牛血液多形核白细胞吞噬功能检测方法的研究

以啤酒糖酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）为吞噬材料，用吖啶橙染色指示牛血液多形核白细胞的吞噬活性。该方法直观、简便、可靠，一项试验可同时获得吞噬百分率、杀伤百分率、吞噬指数和杀伤指数４项指标，从不同角度反映了机体免疫功能状态。此外，用透射电镜和扫描电镜观察了牛血液多形核白细胞吞噬经牛血清调理的啤酒糖酵母的情况。     

弓形虫半巢式PCR检测方法的建立

根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序.结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%.该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg.该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持.     

减毒沙门氏菌为载体在Vero细胞中表达弓形虫SAG1基因

将PCR扩增获得的弓形虫SAGI基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建成pcDNA3-SAG1真核表达质粒,高压电转化入dam和PAOP基因双突变的减毒沙门氏菌(ZJ111株)中,并直接转染Vcro细胞,胰酶消化、收集细胞,SDS-PAGE和western blot可检测到30 ku左右的蛋白条带和印迹带.结果表明减毒沙门氏菌能将外源基因呈递给Vero细胞并进行表达.     

仔猪黄痢的病原学研究

仔猪黄痢是由病原性大肠杆菌引起的初生仔猪的一种急性、高度致死性传染病,本病多发于1周龄以内的仔猪,以1～5日龄最为常见。一窝仔猪中发病率可达90%以上,病死率也很高,有的全窝死亡;不死的仔猪也须经较长时间才能恢复,因此,严重威胁着养猪事业的发展。鉴于本病对养猪生产的危害性,许多学者对此作了大量的研究,特别是对于仔猪黄痢的病原学研究近年来进展较快,现简要叙     

中国对虾血细胞及其吞噬活力的电镜研究

对中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）血细胞及其吞噬活力进行了电镜研究．结果表明，中国对虾血细胞有三种类型：①颗粒细胞，无吞噬功能，胞浆内充盈大电子致密颗粒；②半颗粒细胞，胞浆内颗粒较颗粒细胞少而小，富含线粒体；③透明细胞，胞浆内无颗粒．透明细胞和半颗粒细胞都具有吞噬功能．三类血细胞经金黄色葡萄球菌处理后发生形态学改变     

猪瘟抗体ELISA效价与保护力的相关性

对不同猪瘟抗体水平的6个试验组的24头猪及4头对照组猪用已建立的“ELISA间接法检测猪瘟抗体”法进行血清猪瘟抗体ELISA效价的测定,用石门系猪瘟强毒攻击受试猪测定保护力.研究结果表明,血清猪瘟抗体ELISA效价在1:30以上多数能够抵御猪瘟强毒的攻击.该临界线的确定为“ELISA间接法检测猪瘟抗体”技术在猪群免疫监测及防疫注射质量考核中的推广应用提供了依据.     

中国对虾血红细胞吞噬功能的研究

本研究建立了检测对虾血细胞吞噬的功能吖啶橙检测法，该检测同时直观地中国对虾血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬和杀伤情况；一项试验可同时获得吞噬和杀伤百分率，吞噬和杀伤指数四个指标。用本法研究四种免疫增强剂对对，血细胞吞功能的作用，结果表明，均呆提高血细胞对金葡菌的吞噬活力以及血淋巴中的溶菌活力和酚氧化酶活力，但经统计学分析，结合攻毒试验的结果，浙农Ｉ号和湖州Ｉ号的免疫效果优于湖州Ⅱ号和湖州Ⅲ号。     

SS-2、APP和PM多重PCR检测方法的建立与应用

猪链球菌2型(SS-2)、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、多杀性巴氏杆菌(PM)是引起"猪无名高热症"的部分病原菌,为建立可以同时检测SS-2、APP和PM的多重PCR快速诊断方法,根据GenBank中公布的有关基因序列,设计了3对引物分别用于扩增CPS2J(SS-2),ApxIVA(APP),KMT1(PM)基因的片段。敏感性和特异性结果表明,本方法对3种病原菌的最低DNA检测量分别为48.3pg(SS-2),581pg(APP),5pg(PM),而对大肠杆菌、沙门菌、猪附红细胞体、刚地弓形虫的扩增结果均为阴性。35份临床样品的多重PCR检测结果表明,有7例SS-2,5例APP,7例PM,与生化试验的鉴定结果一致。表明所建立的多重PCR方法能够对SS-2、APP和PM单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。