草鱼细胞和病毒的大规模培养研究

本文对草鱼细胞和病毒的两种大规模培养方式进行了研究和比较。静置培养条件下，细胞生长速度快，２—３天内可形成单层，单层均匀而稳定；旋转培养条件下，细胞７天左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。这两种培养方式所观察到的细胞病变过程及表征基本相同，病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。采用这两种培养方式，可实现草鱼细胞和病毒的大规模培养。     

培养基更换后草鱼出血病灭活疫苗的免疫效果

使用廉价培养基ＣＡＳ在ＣＩＫ细胞系上增殖草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ—８５４株），所制备的灭活疫苗性能稳定，安全性好。用该疫苗免疫草鱼，饲养１０天后，其血清中和抗体水平测定结果表明，注射组为１０７．９±１１．０（３），浸泡组为６８．５±９．９（３），与对照组［２０．２３±４．５（３）］相比，Ｐ值分别为Ｐ＜０．００１和０．００１＜Ｐ＜０．０１，差异极显著。     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的最小免疫量、免疫期和保存期

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗对草鱼的最小免疫最为稀释１０＾３倍、０．２ｍｌ／尾。免疫产生期为疫苗注射后的第２天;免疫保护期达１５个月。     

条纹石鮨摄食强度与代谢及能量收支间的关系

设日摄食率为０．４％、１．５％、４．０％三种水平,分别测定条纹石鱼旨Ｍｏｒｏｎｅｓａｘａｔｉｌｉｓ幼鱼的代谢及能量的收支情况。处于饱食（日摄食率４．０％）及维持状态（日摄食率１．５％）下,该鱼代谢率增加的峰值分别于摄食后３ｈ及７ｈ内出现,为静止时代谢水平的２．１０倍和２．４６倍,ＳＤＡ（特殊动力作用）持续时间均为２１ｈ,ＳＤＡ总耗能量分别占摄入能的１３％和３５．８％。条纹石鱼旨在饱食时的转化效率Ｋ（湿重）为２０．８５％。三种摄食水平下条纹石鱼旨的能量收支方程分别为：饱食状态（日摄食率４．０％）时,１００Ｃ＝８．４Ｆ＋７．８Ｕ＋１３．０ＳＤＡ＋３６．９（Ｒｓ＋Ｒａ）＋３３．９Ｇ;维持状态（日摄食率１．５％）时,１００Ｃ＝７．８Ｆ＋４．１Ｕ＋３５．８ＳＤＡ＋５２．３（Ｒｓ＋Ｒａ）,其中Ｇ＝０;减重状态（日摄食率０．４％）时,（Ｆ＋Ｕ＋Ｒ）／（Ｃ＋Ｐ１）＝６７．３％,其中Ｃ＋Ｐ１＝１４．４Ｃ＋８５．６Ｐ１,Ｆ＋Ｕ＋Ｒ＝１．８Ｆ＋８．１Ｕ＋５７．４Ｒ。     

“四大家鱼”对暴发性鱼病的抗病力的种间差异↑（*）

嗜水气单胞菌所引起的暴发性鱼病，是近年来危害我国淡水养殖业的主要病害之一。本文报导草鱼、青鱼、鳙、鲢对该病的抗病力的差异及机理的研究结果。在菌液浓度为６．０×１０￣８ＣＦＵ／ｍｌ（１０°，１０￣（－１），１０￣（－２），１０￣（－３）四个稀释度），注射剂量为０．３ｍｌ／尾时，半数致死生（ＬＤ＿（５０））分别是草鱼１０￣（－０．４８），青鱼１０￣（１．２５），鳙１０￣（－１．３７），鲢１０￣（－２．１９），差异显著（Ｐ＜Ｐ＿（０．０５））。四种鱼的白细胞吞噬百分率存在极显著差异（Ｐ＜Ｐ＿（０．０１）），其中草鱼极显著地（Ｐ＜Ｐ＿（０．０１））强于其他三种鱼。四种鱼的补体替代途径（Ｃ＿３旁路）杀菌力１２小时测定结果的大小顺序是草鱼＞青鱼＞鳙＞鲢，差异显著（Ｐ＜Ｐ＿（０．０５））。草鱼的补体总量极显著地（Ｐ＜Ｐ＿（０．０１））低于鲢、鳙。四种鱼的红细胞Ｃ＿３ｂ受体花环率存在显著差异（Ｐ＜Ｐ＿（０．０５）），顺序为鳙＞鲢＞草鱼＞青鱼。“四大家鱼”对暴发性鱼病的抗病力的种间差异，不仅同它们的免疫力的大小有关，也同它们对特定病原的易感性的大小有关。     

二氧化氯改善养殖水环境效果的研究

使用二氧化氯化处理水养殖用水（实验室规模）测定水化学指标及水中细菌数量的变动,结果表明：（１）二氧化氯能够明显中水环境的溶氧（增氧量为５．８－２２．７％）减低水中ＣＯＤ和ＮＨ３－Ｎ值（ＣＯＤ降低幅度为２６．０－５８．８％,ＮＨ３－Ｎ清除率为１９．４－３８．５％）（２）二氧化氯浓度为０．２×１０＾－３ｍｏｌ／ｍ＾３及１．２×１０＾－３ｍｏｌ／ｍ＾３可有显降低海水中弧菌数及细菌总数,随着药物浓度增大,     

食盐对草鱼血清超氧化物歧化酶和溶菌酶活性的影响

草鱼养殖过程中经常使用食盐药浴，以便在高渗环境下杀死病原体。研究食盐药浴后草鱼代谢酶变化，有助于了解食盐药浴对草鱼机体生理免疫的影响。将草鱼（Ｃｔｅｎｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ）分别暴露于食盐浓度为０、２％、３％、４％水体中浸浴１０ｍｉｎ，然后置入水簇箱中饲养，分别在药浴后１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ取样，测定其血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和溶菌酶（ＬＳＺ）活性变化。结果显示，与对照组相比，血清ＳＯＤ活性在１２ｈ时，２％组中显著上升（Ｐ＜０．０５），３％、４％组显著下降（Ｐ＜０．０５）；２４ｈ取样时，２％、３％组中无显著差异（Ｐ＞０．０５），４％组显著下降（Ｐ＜０．０５）；３６ｈ取样时，各组间均无显著差异（Ｐ＞０．０５）；血清ＬＳＺ活性各组间均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。食盐能引起草鱼ＳＯＤ活性变化，而对溶菌酶活性影响不大；表明食盐对草鱼不同代谢酶有不同的反应模式，抗氧化酶ＳＯＤ对食盐应激有敏感的生理应答。     

pH和盐度对斑节对虾存活,生长和渗透调节能力的影响

斑节对虾幼虾（平均体重４．２－５．５ｇ）的ｐＨ低临界值使用盐酸醋化海水的静态生物测定的方法来求得。在盐度３２ｐｐｔ进其致死ｐＨ（即９６ｈＬＣ５０的ｐＨ）为３．７（９５％置信度是３．４和４．１）。最小可采用的ｐＨ（此ｐＨ在２３ｄ中使生长减少５％），在盐度为３０ｐｐｔ时估算为５．９。同ｐＨ７．８相比较，长期（２３ｄ）置于低ｐＨ（４．９），盐度为３０ｐｐｔ时，对虾于民分明显减少（Ｐ＜０．００１），而蜕皮     

EM生物发酵液在育肥猪上的应用效果

应用ＥＭ发酵液发酵饲料开展育肥猪试验,经 １２７ｄ的饲喂,试验和对照组分别由 １６．８ｋｇ和２０．０ｋｇ平均体重起试,试终出栏体重分别达到９４．８ｋｇ和９５．５ｋｇ,由组间差异显著（Ｐ＜０．０５）最终达到不显著（Ｐ＞０．０５）;试验组较对照组头均日增重提高１９．３ｇ;头平均减少饲料消耗８．６ｋｇ,料重比较对照组降低６．２％;缩短饲养周期１０ｄ,节省饲料２２．９ｋｇ;增加了养殖效益,试验期内头均增收５０．６元。     

咪唑类离子液体处理对草鱼CYP3A和PXR基因表达的影响

细胞色素Ｐ４５０是一类含有亚铁血红素的超家族单加氧酶,参与许多外源物质（包括药物、环境化合物等）和内源性物质（如激素）的代谢转化。ＣＹＰ３Ａ是Ｉ相解毒酶系Ｐ４５０家族中的重要成员,在肝脏对外源毒物解毒和内源激素的代谢过程中发挥重要作用。为探讨草鱼（Ctenopharygodon idellus）肝脏ＣＹＰ３Ａ在溴化１-辛基３-甲基咪唑离子液体（［Ｃ８ｍｉｍ］Br）的解毒过程作用以及鱼体对［Ｃ８ｍｉｍ］Br的解毒是否通过ＰＸＲ-ＣＹＰ３Ａ转录调控途径作用,通过预试验获取［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼的急性毒性效应,选取２２ｍｇ／Ｌ（１／１０ＬＣ５０）和１０９ｍｇ／Ｌ（１／２ＬＣ５０）浓度组［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼染毒２４ｈ,荧光定量ＰＣＲ检测ＣＹＰ３Ａ和ＰＸＲ的表达情况。结果表明,草鱼肝脏ＣＹＰ３Ａ水平与对照组相比极显著上升（Ｐ＜００１）,ＰＸＲ基因表达量与对照组相比也极显著升高（Ｐ＜０．０１）,ＣＹＰ３Ａ与ＰＸＲ基因表达水平呈现出一定的相关性;推测在草鱼体内ＰＸＲ可能就是［Ｃ８ｍｉｍ］Ｂｒ作用于ＣＹＰ３Ａ的受体。     

南美白对虾半咸淡水养殖试验

２０００年５～７月在广东省澄海市六合围荣鸿水产养殖场进行了南美白对虾半咸淡水池塘养殖试验。在０．８ｈｍ＾２的半咸淡水池塘中投放淡化虾苗７万尾，平均全长０．８～１．０ｃｍ，经６５ｄ饲养，生产成虾５５０ｋｇ，平均每６６７ｍ＾２产４６ｋｇ，成活率８０％，成虾平均体长９．８ｃｍ（最大个体为１２４ｃｍ），平均全长１１．３ｃｍ（最大个体为１３．２ｃｍ），平均体重１０．０７ｇ（最大个体为１６．６７ｇ），饲料系数     

碳酸盐碱、pH对中国对虾幼虾的致毒效应

实验结果表明,ｐＨ为８．６、９．０、９．３和９．５时,中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）幼虾２４ｈ半致死碱度（ＬＣ５０）分别为２２．００、１１．６６、６．５７和３．２８ｍｍｏｌ／Ｌ;随着碱度、ｐＨ的升高,中国对虾幼虾的存活率下降。碱度和ｐＨ对幼虾的致毒效应应具综合作用,ｐＨ８。６～９．０时,ＨＣＯ３＾－、ＣＯ３＾２－共同影响幼虾的存活率;ｐＨ９．０～９．５时,ＯＨ＾－协同ＣＯ３＾２－影     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果

本文报道经筛选的ＧＣＨＶ－８４１毒株在草鱼吻端成纤维细胞系中进行适应性培养，弱毒驯化，细胞培养弱毒疫苗的制备，安全性观察，不同稀释度和剂量的免疫保护率测定及保存试验，ＧＣＨＶ－８４１毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的。筛选得５３－５９代作毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的，筛选得５３－５９代作毒种制备的细胞制备细胞弱毒疫使用安全，用稀释１０－１０＾４倍的疫苗，０．１－０．３     

莱州湾日本对虾放流移植的研究

１９９６年５月２６日在莱州湾水域放流平均体长为９．９ｍｍ的日本对虾仔虾８５５．８万尾,进行了跟踪回捕调查,生物学测定求得各项生长参数为：雌性：Ｌ∞＝２０１．５ｍｍ;Ｗ∞＝９０．０ｇ;ｋ＝０．０１７;ｔ０＝２６ｄ;ｔ（拐点）９０ｄ（７月２８日）雄性：Ｌ∞＝１６８．６ｍｍ;Ｗ∞＝５２．８ｇ;ｋ＝０．０１７;ｔ０＝１９ｄ;ｔ（拐点）８３ｄ（７月２１日）放流群体于８月上旬开始交尾,在持续近两个月的交尾活动期间,雌体可以连续蜕皮并多次交尾;秋汛虾群集中分布在３－５ｍ的放流水域,不作长距离移动。７月中旬开始捕捞,至９月莱州市共捕获放流对虾１０５．４万尾;９月中、下旬开始途经蓬莱沿海陆续游出,至１１月蓬莱沿海捕获２～３万尾,整个秋汛回捕率估计为１２．５％左右;至１２月初莱州湾水温降至１０℃以下时,放流群体才全部游离渤海。根据放流群体的生长特性,秋汛开捕时间应控制在８月中旬,放流群体的平均体长超过１４５ｍｍ时为宜。     

中华鳖出血性肠道坏死症流行病学

中华鳖出血性肠道坏死症是近两年来发生且危害性较大的一种新的流行病,主要危害成鳖、亲鳖和１００～２００ｇ的幼鳖。肠道糜烂出血,胃肠粘膜组织坏死是该病的主要症状。养殖区流行该病的主要流行季节为５～７月,６月是发病高峰月,占发病总例数的３９．８％;水温２５～３０℃时该病较易发生。该病潜伏期较长,发生期（１４．３±６．９）ｄ,暴发期（１４．７±６．２）ｄ。对湖北省９５个养殖场（户）的调查结果表明,该病发病率为４３．２％,平均死亡率（４４．５±２５．６）％,日平均死亡率（６．９±６．５）％。     

温度对虾夷扇贝幼体和稚贝生长,成活率的影响

在１５．０℃、１７．５℃和１９．０℃３个温度梯度下，各试验组纪体的生长速度和成活率６．３μｍ／ｄ，８．６μｍ／ｄ、９．３μｍ／ｄ；６１．０％、７０．５％、２３．０％。投附着基经２２ｄ培养各试验组稚贝规格（壳长×壳高）分别平均为６２０μｍ×５９５μｍ、７０５μｍ×６８０μｍ、７４５μｍ×７１０μｍ；各组生长速度和附着后成活率分别为１７．７μｍ／ｄ、２１．６μｍ／ｄ、２３．４μｍ／ｄ；３５．４％、３４     

一龄草鱼促长防病饲料添加剂研究：三,VM—I号复合添加剂维生素添加量的…

对ＶＭ－Ｉ号复合添加剂中的维生素分四组不同添加量进行了６０天的网箱饲养夏花草鱼试验，结果表明，不论是鱼体相对生长率，饲料利用率或草鱼成活率，饲料组均高于对照组。１－４＾＃网箱组草鱼的相对生长率均值分别为１０９．６％，１０７．４％，１１６．８％和１２９．６％，与对照组（７８．６％）相比提高２８．８－５１．０％；饲料利用率比对照组高２２．４－４３．０％；草鱼成活率比对照组高３．０－９．６％。对同一配方     

海水单胞藻培养液中微量元素的最佳浓度↑（*）

本文通过正交试验,研究确定了铜、锌、锰、钼、钴、镍为牟氏角毛藻（Ｃｈａｅｔｏｃｅｒｏｓｍｕｌｅｒｉ）和金藻（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓｇａｌｈａｎａ）培养的必需元素,并确定了最佳浓度,依次为（１～５）×１０－８、１０－９、（５～１０）×１０－８、（１～５）×１０－８、１０－７～１０－９、１０－９ｍｏｌ／Ｌ。它们应用于牟氏角毛藻和金藻的培养,可使细胞浓度和叶绿素浓度分别提高２０４％～４３２％和１９７％～２５６％。本文的研究结果较著名的Ｍ－ｆ／２配方增加了镍,并对其他的五种元素的浓度进行了修订。铜、钼、钴的浓度和Ｍ－ｆ／２配方基本相同;锰的浓度低约１个数量级;锌的浓度低约２个数量级。     

复合酶对鲫生长影响的试验

本试验分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四个组和一个对照组Ｅ,复合酶添加比例依次为０．０５％、０．１％、０．２％、０．３％,对照组不添加,对鲫鱼进行养殖对比试验,通过３７天的饲养结果表明：鱼平均体长增长率较对照组依次高出８．０％、７．６％、１７．３％、９．０％,平均体重增重率依次高出９．５％、１１．０％、２１．０％、９．０％。本试验条件下复合酶的最适添加比例为０．２％。     

盐度对杂交鳢幼鱼生长及血液免疫指标的影响

在３５ｄ的试验周期内,研究了不同盐度（２、４、６、８）对杂交鳢（斑鳢♀×乌鳢♂）幼鱼生长及血液红细胞数量（ＲＢＣ）、白细胞数量（ＷＢＣ）、溶菌酶（ＬＺＭ）含量、超氧化物歧化酶活性（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性等免疫因子的影响。结果显示,随着盐度的升高,杂交鳢增重率分别为６７．８１％、６８．２６％、７１．１４％、３２．９６％和１４．２６％,存活率分别为１００％、１００％、１００％、１００％和９３．３％。盐度２、４组增重率和对照组差异不显著,盐度６、８组增重率和对照组差异显著（Ｐ＜０．０５）。随着盐度的升高,血液红细胞数量呈下降的趋势,对照组和其他组差异显著（Ｐ＜０．０５）,而白细胞数量先急剧上升后又恢复到对照组水平,盐度６组达到最高。血液中溶菌酶浓度随着盐度变化出现波动,盐度６组达到最高,且与对照组差异显著（Ｐ＜０．０５）,盐度８组溶菌酶浓度有所回降,但仍显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。超氧化物歧化酶活性变化趋势与溶菌酶浓度变化趋势相似,各组超氧化物歧化酶活性均高于对照组且差异显著（Ｐ＜０．０５）。当盐度升至６时,超氧化物歧化酶活力升至最高。过氧化氢酶活性随着盐度的增加逐步升高,盐度８组达到最高,且各组与对照组差异显著（Ｐ＜０．０５）。