盐酸克仑特罗单抗检测试剂盒的研制

在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0.1ng/ml,检测范围在0.1～10ng/ml,通过对24份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%。     

盐酸克仑特罗单抗检测试剂盒的研制

在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上，首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒，本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选，并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0．1ng／m1，检测范围在0．1～10ng／ml，通过对24份阳性样品检测并与德国r—b1opharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验，阳性符合率95．8%。     

肉品中莱克多巴胺残留的酶联免疫快速检测方法的建立

用自主制备的莱克多巴胺特异性抗体建立了猪肉样品中莱克多巴胺药物残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并将该检测系统与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比分析。结果显示:莱克多巴胺药物残留的酶联免疫检测体系的检测范围为1～100 ng,灵敏度为0.12 ng/mL,检测限为1 ng/mL,回收率为80%～100%,与同类药物如盐酸克仑特罗、硫酸特布他林及硫酸克仑特罗的交叉反应率均小于0.01%;采用HPLC方法进行莱克多巴胺药物残留的检测时,其检测范围为10～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为83%～100%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊于HPLC方法。     

高效液相色谱-串联质谱法研究猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺的残留及代谢规律

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺残留的方法。猪毛发经1 mol/L氢氧化钠溶液水解、乙酸乙酯萃取、MCX固相萃取柱净化,流动相溶解后用HPLC-MS/MS进行检测。克仑特罗在1.9～463.2 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 0);回收率为83.3%～86.6%,相对标准偏差为6.7%～9.2%;检出限为0.3μg/kg,定量限为0.8μg/kg。莱克多巴胺在2.8～562.9 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 2);回收率为83.4%～88.4%,相对标准偏差为7.2%～9.6%;检出限为0.4μg/kg,定量限为1.2μg/kg。应用该方法研究了克仑特罗、莱克多巴胺在猪毛发中的代谢规律并进行了猪毛发样品检测。结果喂药7 d至停药21 d猪毛发中均检出克仑特罗、莱克多巴胺残留;检测猪毛发样品25份,1份样品检出克仑特罗,残留量为58.68μg/kg。     

农业部发布饲料中盐酸克仑特罗测定的行业标准

农业部今年 2月印发的农市发 [2001]2号文通知：“饲料中盐酸克仑特罗的测定”等 5项标准业经农业部审查批准为中华人民共和国行业标准，其中“ NY 438－ 2001饲料中盐酸克仑特罗的测定”属强制性标准。 农业部发布饲料中盐酸克仑特罗测定的行业标准     

动物尿液中盐酸克仑特罗残留检测LC-MS/MS法探讨

本文在参考国内外文献的基础上,对高效液相色谱串联质谱法测定猪尿中盐酸克仑特罗残留进行了探讨,建立了快速测定动物尿液中盐酸克仑特罗的高效液相色谱串联质谱检测法。用移液枪准确吸取1.00 m L样品于50 m L离心管中,加入10 m L乙腈水,涡旋混合后超声。取样液过固相萃取小柱,用玻璃小管收集,移出至黑色带刻度离心管,再用45℃水浴氮吹至吹干。最后用1.00 m L流动相溶解定容,充分涡旋混合,过膜后上UPLCMS/MS测定,建立了猪尿中盐酸克仑特罗残留的高效液相色谱串联质谱检测方法。具有良好的线性关系,相关系数r=0.999 86;加标回收试验的变异系数及回收率范围等结果满足GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求。本试验方法前处理过程简便、快捷、易操作,LC-MS/MS及流动相梯度等一系列的条件设置合理,经LC-MS/MS打碎后的定性定量离子辨识度高,有较高的响应,测得检出限可满足检测需求,验证结果具有较好的精密度和准确度,可用于猪尿中盐酸克仑特罗残留检测[1]。     

沙丁胺醇残留的酶联免疫检测方法的建立

用自主制备的沙丁胺醇特异性抗体建立了针对沙丁胺醇残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并与高效液相色谱方法进行了对比性分析。结果显示:沙丁胺醇药物残留的间接竞争酶联免疫检测体系的检测范围为1～80ng/mL,灵敏度为0.58ng/mL,检测限为1ng/mL,回收率为70～99%,与盐酸克仑特罗、硫酸特布他林交叉反应率分别为107%、10%,与盐酸莱克多巴胺及肾上腺素的交叉反应率小于0.01%;采用HPLC方法进行沙丁胺醇药物残留的检测时,其检测范围为10μg/mL～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为80～95%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊与HPLC方法。     

ELISA检测盐酸克仑特罗的经验与体会

酶联免疫吸附法(ELISA)是一种敏感性高、特异性强、重复性好的测定新技术,具有操作简便、样品容量大、成本低等优点,也是目前盐酸克仑特罗的主要检测方法.     

高效液相色谱/质谱联用仪测定盐酸克仑特罗

利用高效液相色谱质谱检测器 ,建立了检测盐酸克仑特罗的方法。其中质谱 (SIR)检出限为 0 .0 1～ 5 μg/kg ,液相色谱中外检测器的检测限为 0 .3μg/kg ,最大吸收峰 2 96nm ,符合农业部规定动物性食品中的盐酸克仑特罗检测限 :1μg/kg。本方法可用于定量、定性检测     

猪尿中盐酸克伦特罗ELISA方法检测及注意点

“瘦肉精”学名盐酸克仑特罗，近年来，有个别药厂或养殖场受经济利益的驱使，在饲料中添加盐酸克伦特罗等β-肾上腺素能激动剂，使肉猪的瘦肉率大大提高，导致猪肉食品中盐酸克伦特罗等β-肾上腺素能激动剂残留严重超标，消费者食用了这种猪肉会出现严重的毒副作用。至今已发生多起“瘦肉精”集体中毒事件，因此对出栏前生猪“瘦肉精”的检测和监控是我们确保食用肉产品安全的重要保证。下面介绍一下我们实验室中最常用的一种检测方法：ELISA方法。     

猪尿中克伦特罗检测方法--酶联免疫吸附测定法

农业部于2001年11月1日发布农牧发[2001]38号文，发布10种动物源食品中兽药残留检测方法。方法之十：猪尿中克伦特罗检测方法——酶联免疫吸附测定法。全文如下：猪尿中克伦特罗检测方法——酶联免疫吸附测定法1范围本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是…     

ELISA快速检验饲料和家畜尿液中的“瘦肉精”

酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）,是目前检测家畜饲料、产品以及组织、尿液中瘦肉精的最常用、最快速的方法。本文针对此方法和其它检测方法做了详细的比较,提出了酶联免疫吸附方法点板操作时的注意事项,并总结了在检测样品过程中注意的要点和经验。     

ELISA试剂盒用于检测猪尿中赛庚啶残留的考察

对市场销售的四种未明确标识可用于猪尿样品的赛庚啶ELISA试剂盒进行考察,使用空白猪尿和不同浓度的空白添加猪尿对其反应原理、可操作性、灵敏度、检测限、回收率等进行研究,发现其中三种赛庚啶ELISA试剂盒可用于猪尿中赛庚啶残留检测,但需根据试剂盒的特点按需选择。结果表明使用市售的ELISA试剂盒监测猪尿中赛庚啶残留简便可靠,可作为初筛方法,检坝0限为0．5μg／L。     

应用酶联免疫吸附法(ELISA)结合胶体金试纸法快速筛选猪尿中的盐酸克伦特罗残留

猪尿中盐酸克伦特罗（Clenbuterol．简称CL）的残留检测，目前的检测方法．主要有高效液相色谱法（HPLC）．气相色谱-质谱法（GC/MS）．毛细管区带电泳法（CE）和酶联免疫吸附法（ELISA）等。其中GC／MS法是农业部规定的动物组织中CL确证检测方法（NY/T468-2001）．ELISA法是农业部规定的猪尿中CL筛选检测方法。GC/MS法具有灵敏、准确、特异的优点，但存在仪器贵重、操作烦琐、费用昂贵、耗费时间等问题．限制其在基层日常工作中的应用。     

尿液蛋白质组学

随着新技术的出现与多种技术之间的交叉融合,尿液蛋白质组学研究发展迅速。论文概述了正常的尿液蛋白质组学研究发展历程,生理情况下的尿液蛋白质组学研究进展及在尿液中已检测到疾病相关蛋白标记物的研究,列举了一些收集和整合尿液蛋白质组数据的共享平台。目前,正常尿液中的大多数蛋白种类已近被发现,建立基本的尿液蛋白质数据库非常必要的;病理状态生物标记物的检测已进入临床应用阶段,然而一种生物标记分子往往不能特异性的标记一种疾病或一个生理变化,可能需要多个相关学科的整合协调。尿液蛋白质组学研究还面临着许多困难,仍有许多工作需要去做。     

酶联免疫吸附测定技术新进展

酶联免疫吸附测定(Enzyme－linked immunosorbent assay,ELISA)技术是1971年由Engvall等建立的一种生物活性物质微量测定新技术，以其灵敏度高、特异性好等优点，在生命科学各领域得到广泛应用。在实际应用过程中，该技术得到不断改进，形成了多种分析方法，并且在检测的灵敏度、特异性、操作简单化以及实时、高效等方面都有很大提高，可以说ELISA是当前应用最广、发展最快的一项技术。本文仅就近几年ELISA的发展情况作一综述。 1 常规ELISA常规ELISA试验方法如间接法、双抗夹心法及竞争法或阻断法仍然被广泛用于诊断各种病毒、…     

Urine sediment from a Chihuahua

A 6-year-old, intact male Chihuahua was presented with stranguria and painful urination of 5 days duration. Cystine crystals were observed in low numbers in unstained urine sediment preparations, and a diagnosis of cystinuria was made. Uroliths were removed surgically from the urethra and the bladder, and mineral analysis indicated the stones were composed of 100% cystine. Cystinuria results from an inherited defect in renal tubular transport of cystine that affects many breeds and has been found as an autosomal recessive trait in Newfoundlands. Accurate identification of cystine crystals in urine is an important means of diagnosing cystinuria.