小麦胚芽的产业化开发现状与发展趋势

小麦胚芽资源的开发利用对于缓解中国十分紧缺的蛋白和油脂资源,提高人类膳食营养与健康水平具有重要的现实意义。该文在分析中国小麦胚芽资源分布与品质状况、小麦胚芽的利用现状以及存在问题的基础上,从小麦胚芽高效提取、稳定化、小麦胚芽油萃取、小麦胚芽微生物转化等方面,论述了关于小麦胚芽深加工技术与装备的国内外最新发展趋势。最终提出了从心磨系统提取高纯度小麦胚芽、采用微波在线稳定化小麦胚芽、亚临界流体萃取小麦胚芽油、小麦胚芽粕进一步发酵制备抗肿瘤功能食品的技术集成方案,旨在为面粉加工企业进一步深入开发利用小麦胚芽资源提供参考。     

复合多糖酶Viscozyme L在制备燕麦麸分离蛋白中的应用

以脱脂燕麦麸为原料，通过碱溶酸沉工艺制备燕麦麸分离蛋白。在传统工艺基础上增加了复合多糖酶Viscozyme L预处理过程，并通过响应面回归分析方法对预处理条件进行了优化，确定最优的工艺参数为：加酶量3.02 FBG/g，pH 4.6，温度44℃，预处理时间2.8 h。与传统工艺相比，燕麦麸蛋白的提取率由6.6%提高到56.2％，分离蛋白制品纯度由72.9%提高到81.7％。     

烟夜蛾泛素延伸蛋白基因的克隆与表达

应用RT-PCR技术，从烟夜蛾(Helicoverpa assulta)幼虫脂肪体组织总RNA中反转录扩增泛素延伸蛋白基因的cDNA片段，扩增得到的片段全长390bp，编码一个长为129个氨基酸残基的蛋白质，预测分子量14.8kDa。同源性分析表明，此cDNA序列为ubiquitin-53aa extension protein(ubi-53，UBE)基因，在泛素蛋白后融合了一个核糖体L40蛋白(ribosomal L40 protein)。使用Clustal W软件，对cDNA编码的氨基酸序列进行了同源性分析，分析表明：烟夜蛾的泛素延伸蛋白氨基酸序列与其他真核生物泛素延伸蛋白氨基酸序列高度同源（90%－98%），与棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)泛素的同源性为69%。将烟夜蛾的UBE基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG进行诱导表达，电泳检测到一条约40kDa大小的外源蛋白，用鼠抗GST抗体进行Western blot检测表明原核表达蛋白是目的蛋白。     

碱酶两步法制备大米蛋白的研究

该文采用碱法和酶法两步加工碎米，制备得到纯度较高的大米蛋白。通过研究米粉粒度、pH值、温度、水料比和时间对提取率的影响，确定碱法制备大米蛋白的较佳工艺条件为：米粉粒度80目，pH 11.0，温度50℃，水料比8，时间120 min。采用α-淀粉酶对大米蛋白进行纯化，酶解条件为：加酶量60 U/g，pH 6.0，温度50℃，时间30 min。在上述工艺条件下制备大米蛋白，提取率为73.22%，纯度为88.75%。     

链霉菌(Streptomyces TE66 ) MalQ基因克隆与原核融合表达

用PCR方法获得Streptomyces TE66 MalQ基因，将该基因插入原核表达载体pTrc-CKS中，对质粒所含外源片段双向测序，并经BLAST比较分析，发现其与GenBank中报道的Streptomyces coelicolor MalQ基因的同源性高达97％。重组质粒转化E.coli Top 10F’，经IPTG诱导后以融合蛋白形式表达，SDS-PAGE电泳显示MalQ基因与CKS表达的融合蛋白在目标位置约106kDa处有明显条带。经薄层层析分析粗酶液酶处理的麦芽三糖溶液，证实粗酶液具有麦芽糖转糖基活性。     

中国小麦胚芽资源分布及深加工相关品质

粮食加工副产物的深加工与综合利用是中国粮食工业发展的重要方向,为了准确获得中国小麦资源总量、分布以及品质状况,在调查中国小麦胚芽资源分布基础上,从中国小麦主产区的大型面粉企业采集小麦胚芽样品,分析商用小麦胚芽的主要营养组成以及微生物污染状况。结果表明,中国每年实际可利用小麦胚芽约20万t,资源主要集中在山东、河南、河北等省;商用小麦胚芽的平均酸价(以KOH计)22.8mg/g,夏季最高达60.4mg/g;其平均含水率为12.1%、蛋白质质量分数为33.70%(其中赖氨酸质量分数为2.10%)、油脂质量分数为11.12%(其中亚油酸质量分数为58.34%),α-生育酚质量分数为0.23%;其菌落总数平均为2.65×104cfu/g。小麦胚芽资源调查与品质评估结果,对中国粮食工业发展规划和粮食副产物深加工企业决策将具有重要的参考价值。     

葡萄籽中水溶性钙结合蛋白的分离和鉴定

为了开发植物源葡萄籽补钙制剂,该研究通过亚细胞定位试验表明,葡萄籽的胚乳中含有大量的钙元素。通过电泳分析发现,葡萄籽的水溶性蛋白包括2种主要成分,其中一种是11 S球蛋白(蛋白质B),也是最主要的钙结合蛋白,另一种是表观分子量为670 k Da的蛋白质A。在蛋白质组成相同的情况下,用传统的碱溶酸沉法来分离葡萄籽蛋白会导致大量的钙流失。但用30%~50%硫酸铵沉淀法得到的蛋白质得率是(22.5±0.02)g/kg,蛋白质中钙质量分数(3.47%)是碱溶酸沉法(1.11%)的3倍。该研究结果为食品工业中矿物结合蛋白质的分离纯化提供参考。     

光系统Ⅱ抑制型除草剂Atrazine诱导小麦幼苗叶绿体蛋白质组变化分析

为了研究除草剂作用机理,用光系统Ⅱ抑制型除草剂阿特拉津（Atrazine）处理小麦幼苗,用2-DE技术和生物质谱方法,分析了叶绿体蛋白质组的变化。结果发现,在10mg·L-1浓度处理时,有7个叶绿体蛋白质斑点（斑点1,50kDa/PI8.1;斑点2,41kDa/PI8.4;斑点3,41kDa/PI7.6;斑点4,23kDa/PI7.1;斑点5,31kDa/PI5.0;斑点6,35kDa/PI8.9;斑点7,14kDa/PI8.1）丢失。对7个发生变化的斑点利用MALDI-MS方法,于NCBI进行数据查询,其中,有6个叶绿体蛋白质归属得到鉴别,它们是Calvin循环中,固定CO2的RuBPcase的激活酶（2个同工体和1个β型前体）,在H2O氧化裂解中起重要作用的23kDa氧释放蛋白（psbp protein）,在能量转贮中起重要作用的3-磷酸甘油酸激酶和催化HCO3--CO2水合作用可逆反应的碳酸酐酶。研究表明,叶绿体蛋白质组中丢失的6个蛋白质是Atrazine处理的相关蛋白。     

一种简易快速鉴定动物组织总RNA质量的方法

通过一系列的对比实验发现,RNA电泳检测效果不仅与凝胶孔径大小和稀释与否相关,而且也与电泳时间长短和RNA上样量的多少有关。建立了一套可方便快捷地鉴定动物组织总RNA质量的方法,即在孔径宽度为7 mm的1.2% 琼脂糖凝胶上,仅需取3~5 μg 总RNA,加6×RNA上样缓冲液混合并用无RNase的灭菌双蒸水稀释到一定体积后上样,电泳15~30 min即可准确地鉴定RNA的质量。经实践证明,该方法实用性强,重复性好,具有良好的推广应用价值。     

棉花胚珠蛋白三氯乙酸丙酮法与酚抽提法的比较分析

以亚洲棉（Gossypium arboreum）DPL971及DPL972初生壁合成期的胚珠为材料，通过蛋白质产率、纯度测定以及凝胶电泳图谱对三氯乙酸丙酮沉淀法和酚抽提法进行了比较分析，结果表明：1.两种方法均能获得大量的可溶性蛋白，但是酚抽提法获得的蛋白产率高、质量好、种类多；2.两种方法提取的蛋白种类有所不同，但酚抽提法在酸性区域以及对高分子量和低分子量蛋白的提取有更好的表现；3.酚抽提法可以更加有效地清除干扰物质，获得高质量的凝胶图谱，适合棉胚珠组织蛋白的提取。实验为棉纤维发育期蛋白质组学的研究提供了参考，同时对包含多种干扰物质的其它非模式植物蛋白提取也具有一定的借鉴意义。     

草菇低温诱导蛋白的分离与纯化

低温4℃诱导草菇（Volvariella volvacea (Bull.ex Fr)Sing.)菌丝体2h后，对其可溶性蛋白进行分析，发现草菇在低温胁迫下有新的可溶性蛋白质产生。应用硫酸铵分级沉淀和电泳分离制备技术，分离和纯化得到了草菇菌丝体中的一个低温诱导蛋白，用聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳等方法分析该蛋白，结果均呈现为单一条带。SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明蛋白是由分子量为51kD的一个亚基组成，等电聚焦电泳结果发现该蛋白的等电点为3．73。     

小麦幼穗蛋白质双向电泳条件的优化

本研究以温光敏小麦为试材,用TCA/丙酮和酚提取法提取小麦幼穗蛋白样品,进行了双向电泳优化分析,并对双向电泳过程中出现的问题进行了讨论。结果表明,用TCA/丙酮法提取小麦幼穗蛋白质其产率（浓度）高于酚提取法。SDS-PAGE电泳显示,用TCA/丙酮提取法提取的蛋白质能获得较清晰条带,分辨率较高,而酚提取法提取的蛋白质其条带模糊,分辨率低。对蛋白质纯化除盐可以提高分辨率,减少横竖纹,获得背景清晰的圆形蛋白点。通过ImageMasterTM 2D Platinum5.0软件分析凝胶图谱,结果显示纯化后可降低噪点,纯化后蛋白点数可从未纯化蛋白点数的216增加到583。显然,采用TCA/丙酮法可获得高浓度高质量的蛋白质,而进一步纯化、除盐离子可进一步获得背景清晰可高重复性的电泳图谱。在双向电泳实验过程中,观察到一些异常缺陷胶的出现,如双向电泳图谱中蛋白点扩散,蛋白聚集形成斑点串,没有点或点很少,出现纵纹横纹及图谱扭曲等影响图谱质量的严重问题,本研究对这些问题做了分析并提出了解决方案。     

烟草钾转运体基因NtHAK1的克隆及表达模式分析

采用RT-PCR的方法,结合3'RACE与5'RACE,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种K326中克隆出烟草K+转运体基因NtHAK1的全长cDNA序列.该序列长度为2016bp,编码378个氨基酸,其分子量为42.27kDa,等电点7.2.生物信息学分析表明,该蛋白具有6个跨膜区,含有K+转运蛋白...     

长期轮作和连作对白浆土中氮素的影响

对轮作及大豆、玉米、小麦长期连作白浆土中氮含量及有机态氮组分变化进行研究。结果表明，在不施肥情况下，小麦连作区土壤由全氮、碱解氮降幅最大，酸解总氮、氨基酸态氮和氨基糖态氮降幅最小。在施有机肥情况下，土壤全氮、碱解氮及酸解总氮则以小麦连作区增幅最小，玉米连作区增幅最大；氨基酸态氮和氨基糖态氮在轮作区增幅最大。其他组分氮在轮作与连作小区间变化无规律。     

鸡蛋壳膜角蛋白不同提取工艺的效果比较

为探索不同方法提取的鸡蛋壳膜角蛋白的得率及其结构的区别,为鸡蛋壳膜角蛋白工业化生产方法的选择提供理论依据,分别采用氢氧化钠碱法、过氧化氢氧化法、碱性蛋白酶法从鸡蛋壳膜中提取角蛋白,以其反应速率及产品角蛋白的得率、分子量、结构完整性等为指标,比较3种不同提取方法对鸡蛋壳膜角蛋白性质的影响。试验比较结果表明,角蛋白得率:氧化法(24.33%)碱法(19.31%)酶法(15.19%);反应速率:氢氧化钠碱法最快,过氧化氢氧化法次之,碱性蛋白酶法最慢;角蛋白分子量:碱性蛋白酶法(31~43 kDa)氢氧化钠碱法(14.4~20.1 kDa)过氧化氢氧化法(14.4 kDa);角蛋白结构:碱性蛋白酶法和氢氧化钠碱法提取的角蛋白,二级结构保存完整,过氧化氢氧化法提取的角蛋白二级结构受到了破坏。氢氧化钠碱法和碱性蛋白酶法可用于生产分子量高、二级结构完整的角蛋白产品,而过氧化氢氧化法是生产小分子肽类角蛋白产品较好的方法。     

引进美国小麦种质资源抗病性及品质性状鉴定

为了挖掘新的种质资源，本研究对引自美国的442份小麦材料对白粉病和条锈病的抗病性、蛋白含量以及高分子量麦谷蛋白(HMW-GS)亚基组成进行了鉴定分析。抗病性鉴定结果显示，153份材料抗白粉病，27份抗条锈病，6份兼抗两种病害。蛋白质含量达到GB/T 17892-1999《优质小麦强筋小麦》一等(粗蛋白质含量≥15.0%)的样品有143份。高分子量麦谷蛋白检测发现，供试材料共含18种HMW-GS亚基和100种不同亚基组合类型，其中N,7+9,5+10出现次数最多，优质亚基1、2*、7^oe、17+18、5+10的材料分别占总材料数的25.6%、5.2%、27.8%、7.7%和25.6%，含7^oe,5+10亚基的有36份，含2*,5+10亚基的有1份，含2*,7^oe亚基的有7份。综合抗病性及品质分析结果显示，PI 17738等11份材料至少抗1种病害，且蛋白含量≥15.0%，湿面筋含量≥35.0%，同时含有稀有优质亚基。以上11份材料可作为我国优质、抗病小麦培育亲本，为我国小麦抗病和品质遗传改良提供优异基因源。     

低次烟叶中蛋白质提取工艺优化及氨基酸分析研究

为了充分综合利用低次烟叶蛋白资源，采用碱溶酸沉法对低次烟叶中蛋白质的提取工艺进行了研究，并利用高效液相色谱系统对其氨基酸组成进行了分析。研究结果表明：烟叶磨浆的最佳工艺为固液比1∶17，提取温度60℃，提取液pH值8.0，磨浆两次；烟叶蛋白碱溶最佳工艺为温度60℃，pH8.0，时间60 min，搅拌条件下碱溶提取3次；烟叶蛋白酸沉工艺中，在pH3.0，4℃下静置8 h效果最佳，烟叶蛋白酸沉提取率最高为86.71％；烟叶蛋白的氨基酸分析结果显示，烟叶蛋白的氨基酸组成种类齐全，必需氨基酸含量较高，氨基酸分数较高，表明低次烟叶蛋白是一类比较优质的蛋白质资源。     

早籼米制备大米蛋白和酒精的联产工艺研究

该文以早籼米为原料，采用碱法提取大米蛋白并利用残余淀粉发酵制备酒精。通过研究碱液浓度、提取温度、料液比和时间对大米蛋白提取的影响，确定了提取大米蛋白的较佳工艺条件为：碱液浓度0.05 mol/L、提取温度30℃、料液比1∶4、提取时间2 h。此条件下提取的大米蛋白纯度为94.9%，提取率为52.4%。残余淀粉中添加25%的玉米粉有较好的发酵效果：发酵时间45 h，酒精度为12.78%，残余还原糖为0.13%。     

秸秆灰、生物菌肥与化肥配施对土壤养分和设施碱蓬产量及品质的影响

以单施氮磷肥为对照,研究设施栽培条件下秸秆灰、秸秆灰配施生物菌肥、生物菌肥、碳酸钾及碳酸钾配施生物菌肥对碱蓬嫩茎叶产量、品质、养分形态及土壤养分的影响。结果表明,+K、+KM、+A、+AM及+M处理使碱蓬3次收获的嫩茎叶总产量显著增加14.3%～41.1%,其中,以+A与+AM处理增产效果最显著。+A与+AM处理碱蓬嫩茎叶中Vc含量提高14.3%～28.3%,氨基酸含量提高5.4%～27.3%,硝酸盐含量降低13.3%～14.8%,营养品质得到明显改善。碱蓬嫩茎叶中磷、钾养分形态均以非蛋白态为主,氮素养分形态比较均衡。+AM与+A处理提高了碱蓬嫩茎叶中非蛋白态养分含量,且+A与+AM处理使土壤有效磷、有效钾及有机质含量增加21.3%～128.0%,显著高于施用化肥的处理。     

不同制备方法对花生蛋白功能性质的影响(简报)

该文研究了不同制备方法对花生浓缩蛋白功能性的影响,以期为不同制备方法制得的花生浓缩蛋白在食品中的广泛应用提供理论支持。以脱脂花生蛋白粉（DPF）为原料,通过等电沉淀、乙醇浸提、等电沉淀与乙醇浸提相结合及碱溶酸沉技术制备花生浓缩蛋白,并分别测定其蛋白功能性（蛋白溶解性、吸水性、持油性、乳化能力及乳化稳定性、起泡能力及泡沫稳定性、凝胶性质）。结果表明：碱溶酸沉技术制备的蛋白溶解性、起泡能力及泡沫稳定性最好;而乙醇浸提制备的蛋白吸水性、持油性和凝胶性质要显著性的高于其他方法制备的蛋白产品的;不同方法制备的花生浓缩蛋白的乳化稳定性均明显低于对照（DPF）,尤以碱溶酸沉技术制备的最低。因此可知,乙醇浸提制备的蛋白适用于对吸水性、持油性和凝胶性质要求较高的食品中;碱溶酸沉技术制备的蛋白适用于对起泡能力要求较高的食品中。