、不同褐化抑制剂及不同植物生长调节剂浓度及配比,研究其对叶片诱导愈伤组织形成的影响。结果表明,不同消毒方法对薄壳山核桃叶片愈伤组织形成影响显著,以0.1%HgCl_2消毒2 min效果最好,污染率为15.6%,且愈伤组织生长状态最好;不同蔗糖浓度对叶片愈伤组织形成的影响以30 g/L效果好,愈伤诱导率达75.6%;不同褐化抑制剂对叶片愈伤组织影响较小,其中以0.2 g/L PVP效果最好,不仅褐化率低且愈伤诱导率高;不同植物生长调节剂浓度及配比对薄壳山核桃叶片愈伤组织形成影响显著,以4/5MS+0.75 mg/L TDZ+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA培养基与改良DKW+0.4 mg/L TDZ+0.4 mg/L IBA培养基诱导效果最好,研究发现低浓度的TDZ (0.2～0.4 mg/L)促进愈伤组织形成,高浓度的TDZ (0.8～2.0 mg/L)抑制愈伤组织形成。本研究可筛选出诱导叶片愈伤组织的最佳方法,为后期愈伤组织诱导不定芽提供科学依据。     

野生软枣猕猴桃组织培养及褐变处理

以野生软枣猕猴桃嫩芽、幼嫩叶片以及茎段作为外植体,研究野生软枣猕猴桃组织培养整个过程,以建立快速高效的野生软枣猕猴桃再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片、茎段愈伤组织的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;诱导出愈伤组织在MS+0.6 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基上能很好地分化不定芽苗;诱导幼芽产生丛生芽的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;较适宜的生根培养基为1/2MS。愈伤组织继代中发现细胞生长素NAA可以防止愈伤褐化。在愈伤组织分化中,发现将分化出的芽苗再次愈伤化,可以提高分化率。     

马尾松嫩茎愈伤组织保持、增殖与不定芽分化培养

笔者以马尾松嫩茎诱导产生的愈伤组织为材料,针对愈伤组织保持、增殖和分化中容易出现褐化死亡的现象,探讨培养基中改变肌醇浓度引起的渗透压变化,调节激素配比和改变培养环境对愈伤组织保持、增殖和丛芽分化的影响。结果表明：（1）改良GD培养基,添加肌醇3.0 g/L,能有效地解决在愈伤组织增殖培养中的褐化问题;（2）在DCR培养基中添加KT 1.0~2.0 mg/L和NAA 0.5 mg/L能逐渐把增殖培养的马尾松愈伤组织从暗培养过渡到光培养,并保持增殖;（3）DCR培养基中添加KT 1.0 mg/L和TDZ 0.5 mg/L可以促进愈伤组织向丛生芽分化,并获得4个丛生芽。本研究结果为马尾松优良基因型快繁中愈伤组织保持、增殖和分化培养提供了研究基础。     

薄荷离体培养及植株再生的研究

以薄荷茎段为外植体,研究了不同植物激素对薄荷愈伤组织的诱导及其增殖、不定芽分化和诱导生根的影响。结果表明,愈伤诱导最适培养基为MS 6-BA1.5mg/L 2,4-D0.5mg/L NAA0.5mg/L,其愈伤组织生长良好;最佳愈伤增殖培养基为MS NAA1.0mg/L或MS IAA2.0mg/L,其褐化率均较低;最佳诱导分化培养基为MS 6-BA2.0mg/L NAA0.1mg/L,分化率达77%;生根培养基为1/2MS NAA2.0mg/L,且根较为粗壮。     

3种豆科牧草愈伤组织继代培养抗褐化的研究

为解决3种豆科牧草愈伤组织继代培养中的褐化问题,以‘新牧4号’紫花苜蓿、普通红豆草和‘海法’三叶草愈伤组织为材料,探讨不同防褐化措施在3种豆科牧草愈伤继代培养过程中抗褐化效果的影响。结果表明,在苜蓿和红豆草愈伤组织的继代培养中,对愈伤组织褐化抑制效果较好的是AgNO_3,浓度为0.02 g/L时,褐化率分别为13%、15%,愈伤组织褐化程度强弱依次是PVP柠檬酸AgNO_3;在三叶草愈伤组织的继代培养中,对愈伤组织褐化抑制效果较好的是AgNO_3,浓度为0.015 g/L时,褐化率为32%,愈伤组织褐化程度强弱依次是柠檬酸PVPAgNO_3。一定浓度的AgNO_3不仅能有效控制褐化,还在一定程度上促进了愈伤组织的生长。     

银杏的药用价值及组织培养研究

从银杏的果实、叶、种皮、种仁及木材等方面论述了其药用价值,并概述了银杏茎段培养、配子体培养、胚培养、愈伤组织诱导以及银杏组织培养中抑制褐化问题等方面的进展。愈伤组织培养的基本培养基为SH基本培养基中加2,4-D2mg/L,6-BA1mg/L和NAA0.5mg/L以及苹果汁10%以及在1.0kV/cm强度的高压静电和Cu2+条件下有利于愈伤组织生长。改良MS培养基和多效唑可以促进腋芽萌动和分化;MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L的培养基、蜂王浆和椰子乳汁对诱导银杏胚状体有很大促进作用。0.1%植酸(肌醇六磷酸酯)、5.0mg/L抗坏血酸或2000mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP有明显抑制褐变的作用。     

三种豆科牧草愈伤组织继代培养中抗褐化的研究

为解决3 种豆科牧草愈伤组织继代培养中的褐化问题，以‘新牧4 号’紫花苜蓿、普通红豆草和‘海法’三叶草愈伤组织为材料，探讨不同防褐化措施在3 种豆科牧草愈伤继代培养过程中抗褐化效果的影响。结果表明，在苜蓿和红豆草愈伤组织的继代培养中，对愈伤组织褐化抑制效果较好的是AgNO3，浓度为0.02 g/L 时，褐化率分别为13%、15%，愈伤组织褐化程度强弱依次是PVP＞柠檬酸＞AgNO3；在三叶草愈伤组织的继代培养中，对愈伤组织褐化抑制效果较好的是AgNO3，浓度为0.015 g/L时，褐化率为32%，愈伤组织褐化程度强弱依次是柠檬酸＞PVP＞AgNO3。一定浓度的AgNO3不仅能有效控制褐化，还在一定程度上促进了愈伤组织的生长。     

‘绿波’核桃叶片愈伤组织的诱导研究

本研究以"绿波"核桃试管苗幼嫩叶片为外植体,探讨暗培养时间、植物生长调节剂种类及配比等对愈伤组织的诱导影响。结果表明,暗培养时间对叶片愈伤组织的形成影响较大,暗培养2周时叶片愈伤率可达100%,暗培养时间的增加或减少会抑制叶片愈伤组织的形成,使愈伤组织变得疏松;低浓度的TDZ(2.0~4.0 mg/L)促进叶片愈伤的形成,高浓度的TDZ(8.0~10.0 mg/L)抑制叶片愈伤的形成,同时也抑制了叶片和愈伤组织的褐化,使愈伤组织的结构也变得更加疏松;低浓度的IBA(0.01~0.5 mg/L)有利于叶片愈伤组织的形成,高浓度的IBA(1.0 mg/L)不利于愈伤组织的形成。本研究结果可进一步明确影响核桃叶片愈伤组织诱导的主要因素,为容易分化出不定芽的愈伤组织的诱导研究指明方向。     

不同抗生素对韭菜根愈伤组织诱导及再生的影响

本研究以"汉中冬韭"韭菜品种为试验材料,研究了韭菜根尖及愈伤组织对抑菌性和选择性抗生素的抗性。研究结果表明,选择性抗生素对韭菜再生的影响极显著,以PPT作为选择抗生素时,愈伤生长及不定芽分化阶段PPT适宜浓度为1mg/L,而生根阶段PPT最适浓度为0.5mg/L。当潮霉素浓度为1mg/L时,根尖愈伤组织分化率达到了8%,而浓度为2mg/L时根尖已不能分化,以1mg/LHyg为最佳浓度。用头孢霉素作为抑菌剂时,愈伤生长及不定芽分化阶段,最适浓度为400mg/L,而生根阶段适宜浓度为200mg/L;以Timentin作为抑菌剂时,最适浓度在400mg/L以内,韭菜外植体的分化没有受到影响,随着浓度的增加抑制作用越来越明显,以400mg/LTimentin为最适抑菌抗生素浓度,这为农杆菌介导韭菜遗传转化奠定基础。     

白术叶片再生植株和丛生芽快繁的研究

白术是菊科的一种重要药用植物。为满足白术的药用需求，扩大其资源供应，避免传统开荒育苗种植模式对生态环境的破坏，为白术的大规模工厂化育苗及获取药用次生代谢产物提供有效的途径和方法，笔者以白术叶片为外植体经愈伤组织再生植株和丛生芽增殖两种方式建立了白术无菌苗的快速繁殖技术，分析了不同植物激素种类和浓度对白术叶片再生植株及丛生芽增殖的影响，研究了温度和光照条件对白术叶片愈伤组织褐变的影响。研究结果显示在培养基MS+ 6-BA1 mg/L+NAA0.2 mg/L上白术丛生芽增殖倍数最高，可达4.45倍；以白术的叶片愈伤组织诱导及再生植株的最佳培养基为MS +KT 1mg/L+NAA0.2 mg/L，愈伤组织诱导率可达96.7%；芽分化率为90%。不同的细胞分裂素种类与浓度处理差异显著，在白术叶片的愈伤组织诱导中，KT的效果要优于6-BA，但在丛生芽增殖中则表现出高浓度的6-BA要优于KT。白术叶片愈伤组织继代培养中褐变程度与温度、光照条件有关，1000 lx光照强度，20±0.5℃的温度条件下继代培养能有效控制褐变。     

植物激素配比对大蒜茎盘愈伤组织再生体系的影响

植物激素对大蒜茎盘愈伤组织再生的各个环节都发挥着重要的作用。试验结果表明：2,4．D对茎盘愈伤组织的诱导具有主要作用，高浓度的2，4-D有利于大蒜愈伤组织的诱导，但并不利于其增殖分化。MS＋NAA 2mg／L＋BA 1mg／L培养基适宜于愈伤组织的继代增殖，MS＋NAA 1mg／L＋BA 5mg／L培养基适宜不定芽的分化，只添加NAA或无激素的MS培养基有利于不定芽生根。     

萝卜花药愈伤组织诱导及褐变因素初探

以萝卜为试材,研究了不同激素配比、供体基因型、光照与温度以及蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响,同时比较研究了花药愈伤组织褐变过程中几种抗氧化酶活性变化。结果如下：P403在2.0mg/L 2,4-D+1.0mg/L 6-BA+2.0mg/L KT的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织开始褐化的时间晚,抗氧化酶的活性较高;同时进行低温预处理、高温预培养和初期暗培养的协同效果较任何一种单独处理好;6%的蔗糖浓度有利于愈伤组织的诱导。     

降低魔芋球茎组培褐变的技术研究

以魔芋球茎为外植体,研究组织培养过程中有效降低外植体褐变的方法。采用MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L为基本培养基,用正交实验方法研究不同琼脂浓度、吸附剂及光、暗2种不同培养条件下,对魔芋组织培养过程中褐变的影响。在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂 6 g/L+AC 0.5 g/L+PVP 0.05 g/L及暗培养条件下,魔芋外植体的褐变率减低为38.3%,愈伤组织诱导率提高到78.3%。在培养基中加入一定量的活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP),并进行暗培养,可在一定程度上控制魔芋外植体的褐变,促进愈伤组织形成。     

Callus Induction of Aloe vera L var chinensis (Haw) Berg

Studies were given to the induction and growth of callus of Aloe vera L.var.chinensis(Haw.) Berg when the young stem was applied as explant.MS was taken as basic medium,added with various concentrations of auxins(IAA,IBA,NAA and 2,4-D),cytokinins(6-BA,KT and Zeatin) and the different combinations of these plant growth regulators.Results showed that the callus is barely induced by cytokinin alone,and the callus induction rates have significant difference when different concentrations of auxin and different combinations of auxin with cytokinin are used on the MS medium.In order to inhibit callus browning during culturing,various concentrations of vitamin C or active carbon are added into four combinations of auxin and cytokinin respectively,which can induce callus most effectively.The result showsd that vitamin C can alleviate callus browning more effectively than the active carbon.The most efficient medium for induction and growth of callus of Aloe vera L.var.chinensis(Haw.) Berg was MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+10 mg/ L vitamin C,with which the callus induction rate can reach to 91.4% and callus grow vigorously.     

高粱幼叶细胞悬浮系的建立

以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究。结果表明：幼叶在MS（Murashige and Skoog）+2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2~3次继代筛选后获得了浅黄色、颗粒状胚性愈伤组织;胚性愈伤组织接种于液体培养基中,于25±1℃、黑暗条件下,经45~60d的悬浮震荡培养建立了高质量的细胞悬浮系,细胞生长曲线呈“S”型,细胞密度可达6.45×10 ⁵~5.08×10 ⁶个/mL以上,活细胞率可达72.76%,近圆细胞率可达87.50%;培养基的基本成分、激素种类和水平对悬浮细胞生长状态有很大的影响,相比1/2MS培养基,MS培养基为适宜的培养基,2,4-D对保持细胞系的稳定增殖至关重要,适宜的浓度为1mg/L;培养液中加入0.5mg/L KT或6-BA会造成悬浮液褐化,影响悬浮细胞的生长;最适宜的细胞悬浮培养基为L2培养基（MS+1mg/L 2,4-D,30g/L蔗糖,pH5.8）,震荡培养转速为110~120r/min,继代周期为7d,新旧培养基的接种比例为2∶1。     

菠萝花药愈伤组织诱导及褐变影响因素初探

以菠萝为试材,筛选了花药愈伤组织诱导最适激素组合,同时通过正交试验研究了基因型、取样时期及添加AgNO3等因素对菠萝花药培养过程中愈伤组织诱导及褐变的影响。结果表明：菠萝花药培养诱导愈伤组织最佳激素组合为2 mg/L 2,4-D+0.08 mg/L TDZ;正交试验三个因子对愈伤组织诱导的影响主次顺序为AgNO3>取样时期>基因型,对褐变影响主次顺序为AgNO3>基因型>取样时期,其中AgNO3最适浓度为50 mg/L。