磷酸吡哆醛补救途径两个关键酶的研究进展

维生素B_6(VB_6)包括6个可相互转换的吡啶衍生物。其中,磷酸吡哆醛(PLP)作为140多种细胞酶的辅酶,在生物体内发挥重要作用。动物从食物中获得VB_6,通过由吡哆醛激酶和磷酸吡哆醇氧化酶构成的补救途径合成PLP。PLP依赖酶的正常功能乃至人体最佳健康状态,依赖于细胞中PLP的平衡供给。然而,就PLP的动态平衡和调节机制以及PLP合成后的转移机制而言,目前还知之甚少,是一个富有挑战性的研究领域。为此,综述PLP补救途径两个关键酶的研究进展。     

维生素E和谷氨酰胺对兔精液获能的影响及获能相关基因的表达

为了探讨不同质量浓度维生素E和谷氨酰胺(glutamine,Gln)对精子获能的影响,以及与获能有关的关键基因在获能后相对表达量的差异,在获能液中加入不同质量浓度的维生素E(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/m L)或Gln(0、5、10、15、20 mg/m L),并分别将其与精子悬液一同培养,以孕酮诱导顶体反应,通过涂片染色镜检得到顶体发生率;采用实时荧光定量PCR得到获能相关基因蛋白激酶A催化亚单位β(PRKACB)和ACP6(acid phosphatase 6,lysophosphatidic)在获能后的表达。结果表明,添加质量浓度为1.0 mg/m L的维生素E对精子顶体发生率的影响显著高于其他组别(P0.05);添加质量浓度为15 mg/m L的Gln,精子顶体发生率显著高于其他组别(P0.05);与空白对照组相比,维生素E最佳质量浓度处理组(1.0 mg/m L)的PRKACB和ACP6基因的相对表达量显著性降低(P0.05);Gln最佳质量浓度处理组(15 mg/m L)处理后,基因PRKACB、ACP6在获能后的相对表达量高于空白对照组,但差异不显著(P0.05)。可见,获能液中添加维生素E和Gln对兔精子获能具有一定影响。     

低聚原花青素对STZ糖尿病小鼠血糖水平的影响

目的:观察低聚原花青素(OPC)对糖尿病小鼠血糖的影响。方法:用低聚原花青素对昆明小鼠进行口服毒性限量试验;采用STZ小剂量多次注射方法诱导糖尿病小鼠模型;实验组分别按50、100、150 mg/kg体质量灌胃给予OPC,模型组和正常对照组则灌胃给予等容积生理盐水,连续4周;观察小鼠的一般情况、动态监测实验动物外周血中血糖含量。结果:小鼠口服OPC限量试验结果>5 g/kg体质量,证实OPC安全、无毒性作用;成模小鼠的空腹血糖水平为18.37±2.13 mmol/L,明显高于正常对照组(P<0.01),并出现三多一少的糖尿病症状,表明糖尿病模型制作成功;3个OPC给药组糖尿病小鼠的血糖水平升高趋势得到控制,血糖随着给药时间延长而下降,与模型组比较,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:OPC具有控制糖尿病小鼠血糖升高幅度,降低血糖水平、干预糖尿病发生发展进程的作用。     

HPLC法测定维生素B_1注射液中维生素B_1含量

采用HPLC法测定维生素B_1注射液的含量,采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(5μm, 4.6mm×250mm),以甲醇-乙腈-0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液(含1%三乙胺,用磷酸调节pH=5.5)(7:7:86, v/v)为流动相,流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为246nm。结果表明:维生素B_1在1～200μg/ml范围内线性良好,R2=1.0000,平均回收率为99.76%(n=9), RSD为0.4%。本方法简便、准确、可靠,可用于维生素B_1注射液的质量控制。     

饲喂玉米——豆饼日粮的肉用仔鸡维生素B_2的需要量

用玉米——豆饼粉日粮饲喂一日龄肉用雏鸡,进行两个21天的笼养试验,以重新评定最佳生产性能的维生素B_2的需要量。每个试验用6个日粮处理和384只雏鸡,每个处理饲料中维生素B_2分别为0,0.9,2.02.8,3.6,4.4mg/kg。玉米——豆饼粉日粮每千克含粗蛋白质22％,代谢能3200千卡。分析未补充维生素B_2日粮中维生素B_2含量为2.6mg/kg。一种严重的腿麻痹(一条或二条腿不能走和移动)首先在未补充维生素B_2的10至21日龄雏鸡中发现。除腿麻痹外,高死之率和生长不良是所观察到的维生素B_2缺乏的主要症状。用broken—line技术测定,用于生长的维生素B_2最低需要量为每千克饲料3.6mg。但为了避免腿麻痹症的发生,建议每千克饲料维生素B_2最低需要量为4.6mg。在最大采食量(834g)基础上观察,鸡达到最大体重(593g)在21日龄。为了发挥其最大生产性能,每克体重最少约需6.5mg的维生素B_2。     

马波沙星在健康小鼠和感染多杀性巴氏杆菌小鼠体内的药动学比较

【目的】建立小鼠肺部感染多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida模型,研究马波沙星在健康小鼠和肺部感染的小鼠体内的药动学,通过分析比较两者的药动学参数,优化临床给药。【方法】采用气管插管法对小鼠进行肺部感染,对感染小鼠和健康小鼠按体质量单剂量皮下注射2 mg·kg-1的马波沙星,用高效液相色谱法测定血浆中马波沙星的浓度。用Win Nonlin5.2.1软件提供的非房室模型处理血浆药物浓度-时间数据。【结果】马波沙星在感染小鼠体内得到的药时曲线下面积(AUC)为4.58μg·m L-1·h、峰质量浓度(Cmax)为0.97μg·m L-1、平均滞留时间(MRT)为5.62 h,均显著高于(P0.05)在健康小鼠体内得到的AUC(1.67μg·m L1·h)、Cmax(0.68μg·m L-1)、MRT(2.63 h),而表观分布容积(V/F)3.12 L·kg-1和体清除率(Cl/F)0.42 L·kg-1·h-1均显著低于(P0.05)健康小鼠体内的V/F(8.61 L·kg-1)和Cl/F(1.07 L·kg-1·h-1)。【结论】多杀性巴氏杆菌感染显著增加了马波沙星的AUC、Cmax、MRT,并降低了V/F、Cl/F,而其他药动学参数无显著性差异。     

脐血维生素C水平及其对血钙、碱性磷酸酶的影响

目的:通过定量测定新生儿脐血维生素C水平、总碱性磷酸酶活性(ALP)及血钙水平,了解胎儿期维生素C的营养状况,探讨三者之间的关系。方法:采用常规生化方法对178例新生儿脐血进行维生素C、ALP和血钙定量测定,采用SAS软件包对检测数据进行均数、标准差、方差分析和卡方检验等分析处理。结果:178例新生儿脐血维生素C为16.49±5.99μmol/L。其中低于17μmol/L者72例,占40.45%;总碱性磷酸酶141.72±41.63 U/L。其中高于145 U/L者62例,占34.83%;血清钙2.43±0.48 mmol/L,其中低于2.23 mmol/L者16例,占8.99%。维生素C水平降低组的ALP增高率比正常组略高,分别为41.67%和30.19%,但差异无显著性(P>0.05)。维生素C水平降低组的血钙降低率明显高于正常组,差异有显著性(P<0.05);血钙降低组的ALP增高率明显高于血钙正常组(P<0.01)。结论:脐血维生素C水平偏低,低血钙可能与低维生素C有关,提示母孕期在补充维生素D的同时应考虑维生素C的补充。ALP的增高与低血钙相关,与低维生素C水平无明显相关。     

天花粉凝集素对2型KK-Ay糖尿病小鼠血糖、血脂的调节作用

目的:探讨天花粉凝集素(Trichosanthes kirilowii lectin.TKL)对自发性2型KK-Ay糖尿病小鼠血糖、血脂的调节作用.方法:选取KK-Ay小鼠,随机分为模型组、阳性对照组(罗格列酮,0.003g/kg)、TKL(0.1,0.2,0.3g/kg)剂量组,以同龄C57BL/6J小鼠为正常组,连续灌胃30d,检测小鼠体质量、饮食量、饮水量、空腹血糖(FBG)、口服糖耐量、血清胰岛素(INS)及血脂等指标.结果:与模型组比较,各给药组体质量、饮食量、饮水量、FBG及INS值有显著下降(p<0.05,p<0.01),小鼠糖耐量异常也有所改善;30d后,TKL(0.3g/kg)组血清中TC、TG有明显改善(p<0.05),LDL-C明显降低,HDL-C明显升高(p<0.01);TKL(0.2g/kg)组血清中TG、LDL-C、HDL-C值有明显变化(p<0.05).结论:TKL对2型KK-Ay糖尿病小鼠有一定的降血糖、调血脂作用.     

绿原酸对小鼠血糖浓度的影响

为探究绿原酸对小鼠血糖浓度的影响,选用健康正常成年小鼠为对照组,尾静脉注射四氧嘧啶为处理组建立高血糖小鼠模型。绿原酸采用高(2 500μg/g)、中(250μg/g)、低(25μg/g)剂量,连续对小鼠给药6d后,采用葡萄糖氧化酶法和班氏试剂显色法,测定正常小鼠及四氧嘧啶诱导高血糖小鼠血糖浓度和肝糖原质量分数的变化,并观察小鼠肝脏病理切片变化。结果显示,绿原酸对正常小鼠血糖浓度没有影响,而对四氧嘧啶诱导的高血糖模型小鼠有增加肝糖原质量分数,降低血糖浓度的作用。小鼠肝脏病理切片亦显示出相应的变化。结果表明,绿原酸对辅助降血糖有一定的作用,而这一作用可能是通过将葡萄糖直接转换为肝糖原来实现的。     

外源糖类和维生素对莱氏绿僵菌Metarhizium rileyi孢子萌发的促进作用

莱氏绿僵菌Metarhizium rileyi是重要的昆虫病原真菌,对鳞翅目害虫有很好的防治效果,但存在杀虫速度慢的缺点。为了提高莱氏绿僵菌孢子的萌发速度,缩短对寄主的致死时间,在孢子悬液中分别添加不同糖类和维生素类,以测定外源营养对莱氏绿僵菌孢子萌发的促进作用。配制含有不同浓度糖和维生素的SMY液体培养基后,接种M.rileyi孢子,25℃、180 r/min振荡培养,每隔24 h,用血球计数板镜检孢子萌发率。结果表明:接种24 h后,以10 g/L甘露糖、5 g/L维生素B_6和5 g/L维生素C对孢子萌发的促进作用较好,孢子萌发率分别为3.50%、3.67%和0.83%;随着培养时间延长,10 g/L甘露糖、5 g/L维生素C依然对孢子萌发有较好的促进作用,5 g/L维生素B_6对孢子萌发的促进作用逐渐降低;进一步测定甘露糖和维生素C对孢子萌发的浓度效应,甘露糖浓度为25.0 g/L时对孢子萌发的促进作用最好,维生素C浓度为0.2 g/L时最好。以上结果表明,对M.rileyi孢子萌发促进效果最好的外源营养是甘露糖和维生素C,最适浓度分别是25.0 g/L和0.2 g/L。     

大蒜体细胞胚胎发生诱导因素研究

通过研究不同质量浓度的 2 ,4 - D、维生素 B1 (VB1 )、水解酪蛋白 (CH )、腺嘌呤 (ADE)和蔗糖等激素及有机物对大蒜体细胞胚胎发生的单一或组合效应 ,结果表明 :0 .5 m g/L的 2 ,4 - D有利于体胚的发生和发育 ,梨形胚和棒状胚数目较多 ;VB1 质量浓度提高到 0 .5～ 2 .0 m g/L可促进体胚高频发生 ,较高质量浓度的 VB1 与 2 ,4 - D有明显的互作效应 ;15～ 30 g/kg的蔗糖能较好地促进大蒜体胚的发生 ,蔗糖含量超过 6 0 g/kg则抑制体胚发生和发育。 MS+2 ,4 - D 0 .5 mg/L +CH 5 0 0 mg/L +ADE 2 0 m g/L是胚性愈伤组织适宜的继代培养基。     

柠檬酸钠对脱氮假单胞杆菌发酵产维生素B_(12)代谢过程的影响

以脱氮假单胞杆菌为生产菌,研究了柠檬酸钠对其发酵过程中产维生素B_(12)的代谢调控作用。通过摇瓶培养的方式,在基础培养基中添加不同质量浓度的柠檬酸钠,利用分光光度法和HPLC法分别测定了关键酶活和有机酸等含量。结果表明,添加质量浓度为0.3%的柠檬酸钠最有利于维生素B_(12)的发酵,其产量高达45.73μg/mL。在此基础上,结合有机酸和酶学方法,进一步研究发现,外源添加柠檬酸钠能显著降低菌体柠檬酸和琥珀酸的积累,并且加速苹果酸的消耗,降低EMP途径中丙酮酸激酶和磷酸果糖激酶的活力,提高HMP途径中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活力,从而避免发酵液pH急剧下降,减少EMP途径的通量,增加HMP途径的通量,为维生素B_(12)的合成提供充足的还原力NADPH,提高维生素B_(12)发酵产量。     

正交试验设计法筛选印度块菌液体培养基

为筛选出印度块菌(Tuber indicum)最适用的液体培养基,以印度块菌菌丝体生物量为测量指标,采用L9(34)正交试验方法对各配比的印度块菌液体培养基进行研究。结果表明,印度块菌最适液体培养基为20.00g/L葡萄糖,15.00g/L麦芽糖,1.50g/L蛋白胨,2.50g/L酵母浸粉,3.00g/L KH_2PO_4,1.50g/L MgSO_4·7H_2O,0.008g/L维生素B_1,pH值自然。25℃、120r/min摇瓶培养120h,其菌丝生物量干质量可达9.58g/L。     

绵羊血浆催产素水平定量检测方法的建立

建立采用高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定绵羊血浆中催产素(oxytocin,OT)的方法。经乙腈沉降法提取血浆样品,在多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式下进行检测,标准加入法定量。通过该方法获得标准曲线线性方程为y=1.448x+544.400,相关系数为0.998,线性范围在50~10 000 pg/m L,方法检出限为10 pg/m L,定量限为50 pg/m L。应用HPLC-MS/MS法测定醋酸去甲雄三烯醇酮-17β雌二醇(trenbolone acetate and estradiol-17β,TBA-E2)联合处理阉公羊血浆中OT浓度变化,其中对照组催产素浓度为55~80 pg/m L,TBA-E2处理组为75~160 pg/m L,表明TBA-E2可提高阉公羊血浆中的OT浓度。该方法简便、快速、准确,可用于血浆样品中OT的检测。     

中药(赶黄草+波棱瓜子)提取物对小鼠维生素A 急性中毒早期的治疗效果

[目的]研究中药提取物及其组方对小鼠维生素A急性中毒早期的治疗效果,为动物维生素A急性中毒提供有效的治疗手段,进而促进伴侣动物医疗的健康发展.[方法]选取健康成年昆明种小鼠一次性腹腔注射维生素A(按1500 mg/kg计)建立维生素A中毒致骨骼发育不良综合症小鼠模型,4周后采集血液测定生化指标.将维生素A急性中毒小鼠随机分成6组(T1~T6)进行治疗:T1组为空白对照组(不给药);T2组为10.0 mL/kg赶黄草水粗提物;T3组为1.0 mL/kg波棱瓜子粗提油;T4组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油;T5组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油+1.0 g/kg黄芪多糖;T6组为阳性对照,安宫牛黄丸(1/3粒,约1 g).各给药处理组均连续灌胃给药7 d.在开始给药的第2、4、6和8 d分别采集小鼠静脉血制备血清,用于谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)和甲状旁腺素(PTH)等血清生化指标测定.[结果]除T1组外,各给药处理组维生素A急性中毒小鼠的血清生化指标均发生明显变化,ALT、AST和ALP活性及Ca和P含量整体上均呈下降趋势,PTH含量则呈上升趋势.综合各项血清生化指标的变化趋势,可确定T5组的小鼠维生素A急性中毒治疗效果最佳,至给药第8 d,维生素A急性中毒小鼠血清ALT活性降至3.78 ng/mL,AST活性降至628.14 pg/mL,ALP活性降至2.35 ng/mL,Ca含量降至3.29 mmol/L,P含量降至1.62 mmol/L,而PTH含量升高到337.95 pg/mL.[结论]赶黄草水粗提物和波棱瓜子粗提油均能有效治疗小鼠维生素A急性中毒,两者联用效果更佳,尤其是与黄芪多糖配伍组合,其作用机理主要是通过修复肝功能及骨组织损伤来实现.     

微量元素和维生素对四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型的影响

用含低微量元素、维生素的饲料(L)和含高适量微量元素和维生素的饲料(H)分别喂养小鼠4周,采用腹腔注射ALX建立DM小鼠模型。血糖仪检测血糖结果,并在光镜下观察两组鼠胰岛细胞的形态变化。结果表明L组喂养的小鼠血糖明显上升,胰岛内分泌细胞排列稀疏不均,胰岛数及岛内细胞数减少;H组小鼠血糖基本维持正常水平,胰岛为圆形、椭圆形细胞团,境界清楚,胰岛数及岛内细胞数较多,内各分泌细胞大小一致。总之,DM发生前,微量元素和维生素的联合生物学效应可拮抗ALX引起的胰岛损害,保护胰岛细胞,使血糖维持正常水平。     

白背三七地上部分降血糖作用研究

在研究白背三七地上部分化学成分的同时,对其药理作用也进行了研究.白背三七鲜样水提物3.3,6.6 mL/kg(相当于生药0.2,0.4 g/kg)及95%乙醇提取物0.75,1.50 mL/kg(相当于生药0.2,0.4 g/kg)对正常小鼠的血糖有显著的降低作用,其中1.50 mL/kg 95%乙醇提取物的降血糖效果优于格列本脲;白背三七乙酸乙酯提取物40 g(生药)/kg,正丁醇提取物4 g(生药)/kg均可明显降低正常小鼠的血糖,且乙酸乙酯提取物40 g(生药)/kg能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖;白背三七总生物碱(32,16,8 mg/kg)、总黄酮(8,4,2 mg/kg)及单体化合物IV[3-O-β-D-吡喃葡萄糖(6→1)-α-L-鼠李糖山奈素](8,2 mg/kg)对正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖水平均有降低作用,该作用对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠更为显著,其中对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖水平的降低作用从末次给药后0.5 h时即已显现,一直持续到末次给药后6 h,说明这些提取物和单体化合物的降血糖作用不但迅速,而且持久.     

松花苦桑粉对糖尿病小鼠降血糖的作用

[目的]研究松花苦桑粉的降血糖作用,为其作为辅助降血糖的功能食品提供科学依据。[方法]以正常小鼠、四氧嘧啶(ALX)诱导的糖尿病模型小鼠为材料,按体重随机分组,灌胃给药,测定空腹血糖,进行淀粉负荷糖耐量试验(OSTT)。[结果]松花苦桑粉以13.6、6.6、3.3 g/kg 3种剂量灌胃15 d,以13.6 g/kg剂量效果为好,具有统计学意义(P<0.01)。松花苦桑粉以13.6、6.6、3.3 g/kg 3种剂量灌胃35 d,其中13.6 g/kg剂量组ALX性糖尿病小鼠空腹血糖显著降低(P<0.05);高、中和低剂量组均明显降低ALX性糖尿病小鼠血糖水平。[结论]在空腹血糖试验,松花苦桑粉降低正常小鼠空腹血糖试验结果阳性,降低ALX性糖尿病小鼠空腹血糖试验结果阳性。在糖耐量试验,松花苦桑粉对ALX性糖尿病小鼠的糖耐量试验结果阳性。13.6、6.6和3.3 g/kg松花苦桑粉对ALX性糖尿病小鼠的糖耐量试验结果阳性。     

早期不明原因流产患者氧化应激指标与微炎症状态的相关性

目的:检测早期不明原因自然流产患者氧化应激产物和机体的微炎症状态,探讨不明原因自然流产的发病机制.方法:以50例早期不明原因自然流产患者为研究组,50例同期正常早孕要求人工流产的妇女(正常早孕组)和20例健康妇女(健康非孕组)为对照组.检测血浆TNF-α、hs-CRP、IL-6等炎症反应产物和8-isoprostane、MDA、ox-LDL等氧化应激产物的浓度.结果:研究组血浆8-isoprostane、ox-LDL的浓度分别为(148.27±39.35)pg/ml、(689.15±152.06)μg/L,均高于对照组(正常早孕妇女和健康非孕妇女),差异有统计学意义;血浆MDA为(5.13±0.12)μmol/L,研究组也高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).研究组TNF-α、hs-CRP、IL-6的浓度分别为(23.53±11.35)pg/ml、(3.84±1.26)mg/L、(28.72±17.38)pg/ml,均高于正常早孕组[(11.45±6.82)pg/ml、(1.82±1.25)mg/L、(16.79±11.19)pg/ml,P＜0.05、P＜0.01、P＜0.05]和健康非孕组[(8.86±1.39)pg/ml、(1.46±1.02)mg/L、(13.35±4.01)pg/ml,P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01];正常早孕组也稍高于健康非孕组,但两组差异无统计学意义(P＞0.05).早孕流产患者8-isoprostane及ox-LDL均与hs-CRP、IL-6、TNF-α呈显著正相关(P＜0.01、P＜0.05),MDA与hs-CRP、IL-6、TNF-α无相关性(P＞0.05).结论:正常妊娠存在炎症反应和氧化应激,氧化应激失衡和微炎症状态的加剧及两者的相互作用可能在早期不明原因自然流产中发挥重要作用.干预氧化应激及炎症反应可能有利于控制早期不明原因流产的发生和发展.     

大学生篮球运动员营养调查及营养补充剂干预试验研究

为了对大学生篮球运动员营养情况进行调查,并研究补充营养补充剂对运动员的影响,本试验中,运动员按照规定的训练方法进行训练,选择相应数量的对照组,分别测定胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇值、肌酸激酶心型同工酶CK-MB(u/L)、免疫球蛋白G IgG(g/L)、免疫球蛋白A IgA(g/L)、血清蛋白Protein(g/L)、血红蛋白Hb(g/L).选取富含优质蛋白质,不饱和脂肪酸,多种维生素和矿物质的麦胚蛋白给运动员食用,并选择相应对照组运动员,再测定相关指标.结果表明:运动员食用营养补充剂干预后,各项指标有显著变化,胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇值有所下降,免疫球蛋白G IgG(g/L)、免疫球蛋白AIgA(g/L)显著升高.得出通过长期耐力运动训练可以使胆固醇脂质类含量显著下降,补充营养剂后,脂质类含量下降,抗疲劳能力增强.