在贵州发现的一些昆虫病毒

从贵州茶树及森林害虫的自然罹病虫体中分离鉴定获得14株病毒,即茶鹿子蛾NPV,肾毒蛾NPV,大茸毒蛾NPV,叉带黄毒蛾NPV,半带黄毒蛾NPV、卵黄毒蛾NPV,幻带黄毒蛾HPV,黄毒蛾NPV,茶奕刺蛾NPV,杨白纹毒蛾NPV,杨二尾舟蛾GV,茶刺蛾GV,茶茸毒蛾GV,茶奕刺蛾GV。其中,除肾毒蛾NPV,黄毒蛾NPV,茶奕刺蛾NPV,茶刺蛾GV已有报道外,其余均属我国首次报道。通过电镜对上述病毒的形态观察和对其宿主的回感试验,证明是其病原病毒。     

德昌松毛虫质型多角体病毒初步研究

从1985～1987年,作者就利用德昌松毛虫质型多角体病毒 Dendrolimuspunctatus techangensis Cytoplasmic Polyhedrosis Virus 防治德昌松毛虫Dendrolimus punctatus techangensis Tsai et Liu 进行了初步研究。经室内及林间感染试验表明,该病毒对德昌松毛虫具有较强的致病力。     

潜山县松树食叶害虫控制技术研究

介绍潜山县马尾松毛虫、思茅松毛虫、黄缘阿扁叶蜂、松毒蛾4种松树食叶害虫发生概况,系统论述潜山县松树食叶害虫的控制策略和防治技术,以为该县松树食叶害虫的防控提供参考。     

在华南地区发现的一些昆虫包涵体病毒

从广东、广西二地分离到一些昆虫包涵体病毒。它们是油桐叶刺蛾NPV、两色绿刺蛾多角体病毒病、油桐尺蠖NPV、木麻黄枯叶蛾NPV、母生天社蛾GV、细皮夜蛾GV、松茸毒蛾CPV、茶毛虫NPV和十斑大瓢虫NPV。另外尚报道了新疆地区的苹果蠹蛾的多角体病毒病。 天敌昆虫的病毒病在国内尚属第一次报道。     

松叶蜂幼虫数量与环境因子间的关系

松叶蜂属膜翅目(Hymenoptera)广腰亚目(Symphyta)松叶蜂科(Diprionidae),主要以幼虫为害针叶树种,严重发生时针叶树种受害率达80%以上,给林业生产造成严重的经济损失。采用样方法就不同林分、坡位、海拔对松叶蜂幼虫虫口密度的影响进行了研究,分析了松叶蜂幼虫虫口密度与环境因素之间的相关性。结果表明,松叶蜂幼虫在针叶纯林的虫口密度显著高于针叶阔混交林的虫口密度;海拔高度与松叶蜂的虫口密度具有显著正相关性;阴坡松叶蜂幼虫虫口密度明显高于阳坡。研究结果可为松叶蜂的综合治理提供理论依据。     

连续传代时感染斜纹夜蛾核多角体病毒不同分离株的毒力变化

自然界中的核多角体病毒(NPV)和颗粒体病毒(GV)普遍存在多种分离株,同种病毒不同分离株往往在致病性和作用速度上存在差异[1～3].     

云南松叶蜂的分布型适应对策及生活史研究

松叶蜂是云南省的重要食叶性害虫,目前为止在云南省已记载松叶蜂科昆虫６属１６种,按照分布特点可将云南省的１６种松叶蜂划分为３个分布型：广布型,窄布型,点布型,其中３个点布型种：油杉小松叶蜂,景洪吉松叶蜂,楚雄新松叶蜂是稀有物种,建议将它们列入保护名单。根据松叶蜂地食物,气候,天敌等生态因素的适应特点,可将１６种松叶蜂分为２个适应型：群居生活型和散居生活型,前者有时在森林中大量繁殖,并暴发成灾,而后者     

余庆县松叶蜂虫疫情调查与防治方案

松叶蜂是一种对松树有严重危害害虫,2007年,余庆县发生松叶蜂疫情,县林业局检疫站按省林业厅及县委政府要求启动了余庆县森林病虫害应急预案,并对全县松叶蜂疫情进行调查、开展防治工作,有效阻止了松叶蜂疫情大面积爆发。     

余庆县松叶蜂虫疫情调查与防治方案

松叶蜂是一种对松树有严重危害害虫,2007年,余庆县发生松叶蜂疫情,县林业局检疫站按省林业厅及县委政府要求启动了余庆县森林病虫害应急预案,并对全县松叶蜂疫情进行调查、开展防治工作,有效阻止了松叶蜂疫情大面积爆发。     

天幕毛虫核型多角体病毒对天幕毛虫幼虫的致病机理

用天幕毛虫核型多角体病毒(Nucleus polyhedrosis virus,NPV)感染天幕毛虫(Malacosoma neustriatestacea Motschulsky)幼虫,对其致病机理的研究表明:该病毒可以侵染和破坏天幕毛虫的中肠细胞,在中肠组织细胞中均能观察到形成的多角体。幼虫取食核型多角体病毒100 h后,在光学显微镜下可见细胞核内出现多角体形成,细胞核开始增大;取食130 h后,中肠组织细胞间出现缝隙,细胞核内多角体数量增多;取食160 h后,中肠细胞的细胞核进一步增大,个别细胞核增大至整个细胞的1/3以上,与正常天幕毛虫幼虫相比,整个虫体出现软化;取食190 h后,中肠细胞受到严重破坏,细胞结构模糊不清,中肠内食物极少并有许多游离的核型多角体存在;取食220 h后,天幕毛虫幼虫的中肠和其他组织完全受到破坏。     

Cloning and Sequence Analysis of lef-3 Gene from Pieris rapae Granulovirus

To better understand the origination and evolution of lef-3 gene from baculovirus genome and determine the relationships between various viruses at molecular level, late expression factor 3 gene （lef-3） fragments of Pieris rapae granulovirus were obtained through conventional PCR method and sequenced after cloned into T-vector. Then, bioinformatics analysis on lef-3 gene and its encoding sequences were conducted by using bid-softs. Four mutations were appeared in the ORF of cloned lef-3 gene, which did not alter the characteristics of amino acids. It was inferred that PiraGV LEF-3 protein contained 399 amino acids, the molecular weight of which was 3.99 kD. Prediction of the LEF-3 advanced structure and homology comparison between other LEF-3 from various baculoviruses showed that the lef-3 gene might encode the single-stranded DNA-binding protein. The result of BLAST revealed that the lef-3 gene only existed in Lepidoptera host for the baculovirus genome, and the evolution analysis illustrated that lef-3 gene could be divided into 3 groups including one granulovirus （GV） group and 2 nucleopolyhedrovirus （NPV） groups. The selection pressure analysis of GV lef-3 gene coding region showed that the majority of lef-3 genes performed negative selection, while the Ka/Ks differed from different lef-3 gene, to some extent, which also performed positive selection. The origination analysis revealed that lef-3 gene of baculovirus might derive from bacteria. The lef-3 gene of PiraGV was cloned successfully and the possible patterns of origination and evolution were speculated through bioinformatics analysis.     

我省杨毒蛾Leucoma candida Staudinger和舞毒蛾Lymantria dispar(L.)核多角体病毒的观察研究

杨毒蛾和舞毒蛾是我省林业方面主要害虫,从雁北至晋南均广泛分布。特别是杨毒蛾,近年来为害严重,每年成灾面积达百万亩。这两种害虫的幼虫均能受到病毒的感染,它们所感染的病毒在自然情况下,常引起流行病,是仰制种群数量的重要因素。经染色鉴别和电镜观察,这两种害虫的幼虫所感染的均是核多角体病毒。杨毒蛾核多角体病毒包涵体为多角形,大小约为0.94～2.29微米,平均1.83微米,病毒粒子杆状,大小约为37×256毫微米,粒子2～7根成束存在于病毒束内。舞春蛾核对角体病毒包涵体亦为多角形,大小约为0.8～3.2微米,病毒粒子亦呈杆状,大小约为30×290毫微米,粒子1—12根成束存在于病毒束内。     

小菜粉蝶颗粒体病毒lef-3基因的克隆与分析

 【目的】研究杆状病毒lef-3基因的起源与进化,从分子水平明确病毒之间的亲缘关系。【方法】通过常规PCR方法获得小菜粉蝶颗粒体病毒晚期基因表达调控因子lef-3的基因片段,克隆后测序,然后利用软件对lef-3及编码序列进行生物信息学分析。【结果】克隆得到的PiraGV lef-3基因ORF序列中存在4个突变位点,但氨基酸性质未发生改变,推导PiraGV LEF-3蛋白含399个氨基酸残基,分子量为3.99 kD;通过高级结构预测及其编码序列与其它杆状病毒的LEF-3同源性比对表明,该基因可能编码单链DNA结合蛋白;BLAST比对发现lef-3基因只存在于鳞翅目昆虫为宿主的杆状病毒基因组;进化分析表明LEF-3可分为3组,其中GV属的LEF-3聚类为1个组,NPV属的LEF-3聚类为2个组;GV的lef-3基因编码区的选择压力分析表明,大多数lef-3基因间相比较表现为负向选择,但不同lef-3基因间的Ka/Ks不同,也有正向选择;起源分析表明,杆状病毒lef-3基因可能来源于细菌。【结论】获得了小菜粉蝶颗粒体病毒（PiraGV）lef-3基因,通过生物信息学分析推测出了lef-3基因的起源进化规律。     

6种日本核型多角体病毒对斜纹夜蛾幼虫致病性的研究

从日本引进6种核型多角体病毒(NPV),保存5年后仍对斜纹夜蛾幼虫持有致病性。其中斜纹夜蛾核型多角体病毒(福山株)、甘蓝夜蛾核型多角体病毒(芸北株)、粘虫核型多角体病毒(芸北株)、八字地老虎核型多角体病毒(那须株)均保持较强的致病力,其剩余侵染力在1/1.34~1/2.50间。甘蓝夜蛾核型多角体病毒(东京株)的致病力下降最大,剩余侵染力为1/17.5、其次为海灰翅夜蛾核型多角体病毒(埃及株),剩余侵染力为1/7.01。     

甜菜夜蛾中增殖的几种杆状病毒DNA限制酶分析

甜菜夜蛾除可被其自身病毒ＳｅＮＰＶ感染外，还对其他多种昆虫ＮＰＶ有一定敏感性，以苜蓿丫纹夜蛾ＮＰＶ，棉铃虫ＮＰＶ，甘蓝夜蛾ＮＰＶ分别感染甜菜夜蛾均可引起典型病症，其ＤＮＡ限制酶图谱表现为各自独特带型，表明这些ＮＰＶ在替代宿主甜菜夜蛾中增殖后，其酶切图谱未发生改变，毒力及宿主范围有无变化未作评价。     

玻璃化冷冻对猪卵母细胞体外发育能力的影响

采用猪未成熟(GV期)和体外成熟(MⅡ期)卵母细胞分组进行冷冻保护剂毒性试验,试验组经冷冻液处理,对照组不用冷冻液处理。结果表明,GV期与MⅡ期卵母细胞相比,两者经冷冻保护剂处理后,其存活率、体外受精胚卵裂率均无显著差异(P>0.05);试验组GV期卵母细胞存活率、体外成熟率及体外受精胚卵裂率虽略低于对照组(85.9%,72.4%和50.9%对91.3%,73.9%和53.3%),但差异不显著(P>0.05);试验组MⅡ期卵母细胞存活率虽显著低于对照组,但卵裂率与对照组无显著差异(P>0.05)。表明所用冷冻液及其处理程序,对卵母细胞无明显毒性。分3组对猪卵母细胞进行冷冻保存试验:I组为对照组;II组为GV期卵母细胞冷冻组;III组为MⅡ期卵母细胞冷冻组。结果表明,经开放式拉管(Open pulled straw,OPS)法玻璃化冷冻后,GV期和MⅡ期卵母细胞均获得较高的形态正常率,但GV期卵母细胞冷冻后存活率要显著高于MⅡ期卵母细胞(P<0.05)。经玻璃化冷冻后,GV期卵母细胞的体外成熟率和卵裂率均明显低于新鲜卵母细胞(42.6%和7.79%对73.9%和53.3%,P<0.05),MⅡ期卵母细胞冷冻-解冻后未获得卵裂。在GV期卵母细胞冷冻组,154枚卵母细胞冷冻后经体外成熟、体外受精及体外培养,共有12枚发生卵裂,其中6枚发育至8-细胞,3枚发育至16-细胞,3枚发育至桑椹胚。本研究表明,所用冷冻方案更适合于猪GV期卵母细胞的冷冻保存。     

猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存技术研究

旨在探讨提高猪GV期卵母细胞冷冻保存效率的可能途径。将EDS、EFS40和ES冷冻保护液用作卵母细胞冻前、冻后程序的处理,但不冷冻,比较3种冷冻保护剂对猪GV期卵母细胞的毒性作用;采用ES液作玻璃化液,比较常规细管法、OPS法和电镜铜网法3种冷冻载体对猪GV期卵母细胞的冷冻效果;并以ES液作玻璃化液,OPS管为冷冻载体,将猪GV期卵母细胞分5组,即对照组、CB+离心处理组、直接冷冻组、CB+冷冻组、CB+离心+冷冻组进行对比处理,比较各处理卵母细胞的冻后存活率与发育率。结果表明,在不同冷冻保护液中,以ES液组合作为玻璃化冷冻液时的毒性作用最低,与对照组间无明显差异(P>0.05);在3种冷冻载体中,用OPS法冷冻猪GV期卵母细胞,所获冻后存活率明显高于电镜铜网法和细管法(65.4%对45.0%和38.6%,P<0.05),并可获得最佳的冻后成熟率(43.3%);猪GV期卵母细胞单纯经细胞松弛素B和离心极化处理,不会严重影响卵母细胞的存活,但卵裂率显著低于对照组(39.0%对52.1%,P<0.05);细胞松弛素B处理或细胞松弛素B+离心极化处理后再进行玻璃化冷冻,并不能提高卵母细胞的冻后存活率与发育率。采用OPS法直接进行GV期卵母细胞的玻璃化冷冻,可获得7.8%的冻后卵裂率,并能获得桑椹胚发育,是一种有效的猪卵母细胞冷冻保存技术。     

OPS玻璃化冷冻对山羊卵母细胞超微结构的影响

对山羊不同发育阶段卵母细胞ＯＰＳ玻璃化冷冻的超微结构损伤进行了电镜观察。结果表明，卵丘细胞除内质网扩张外，未见其他明显的结构损伤；卵母细胞的质膜损伤以ＧＶ期最为严重，其次为培养９ ｈ的，ＩＶＭ 的最轻；ＧＶ期卵几乎看不到微绒毛，而培养９ ｈ和ＩＶＭ卵微绒毛保存较好；ＧＶ期卵母细胞线粒体有的发生了损 伤，主要表现在嵴不清或扩张，培养９ ｈ和ＩＶＭ卵母细胞的线粒体基本上保持了正常的结构；培养９ ｈ卵母细胞的 内质同发生了扩张，ＩＶＭ卵母细胞内质网结构正常。     

生发泡移植过程对小鼠卵母细胞体外受精的影响

为研究生发泡(GV)移植后的重组卵母细胞能充分在体外成熟和发育,本试验比较了GV移植过程及体外成熟对小鼠卵母细胞体外受精的影响。通过透明带切口及GV移植获得的重组GV期卵母细胞的成熟率为87.0%(147/169),体外受精后发育到原核期胚和2-细胞期胚的比率分别为76.2%(112/147)和42.2%(62/147),与仅做透明带切口但不进行GV移植的对照组相似(P>0.05),表明GV移植过程未对卵母细胞体外受精后的早期胚胎发育能力产生不利影响。但与体内成熟的卵母细胞相比,体外成熟卵母细胞的受精率和卵裂率都明显降低,表明其进一步发育的能力受到影响。