内标18S rRNA和β-actin mRNA比较:肉鸡十二指肠SGLT1 mRNA的发育规律

-βactinmRNA和18SrRNA因其在相同试验条件下的稳定表达,而被广泛用作内标基因来确定目的基因的表达量。试验分别使用这2种内标基因,用相对定量RT-PCR的方法对肉鸡(0~58 d)十二指肠钠葡萄糖共转运载体1(Sodium glucose cotransporter 1,SGLT1)的发育规律进行了分析研究,比较不同内标基因对SGLT1 mRNA表达水平检测结果的影响,以确定两者在一致试验条件下表达的相似度。结果表明,分别以-βactinmRNA和18SrRNA作为内标,SGLT1 mRNA表达发育规律完全一致,均表现为2~30 d不断升高,44 d下降,58 d回升;2 d和44 d的SGLT1 mRNA丰度显著低于16 d(P<0.05)和30 d(P<0.05),58 d的SGLT1 mRNA表达水平显著低于30 d(P<0.05)。提示这2种管家基因均可以作为内标用于肉鸡肠道转运载体基因mRNA发育规律的相对定量研究。     

出生至断奶仔猪胃肠道组织中FcRn的表达规律初探

【研究目的】旨在研究FcRa在仔猪胃肠道的表达分布及不同日龄间的表达变化。【方法】以大白争长白二元杂交仔猪作为研究对象,分布采集从出生至断奶后共12个日龄仔猪胃肠道组织。应用RT-PCR方法检测FcRa mRNA表达并进行表达量的相对分析。【结果】①FcRa在仔猪胃肠道各段组织中均有表达,其中在十二指肠后段和空肠前段表达量最高,在结肠和胃内表达最低。②在十二指肠争空肠段,仔猪从一出生就有较高水平的FcRa转录,吮乳后至出生后1d达到峰值,随后略有下降但前4d差异不显著（P〉0．05）;自7d起FcRamRNA转录水平明显降低（P〈0．05）,至断奶时降到最低。③在回肠段,FcRa表达水平较十二指肠和空肠段低,从出生至断奶前（21d）表达量变化不明显。断奶后有显著下降（P〈0．05）。④胃与结肠部位FcRa的表达比较稳定,一直保持在较低水平。【结论】仔猪不同组织中FcRa在十二指肠后段和空肠前段的表达水平最高,提示仔猪十二指肠、空肠是FcRa转运初乳中IgG的主要部位。仔猪肠道FcRa的表达量变化与初乳及乳汁中IgG含量的变化规律基本一致,证明了FcRa在肠道转运IgG中发挥重要作用。     

蜡样芽孢杆菌PAS38对肉仔鸡生长性能及免疫功能的影响

为了研究蜡样芽孢杆菌PAS38制剂对肉鸡生长性能和免疫功能的影响,选用80只7日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分成2组,每组4个重复,每个重复10羽,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0. 05%的蜡样芽孢杆菌PAS38制剂,试验期35 d。结果显示:试验组鸡体质量及净增质量均比对照组高,但仅在28 d时差异显著(P 0. 05),空肠和回肠淀粉酶和蛋白酶活性均显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01);试验组的胸腺和脾脏指数在28,42 d时显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01),法氏囊指数在42 d时显著高于对照组(P 0. 05);试验组血清免疫球蛋白含量均高于显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01),42 d时试验组血清中IL-2和IFN-γ含量高于对照组(P 0. 05),IL-4含量低于对照组(P 0. 05);试验组肉鸡的胸腺和法氏囊组织中IL-2、IFN-γ、GBP1、IRF1的mRNA表达量均有不同程度地高于对照组,IL-10 mRNA转录水平低于对照组; IL-4 mRNA转录水平在胸腺组织中显著高于对照组(P 0. 05),而在法氏囊组织中则显著(P 0. 05)或极显著(P 0. 01)低于对照组。结果表明,蜡样芽孢杆菌PAS38具有促进肉鸡的生长性能和增强肠道消化酶活性,促进免疫器官的发育,并且通过调节免疫相关基因mRNA的表达来提高机体的非特异性免疫和细胞免疫。     

谷氨酰胺对肉仔鸡小肠发育及吸收功能的影响

240只1日龄艾维茵肉仔鸡,随机分为4组,1组为对照组,2～4组为试验组,各组分别在基础日粮中添加0、0.2%、0.4%及0.8%的谷氨酰胺（Gln),研究Gln对肉鸡小肠发育、结构及吸收功能的影响。结果表明,饲料中添加Gln可明显提高肉鸡小肠的长度、重量及指数,2周龄时高剂量组（0.8%）效果较好,3、4周龄时则低剂量组（0.2%）较好,其中,空肠受日粮Gln影响最大,回肠次之,十二指肠最小;对肠道形态、结构的组织学观察发现,日粮中添加0.2%的Gln可显著提高试验期间空肠绒毛的高度,降低绒毛的宽度和固有膜厚度;以D-木糖吸收率为代表的小肠主动吸收功能试验表明,试验组肉鸡血清木糖浓度均高于同期对照组肉鸡。上述结果显示,外源性Gln作为肠粘膜细胞的能量来源,对促进小肠发育、维持小肠粘膜的完整性以及提高小肠的主动吸收功能有着重要作用     

马铃薯块茎休眠解除过程中CAT酶活性变化及其编码基因的生物信息学分析

以马铃薯栽培品种"克新4号"为试验材料,测定了在马铃薯块茎休眠解除过程中H2O2含量、CAT活性和CAT基因的相对表达量,并对CAT基因及其编码的蛋白质进行生物信息学分析。结果表明:马铃薯块茎中的H2O2含量和CAT活性变化与CAT1基因表达量变化的趋势相同,均在收获后第40 d达到最大值。马铃薯CAT1的CDS区长1 479 bp,编码492个氨基酸,是一种亲水性蛋白,有12个磷酸化位点,其与番茄CAT同源性高达99%。研究结果为阐明CAT在马铃薯块茎休眠解除过程中的作用提供了基础。     

盐胁迫对桉树(Eucalyptus)活性氧代谢和CAT基因表达的影响

桉树耐贫瘠,盐胁迫影响桉树的生长速率,严重时造成桉树枯萎死亡。本研究以‘广林9’三月龄组培苗为材料,分别用不同浓度NaCl溶液(0, 30 mmol/L, 60 mmol/L, 90 mmol/L, 120 mmol/L, 150 mmol/L)处理20天后,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、过氧化物酶(peroxidase, POD)活性、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性、过氧化氢(hydrogen peroxide, H2O2)含量、丙二醛(malonaldehyde, MDA)质量摩尔浓度等生理指标以及CAT基因的转录变化。NaCl处理后,MDA质量摩尔浓度、H2O2含量显著升高,在90 mmol/L或120 mmol/L处达到最大值;盐胁迫下POD、SOD和CAT活性均表现为先升高后降低的趋势,并且在90 mmol/L NaCl时达到最大值。设无NaCl处理下CAT基因的表达水平为1,用qPCR (real-time quantitative PCR)方法分析不同盐胁迫下6个CAT基因的相对表达水平。随着NaCl浓度增大,CAT1、CAT2和CAT3的相对表达水平呈逐渐降低的趋势,NaCl浓度为30 mmol/L相对表达水平最高,分别为1.54、6.38和1.27;CAT5和CAT6的相对表达水平在120 mmol/L NaCl时达到最大值,分别为2.65和2.21;CAT4的相对表达水平随NaCl浓度增大而增大,并在NaCl浓度为150 mmol/L时显著升高,相对表达水平达3.31。结果表明:90~120 mmol/L NaCl浓度为桉树的耐盐胁迫的极限;盐胁迫会引起桉树ROS (Reactive oxygen species)代谢失衡,积累H2O2导致膜脂过氧化;6个CAT基因在不同盐胁迫强度下的转录变化差异显著,响应机制不尽相同。本研究可为桉树应答盐胁迫机理研究和桉树栽培管理提供参考。     

复合酸化剂对黄羽肉鸡生长性能及消化道pH值的影响

为了研究复合酸化剂对黄羽肉鸡生长性能及消化道pH值的影响。试验选择1日龄黄羽肉鸡160只,随机分成4个处理组,每个处理组4个重复,每个重复10只鸡,各处理组分别在基础日粮中添加 0.0%、0.2%、0.5%、0.8% 的由乳酸、柠檬酸和富马酸组成的复合酸化剂的日粮,试验期56天。结果表明：日粮中添加不同水平复合酸化剂能降低肌胃、腺胃、十二指肠、空肠和盲肠的pH值及料重比,提高平均日增重,添加量为0.8%时显著(P<0.05)降低42日龄十二指肠和盲肠pH值和显著(P<0.05)提高1~56 日龄的平均日增重,添加量为0.5%时显著(P<0.05)降低28~42日龄料重比。说明复合酸化剂能改善黄羽肉鸡消化道pH值和生长性能,最佳添加量为0.5%。     

广金钱草种子适宜采收期研究

通过分析不同发育时期广金钱草种子产量、质量及生理生化物质的变化,确定广金钱草种子最佳采收期。结果表明,在盛花期10~25d长度和宽度增长迅速;绿色种皮比率逐渐降低,黄色种皮比率逐渐升高,依据果荚颜色、种皮颜色、种子硬度可将广金钱草种子成熟过程划分为:(1)绿荚期;(2)黄荚前期;(3)黄荚后期;(4)完熟期;(5)过熟期。种子发芽率在盛花期35d达到最大值79.67%,15~35d千粒重呈上升趋势,而单株产量在盛花期30d高达13.07g/株,是35d的2.07倍。可溶性糖和可溶性蛋白含量呈现上升趋势,SOD和POD活性表现为先上升后降低的趋势,SOD活性在盛花期30d达到最大值,POD活性在盛花期25d达到最高。因此,盛花期30d左右(黄荚后期)为广金钱草种子最佳采收期。     

玉米胚乳母本印记基因ZmVIL1的克隆及印记特性分析

印记基因在玉米籽粒发育中具有重要作用。玉米ZmVIL1是母本印记基因。本研究通过RACE扩增, 获得了ZmVIL1基因的cDNA全长, 约2.2 kb, 编码598个氨基酸。根据对B73和Mo17正反交授粉后14 d胚乳和胚中ZmVIL1等位基因的表达分析, 该基因仅在玉米胚乳中表现母本印记, 而在胚中则无印记现象。在郑58和昌7-2、黄C和178、PH6WC和PH4CV正反交14 d胚乳中ZmVIL1也表现印记, 因此该基因为基因特异性的二元印记。ZmVIL1在B73、Mo17正反交授粉后12~28 d胚乳中处于持续印记状态。组织表达模式研究表明ZmVIL1在营养生长和生殖生长阶段均有表达; ZmVIL1在玉米授粉后10 d籽粒、雌穗、雄穗、花丝中表达量较高, 其次是根、胚珠及授粉后25 d的胚中, 推测ZmVIL1在玉米籽粒及花发育过程中均具有重要功能。     

黄独冻后培养愈伤ESTs序列和抗氧化酶的qPCR验证

为了对黄独冻后培养胚性愈伤组织正反向SSH-ESTs序列的测序分析及其抗氧化酶进行检测,本研究对其SSH-ESTs(A1~A4以及B1~B16)以及其抗氧化酶如过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶1(Cu Zn-SOD)和过氧化物歧化酶2(Mn-SOD)的差异表达进行q PCR验证。研究表明:与黄独胚性愈伤组织冻后光周期培养相比较,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织中A-1、A-2、A-3和A-4的基因下调,表达量下降;而黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织中B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6、B-7、B-8、B-9、B-10、B-11、B-12、B-13、B-14、B-15和B-16的基因上调,表达量升高;同时,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织的过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶1(Cu Zn-SOD)和过氧化物歧化酶2(Mn-SOD)基因也上调,表达量也升高。本试验可为超低温保存后黑暗培养促进黄独胚性愈伤组织成活的机理提供分子依据。     

木聚糖酶对肉仔鸡消化道食糜停留时间和营养消化率的影响

通过在小麦基础日粮中添加国产酶（EⅠ）和进口酶（EⅡ）两种木聚糖酶制剂,研究木聚糖酶对肉仔鸡各段消化道食糜停留时间和营养物质消化率的影响。试验将7日龄肉仔鸡随机分成5组：小麦基础日粮中分别添加0.05% EⅠ(A1组)、0.02% EⅠ（A2组）、0.02% EⅡ（B1组）、0.05% EⅡ(B2组)、0%（C组）,饲喂至21日龄。结果表明：在所有组中,食糜在空肠和回肠的停留时间最长。加酶组使腺胃、结肠、盲肠的停留时间延长,使其它消化道停留时间缩短(P>0.05),A1组、A2组、B1组、B2组使总停留时间分别比对照组减少15.2%、6.4%、13.6%、13.8%。与对照组相比,加酶组可显著提高干物质和粗蛋白的粪消化率。所有组中嗉囊、腺胃、十二指肠和盲肠消化率表现为负值,肌胃、空肠、回肠和结肠各段消化率为正值,且从空肠到结肠消化率有升高的趋势。     

不同栽培品种生大豆对大鼠肠道的影响

为比较不同栽培品种生大豆中抗营养因子对大鼠抗营养影响,选用(50±2)日龄的Wister大鼠60只,随机平均分6组,分别饲喂以吉林小粒6、吉林30、吉林45、吉农7、丰交7607栽培品种生大豆和全脂膨化大豆(对照组)为主要蛋白源的日粮,30 d解剖大鼠,肠道分段称重、测量长度并制作组织切片.结果表明:小肠重量、小肠长度、空肠隐窝深度和空肠绒毛长度和隐窝深度比值对照组与试验组差异显著(P<0.05),各品种生大豆日粮对大鼠肠道影响为吉林小粒6>吉林30>丰交7607>吉林45>吉农7.     

培养液磷含量和pH对鸡离体小肠磷吸收的影响

摘 要:(目的)本研究主要探讨了培养液不同pH值和磷含量对鸡离体小肠磷吸收的影响,为体外培养鸡小肠合理选择培养液pH值和用外翻肠囊法评定饲料有效磷时合理选择培养液磷浓度提供参考依据。（方法）采用2个单因子随机试验,每个因子4个处理。48只30日龄体重相近的三黄肉公鸡的十二指肠、空肠和回肠肠囊随机分配到8个处理中,每个处理6个重复,每个重复1个肠囊,40℃培养50min。（结果）结果表明：培养液 pH和磷含量对鸡离体小肠的磷吸收量有明显影响,pH 5.0～7.0时,肠囊的磷吸收量线性增加,与pH5.0比较,pH7.0时,肠囊的磷吸收量极显著增加（P＜0.01）,pH8.0时,肠囊的磷吸收量开始降低;磷含量在50μg/ml～200μg/ml时,肠囊的磷吸收量与磷含量呈正相关,当磷含量增加到400μg/ml,十二指肠肠囊和空肠肠囊的磷吸收量开始降低。（结论）结果提示： 用外翻肠囊法评定饲料有效磷时,鸡离体小肠培养液pH以6.0～7.0最佳;培养液中磷含量不能超过200μg/ml。     

不同栽培品种生大豆对大鼠内脏器官形态和肠道组织学的影响

摘要：选用50±2日龄的Wister大鼠60只,随机平均分6组,,分别饲喂以吉林小粒6、吉林30、吉林45、吉农7、丰交7607栽培品种生大豆和全脂膨化大豆（对照组）为主要蛋白源的日粮,30天解剖大鼠,内脏器官称重,肠道测量长度、制作切片。结果表明：胰腺重量、空肠隐窝深度和空肠绒毛长度和隐窝深度比值对照组与实验组差异显著（p＜0.05）, 各品种生大豆日粮对大鼠抗营养影响为吉林小粒6＞吉林30＞丰交7607＞吉林45＞吉农7。     

枕纹锦蛇消化道2种内分泌细胞的免疫组织化学定位

为了研究枕纹锦蛇(Elaphe dione)消化道生长抑素(SS)、胃泌素(GAS)2种内分泌细胞的形态和分布规律。应用ABC免疫组织化学法来进行研究,结果显示：SS细胞在消化道各部位均有分布,其中以胃贲门部、胃体和胃幽门部分布密度最高,十二指肠其次,食管、回肠和直肠分布密度最低;GAS细胞只分布于胃幽门部、十二指肠及空肠,且各部位的分布密度差异不显著。上述内分泌细胞的分布特点可能与消化道各部位的功能有关。     

纳米氧化锌对肉鸡生长性能和屠宰性能的影响

【研究目的】本试验研究了纳米氧化锌对肉鸡生长性能和屠宰性能的影响。【方法】选用1日龄AA肉鸡192只,随机分为4个处理组,每组设4个重复,每重复12只鸡。在玉米-豆粕型日粮基础上添加纳米氧化锌0（对照）、40、80、120mg/kg,试验期6周。【结果】试验结果表明：整个试验期内,添加纳米氧化锌的试验组平均增重与对照组差异不显著（P＞0.05）。1~21d,纳米氧化锌在40mg/kg的添加水平肉鸡的饲料消耗显著低于对照组(P＜0.05）;料重比差异极显著(P＜0.01）;22~42d,纳米氧化锌在40mg/kg的添加水平肉鸡料重比显著低于对照组（P＜0.05）。于21、42日龄,每处理随机抽取12只,每重复3只,屠宰测定屠宰指标。结果表明：21d时试验组对肉鸡屠宰性能未产生显著影响（P＞0.05）,但所有测定指标中试验组均高于对照组（P＞0.05）;42d时纳米氧化锌在40mg/kg的添加水平肉鸡的屠宰率极显著高于对照组(P＜0.01）,肉鸡半净膛率显著高于对照组(P＜0.05）;添加纳米氧化锌的试验组肉鸡全净膛率、腹脂率、腿肌率、胸肌率与对照组差异不显著（P＞0.05）。【结论】因此,纳米氧化锌在40mg/kg的添加水平对提高肉鸡生长性能和屠宰性能效果最佳。     

水稻细胞悬浮系的中短期保存方法

细胞悬浮系的中短期保存广泛需要。本文应用中花15细胞悬浮系,比较了AA、N6、MS三种固体培养基对水稻细胞悬浮系的繁殖保存效果,结果表明,AA固体培养基保存效果最好。细胞系可以在AA⁰培养基上4个月、在AA^0.5培养基上6个月(中间45 d左右继代一次)连续保存后仍然保持其可重悬性。通过比较AA固体培养基繁殖保存、冷冻保存、连续悬浮培养3种保存方法,表明AA固体培养基繁殖保存细胞系2~9个月内,既可保持细胞的可悬浮性,又对细胞系的POD、SOD活性和植株再生率影响较小,是一种理想的细胞悬浮系中短期保存方法。