大豆水溶性蛋白含量测定的不确定度评定

建立大豆水溶性蛋白含量测定（NY/T 1205-2006）不确定度评定的数学模型,对检测过程中带来的各个不确定度分量进行识别和量化,提出应用该方法检测的不确定度评定结果。     

分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用

以小鼠急性肝脏氧化损伤为模型,通过采用不同浓度的丙酮对小鼠肝脏蛋白进行分级提取和沉淀,用SDS-聚丙烯酰胺连续密度梯度凝胶电泳(SDS-PAGE)试验寻找差异表达蛋白质。通过试验发现,模型组中水溶性总蛋白、非水溶性总蛋白和膜蛋白总体表达量较空白组均有明显降低,进而对水溶性总蛋白进行的分级提取试验中发现有2个蛋白条带具有显著的差异性。进一步以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测差异蛋白的肽质量指纹,在蛋白质数据库中检索鉴定差异蛋白的种类,经鉴定两种差异蛋白分别为一种未命名蛋白和Cu/Zn超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase),为进一步研究其损伤机理奠定基础。通过分级提取蛋白质样品的试验方法,降低了蛋白组学当中蛋白质分离的成本和技术难度,在保证蛋白纯度的同时提高了电泳的分辨率,电泳图中的条带清晰、分明,便于后期进行质谱分析,同时也为蛋白质组学的应用提供了一种新思路和新方法。     

作物叶片蛋白质组提取与酶切方法比较研究

蛋白质组样品制备主要涉及蛋白质的提取和酶切处理,是蛋白质组学分析的限制环节之一。为了提高作物叶片蛋白质组样品制备的效率和重复性,系统比较了6种缓冲液（pH8.5 Tris-HCl酚、pH7.0磷酸盐、pH9.0碳酸盐、尿素/硫脲、pH8.0 Tris-HCl、pH4.5醋酸盐）和TCA-丙酮处理对水稻、小麦、大豆和玉米叶片蛋白质提取的影响,同时以小麦叶片总蛋白和牛血清白蛋白为样本,比较了传统方法和微波辅助方法的酶切效率。结果表明,TCA-丙酮处理的小麦和水稻样品采用尿素/硫脲方法能获得较高的蛋白得率,而玉米和大豆样品采用尿素/硫脲直接提取时蛋白质得率更高,同时,微波辅助酶切值得用于蛋白质组样品制备。本研究采用适当的蛋白质提取和酶切方法,有效提高了蛋白质的提取率和鉴定率,可为进一步深入开展作物叶片的蛋白质组学研究提供借鉴。     

大豆水溶性蛋白质测定的影响因素探讨

在国家标准的基础上,对大豆水溶性蛋白质测定方法中水溶性蛋白质的提取条件进行探讨。结果表明,振荡方式及频率、提取温度对测定结果影响较大,得到最优条件为:提取温度为25℃、采用回旋式恒温振荡器、振荡器的振荡频率为180r/min。该提取条件测得水溶性蛋白质含量具有重复性好、精密度高等特点。     

作物茬口与施肥对连作大豆化学品质的影响

采用两因素有重复完全随机试验,研究苜蓿、玉米和大豆3种茬口与施肥对连作大豆化学品质的影响。试验结果表明,茬口主效应对连作大豆的蛋白质含量、蛋白和脂肪的总含量分别有极显著和显著的影响,对脂肪含量影响不显著;即连作2年的大豆蛋白质含量分别比苜蓿茬和玉米茬上连作1年的蛋白质含量高1.08%和1.32%,差异极显著;连作2年的大豆蛋白质和脂肪总含量比玉米茬上连作1年的二者总含量高1.45%,达显著水平。施肥主效应对连作大豆的蛋白质、脂肪含量及二者的总含量影响均不显著,脂肪含量随施肥量增加有升高的趋势。茬口主效应与施肥主效应的互作对连作大豆的蛋白、脂肪含量及二者的总含量影响均不显著,大豆茬上施大豆专用复合肥375 kg/hm2（A3B4）组合蛋白质含量及蛋白和脂肪总含量最高,分别达39.86%和58.19%。茬口、施肥主效应及二者互作效应对蛋白质含量及蛋白质和脂肪总含量的影响趋势基本一致。     

棉花根系总蛋白质提取及双向电泳方法的改良

对棉花根系蛋白的双向电泳提取技术进行改良,以获得更好的分离效果,为棉花根系蛋白质组学研究奠定基础。以鲁棉研28为材料,分别采用TCA/丙酮法、改良TCA/丙酮/SDS法、饱和酚-甲醇醋酸铵法这3种根系蛋白质提取方法,提取棉花幼苗根系总蛋白,并进行双向电泳进行蛋白质分离。在蛋白质含量、蛋白纯度和电泳图谱等方面对3种方法进行比较。利用饱和酚-甲醇醋酸铵提取法提取的棉花根系蛋白,其蛋白样品纯度高,SDS-PAGE电泳图谱清晰,蛋白点数量最多为601个点;TCA/丙酮法提取得到的蛋白总量最高约为7.53 mg/g,但样品纯度低,SDSPAGE电泳图谱模糊,蛋白点数量最少为417个点。采用考马斯亮蓝染色,上样量为1 500μg获得的凝胶图谱效果较好。总之,适合棉花根系蛋白质提取的方法为饱和酚-甲醇醋酸铵法,在考马斯亮蓝染色蛋白质上样量为1 500μg时能获得优良的分离效果。     

科技

我国学者发现大豆蛋白数量性状基因位点国际学术期刊《理论与应用遗传学》日前在线发表了河南省农科院研究员卢为国关于大豆蛋白方面的最新研究成果。卢为国在以《大豆中控制水溶性蛋白含量的数量性状基因定位》为题的研究论文中,报道了两个大豆水溶性蛋白的QTL位点,根据目前的文献检索结果,这在国际上尚属首次。大豆是人类重要的蛋白来源,大豆蛋白被广     

中国大豆蛋白亚基构成分析与缺失部分亚基的特异大豆品种的筛选

大豆蛋白亚基组成的不同直接影响大豆蛋白的加工特性与营养特性。本研究利用SDS-PAGE电泳分析大豆蛋白质组成并提出了便捷的样品预处理方法。对1 624个中国大豆栽培品种的分析结果表明,构成大豆蛋白的主要亚基均有一定变异,同时,结合Western Blot分析,首次在中国大豆栽培品种中发现了β-伴大豆球蛋白的β-亚基缺失的大豆品种,为大豆蛋白质的品质改良育种和加工理论研究提供了重要的材料。     

凯氏定氮法测定大米中蛋白质的不确定度分析

采用GB/T5009.5-2003第一法,凯氏定氮法测定大米中蛋白质的含量,其测量不确定度来源于样品称量、消化、定容、移取消化液、蒸馏及滴定等过程。通过对各个不确定度分量的计算合成,找出影响测量不确定度的因素,并对各个不确定度分量进行评估,最终分析出样品大米中蛋白质的标准不确定度及扩展不确定度并描述了影响大米蛋白质测定结果各分量对其不确定度的相对贡献。     

Lox酶缺失大豆新品种耐储藏特性的研究

通过对8个脂肪氧化酶缺失大豆新品种和1个正常大豆品种进行高温(40℃)耐储藏实验,实验期间对9个大豆样品的发芽率、脂肪酸值、过氧化值、粗脂肪含量、水溶性氮指数、脂肪酸成分、色泽进行检测,结果表明:脂肪氧化酶缺失大豆样品在储藏期间的品质变化比正常品种缓慢,大豆中脂肪氧化酶的缺失可在一定程度上提高大豆储藏品质的稳定性.     

不同大豆品种品质分析

对20个不同大豆品种的种子蛋白质、脂肪以及大豆异黄酮含量进行了测定,并对种子贮存蛋白中的醇溶蛋白、球蛋白、谷蛋白分别进行了提取和电泳分析,从中筛选出7个高蛋白品种,4个高脂肪品种,6个高大豆异黄酮品种,2个高蛋白高大豆异黄酮的双高品种,1个高脂肪高大豆异黄酮的双高品种,1个高蛋白高脂肪高大豆异黄酮的三高品种。通过电泳分析得到4个优质蛋白品种,两个豆腐专用品种。将蛋白质、脂肪、大豆异黄酮含量的测定与电泳方法结合,可以成为筛选优质蛋白质兼用性品种的快速简便方法。     

大豆粗脂肪酸值测定方法的比较

以大豆粗脂肪酸值测定方法为研究对象,对GB/T 5512-2008《粮油检验粮食中粗脂肪含量测定》与GB/T 5530-2005《动植物油脂酸值和酸度测定》联用测定大豆粗脂肪酸值法和用GB/T 14488.1-2008《植物油料含油量测定》与GB/T5530-2005标准法测定大豆粗脂肪酸进行比对试验,结果表明:用GB/T 5512-2008与GB/T 5530-2005联用来测定大豆粗脂肪酸值,可以在测定大豆粗脂肪含量的同时,测定大豆粗脂肪酸值,还可以用抽提完粗脂肪回收的乙醚作滴定用溶剂。     

大豆蛋白质巧利用

大豆蛋白质是存在于大豆种子中诸多蛋白质的总称,其含量一般为40％左右,个别品种可达52％。按蛋白质40％计算,1kg大豆的蛋白质含量相当于2．3kg瘦猪肉或2kg瘦牛肉中的蛋白质含量,所以被人们称誉为“绿色乳牛”、“植物肉”。大豆蛋白质作为一种功能性蛋白,具有乳化、吸油、吸水和胶凝等特性,将其添加到食品中有着极其重要的作用。     

我国学者发现大豆蛋白数量性状基因位点

国际学术期刊《理论与应用遗传学》日前在线发表了河南省农科院研究员卢为国关于大豆蛋白方面的最新研究成果。卢为国在以《大豆中控制水溶性蛋白含量的数量性状基因定位》为题的研究论文中，报道了两个大豆水溶性蛋白的QTL位点，根据目前的文献检索结果，这在国际上尚属首次。     

超薄层等电聚焦电泳技术在杂交苦瓜种子纯度鉴定上的应用

为了发掘苦瓜(Momordica charantia L.)种子纯度室内快速鉴定方法,采用种子的水溶性蛋白超薄等电聚焦电泳与田间种植的方法对4个苦瓜杂交组合的F1种子纯度进行检验,并将结果进行一一比对,发现参试的4个组合的父母本均可找到特征蛋白质电泳谱带,而F1均含有父母本的特征蛋白质电泳谱带;超薄等电聚焦电泳技术鉴定的结果与田间种植鉴定的结果完全吻合,说明蛋白质超薄等电聚焦电泳技术可作为杂交苦瓜种子纯度检验的室内快速鉴定方法。     

大豆水溶性蛋白测定方法探讨

对大豆水溶性蛋白测定方法进行探讨,对大豆水溶性蛋白影响因素进行分析,同时,对提取条件进行优化。实验结果表明,温度的影响最为显著（P〈0.05）,所得最优提取完全的条件为：温度35℃,每次加100 mL水,提取2次,每次提取时间为60 min。通过研究后获得的试验条件在操作上较灵活,所提取的水溶蛋白具有更稳定、彻底和准确度高等特点。     

滴定法测定大豆原油过氧化值不确定度的评定

根据GB 5009.227-2016滴定法测定大豆原油过氧化值,通过建立不确定度数学模型,对结果进行不确定度分析与评定,得到样品的合成标准不确定度和扩展不确定度。检测结果显示,该批大豆原油的过氧化值平均值为2.39 mmol/kg,本实验条件下的扩展不确定度U=0.068 mmol/kg,包含因子k=2。结论实验过程中随机效应引入的不确定度最大。     

适于双向电泳分析的大豆花瓣采样方法

大豆花器小,花瓣中蛋白含量低,花瓣采集是大豆花型发育蛋白质组学研究首先要解决的难题.大豆开花期一般持续大约为30d,花瓣采集不仅需要选择恰当的时期、掌握正确的方法,还需要一定的实践经验和技巧.本研究确定了不同发育阶段的大豆花瓣采集标准;明确了采集用于蛋白质组双向电泳分析的不同发育阶段大豆花瓣所需的工作量;建立了1mm花苞大豆花瓣的采集方法.为大豆花型发育蛋白质组双向电泳分析提供了有效的样品采集方法.     

西南区豆腐加工专用大豆品质分析

为筛选出高产、优质、豆腐加工专用的大豆品种,本研究从西南地区收集144份高蛋白地方大豆品种,种植于四川农业大学雅安校区农场试验田,采用大田管理模式,调查其生育期。成熟后风干考种,调查产量,百粒重,生育期等主要的农艺性状,测定大豆蛋白质,脂肪,可溶性糖含量等品质性状。用SDS-PAGE法测7 s球蛋白,11 s球蛋白相对含量和11 s/7 s比值,并对不同品种的大豆的主要农艺性状,产量,品质,7 s球蛋白含量,11 s球蛋白含量以及11 s/7 s之间进行相关性分析。结果表明,大豆产量与生育期成极显著负相关,和株高成显著性负相关,与有效分枝成极显著正相关。蛋白质含量与油脂含量和可溶性糖含量成极显著负相关,可溶性糖含量与油脂含量成极显著正相关,蛋白质含量与7 s球蛋白含量呈极显著性正相关,与11 s球蛋白含量和11 s/7 s之间有着不显著正相关或无明显相关关系。通过聚类分析筛选出高产优质品种高产高质有C79,C68,E312,A59,A22-2共5份大豆品种,这些品种平均单株产量为20.96 g,蛋白含量51.62%,脂肪16.00%,可溶性糖含量6.89%,11 s/7 s为1.50,吸水率123.0%,百粒重14.55 g,可将其作为适合生产豆腐的大豆品种。     

大豆品质影响因子及预防措施

大豆是人类植物蛋白和食用油的主要来源,也是世界上产量最多的油料作物。大豆营养全面、含量丰富,含有优质蛋白质、大量的不饱和脂肪酸、多种微量元素及维生素。大豆中蛋白质含量约为35%~40%,其含量是猪肉和鸡蛋的2~2.5倍。大豆中蛋白质含量不仅高,而且质量好,除蛋氨酸外,其余必需氨基酸的组成和比例与动物蛋白相似,且富含谷类蛋白质缺乏的赖氨酸,是与谷类蛋白互补的天然理想食品。