超排方案及冲胚方法对超排效果的影响试验

采用捷克、澳大利亚及国产促卵泡素（FSH）进行牛的超数排卵试验,对牛的处理采用FSH＋PG和FSH＋CIDR两种方式。结果表明：三种FSH来源获可用胚数分别为：5．43、5．33和4．80个,差异不显著（P〉0．05）;2次PG处理与CIDR处理供体牛所获得的回收卵数和可用胚数差异不显著（P〉0．05）;冲胚操作时采用不需硬膜外腔麻醉的注射式冲胚与传统需麻醉的滴注式冲胚比较。回收率分别为102％和98％,差异不显著;经产牛和育成牛超排效果比较,可用胚数分别为5．27和5．17个,无明显差异（P〉0．05）。     

放牧条件下不同处理对西门塔尔牛超排效果的影响

 为探索适合草原放牧条件下西门塔尔牛的超数排卵技术,分别采用国产及进口促卵泡素(FSH)和三种方案（A：FSH+PG;B：FSH+PG+GnRH;C：FSH+PG+CIDR +GnRH）对放牧条件下西门塔尔牛进行超数排卵试验。结果表明,采用国产FSH超排时,方案A、方案B和方案C所获头均可用胚数分别为（3.43±2.41）枚、（5.93±3.54）枚和（7.21±3.19）枚,采用进口FSH超排时,三种超排方案所获头均可用胚数分别为（4.34±2.71）枚、（6.76±3.79）枚和（7.79±4.23）枚,采用两种FSH超排,方案B、方案C所获头均可用胚数明显高于方案A（P<0.05）;3种方案中,国产与进口FSH所获头均可用胚数差异均不显著（P>0.05）。试验表明,在放牧条件下,采用三种超排处理方案,以FSH+PG+CIDR+GnRH法最好,FSH+PG+GnRH法次之,FSH+PG法效果最差;国产FSH与进口FSH超排效果差异不显著。     

克拉玛依地区荷斯坦牛超排效果及影响因素的分析

本研究比较了不同年度、季节、超排方法、促卵泡素（FSH）的剂量、超排处理开始时发情周期天数及供体牛年龄对荷斯坦牛超排效果的影响。结果表明，秋季、冬季与夏、春季比较在采卵数和可用胚数方面差异极显著（P〈0．01）。改进方法与常规方法比较采卵数差异极显著（P〈0．01），可用胚数差异显著（P〈0．05），8．0mL、9．4mL、10．0mLFSH剂量之间各项指标均差异显著（P〈0．05）。而超排处理的年度、超排处理开始时发情周期天数及供体牛年龄对荷斯坦牛超排效果影响不显著（P〉0．05）。     

促排卵3号在荷斯坦供体母牛超排中的应用效果

采用CIDR＋FSH＋PG法对114头进口新西兰荷斯坦供体母牛进行超排。其中LRH—A3处理60头，共回收卵651枚，回收率95．0％（651／685），可用胚362枚，头均6．0枚，可用率56．0％；对照组54头未用LRH—A3处理，共回收卵526枚，回收率93．8％（526／561），可用胚总数250枚，头均4．6枚，可用率47．6％。结果表明，LRH—A3对荷斯坦母牛超数排卵有显著影响。     

不同处理方法对胚胎移植受体牛同期发情及受胎效果的研究

试验分别采用CIDR＋E2（孕酮阴道栓法）和两次PGF2α（氯前列烯醇）法,对胚胎移植受体牛做同期发情处理,鲜胚移植,观察妊娠率。试验结果表明,受体牛在12—48h发情率分别为85．5％争67．5％,两者之间差异显著（P〈0．05）。移植前对受体牛进行黄体检查,黄体合格率分别为79．3％和77．8％,差异不显著（P〉0．05）。受胎率分别为57．4％和54．9％,差异不显著（P〉0．05）。     

三种同期发情方案对奶牛胚胎移植效果的影响

同期发情是胚胎移植的关键技术环节，本试验通过三种不同的同期发情方案比较其对奶牛胚胎移植效果的影响。结果显示：CIDR＋PG法同期发情率高于直检后一次PG法和2次PG法，但差异不显著（P〉0．05）。可是其48h内的同期化程度显著高于另外两组方案（P〈0．05）。三种方案的黄体合格率、妊娠率均无显著差异（P〉0．05），2次PG法高于另外两组。受体牛的初选合格率育成牛（87．13％）显著高于成母牛（68．5％）（P〈0．05）。育成牛同期发情率为89．04％，高于成母牛的77．01％，黄体合格率、妊娠率育成牛均略高于成母牛，但统计学上差异均不显著（P〉0．05）。     

重复应用CIDR进行超排的效果分析

2002年11月至2003年1月，在新疆金牛生物股份有限公司牛场开展了澳大利亚进口荷斯坦牛超数排卵工作。供体牛埋植CIDR进行超排。CIDR用过一次超排后，经过处理供第二次使用(第二次为旧CIDR)。经过对184头澳大利亚供体牛进行超数排卵，其中：14月龄供体牛埋植新CIDR平均每头获可用胚7．6枚，埋植旧CIDR平均每头获可用胚6．1枚；15月龄供体牛埋植新CIDR平均每头获可用胚胎6．9枚，埋植旧CIDR平均每头获可用胚胎6.6枚。对同一批次不同月龄供体牛平均每头获可用胚胎数进行对比分析，结果差异不显著。     

郏县红牛同期发情及超数排卵的研究

[目的]探讨生产中郏县红牛同期发情及超数排卵的方法。[方法]筛选75头郏县红牛分组分批进行同期发情及超数排卵。[结果]显示,CIDR+PG法处理组母牛同期发情率(100%)显著高于PG二次法处理组(76%)(P0.05);用加拿大促卵泡素(FSH)超排时头均获胚数6.33枚,用中科院动物所促卵泡素(FSH)超排时头均获胚数为6.00枚,二者差异不显著(P0.05)。[结论]分析结果可知,CIDR+PG法处理比PG二次法对郏县红牛的同期发情效果好;进口促卵泡素(FSH)与国产促卵泡素(FSH)对郏县红牛的超排效果无显著差异。     

体况和季节等因素对供体波尔山羊超排效果的影响

本试验以波尔山羊为对象,研究了供体体重、年龄及超排季节等因素对供体超排效果的影响。结果表明,体重和超排季节对供体超排效果没有显著影响（P〉0．05）,但供体年龄对超排效果的影响显著（P〈0．05）,经产羊的可用胚数显著高于育成羊;品种对超排供体的可用胚数没有显著影响（P〉0．05）;激素处理不是降低重复超排效果的主要因素（P〉0．05）。     

绒山羊胚胎移植技术研究

对22只辽宁绒山羊采用CIDR＋FSH方法，进行超数排卵处理，超排有效率87．5％，平均采胚14枚／只，最高个体采胚数26枚；对164只本地山羊采用CIDR＋PMSG方法，进行同期发情处理，24小时内同期发情率为100％；胚胎移植后两个情期不返情率（妊娠率）64．38％。     

非繁殖季节太行山羊胚胎移植方案研究

对48只太行山羊(供体羊)、40只太行山羊和120只奶山羊(受体羊)进行了同期发情和超数排卵胚胎移植试验。其结果如下:(1)CIDR PMSG对太行山羊同期发情,有效发情率为75%;CIDR FSH对奶山羊同期发情,有效发情率为73%。(2)CIDR FSH LH组平均可用胚胎数分别与CIDR PMSG组和CIDR PMSG LH组之间差异达到极显著水平(P<0.01),而与CI-DR FSH组之间差异显著(P<0.05)。(3)CIDR FSH LH超排时,用CIDR FSH对奶山羊进行同期发情,受体妊娠率为56%;CIDR PMSG对太行山羊同期发情,受体妊娠率为60%水平。证明在非繁殖季节对太行山羊采用CIDR FSH LH超数排卵和以太行山羊及奶山羊为受体分别用CIDR PMSG和CIDR FSH同期发情来进行胚胎移植的技术方案是可行的。     

供体牛外周血AMH浓度对荷斯坦青年奶牛体内胚胎生产效率的影响

旨在研究供体牛超数排卵（简称超排）过程中不同时间外周血AMH浓度与荷斯坦青年奶牛体内胚胎生产效率的相关性,优化供体牛筛选标准,提高荷斯坦青年奶牛体内胚胎生产效率。本试验共选用96头荷斯坦青年奶牛进行超排处理,分别在孕酮阴道栓（CIDR）埋置、人工授精和胚胎回收当天通过尾根采集外周血检测抗缪勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）浓度,将不同时期的外周血AMH浓度按照高（浓度分布最高的25%）、中等（浓度分布中间的25%~75%）、低（浓度分布最低的25%）分为3组,并检验了这3组之间头均回收胚胎数、头均可用胚胎数、头均退化胚胎数和头均未受精数等指标间的差异。结果表明：1）外周血AMH浓度检测结果显示,从CIDR埋置至胚胎回收的全过程AMH浓度整体呈下降趋势;2）CIDR埋置当天AMH高浓度组头均回收胚胎数（9.38±1.24）显著高于中等浓度组（6.47±0.56）（P<0.05）,说明CIDR埋置当天AMH浓度高的供体牛超排效果更好,回收胚胎数更多;但是,结果也表明,高浓度组头均未受精卵母细胞数显著高于其他两组（P<0.05）,说明部分卵母细胞未能成功受精,这可能是由于高浓度组牛只更多的卵泡优势化,排卵周期延长导致部分卵母细胞未能完成正常受精;3）人工授精和胚胎回收当天的AMH数据分析结果均表明,3组间各项胚胎生产指标均无显著性差异（P>0.05）;4）通过对供体牛体重记录数据分析发现,不同体重牛只间的体内胚胎生产效率差异也不显著（P>0.05）,但是体况适中组牛只的可用胚胎数、回收胚胎数优于其他两组,尤其是优于体重偏胖组。因此,CIDR埋置时,外周血AMH浓度可以作为青年荷斯坦供体牛筛选标准之一,且供体牛选择时宜选用体况适中的牛只。     

用荷斯坦奶牛性控精液生产体内性控胚胎

采用荷斯坦奶牛X性控冻精和超数排卵技术结合生产奶牛性控胚胎,以建立高效、低成本的体内性控胚胎生产方法。研究发现,使用CIDR和Cue-Mate进行奶牛同期发情处理,发情率分别为90.9%和100%(P<0.05),且Cue-Mate的发情时间更加集中;加拿大的FOLLTROPIN-V和中国科学院动物研究所的FSH对奶牛超排效果影响不显著,分别为头均胚胎数10.08枚±8.08枚、头均可用胚胎数2.38枚±3.07枚和头均胚胎数6.57枚±4.31枚、头均可用胚胎数2.00枚±1.88枚,无显著差异(P>0.05);奶牛发情后12h～14h和16h～19h人工授精,分别获得头均胚胎数10.25枚±5.53枚、头均可用胚胎数5.33枚±4.52枚和头均胚胎数10.13枚±6.93枚、头均可用胚胎数5.88枚±6.26枚,无显著差异(P>0.05)。但是未受精胚胎数差异显著(27对7,P<0.05)。     

日本和牛胚胎移植的试验研究

[目的]为了在我国引进日本和牛这一高等级肉牛品种并迅速扩大纯种日本和牛的数量.[方法]分别采用CIDR+E2法和两次PGF2α法对胚胎移植受体牛做同期发情处理,采用一步细管法冷冻的日本和牛胚胎进行移植,观察妊娠率.[结果]表明,受体牛经CIDR+E2法和两次PGF2α法处理后12～48 h的发情率分别为82.7%和45.9%,两者之间差异显著(P＜0.05),对90枚日本和牛胚胎进行一步细管法管内解冻,然后给62头CIDR+E2法处理和28头两次PGF2α法处理的受体奶牛移植,受胎率分别为43.5%和42.5%,产犊率分别为40.3%和39.3%,两者之间差异不显著(P＞0.05).[结论]经同期发情处理的受体牛,只要其子宫环境及卵巢黄体发育良好,被移植日本和牛胚胎都能正常妊娠和产犊;用日本和牛胚胎对低产奶牛进行移植,经三代纯化即可获得纯种日本和牛.     

不同因素对高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎生产效率和质量的影响

[目的]试验旨在探讨不同种类的促卵泡素(FSH)超数排卵处理、不同精液类型人工输精处理以及不同季节等前处理方式对高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎生产效率的影响,为高产胚胎牛后代的繁育做出贡献。[方法]试验选取208头优质供体牛使用加拿大(Folltropin-v)和比利时进口的促卵泡素(FSH)进行超排,性控冻精和性控鲜精进行人工输精,春(3—5月)、夏(6—8月)、秋(9—11月)、冬(12—2月)四季进行胚胎生产。[结果]结果表明,使用产地为加拿大(Folltropin-v)促卵泡素进行超数排卵头均可用胚胎数和I级胚胎数(包括桑葚胚I级、囊胚I级)均显著高于比利时(P<0.05);通过使用性控冻精和性控鲜精对供体牛进行人工输精头均可用胚胎数分别为和I级胚胎数差异均不显著(P>0.05);春、夏、秋、冬四季进行胚胎生产头均可用胚胎数和I级胚胎数夏季均显著低于其他三季(P<0.05)。[结论]因此,使用加拿大促卵泡素(Folltropin-v)超数排卵、性控冻精进行人工输精避免在夏季进行胚胎生产可获得质量较高的高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎。     

The effect of reduced dose and number of treatments of FSH on superovulatory response in CIDR-treated Korean native cows

The objective of this study was to investigate the effect of dosage and number of days of follicle stimulating hormone (FSH) treatment on superovulatory response in controlled internal drug release (CIDR)-treated Korean native cows. Forty cows underwent two superovulatory treatments with a crossover design. Cows, at random stages of the estrous cycle, received a CIDR together with injections of 1 mg estradiol benzoate and 50 mg progesterone, and gonadotropin treatment began 4 days later. The cows were divided into 2 groups based on the dosage and number of days of treatment with porcine FSH; a total of 28 mg FSH was given in twice daily intramascular injections in decreasing doses over 4 days (5, 5, 4, 4, 3, 3, 2 and 2 mg; T1 group, n=20) or a total of 24 mg FSH was given in twice daily decreasing doses over 3 days (5, 5, 4, 4, 3 and 3 mg; T2 group, n=20). This was followed by the alternate treatment in the subsequent superovulation. The cows were treated identically in all other respects. PGF(2alpha) (25 mg and 15 mg) was given with the 5th and 6th injections of FSH, CIDR were withdrawn at the 6th FSH injection and the cows received 200 microg GnRH 36 h after CIDR withdrawal. The cows were artificially inseminated twice, at 48 and 60 h after CIDR withdrawal, using commercial semen from four Korean native bulls, and embryos were recovered 6 or 7 days after the 2nd insemination. The numbers of corpora lutea (CL; 7.9+/-1.0 vs. 8.3+/-1.1) and large follicles (1.2+/-0.2 vs. 1.3+/-0.3) present at the time embryo recovery, as detected by ultrasonography, did not differ between the T1 and T2 groups (P>0.05). Similarly, the numbers of total ova/embryos (6.2+/-0.9 vs. 6.4+/-1.1), transferable embryos (3.4+/-0.8 vs. 3.2+/-0.7), degenerate embryos (0.8+/-0.2 vs. 1.0+/-0.3) and unfertilized ova (2.1+/-0.5 vs. 2.2+/-0.5) did not differ between the groups (P>0.05). These data indicate that a reduced dose (24 vs. 28 mg) and number of treatments (6 vs. 8) of FSH for superovulation of CIDR-treated Korean native cows does not affect the embryo yield.     

5个品种优质肉用绵羊的超数排卵与胚胎移植

为进一步提高不同优质肉用品种绵羊的超数排卵与胚胎移植效果,本实验采用4种不同的超排方案(CIDR+FSH减量、CIDR+FSH+PMSG、CIDR+FSH+PG、CIDR+FSH等量)对17只绵羊(杜伯、白萨福克、黑萨福克、德克塞尔、美利奴)进行超数排卵处理,选择体况良好的杂交羊87只做受体,并进行胚胎移植实验。结果表明:第1组(CIDR+FSH减量)和第2组(CIDR+FSH+PMSG)方案超排平均可用胚数分别为6.20、6.60枚,显著高于第3组(CIDR+FSH+PG)和第4组(CIDR+FSH等量)方案(P<0.05);白萨福克、德克塞尔、杜伯超排平均可用胚数分别为7.67、6.20枚和6.25枚,显著高于黑萨福克和美利奴(P<0.05)。供体羊全部发情,得到95枚可用胚胎;51只受体新鲜胚胎移植3个月后经B超检查38只受体怀孕,妊娠率74.5%,产羔率88.2%。因此,CIDR+FSH+PMSG是优质肉绵羊超数排卵方案的最佳组合。     

Superovulatory response and embryo quality in Katahdin ewes treated with FSH or FSH plus eCG during non-breeding season

The aim of this study was to evaluate the effect of a co-treatment of follicle-stimulating hormone (FSH) plus equine chorionic gonadotrophin (eCG) on serum insulin and insulin-like growth factor 1 (IGF-1) concentrations, superovulatory response, ovulatory rate, and number and production of embryos in Katahdin breed ewes during the non-breeding season. Twenty Katahdin ewes were synchronized with progestagens (CIDR) and assigned to two superovulation treatments (n = 10): (1): ewes treated with 200 mg ewe⁻¹ of FSH from day 5 to 8 after CIDR insertion at decreasing doses every 12 h (FSH group) and (2) ewes treated as FSH group plus 300 IU of eCG on day 5 after CIDR insertion (FSH + eCG group). Estrous behavior was monitored and direct mating was performed. On days − 7 (CIDR insertion), 0 (CIDR withdrawal), and 7 (embryo recovery), blood samples were collected to determine serum hormone concentrations. Co-treatment with eCG (FSH group) did not affect (P > 0.05) serum hormone levels. Superovulation response, ovulation rate, recovery rate, fertilization, and number of embryos were also similar (P > 0.05) between treatments. Compared with FSH group, FSH + eCG ewes had lower (P < 0.05) number of transferable embryos and higher (P < 0.05) number of oocyte and a tendency to increase the number of degenerated embryos (P = 0.07). Overall results suggest that the administration of eCG is not beneficial either to improve the ovulatory response or the amount of transferable embryos in Katahdin ewes superovulated with a protocol using progesterone and FSH at decreasing doses.

     

鲜整胚及分割双半胚移植试验研究

本试验结合我省胚胎移植的现状,用7头纯种西门塔尔牛作供体,46头杂交牛作受体,进行同期发情和超数排卵,获得鲜整胚59枚,双半胚32枚;用鲜整胚22枚,双半胚24枚进行移植,研究鲜整胚与分割双半胚的移植效果。结果表明:鲜整胚单枚移植妊娠率为27.3%(6/22),分割双半胚移植妊娠率为54.2%(13/24),鲜整胚单枚移植妊娠率比分割双半胚移植妊娠率低26.9个百分点,经t检验差异显著(P<0.05)。