蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

藻胆蛋白源生物活性肽研究进展

本研究旨在为藻胆蛋白源生物活性肽的发掘、构-效关系表征提供重要参考,推动藻胆蛋白源生物活性肽的研发和应用。本研究综述了具有不同生物学活性的藻胆蛋白源活性肽,包括抗氧化肽、降血压肽、免疫调节肽、降糖肽、抗菌肽和抗炎肽等,归纳了藻胆蛋白源生物活性肽的来源、制备、结构鉴定、功能表征及构-效关系研究进展,指出利用传统方法研发生物活性肽存在一定盲目性,提出利用生物信息学与传统方法相结合有利于高效发掘新型藻胆蛋白源生物活性肽,为生物活性肽的研发提供了新策略。     

不同加工辅料对玉米肽（<1 kDa）抗氧化性的影响

玉米肽为玉米蛋白经酶解后获得的多种小肽的混合物,具有抗氧化、促进酒精代谢等多种生物活性,是当前国际食品界热门的功能因子,已被广泛地应用在食品工业中。但一直以来,研究人员多集中于对玉米肽的工艺制备和功能研究等方面,对于玉米肽活性保护的研究仍处于初探阶段。以玉米肽清除ABTS自由基活性变化为指标,探究不同水质、稳定剂、食用酸和静置时间对其抗氧化活性稳定性的影响,以期为玉米肽产品开发,为最大限度发挥玉米肽的抗氧化活性提供理论依据。结果表明,水质不同,玉米肽溶液的抗氧化活性呈现出较大的差异:去离子水纯净水矿泉水。稳定剂海藻酸钠、CMC、黄原胶、明胶的添加,均会降低玉米肽ABTS自由基清除率,且清除活性随着稳定剂用量的增加而显著下降,其中海藻酸钠(0.1%)对玉米肽的抗氧化活性影响最小,玉米肽ABTS自由基清除率为90%。酸味剂苹果酸、柠檬酸的添加降低了玉米肽ABTS自由基清除活性,且呈剂量效应关系,在相同剂量下,柠檬酸(0.6%)对ABTS自由基清除活性破坏力最强,可降至72%。     

牦牛血抗氧化低聚肽肽段的鉴定及抗氧化活性研究

采用LC-MS/MS法检测分子量＜5 kDa的牦牛血抗氧化低聚肽的肽段组成及其序列，根据其氨基酸组成、肽段序列、活性位点以及分子量筛选出可能具有较好抗氧化活性的肽段7条，采用6种不同的体外抗氧化活性测定方法评价其抗氧化活性。结果表明，RRHPYFYAPELL、TLPDTEKQIKKQ、VLKDLKELVFYYLIMAKGGIVRS、EKKFWGKYLYEIARRHPYFYAPE、GPTQEFKKR、KFWGKYLYEIAR RHPYFYAPE、VSRSLGKVGTR这7条肽段均具有较好的体外抗氧化活性；其中，RRHPYFYAPELL在 ·OH清除力、ABTS+·清除力、DPPH·清除力、总抗氧化力、脂质过氧化抑制能力上均表现最好，GPTQEFKKR在还原力上表现最好。这与不同体外抗氧化活性检测方法中Leu、His、Tyr、Phe、Lys、Gln和 Pro残基对抗氧化活性的影响不同有关。此外，与本研究前期试验制备的分子量＜1 kDa的牦牛血抗氧化低聚肽比较，GPTQEFKKR、RRHPYFYAPELL在6个抗氧化指标上均无显著差异，表现出良好的体外抗氧化活性。     

超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

红花籽抗氧化肽的分离纯化及抗氧化活性研究

对红花籽抗氧化肽进行分离纯化,通过凝胶过滤层析得到3个组分,分别以清除DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基和还原力为指标,研究红花籽抗氧化粗肽及其3个组分的抗氧化活性,其中第3个洗脱峰的抗氧化活性最高。抗氧化试验结果表明,纯化后的红花籽抗氧化肽质量浓度为3 mg/mL时,对自由基具有很强的清除作用,DPPH自由基清除率、超氧自由基清除率和羟自由基清除率分别为57.86%,67.48%和60.15%。     

多肽的生物活性及产品开发研究进展

多肽是从动植物及微生物中提取的分子量小的寡肽及分子量大的环形肽,科学试验表明活性多肽具有降低胆固醇、降血压、降血脂、抗氧化、抑菌等功能,概述了蛋白质多肽的生物活性及在食品中的应用,并对蛋白质多肽的发展进行了总结和展望。     

酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺研究

我国为玉米种植大国,玉米年产量达2.5×10~8t。在食品行业中,玉米目前主要用来生产玉米淀粉和玉米油,而副产物玉米蛋白却被丢弃掉,造成蛋白资源的极大浪费。以玉米蛋白粉为原料,首先超声预处理玉米蛋白(超声功率500 W,超声时间10 min),然后以超声预处理过的玉米蛋白为原料,采用酶解法,以水解度及体外抗氧化活性为考查指标,通过单因素试验和正交试验优化酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺参数。最终得到制备玉米蛋白抗氧化肽的最佳工艺参数为超声功率500 W,超声时间10 min,碱性蛋白酶[E]/[S]为10%,胰蛋白酶[E]/[S]为6%,酶解温度60℃,pH值9.0,酶解时间2 h。其中,酶解温度和pH值对玉米蛋白抗氧化肽的ABTS·清除活性影响最大。     

抗氧化肽的研究进展

天然抗氧化肽可有效地减少与衰老相关的疾病,利用天然抗氧化肽防病治病便成为新的研究热点。通过介绍抗氧化肽的特性,并对抗氧化肽机理的研究情况、抗氧化活性的体外测定方法进行简要说明,旨在更好地了解抗氧化太的性能。     

牛乳蛋白酶解产物抗氧化活性的研究

研究牛乳蛋白经胃蛋白酶和木瓜蛋白酶分步水解后,其酶解产物中不同分子量肽片段的抗氧化活性。试验结果表明,分子量小于5ku的牛乳抗氧化肽活性最强;牛乳抗氧化肽(质量浓度为250μg/mL)对超氧自由基、DPPH·和羟自由基的清除率分别为42.9%,69.0%,83.6%,分别是VC的0.75,0.81,0.87倍;其还原能力为VC的1.11倍。牛乳抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性。     

Different Physiological Reactions at Vegetative and Generative Stage of Development of Field Bean Plants Exposed to Flooding and Undergoing Recovery

Plants at various stages of growth are differentiated in their susceptibility to environmental stresses and possibility of regeneration during recovery period after cessation of stress. The role of antioxidative enzymes in the stabilisation of the physiological state of field bean plants was studied. Catalase, peroxidises activity, and hydrogen peroxide accumulation were determined after 1 and 7 days of flooding and after 1 and 7 days of recovery from flooding. The influence of flooding on plants growth was analysed on the basis of leaf area index (LAI), relative growth rate (RGR) and net assimilation rate (NAR). Changes in antioxidative enzymes caused by flooding applied at vegetative stage were reversible. In generative plants, antioxidative enzymes were activated to a greater extent during recovery period and in contrast to vegetative plants did not attain the control level after that period. The reduction in growth was greater when flooding stress was applied at vegetative stage. Vegetative plants regardless of the stabilisation of antioxidant system were not able to restore the physiological function to attain the optimal growth level after flooding. Probably other injuries caused by flooding had a dominant effect on enzymatic antioxidant changes during stress period.     

文蛤蛋白酶解条件的优化及酶解产物体外抗氧化活性的分析

为了制备抗氧化活性多肽,利用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合的方式水解文蛤蛋白,在单因素实验结果的基础上,选取液料比、酶解温度和酶解pH为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合设计原理进行三因素三水平实验设计,以文蛤蛋白的水解度(DH%)为响应值,运用响应面(RSM)法对双酶复合水解条件进行优化,并分析了酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明：双酶复合酶解的最优酶解条件为水解时间4 h,酶添加量3%,双酶复合比（风味蛋白酶:木瓜蛋白酶）2:1,液固比3.25:1,温度51℃,pH 6.9,在此条件下文蛤蛋白水解度为36.11%,酶解产物清除DPPH和?OH自由基的IC50值分别为2.61、3.47 mg/mL,表现出较强的体外抗氧化活性,因此,可以利用优化后的酶解条件水解文蛤蛋白制备抗氧化多肽。     

高温高湿对辣椒抗氧化系统的影响及不同品种抗氧化性差异研究

选用10个具有代表性辣椒品种(系),于人工气候室内分别在正常和高温高湿条件下,研究苗期抗氧化系统生理性状的变化以及不同品种(系)抗氧化性差异。结果表明:10个辣椒品种(系)抗坏血酸(AsA)含量增加,谷胱甘肽(GSH)、类胡萝卜素(CAR)含量下降,类黄酮(Fla)含量变化不一致;脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性增强。根据各生理指标的相对值通过隶属函数法10个辣椒品种(系)的抗氧化性强弱顺序为:I>C>W>D>J>H>F>G>E>K。     

苹果渣中高纯度多酚物质的制备及体外抗氧化活性评价

研究了苹果渣多酚经大孔吸附树脂纯化前后的体外抗氧化活性的变化情况。考察了自然风干、50℃烘干和真空冷冻干燥苹果渣对多酚提取量的影响;通过对比AB-8,XDA-5和D4020三种大孔吸附树脂的静态吸附和解吸性能,并进行筛选,对比了苹果多酚经大孔吸附树脂纯化前后对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力。结果表明,真空冷冻干燥苹果渣的多酚提取量最大;D4020静态吸附率和解吸率均最高;纯化后苹果多酚的抗氧化活性明显提高。     

紫苏等4种天然色素抗氧化能力的比较

以紫苏、紫甘蓝、黑米、紫甘薯这4种天然色素为试验材料,从还原力、抗脂质过氧化和清除自由基等方面对它们的抗氧化能力进行了研究和评价。结果表明,这4种色素具有一定的还原能力;对亚油酸过氧化有抑制作用,在试验浓度范围内,最大抑制率分别为24.56%,33.04%,45.61%,54.39%;对DPPH自由基有明显的清除能力,最大清除率为92.59%,93.2%,78.4%,66.29%;对超氧阴离子也有一定的清除能力,最大清除率为46.85%,57.69%,41.2%,65.08%。紫苏、甘蓝、黑米、甘薯色素是优良的具有抗氧化功能的天然色素。     

紫茄皮红色素抗氧化活性的研究

为了研究紫茄皮红色素的抗氧化活性,为其应用奠定理论基础。以紫茄皮为原料,以抗坏血酸、柠檬酸为对照,以Fenton反应产生羟基自由基(?OH),邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-?)为试验模型,采用紫外分光光度计测定紫茄子皮红色素对羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除作用;以猪油作底物,采用烘箱贮藏法测定油脂的POV值,研究了紫茄皮红色素对油脂的抗氧化活性。结果表明：紫茄子皮红色素对上述自由基均有清除作用,对羟基自由基清除效果比柠檬酸、抗坏血酸好,且清除效果随着浓度的增大而增强,当浓度大于0.5 g/100 mL,对羟基自由基清除能力趋于稳定;对超氧阴离子自由基清除效果比柠檬酸、抗坏血酸好,最大抑制率为91%,当浓度大于0.6 g/100 mL后,对邻苯三酚自氧化的抑制作用趋于稳定;抑制脂质过氧化的程度强于柠檬酸和抗坏血酸,在0.7 g/mL的浓度下,协同增效作用趋于稳定。紫茄皮红色素在一定浓度范围内有很强的抗氧化活性。     

灵芝孢子油对老龄小鼠抗氧化能力的影响

为了开发利用灵芝孢子油资源,对灵芝孢子油进行了抗氧化作用的研究。选用老龄小鼠作为氧化模型,连续40 d给小鼠灌喂灵芝孢子油,灌胃剂量为250,750 mg/kgBW,分别相当于人体推荐剂量的10,30倍。然后测定脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶活力、抗氧化物质等相关指标。结果表明,高剂量组小鼠的血清MDA含量为6.47 nmol/mL,明显低于对照组小鼠的7.76 nmol/mL(p<0.05);高剂量组小鼠的肝组织蛋白质羰基含量为4.97 nmol/mgprot,明显低于对照组小鼠的7.08 nmol/mgprot(p<0.01)。灵芝孢子油能有效减少自由基对机体脂质和蛋白质的损伤,具有良好的抗氧化作用。     

小分子胶原多肽的抗氧化活性研究

为了研究小分子胶原多肽清除DPPH?自由基、羟自由基(-OH)的能力和抗氧化的能力。采用体外DPPH?自由基和羟自由基(-OH)清除系统测定小分子胶原多肽清除自由基的能力;建立D-半乳糖致衰老的模型小鼠,测定小鼠血液及肝脏组织内的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量。结果表明,1000 kDa以下胶原多肽(CP1)组分在10 mg/mL浓度时,对DPPH?自由基的清除率为80%;40 mg/mL时对-OH的清除率为91.56%。与模型组相比服用CP1的小鼠血清和肝脏丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0.01);超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著升高(P＜0.05)。表明小分子胶原多肽具有显著的抗氧化作用。     

发芽糙米抗氧化活性在发芽及干燥过程中的变化研究

发芽糙米具有抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老等保健功能,其中抗氧化活性是其他生物活性的基础。通过测定发芽糙米水提取液清除超氧阴离子活性,研究了发芽糙米在发芽过程及干燥过程中抗氧化活性的变化规律。结果表明,发芽后,抗氧化活性显著增强,在6~18 h,抗氧化活性增加速度很快;但是发芽糙米在干燥过程中其抗氧化活性降低,65℃干燥1.5 h或微波干燥对发芽糙米抗氧化活性破坏较小。