不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响

以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明：最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+ 6-BA 1 mg/L+ NAA 1 mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 1 mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA 1.5 mg/L+香蕉泥100 g/L,其生根率为100%。     

铁皮石斛原球茎诱导与增殖研究

以铁皮石斛嫩茎为外植体,采用幼嫩茎段→原球茎诱导→原球茎增殖途径,通过单因子、双因子以及正交试验诱导原球茎。研究结果表明,外植体灭菌条件为：70%酒精浸泡3s后,0.1%升汞溶液中浸泡8min,诱导铁皮石斛原球茎最佳培养基为MS＋6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+ 2,4-D1.0 mg/L,原球茎增殖最佳培养基为MS＋6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。     

铁皮石斛与钩状石斛杂交及种子无菌播种快繁研究

以铁皮石斛和钩状石斛为研究对象,通过人工辅助杂交获得杂交种子,诱导种子离体萌发,开展无菌播种技术研究.结果表明,铁皮石斛与钩状石斛杂交容易成功,杂交坐果率可达到80％;适宜的种子萌发培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养30 d时的萌发率为89.7％;培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L+香蕉100 g/L+ AC 1.0 mg/L对原球茎的增殖最好;培养基MS+ 6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.1mg/L+马铃薯200 g/L+ AC 1.0 g/L对原球茎的分化最好;壮苗生根培养基配方为1/2 MS+ NAA 0.6 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L,植株生长健壮,生根率100％,移栽成活率达95％以上.     

秋石斛原球茎途径再生体系的建立

为建立秋石斛原球茎途径的再生体系,本研究以秋石斛‘088’新生侧芽为外植体,探索不同BA和NAA浓度对原球茎诱导、原球茎增殖分化以及生根壮苗的影响。结果表明:秋石斛原球茎诱导的适宜培养基为1/2MS+2.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA,存活外植体的诱导率达到90%以上;原球茎增殖分化的适宜培养基为MS+3.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA,增殖系数达到13.15;生根壮苗的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,生根率高,根系发达,植株健壮。本研究建立了秋石斛原球茎途径的再生体系,为种苗繁育和遗传转化提供了技术支持。     

野生软枣猕猴桃组织培养及褐变处理

以野生软枣猕猴桃嫩芽、幼嫩叶片以及茎段作为外植体,研究野生软枣猕猴桃组织培养整个过程,以建立快速高效的野生软枣猕猴桃再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片、茎段愈伤组织的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;诱导出愈伤组织在MS+0.6 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA培养基上能很好地分化不定芽苗;诱导幼芽产生丛生芽的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;较适宜的生根培养基为1/2MS。愈伤组织继代中发现细胞生长素NAA可以防止愈伤褐化。在愈伤组织分化中,发现将分化出的芽苗再次愈伤化,可以提高分化率。     

玫瑰石斛原球茎的诱导与增殖研究

以玫瑰石斛植株茎段为材料,研究了不同的植物生长调节剂及配比、附加物等因子对玫瑰石斛原球茎的诱导和增殖的影响,以期通过组织培养诱导玫瑰石斛茎段获得原球茎,并对原球茎进行增殖,为进一步诱导玫瑰石斛丛生芽和培养玫瑰石斛小苗提供大量的原材料.结果表明:促进玫瑰石斛原球茎诱导的不同植物生长调节剂配比最优水平的组合为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,该组合最有利于玫瑰石斛原球茎的诱导;促进玫瑰石斛原球茎增殖的植物生长调节剂配比最佳组合为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5mg/L,该组合最有利于玫瑰石斛原球茎的增殖;添加椰汁和马铃薯有利于玫瑰石斛原球茎的增殖.     

泽林考兰薄层细胞的再生体系

为建立泽林考兰薄层细胞的再生体系,以其试管苗茎尖薄层细胞为外植体,研究了不同激素浓度配比对其类原球茎诱导、增殖、分化及生根的影响。结果表明,茎尖薄层细胞在1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基上的类原球茎的诱导率最高,达53.3%;类原球茎在1/2MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上培养40 d后,增殖系数为9.6,类原球茎在1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.15 mg/L培养基上培养40 d后分化出小苗,分化率为89.7%;小苗在1/2MS+NAA 0.2 mg/L+AC 0.5 g/L培养基上生根培养40 d后,生根率达94.2%;小苗驯化移栽成活率达90%以上,长势良好。本研究通过以泽林考兰试管苗茎尖薄层细胞为外植体诱导出类原球茎,建立了泽林考兰薄层细胞再生体系,为泽林考兰试管苗产业化生产提供了新的途径。     

白花兜兰的无菌播种和离体快速繁殖

为建立白花兜兰(Paphiopedilum emersonii)组织培养和离体快速繁殖体系,以授粉结果为180 d未开裂的白花兜兰种子为基础材料,研究不同的添加剂对无菌萌发、原球茎分化及其根诱导的影响,筛选出适宜白花兜兰生长增殖的培养基和原球茎诱导与增殖的培养基,以及炼苗时间和栽培基质。结果表明:诱导白花兜兰种子萌发的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L+100 mL/L椰乳;原球茎的诱导和增殖最佳的培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+100 mL/L椰乳,有机添加物椰乳对种子的萌发和原球茎的诱导与分化均有较好的促进作用。1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+1.0 g/L活性炭对白花兜兰根的诱导效果最为理想;炼苗最佳时间为7 d,栽培适宜基质的配比为树皮∶珍珠岩∶腐殖土(1∶1∶1),移栽成活率达76%。     

五种药用石斛快速繁殖的研究

为解决石斛的快速繁殖和提高组培苗的成活率,以MS为基本培养基,把<中华人民共和国药典(2000版)>(以下简称中国药典)收载的5种药用石斛的茎段作为外植体进行了组培和快繁,并根据石斛的生物学特性,配制了多种基质进行炼苗.结果表明:不同种类的石斛在诱导侧芽萌发时所需培养基不同,但是在增殖、壮苗生根以及炼苗移栽时所需基质却具有相似性.环草石斛、铁皮石斛、束花石斛、马鞭石斛和金钗石斛在诱导侧芽萌发时的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.0mg/L、MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.5 mg/L、MS NAA0.5 mg/L 6-BA 2.0mg/L、MS NAA1.0mg/L 6-BA 2.0 mg/L、MS NAA0.1 mg/L 6-BA 2.0 mg/L.这5种石斛增殖、壮苗生根的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 3.0 mg/L、1/2MS NAA 0.7 mg/L.移栽最适基质为:碳酸盐小石子:木屑=1:2,再覆盖1 cm厚的苔藓,幼苗移栽成活率达95%以上.本文首次报道了在实验室里获得马鞭石斛和束花石斛这两个种的组培苗,并初步解决了石斛试管苗脱瓶移栽成活率低的问题,使下一步进行大面积人工栽培成为可能.     

基于正交设计的铁皮石斛组织培养和耐盐性研究

利用正交设计法研究不同浓度的蔗糖及不同浓度NAA、6-BA、KT等激素对铁皮石斛组织培养的影响,并对铁皮石斛愈伤组织、分化组织、生根苗的耐盐性进行了分析。结果表明:铁皮石斛愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+蔗糖15g/L,分化组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+蔗糖15g/L,分化苗生根最适培养基为MS+活性炭1.0g/L+NAA 0.4mg/L+蔗糖30g/L。铁皮石斛愈伤组织耐盐临界浓度为0.6%,分化组织耐盐临界浓度在0.3%~0.6%之间,生根苗耐盐临界浓度在0.6%~0.9%之间。     

鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培快繁体系的建立研究

以西天山野果林中的重要伴生种鞑靼忍冬和疏花蔷薇带芽茎段为外植体,研究不同培养基及激素配比对芽分化、增殖及再生的影响。结果表明:腋芽诱导的最适宜培养基为MS培养基,鞑靼忍冬和疏花蔷薇诱导率分别可达99.12%和100%;适合鞑靼忍冬腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数可达5.37;而疏花蔷薇腋芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数高达3.0;适合鞑靼忍冬组培苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为100%;而疏花蔷薇组培苗生根最佳的培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为66.67%。移栽到单独的珍珠岩基质中的鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培苗成活率最高,成活率分别达90.00%和75.00%。     

Study on Hybridation and Aseptic Seeding as Well as Rapid Propogation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum

[Objective]To study the system of aseptic seeding and rapid propogationtin of hybrid seeds of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum [Methods] Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum were the objects of research,and their hybrid seeds were gained by artificially auxiliary hybridation. The seeds were induced to germinate in vitro,and study on the technology of aseptic seeding was finished. [Results]Successful hybridation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum could be easily realized,and hybrid fruit-bearing rate could reach 80%; the suitable culture medium for seeds was: MS +1. 0 mg/L 6-BA +0. 1 mg/L NAA,the germination rate after 30 d of cultivation was 89. 7%; appropriate culture medium for proliferation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 100 g /L banana + 1. 0 mg /L AC; appropriate culture medium for differentiation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 200 g /L potato + 1. 0 g /L AC; the formula of culture medium for strenghening the seedlinge and nurturing the rooting was: 1 /2 MS + 0. 6 mg /L NAA +100 g /L banana + 1. 0 g /L AC,the plant grew robustly,the rooting percentage was 100%,and the survival rate of transplanting was higher than 95%. [Conclusions]This method ascertains the optimum culture media formula in the whole regeneration process and all phases from seed germination to acclimatization and transplantation,so fine solidation is laid for its germplasm innovation and industrialized seedling production.     

香石竹离体组织培养特性的研究

本实验以香石竹当年生带腋芽的茎段为外植体,研究它的诱导分化、继代增殖、生根培养各阶段离体培养的特性.结果表明:附加1.5mg/LBA和0.1 mg/LNAA的MS培养基适合腋芽的萌发诱导,诱导率达100%;附加0.5mg/LBA和0.1 mg/L NAA的培养基适合香石竹的增殖,增殖率达340%;附加1.0mg/L NAA的培养基为适宜的生根培养基.     

色素万寿菊杂交母本未授粉子房培养

以色素万寿菊雄性不育株未授粉子房为外植体,比较研究子房发育期、高低温处理和生长调节剂组合对愈伤组织诱导和分化的影响。结果显示:发育6~10 d,花丝刚好露出花萼,顶部呈圆柱状的花蕾愈伤组织诱导效果最好,为79.2%;低温预处理3 d,高温培养5 d有利于愈伤组织诱导;MS+2,4-D 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基,诱导率高达85.8%;NAA 1.0 mg/L+6-BA3.0 mg/L为不定芽分化适宜培养基,分化率达77.6%;1/2MS+NAA 0.2 mg/L为生根适宜培养基,生根率93.5%。本研究可为建立高效单倍体培养体系以及单倍体育种技术提供基础性资料。     

亚洲百合花器官的组培快繁技术研究

亚洲百合新品种“西农一号”最佳诱导分化培养基为MS 6-BA1.2 NAA0.1;不定芽增殖最佳培养基为MS 6-BA1.0 NAA0.1;最佳生根培养基为1/2MS NAA0.2。比较花器官不同组织作外植体时诱导分化不定芽的能力,其顺序为花托>花柱>花瓣。     

小美石斛茎段培养的研究

用小美石斛茎段作外殖体,进行试管繁殖。筛选出各培养阶段适宜的培养基,(1)腋芽萌生MS + 6-BA 5mg/L+NAA 0.4 mg/L;(2)继代增殖 MS + 6-BA 2mg/L+NAA0.2mg/L,三种培养基MS,1/2MS,N6,以MS增殖效果最好,(3)适宜的生根培养基为1/2MS + NAA0.1mg/L+PP333 0.1mg/L 其中平放的芽块生根速度,生根质量和生根率均高于直立放置的。     

粗肋草‘中国红’植株再生体系的建立

为建立相对稳定、高效的‘中国红’粗肋草植株再生体系,本研究以‘中国红’粗肋草的嫩茎腋芽原基、嫩叶为外植体,对诱导愈伤组织的初代培养基、芽增殖分化培养基的激素种类和配比以及生根培养方法等进行筛选优化。结果表明:适宜建立‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径再生体系的外植体为腋芽原基;最佳诱导愈伤组织的初代培养基为1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率分别为:腋芽原基83.3%,嫩叶为23.9%;适合腋芽原基愈伤组织分化培养基的激素配比为6-BA/IAA组合,愈伤组织分化率为65.7%~67.6%、主要以体细胞胚性途径形成再成芽、芽增殖系数5.3~5.8;适宜的生根接种、培养方式为体细胞胚植株断根促根培养,生根苗生根率99.2%。本研究已初步建立和优化以腋芽原基为外植体的稳定‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径的植株再生体系,可进一步改良优化,为今后‘中国红’粗肋草工厂化及规模化生产提供理论和技术指导。     

山新杨组织培养快繁技术研究

山新杨冬季枝条经FC处理,选择萌发新枝的茎段和叶片为接种外植体;诱导茎段产生腋芽的培养基为1/2MS 6-BA0.2~0.5mg/L NAA0~0.5mg/L,诱导叶片产生不定芽的培养基为1/2MS或MS 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L;丛生芽快繁培养基MS 6-BA0.3mg/L NAA0.3mg/L,每20天继代一次,繁殖倍数20左右;生根培养基为1/2MS或MS,附加0.1~0.5mg/L的多效唑,对生根有促进作用。