污染细菌的试管母种纯化法

在制作食用菌试管母种时,常因转管操作不慎而污染上好气性芽孢杆菌,有时从外地购回的试管种也常因破细菌污染而弃之。为此我们参考了有关抑制细菌生长的资料,经多次试验找到一种纯化的好方法,现简介如下:将配制好的PDA 培养基,装入三角瓶中,在1公斤/厘米~2高压下灭菌30分钟,待冷至50℃时,事先用无菌水配好的链霉素溶液,浓度为100毫升培养基古链霉素2000单位,充分混匀后注入培养皿内。冷凝     

黑木耳菌种母种的生产技术

<正>1母种培养基配方母种培养基用试管作培养容器,装入培养液并经过高压灭菌后摆成斜面,所以又称试管斜面培养基,常用于母种扩大培养及菌种保存。1.1生产母种配方1.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。1.1.2马铃薯葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:马铃薯200克,蛋白胨10克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。     

快速制作斜面培养基方法

制作斜面是制备菌种不可缺少的一步,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。我们在实践中摸索出一种简捷快速制斜面培养基的方法,现介绍如下: 1 将胶合板截成长18cm(与试管长度相等或略短),宽9cm(比排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。 2 在并排5支试管上面平置截好的胶合板,再在胶合板上面并放5支试管,然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好,用线扎紧,使胶合板两侧的试管保持平行,置高压锅中灭菌。 3 高压灭菌后,经自然冷却,待气压降至零时,将高压     

黑木耳组织分离的新消毒法

多年来,在黑木耳的组织分离中通常采用酒精及升汞水溶液消毒.由于消毒效果不理想,杂菌污染严重.在反复试验的基础上,我们探索了一种加青霉索、链霉素的新消毒方法,取得了良好效果.(一)配制药液取一支80万单位的医用针剂青霉素及一支100万单位的医用针剂链霉素,溶于5毫升的无菌水中搅匀备用.(二)试验处理设3个处理,每处理为一组,每组为10支装有PDA培养基的试管,灭菌后在未摆斜面前,将配制好的青、链霉素水溶液分别加入三组试管中:a组每支试管注入0.2ml;b组每支试管注入0.4ml;c组每支试管注入0.6ml.     

天麻的人工栽培技术——第二节 蜜环菌菌棒和菌床的培育

(一)母种的制作 ①培养基配方:马铃薯20％,白糖2％,阔叶树木屑7％,蛋白胨0.2％,硫酸镁0.015％,磷酸二氢钾0.03％,麸皮5％,琼脂2％,水100ml。②培养基制作:马铃薯去皮洗净,挖去芽眼,切成薄片,与木屑、麸皮混合,加水煮沸10分钟,用双层纱布过滤,取滤液加其它配料,煮沸至琼脂溶化后装试管、灭菌(1.5kg/cm~230分钟)趁热摆成斜面,冷却备用。③接种培养:在无菌箱内,蜜环菌种接入斜面培养基,每支母种可转接20～30支试管,接种后置24～26℃下培养10天左右,即可使用或保藏。 (二)原种的制作 ①培养基配方:木屑77％,白糖2％,麸皮20％,石膏粉1％,水130％,pH值自然。     

菌种贮存五法

菌种贮存五法１液体石蜡贮存法。用化学纯液体石蜡，经高压灭菌后，置于４０℃恒温箱中或太阳下数小时，或放置干燥容器中数日，使高压灭菌时渗入石蜡中的水蒸汽蒸发掉。用无菌吸管或注射器吸取上述液体石蜡，注入菌种试管中，以高出斜面顶端１ｃｍ为度，试管口塞上棉塞，...     

菌种培养基简易制备方法

一、母种培养基的制备和菌种的分离及培养〈一〉培养基配方:1.PDA 培养基(常规配制装管)。2.碎玉米培养基:把玉米粒粉碎成0.1—0.3厘米大小的碎粒,加水浸泡12小时后,煮沸10分钟,拌入2%的石膏粉,凉干表面水分即可装管灭菌。但玉米粒培养基要装至试管的一半,且不需摆斜面。〈二〉灭菌:把试管放入低于管口7厘米的金属器皿内(高于管口棉塞易受潮,加低于器皿3     

食用菌斜面菌种的纯化

食用菌斜面菌种在分离、培养过程中,有时会受到杂菌的污染。因此,要及时进行纯化培养。下面介绍几种简易的纯化方法。利用寄主组织或子实体进行组织分离,在分离培养基内加入链霉素(30单位/毫升)可抑制细菌生长;加入灰黄霉素(20单位/毫升)、制霉素(30单位/毫升)可抑制真菌生长。斜面受到细菌污染,可酌情采用下列方     

怎样制作袋栽银耳菌种

袋(瓶)栽银耳菌种的制作,包括母种分离和提纯、原种培养、栽培种扩大三阶段。 (一)母种的培养:首先要配制培养基,取马铃薯200克,洗净、去皮、切碎,加水1000毫升煮沸30分钟,用8层纱布过滤,取溶液,加琼脂20克、葡萄糖20克,文火加热至琼脂溶化,趁热分装试管,高压灭菌(1.2公斤/厘米~2)30分钟,趁热排斜面。 1.银耳孢子的弹射:选一朵八成熟、朵形大、肉质厚、色鲜白、无杂菌的银耳作为     

利用粪草培养基制作双孢菇母种

用粪草培养基制作双孢菇母种,接种块萌发早,菌丝长势旺、均匀,菌丝满管较常用的玉米粉、PDA、麦粒等培养基制种早5～10天。现将其制作方法介绍如下: 1培养基配方 干粪草料250g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.59,VB_13片,蛋白胨5g,水1000mL。 2培养基制作 粪草料(发酵好的双孢菇粪草培养料)250g,置铝锅中,加水至淹没料,煮拂保持20～25分钟,用4～6层纱布过滤,取滤液;将滤液加热至沸,加入琼脂,文火并用玻棒搅拌,待琼脂完全溶化后加入其它营养物质,使其溶化;最后补足水至1000mL,调pH值,趁热分装试管(占试管长度的1/4～1/5),注意培养液易沾附试管口壁,加棉塞,5支或10支一把用牛皮纸包扎好,高压灭菌30分钟,趁热摆斜面。 3接种培养 试管斜面冷却凝固后,放入超净工作台或接种箱接种。接种后置25～28℃温度下培养,一般12～15天满管。     

小米做凤尾菇母种扩大培养基

为便于菇农就地取材扩制母种,我们进行了用小米做凤尾菇母种扩大培养基试验,取得了良好的效果,现简报如下。 (一)培养基配制:小米适量,加水量为小米的1.2～1.3倍。小米用量以试管大小而定,20×200mm的试管可装小米5克,加水6毫升(不可过量),用棉塞封口后置高压锅内120℃灭菌半小时或常压灭菌2小时,冷却后于无菌条件下在培养基上打一个深达管底的小洞即可接种。     

卫生纸试管的制作

常用的琼脂斜面试管,制作手续较为麻烦,为此介绍一种简易可行的卫生纸试管做法。培养基配方:取清水500毫升,加入白糖20克,维生素B_13片,维生素B_63片。搅拌溶化后备用。用卫生纸一张折裁成7厘米见方小块,取8块一摞,再折叠成2厘米宽小条块。然后分装试管,一张卫生纸可制作4支试管。小条块装入试管后,即可将培养液倒入试管浸湿卫生纸后,再将多余的培养液倒出。千万不得使试管里有流动余液。然后用一层耐高温塑料纸包扎试管口,而后再用两层牛皮纸包扎。包好后置于1.5公斤/厘米~2高压灭菌30分钟,或常压灭菌3小时。     

食用菌杂菌防治法

在食用菌栽培过程中,杂菌污染是造成减产甚至失败的主要原因,如何将杂菌污染的损失降至最低,现总结如下(以黑木耳为例),以供读者参考。1试管母种(斜面培养基)在菌种分离或继代扩繁时,由于种种原因,造成培养基受杂菌污染,早期发现可采取如下处理。1.1种接前发现细菌污染早期表现在斜面培养基周围的乳白色糊状物。不论面积大小,应立即淘汰被污染试管,之后将剩余     

失水空白琼脂培养基恢复试验

空白琼脂培养基存放久了由于失水干裂,无法使用,造成很大浪费。如何使培养基恢复,还要保证其营养成分不变,笔者就这一问题进行了试验。(一)用品无菌水,接种箱,70％酒精液,酒精灯,酒精棉球,注射器,铝锅,平菇菌株F_3,失水空白琼脂PDA培养基。(二)做法试验的全过程必须在灭菌接种箱内完成。注射器先吸入70％酒精液进行内部消毒,然后吸入无菌水清洗2次。根据失水多少注入水量也不同。一般18×180mm试管每支注入2～3ml。用酒精棉球先擦试管口,再用酒精灯烧棉塞外层,然后将已吸入无菌水的注射器针头灼烧灭菌后,沿管壁插入试管内,注水后迅速抽出,…     

猴头菇母种培养基调酸技术

猴头菇菌丝适宜在酸性环境下生长,一般要求pH值在4.5～6.5,而培养基中的琼脂在pH值过低时易被水解难凝固,尤其培养基高压灭菌后.pH值会下降。因而在调节猴头菇母种培养基酸度时,操作手续较复杂、费时。对此,笔者进行了本项研究,现简报如下: (一)试验材料 猴头菇为常山99(引自浙江微生物研究所),琼脂,醋酸,氢氧化钠,柠檬酸,母种培养基为PDA。 (二)试验方法 采用三组不同的调酸处理和一个空白对照。A.将制好的PDA培养基分装于试管和用柠檬酸调好pH值为5.0的酸性水溶液于试管中,高压灭菌后在无菌条件下海支试管滴少许配制好的柠檬酸酸性水溶液混合凝固。B.前半部方法与A组同,灭菌     

黑木耳原种常见的问题及其原因

1霉菌污染如果出现在种块上,属于母种问题;培养基表面污染,是没有严格按照无菌操作程序所造成;培养基深处同时有霉菌污染,属于培养基灭菌不彻底。培养基含水太低也容易引起霉菌污染。2母种块成活但不吃料原料不新鲜,配好料后积压时间过长,装瓶(袋)后没能及时灭菌、装锅灭菌温度     

松木屑栽培猴头菇

用松木屑栽培猴头菌,经几年的探索,已获得满意的结果,现总结如下。(一)菌种制作:供试菌种引自三明食用菌研究所,后经组织分离复壮。1.母种制作:培养基为麸皮50克,米糠50克、硫酸铵1克、蔗培20克、琼脂18—20克,加水至1000毫升,pH 自然。分装试管,在1公斤/厘米~2下灭菌30分钟,制成斜面冷却后接菌种,在18—20℃下培养7—12天,菌丝长满斜面即成母种。此培养基由于麸皮和米糠较多,通气较好,营养全面,因此菌丝生长粗壮,浓密、洁白、形态正常,生长速度较快。     

用麦粒替代琼脂制试管母种

琼脂斜面母种,易失水、老化,保存时间较短,且在转接时有的琼脂块不萌发,有的长势较弱。为此,我们于1993年初试用麦粒培养基制试管母种,经三年多的实践证明,用麦粒生产试管母种具有诸多优点:原料价廉,操作简单,对菌种有复壮作用,菌丝萌发快且粗壮,抗老化,室温保藏一年左右也不会影响菌种质量。具体操作:称取干小麦1kg,加水煮至无白心(全张而不破皮),沥水后凉晒干至麦粒抓在手里不湿手为宜,装管至1/2,加棉塞,每公斤小麦可装150支试管,每10支扎成一捆用薄膜包住棉塞,高压灭菌1.5小时或常压灭菌6小时,自然冷却后即可用于接种。     

简易扩繁生产用母种的尝试

食用菌母种的扩繁一般是利用马铃薯、琼脂培养基,或其加富培养基,装在试管中,高压灭菌,无菌接种,生产比较繁锁,高温易感染,特别是在扩繁草菇种时很容易引起细菌及酵母感染.     

食用淀粉可配制斜面培养基

我们用市售以豌豆为原料制成的烹调用淀粉(俗称豆粉)配制成淀粉斜面培养基进行试验,效果良好。方法去皮马铃薯200克切碎,加水800毫升煮沸20分钟,四层纱布过滤,滤液中加入蔗糖20克。待滤液温度降至30℃左右时加入食用淀粉250～300克,加水至1000毫升,搅匀,立即分装试管,塞好棉塞,将其置于搪瓷盘中摆成斜面。将盛试管的搪瓷盘移入1000℃烘箱中烘烤30分钟形成斜面。取出试管