早期隔离断奶法的技术措施

早期隔离断奶法（ＳｅｇｒｅｇａｔｅｄＥａｒｌｙＷｅａｎｉｎｇ，简称ＳＥＷ）是指给２１日龄前的仔猪断奶的方法。近几年深受欧美和亚洲一些养猪发达国家重视。美国约有３０％的猪场采用，日本自１９９５年开始以农林水产省为中心进行开发研究、推广。１　实行ＳＥＷ的优点可以防止母猪某些疾病特别是一些慢性疾病对仔猪的垂直感染。表１　采取不同早期断奶日龄可能排除的病原体病原体断奶日龄链球菌病（ＳｔｒｅｐｔｃｏｃｃｕｓｓｕｉｓｔｙｐｅⅡ）萎缩性鼻炎（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）巴氏杆菌病（Ｐａｓ…     

鸡大肠杆菌病多价灭活苗的菌种选择和冻干保藏

８０年代以来，鸡大肠杆菌病（ｃｈｉｃｋｅｎｃｏｌｉｂａｃｉｌｌｏｓｉｓ）几乎遍及所有的商业鸡群，给养鸡业带来较大的直接和间接经济损失。根据鸡致病性大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）易产生耐药性和抗原血清型多样性的特点，辽宁省益康生物制品厂自１９９４年起，为试制鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活疫苗，进行了系统鉴定和筛选，并对菌种冻干保存条件进行了研究，现报道如下。１　材料鸡致病性Ｅ．ｃｏｌｉ冻干菌种Ａ、Ｂ、Ｃ，由中国兽药监察所提供；斜面菌种ＳＥ，由解放军农牧大学提供。ＳＢ１－２、Ｂ２－１及其他菌株，为本地区病…     

新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析

为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。     

疯牛病

疯牛病Ｓ．ＢｒｅｈｅｒＪ．Ｎｏｖｅｋｏｆｓｋｉ牛海绵状脑病（ＢｏｉｖｅｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍＥｎ－ｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，ＢＳＥ）即通常所说的“疯牛病”，它是牛的一种致命性脑病，预防根除这种病对于保持牛群的健康和正常供应肉、奶产品都有很重要的意义。１...     

用Digoxigenin标记核酸探针检测EDS—76病毒核酸的研究

用ＥＤＳ－７６病毒标准ＡＶ１２７株和分离株感染鸭胚,提取病毒核酸,分别经ＥｃｏＲ１和Ｐｓｔ１双酶切,获得图形和大小相似的酶切片段。分别进行了ＥｃｏＲｌ和Ｐｓｔｌ单酶切,也得到相似结果。病毒ＤＮＡ经ＥｃｏＲｌ和Ｐｓｔｌ双酶切后,与ＰＵＣ１９质粒载体重组,并转化到ＥｃｌｉＪＭ１０１中,筛选出一个插入片段约为２．７ｋｂ的重组质粒。     

水牛梭形住肉孢子虫抗原的薄层等电聚焦行为分析

应用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳（ＩＦＥ）对水牛梭形住肉孢子虫（Ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ）抗原进行了分析。结果表明，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００纯化的包囊抗原在电泳图谱上显示３条相距较近的带，等电点分别为６．３０，６．４５，６．６５；缓殖子纯化抗原仅出现１条带，等电点为６．４０     

从肿头综合征鸡分离出产Vero毒素E.coli

本研究从哈尔滨郊区某鸡场肿头综合征（ Ｓ Ｈ Ｓ）鸡分离出 ３ 株血清型为 Ｏ７８ 的埃希氏大肠杆菌（ Ｅ．ｃｏｌｉ）,从鞍山 Ｓ Ｈ Ｓ病料分离出 １ 株血清型为 Ｏ８ 的 Ｅ．ｃｏｌｉ。并证实这 ４ 株 Ｅ．ｃｏｌｉ 能够对 Ｖｅｒｏ 细胞产生毒性作用,与产 Ｖｅｒｏ 毒素的 Ｅ．ｃｏｌｉ一致。对哈尔滨市郊 Ｓ Ｈ Ｓ病鸡做病理组织学观察,主要变化为头部皮下组织,头盖骨气室及鼻粘膜下纤维素性化脓性炎症,水肿和大肠杆菌性肉芽肿,心、肝、肾等器官炎症变化并有大量异嗜性粒细胞和细菌团块。     

感染网状内皮组织增殖病病毒SPF雏鸡中枢和外周免疫器官的免疫学变化

实验研究了１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＲＥＶ）后免疫器官匀浆涂片的免疫学变化。结果发现,雏鸡感染ＲＥＶ后其免疫器官法氏囊、胸腺、脾脏中淋巴细胞数、酯酶阳性（ＡＮＡＥ＋）Ｔ细胞数以及颗粒型和弥散型ＡＮＡＥ＋Ｔ淋巴细胞数显著降低（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。表明１日龄ＳＰＦ雏鸡感染ＲＥＶ后,其中枢免疫器官和外周免疫器官的细胞免疫呈现抑制。     

我国犬埃立克体病病原分离与鉴定：Ⅱ.我国病原株与其他埃立克体间 …

应用Ｃｌｕｓｔａｌｗ计算机分析软件,对我国南方基地的埃立克体病原株（Ｇｚｈ９８１）和Ｇｚｈ９８２）与基因库中其他相关埃立克体１６ＳｒＲＮＡ基因进行了匹配分析。结果表明,我国的２种分离株分别与Ｅ．ｐｌａｔｙｓ和Ｅ．ｃａｎｉｓ的遗传距离最小（０．００１）。在系统发育中,Ｇｚｈ９８１和Ｅ．ｐｌａｔｙｓ、ＨＧＥ、Ｅ．ｅｑｕｉ、Ｅ．ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌａ同属一群;Ｇｚｈ９８２和Ｅ．ｃａｎｉｓ、Ｅ．ｅｗ     

喀×意杂交蜂与意蜂载粉量比较研究

在小叶按（ＥｕｃａｌｙｐｔｕｓｔｅｒｅｔｉｃｏｒｎｉｓＳｍ１ｉｔｈ）花期，比较研究种性退化的喀×意杂交蜂（ｃａｒｎｉｃａ×ｌｉｇＩＩＳｔｉＣａ）及其亲本意大利蜂（ＡｐｉｓｌｎｅｌｌｉｌｅｒａＩｉｇｕｓｔｌｃａＳｐｉｎ，）的载粉量。两种蜂的载粉量分别为１４．８１１ｍｇ和１９．３６ｍｇ，喀×意杂交蜂载粉量明显小于意蜂，两者差异极显著（ｔ一检验ｐ＜０．０１）。养蜂生产利用杂种优势时，要注意杂种种性退化和性状分离，以便更好地利用杂种优势。     

大鹅观草的染色体组组成

以大鹅观草（ＲｏｅｇｎｅｒｉａｇｒａｎｄｉｓＫｅｎｇｅｔ．Ｓ．Ｌ．Ｃｈｅｎ）与竖立鹅观草（Ｒ．ｃｉｌｉａｒｉｓｖａｒ．ｊａｐｏｎｅｎｓｉｓ（ｈｏｎｄａ）Ｂ．Ｒ．Ｌｕ，Ｙｅｎｅｔ．ｙａｎｇ２ｎ＝２８，ＳＳＹＹ）犬草（Ｅｌｙｍｕｓｃａｎｉｎｕｓ（Ｌ．）Ｌ，２ｎ＝２８，ＳＳＨＨ）拟鹅观草（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｅｇｎｅｒｉａｓｐｉｃａｔａ（Ｐｕｒｓｈ）Ａ．ｌｏｖｅ，２ｎ＝２８，ＳＳＳＳ）三个种进行杂交，对亲本     

奶牛临床型和隐性型乳房炎的细菌学分析

对１０２例临床型和１８７例隐性型乳房炎病例的奶样进行了细菌学分析。临床型病例中，８５．３％的乳样检出了细菌，检出率高于隐性乳房炎病例（７２．２％）。传染性病原，包括无乳链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ），金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）和牛棒状杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｏｖｉｓ），在临床型病例中的检出率是４１．２％，隐性型病例中的检出率是３９．５％，是检出率最高的一类致病菌。临床型乳房炎的另一类重要致病菌是环境性细菌。本研究检出的这类致病菌有乳房链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｕｂｅｒｉｓ），粪链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ），牛链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｂｏｖｉｓ），埃希氏大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）和变形杆菌（Ｐｒｏｔｅｕｓｓｐｐ．），检出率是２０．６％，而隐性乳房炎中的检出率只有２．２％。凝固酶阴性的葡萄球菌（Ｃｏａｇｕｌａｓｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ，ＣＮＳ）在两类乳房炎中的检出率分别是１４．７％和１３．４％。此外还检出了一些乳区有两种或两种以上的细菌混合感染。     

新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达

用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒），对病毒进行纯化，抽提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆入ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ位点之间，获得２个毒株Ｆｃ基因克隆ｐＵＣＦ４６Ｆｃ和ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／ＳａｌⅠ双酶切法、ＰｓｔⅠ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，获得重组子ｐＢＶＬａＦｃ。ＰＣＲ和内切酶酶切法鉴定表明，Ｆｃ插入的位置和方向都正确无误。用Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α通过热诱导法进行了表达。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测了表达产物。结果表明，有１条能够与ＮＤＶ多抗反应的特异条带，分子量约１５７００，与预期大小一致，说明是Ｆｃ基因的表达产物     

二甲苯胺噻嗪对大鼠镇痛和麻醉的ED50及时效的测定

大鼠腹腔注射二甲苯胺噻嗪（ｘｙｌａｚｉｎｅ）后,采用序贯法（ＳｅｑｕｅｎｔｉａｌＡｎａｌｙｓｉｓ）测定对大鼠镇痛和麻醉的半数有效量（Ｍｅｄｉａｎ Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ Ｄｏｓｅ,ＥＤ５０）结果,镇痛的ＥＤ５０值１５．５２４ｍｇ／ｋｇ麻醉的ＥＤ５０值为４５．０９６ｍｇ／ｋｇ,在增加一个公比（ｒ镇痛＝１．５０７,ｒ麻醉＝１．１４３）的基础上,我们取２５．０ｍｇ／ｋｇ和５５ｍｇ／ｋｇ用于镇痛和麻醉实验,结     

常用中草药—菟丝子 骨碎补 续断

１菟丝子本品为旋花科植物菟丝子ＣｕｓｃｕｔａｃｈｎｅｎｓｉｓＬａｍ．及大叶菟丝子Ｃ．ｊａｐｏｎｉｃａＣｈｏｉｓｙ．的干燥成熟种子。生用或盐水炒用。１．１性味归经味甘、辛，性微温，入肝、肾经。１．２功效补肝肾、益精髓。１．３主治１．３．１补肝肾用于肝肾...     

家蚕病原性微孢子虫孢子表面蛋白的选择性分离与总蛋白比较分析

选择性分离了Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ孢子表面蛋白和总蛋白，采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测发现，孢子表面蛋白由分子量不同的３种亚基（３２０００、２６０００、２４５００Ｄａ）组成，其总蛋白至少包括２５个条带。同时将从养蚕生产中收集到的两种微粒子ＭＡ－１和ＭＤ－１以及从野外昆虫收集到的微孢子虫Ｐｈａ－Ｍ和Ｈａ－Ｍ与Ｎ．ｂｏｍｂｙｃｉｓ进行了比较，发现不同微孢子虫间蛋白组成有差异。     

成人肝cDNA文库的构建

用异硫氰酸胍／盐酸胍法从人肝组织中提取ＲＮＡ，通过Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维柱分离出ｍＲＮＡ。以ｍＲＮＡ为模板，含ＮｏｔⅠ接头的Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物，在逆转录酶ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔⅡＲＴ催化下合成单链ｃＤＮＡ（ｓｓｃＤＮＡ），再在Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ聚合酶Ⅰ与ＲＮａｓｅＨ和ＤＮＡＬｉｇａｓｅ共同作用下，ｓｃＤＮＡ拷贝成双链ｃＤＮＡ（ｄｓｃＤＮＡ）。经放射自显影测定，合成有全长ｃＤＮＡ片段。平末端ｄｓｃＤＮＡ与ＳａｌⅠ接头连接，ＮｏｔⅠ酶切后，通过过柱取掉小于５００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，大片段ｃＤＮＡ与载体ｐＳＰＯＲＴ１连接，转化受体菌ＤＨ５α，经稀释测定出含有重组子的文库大小为３．３×１０６。该文库适合于筛选低丰度ｍＲＮＡ的ｃＤＮＡ克隆。     

产蛋下降综合征（EDS—76）病毒DNA酶切图谱分析

选Ｅｃｏ，Ｒｉ，Ｐｓｔ，Ｉ，Ｐｖｕ ＩＩＩ，ＨｉｎｄＩＩＩ，Ｂｇ１Ｉｔ和Ｂｇ１ＩＩＩ６种限制性内切酶，对国内４株ＥＤＳ－７６病毒鸡源分离株和国外标准株ＡＶ－１２７及１株鹅源腺病毒的ＤＮＡ进行酶切图谱的比较，结果发现４种鸡源分离株子ＡＶ－１２７株用上述６种酶切的片段数分别为４，８，１０，１０，６和７条。各酶切图形，片段大小亦十分相似，表明均为ＥＤＳ－７６病毒。ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ和Ｐｓｔ－Ｉ－Ｅｃ     

3株减蛋综合征病毒毒株核酸酶切谱分析

选用ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲⅤ、ＰｖｕⅡ、ＢｇｌⅠ、ＳｍａⅠ和ＰｓｔⅠ等８种限制性内切酶,对不同地区分离的３株减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒进行酶切图谱比较。结果发现３株毒用前６种酶切割后产生的片段数及各片段的大小均相同,而用ＳｍａⅠ和ＰｓｔⅠ切割后,贵州分离毒ＨＳ－１与国际标准毒ＡＶ－１２７、南京他离毒ＧＣ２相比,多出１个片段。表明不同地区ＥＤＳ分离毒的核酸结构基本相同而又略有差异     

一次试验中出现的问题及对特异性PCR反应条件的探讨(简报)

本试验根据Ｌａｍｂ等［１］报道的鸡生长激素基因序列，设计合成２对特异性引物ＰＭ３和ＰＭＰＳ１，它们的碱基序列分别是ＰＭ３ＦＯＲ５′－ａｔｃｃｃｃａｇｇｃａａａｃａｔｃｃｔｃ－３′ＲＥＶ５′－ｃｃｔｃｇａｃａｔｃｃａｇｃｔｃａｃａｔ－３′ＰＭＰＳ１ＦＯＲ５′－ｃｔａａａｇｇａｃｃｔｇｇａａｇａａｇｇｇ－３′ＲＥＶ５′－ａａｃｔｔｇｔｃｇｔａｇｇｔｇｇｇｔｃｔｇ－３′。通过ＰＣＲ反应从鸡基因组中扩增出含有ＧＨ基因内含子１和４的片段，再用ＭＳＰ１内切酶对产物做ＲＦＬＰｓ分析。由于特异性ＰＣＲ的条件要…