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抑制素免疫对牛繁殖的影响 总被引:4,自引:1,他引:3
抑制素是一种主要由动物性腺9睾丸的支持细胞和卵巢的颗粒细胞)分泌的一种异二聚体糖蛋白激素,由两个二硫键连接两个不同的亚单位(α和β)构成。抑制素对垂体FSH分泌和/或合成具有选择性地抑制作用。抑制素免疫中和技术能特异性地刺激FSH分泌,进而促进配子生成,提高动物繁殖力。 相似文献
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家鸡LDH同工酶的发生遗传学分析 总被引:2,自引:0,他引:2
采用不同连续缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳法,结合组织特异性染色和酶谱区带活性扫描技术,对家鸡胚胎期和生后期不同生长发育阶段各组织器官的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了测定。结果表明,鸡胚胎期B型LDH同工酶占优势(51.4 ̄99.8%),生后期则有3种不同表现:心、眼、脑组织继续保持B亚基的优势地位;肝、肾组织呈现B型酶含量的微弱上升;胸肌则发生B型酶到A型的颠倒转换。LDH同工酶的这种表达特征是 相似文献
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水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定.序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1 083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质.将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达.在1 mmol/L IPTG 中,37 ℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达.将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku. 相似文献
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应用反向间接血凝试验(RPHA)、酶免疫测定(EIA)和聚合酶链反应(PCR)测定了家禽血清、卵黄和牛乳清中HBV标志物及人HBV-DNA。经RPHA测定发现,HBsAg阳性率分别为48/205(鸡血清),9/31(鸭血清),31/107(鸡卵黄)和5/35(牛乳清);在EIA测定中,HBsAg的阳性率和滴度均低于RPHA法,而且还发现其他HBV标志物(HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb)阳性的样品。对其中阳性样品应用PCR测定HBV-DNA,结果全部阴性。此外,在RPHA测定中,经热处理的样品中56.99%由阳性转阴性;RPHA-HI测定中,人的阳性对照组明显地被抑制,而畜禽的阳性样品几乎均不能被抑制。根据上述结果,提示存在于家禽血清等样品中的HBV标志物可能是由非特异性因素和/或其他交叉抗原所引起,而与人HBV无关。 相似文献
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何兰花 《广东畜牧兽医科技》2003,28(5):21-23
抑制素(Inh ib in,IB)是一种由雌性卵泡颗粒细胞和雄性睾丸支持细胞分泌的糖蛋白激素,由α和β亚基组成的二聚体,其主要生理作用是特异性地调控垂体FSH(促卵泡素)的分泌。自1932年Macullagh提出这个概念以来,动物抑制素的研究日益受到人们的重视。目前对哺乳动物抑制素合成的部位、分子结构及生理作用已经有了深入的认识,利用蛋白质分离及分子原位杂交技术已人工合成了牛、羊、人的重组抑制素,固相合成技术已成功地合成了有功能的α片段N端 相似文献
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试验旨在探究紫草素凝胶对驴伤口愈合的效果,为皮肤无瘢痕愈合提供参考。用不同浓度的紫草素对体外培养的驴巨噬细胞进行处理,分别检测细胞中TGF-β1、IL-10、TNF-α和IL-6的mRNA与细胞上清液中蛋白的表达水平,以确定紫草素的最佳添加浓度;建立驴皮伤口模型,在伤口表面涂抹紫草素凝胶,拍照、HE染色观察伤口愈合情况,并检测驴皮肤中伤口愈合相关基因和血清的表达水平。结果表明,与对照组相比,添加不同浓度的紫草素均能降低相关炎症因子的表达,其中10 μmol/L紫草素效果最佳。在驴皮伤口上涂抹紫草素凝胶第11天时,紫草素组的伤口收缩率极显著高于对照组(P<0.01);HE染色发现,第11天时紫草素中的组织逐渐排列整齐;第60天时,紫草素组中表皮层的厚度相对减少;实时荧光定量PCR结果表明,第11天时,紫草素组中TGF-β1、IL-10 mRNA表达极显著升高(P<0.01),TNF-α、IL-6 mRNA的表达极显著降低(P<0.01);第3天时,紫草素组血清中TGF-β1、IL-10的浓度升高,TNF-α、IL-6浓度极显著降低(P<0.01);第7天时,紫草素组TGF-β1浓度显著降低(P<0.05),TNF-α浓度极显著降低(P<0.01),且IL-10的浓度显著升高(P<0.05)。综上,与对照组相比,添加不同浓度的紫草素均能降低相关炎症因子的表达,其中10 μmol/L紫草素效果最佳,能促进驴皮伤口的愈合。 相似文献
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根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT—PCR方法扩增获得了约812bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩增新疆细毛羊INHα亚基基因片段,经过NcoⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆于pET32a原核表达载体,获得pET—INH重组表达载体。将携带有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol·L^-1IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大约为32ku,与预期表达蛋白大小一致。Western blot检测表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。新疆细毛羊抑制素α亚基基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。 相似文献
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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析山谷型藏山羊、安哥拉山羊、F1乳中的LDH、as-CN、β-CN、β-Lg、SA等基因座。结果表明,乳LDH出现三条带(A)、两条带(B)、一条带(C)3种类型;as-CN有3种表型(AA、AB、BB),由A基因和B基因控制;在β-CN和β-lg中以AB型为主,其余类型很少;乳SA为单态,定为AA型。分析乳as-CN多态性与6个主要经济性状(体重、体直长、体高、胸围、管围、自然毛长)的关系发现,山谷型藏山羊as-CNAA、AB型体直长显著大于BB型体直长(P<005),F1as-CNAA型胸围显著大于AB型。 相似文献
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本试验旨在研究断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白(I-FABP)和二肽转运载体 1(PEPT1)mRNA表达的发育性变化及谷氨酰胺对其的影响。以 69头(21±3)日龄断奶杜 ×长 ×大仔猪为试验动物,断奶当天选取 3头猪进行屠宰,剩余 66头随机分为 2组,每组 3个重复,每个重复 11头。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮 +1%谷氨酰胺。断奶后第 3、5、7、14天试验组和对照组分别选取 3头猪进行屠宰(共计 27头),取十二指肠、空肠和回肠黏膜组织样品,通过实时定量 PCR法测定 I FABP和 PEPT1mRNA的表达量。结果表明:1)I-FABP和 PEPT1mRNA的表达量各肠段间无显著差异(P>0.05);2)I-FABP和 PEPT1mRNA在十二指肠、空肠和回肠的表达量均在断奶后急剧下降,断奶第 3天的表达量最低,显著低于断奶当天(P<0.05),而后逐渐升高,第14天达到峰值;3)试验组 I-FABP和 PEPT1mRNA表达量与对照组无显著差异(P>0.05),但试验组表现出促使十二指肠、空肠、回肠黏膜的 I-FABP和十二指肠 PEPT1mRNA表达提前恢复至断奶前水平的趋势。结果提示,断奶仔猪 I-FABP和PEPT1mRNA表达量随时间而变化,谷氨酰胺对断奶后I-FABP和 PEPT1mRNA表达量的恢复有一定的促进作用。 相似文献
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抑制素及其对动物繁殖的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
抑制素是一种性腺分泌的糖蛋白激素 ,主要由雄性睾丸支持细胞和雌性卵颗粒细胞分泌。抑制素对于动物生殖机能具有重要调节作用。本文将对其分子结构、特性、生成转运、对生殖活动的调节及其免疫在动物繁殖上的运用加以论述。1 抑制素的分子结构和特性抑制素 (Inhibin ,IB)是一种大分子糖蛋白 ,由α和β两个不同的亚单位通过二硫键偶联而成[1] 。分子量变化范围很大 ,约 2 0 0 0~ 2 0 0 0 0 0。不同种属动物抑制素氨基酸序列差异很小。α单位上有糖基化位点 ,β单位有A、B两种类型。因此 ,抑制素有两种形式 ,即抑制素A(αβA)… 相似文献
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R.C.Ghosh 《国外兽医学(畜禽传染病)》1991,11(4):22-23
以0.3和1ppm的纯化黄曲霉毒素B1作肉鸡细胞免疫效应的研究,经喂0.3和1ppm黄曲霉素素B1的鸡,用醋酸α-萘酯酶反应检测其淋巴细胞数显著下降(P<0.05),白蛋白和球蛋白量也显著下降(P<0.05)。Pier等(1970)发现了黄曲霉毒素能抑制蛋白质的合成和抗体的产生。主要通过宿主迟发型过敏反应和组织移植排斥反应,以评价黄曲霉素素B1对细胞免疫的作用,尚未明确喂黄曲霉毒素B1的鸡的外周血液TI林巴细胞数,本研究测定了试验鸡的外周血液中经醋酸α-萘酯酶(ANAE)染色的T淋巴细胞的百分率。 相似文献
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将重组有北京鸭抑制素α-亚基基因的T载体和pET-28a表达载体分别用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接并转化E. coli BL21(DE3),经PCR和双酶切鉴定,筛选得到阳性重组表达载体,在IPTG诱导下融合表达了北京鸭抑制素α-亚基蛋白。试验结果表明,抑制素α-亚基基因在E. coli BL21中得到了有效表达,表达产物具有免疫活性,为后期探讨该免疫原提高北京鸭产蛋性能的研究奠定基础。 相似文献
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从雌性骆驼输卵管、子宫、子宫颈、阴道组织中提取总RNA,根据已发表的骆驼β-防御素-1基因的cDNA序列设计合成引物,采用RT—PCR扩增出了骆驼β-防御素-1基因;将扩增产物克隆于pBlueselect T载体后进行了序列分析。以伊肌动蛋白(pactin)基因作为内参,对扩增的β-防御素-1基因进行琼脂糖凝胶电泳后,应用凝胶成像分析系统,推断出了不同组织中β-防御素-1基因的表达量。结果,从雌性骆驼生殖各组织上皮均获得了203bp的β-防御素-1基因的扩增片段,且β-防御素-1基因在雌性骆驼生殖道各组织内的表达量不同。结果表明,β-防御素-1在雌性骆驼生殖组织的先天免疫中起重要作用。 相似文献
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《中国畜牧兽医》2015,(6)
为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。 相似文献