山羊卵母细胞冷冻保存及其对发育效果的影响

在程序冷冻条件下,冷冻保护剂种类对山羊卵母细胞发育效果有显著影响。对于山羊GV期卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(83 1%)和DMSO(81 7%)均高于甘油(70 7%)(P<0 05);而体外成熟率则是PROH(20 3%)高于DMSO(14 2%)和甘油(9 8%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。对于山羊IVM卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(84 5%)和DMSO(86 4%)均高于甘油(74 2%)(P<0 05);而受精率则是PROH(23 2%)高于DMSO(17 5%)和甘油(13 1%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。冷冻方法和卵母细胞发育阶段对冷冻效果有显著影响。从冷冻方法看,程序冷冻和OPS玻璃化冷冻,GV期卵母细胞的成熟率分别为19 7%、27 6%,受精率为3 3%、8 6%;培养9h卵母细胞的成熟率分别为20 6%、30 9%,受精率为4 4%、10 3%;IVM卵母细胞的受精率分别为20 9%、29 4%,2 细胞率为4 4%、8 8%,均是OPS玻璃化高于程序冷冻,差异显著(P<0 05);从卵母细胞发育阶段看,不论是程序冷冻还是OPS玻璃化冷冻,GV期和培养9h卵母细胞的成熟率、受精率差异均不显著(P>0 05),但受精率均显著低于IVM卵母细胞(P<0 05)。     

小鼠卵母细胞的孤雌激活及体外发育

分别用不同条件的电脉冲、酒精浓度刺激不同卵龄的小鼠卵母细胞，进行体外培养并观察卵母细胞的活化和体外发育情况。结果表明，①以场强５５Ｖ／ｍｍ，脉宽１６０μｓ的电脉冲刺激卵龄为１７ｈ的卵母细胞，活化卵形成二原核率为９０％；以场强５５Ｖ／ｍｍ，脉宽６４０μｓ的电脉冲刺激卵龄为１５ｈ的卵母细胞，激活卵的桑椹胚最高发育率为６９％．②用７％酒精刺激卵龄为１５ｈ的卵母细胞２ｍｉｎ，活化率最高为７２％，激活卵的桑椹胚发育率为２２．２％．     

山羊卵泡卵母细胞体外成熟体外受精研究

对山羊孵巢卵泡卵母细胞的采集方法、 PMSG处理山羊促进多卵泡发育及受精体系进行了研究。结果表明：切割法获可用卵数高于抽吸法， PMSG处理获卵总数及可用卵数高于对照组， BO液法的受精率高于 TALP液法，而 TALP液法的桑椹胚率高于 BO液法。     

小鼠腔前卵泡的分离采集和体外成熟研究

采用机械法和酶法结合机械法分离采集小鼠卵巢 ,每只小鼠可获腔前卵泡 5 3 2 5和 5 7 2 9枚 (P <0 0 5 )。成年小鼠腔前卵泡在体外培养 9d ,换用成熟培养液继续培养 2 4～ 2 8h后 ,3种不同培养系统中卵泡的成熟分裂率分别为 5 47%、3 85 %和 9 31%。表明EMEM +5 %FCS +0 2 3mmol/mL丙酮酸钠 +2 0 μg/mLFSH +0 0 5mmol/mL次黄嘌呤 +2 0 0IU/mL青 -链霉素培养系统可以使小鼠腔前卵泡卵母细胞在体外发育达到成熟     

哺乳动物配子操作过程中各种耗材的选择使用

哺乳动物配子操作的实验如卵母细胞或卵泡的体外成熟,体外受精,以及胚胎的体外培养等等,都要用到很多消耗性器材,包括培养器皿、离心管、吸头和吸卵管等,这些耗材产品型号多,用途广,用量大,而国产和进口产品质量和价格差别很大,合理选用这些耗材,在保证实验顺利进行和获得可靠实验结果的基础上,尽可能节约开支用费,这对于各高校或科研院所的实验室都十分必要。本文根据实验室工作的经验积累,总结了主要耗材的选择使用情况,为实验室耗材的合理使用提供参考。     

大熊猫卵母细胞体外成熟及受精后的超微结构观察

用抽吸法和切割法采集死亡大熊猫卵泡卵母细胞进行体外培养和体外受精 ,对其培养前、培养后及受精后的卵母细胞进行了电镜观察。结果表明 ,( 1 )大熊猫卵母细胞中富含卵黄颗粒和卵黄泡 ;( 2 )经过 2 2 h的培养 ,大熊猫卵母细胞在超微结构上表现为成熟卵的特征 ;( 3)大熊猫卵母细胞中的线粒体为基质密度浅且均匀的线粒体。     

一氧化氮对小鼠卵母细胞自发成熟的影响及作用机制

为研究一氧化氮（NO）供体硝普钠（nitroprusside sodium，SNP）对小鼠卵母细胞体外自发成熟的作用，并进一步探讨NO影响卵母细胞体外自发成熟的可能机制，我们采用了体外细胞培养方法和放射免疫分析法（RIA）。细胞培养研究结果显示，NO供体SNP（1mM）能够延迟卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs) 自发成熟过程中GVBD的发生，抑制PB1的释放。放射免疫分析（RIA）实验结果表明，1mM SNP能够显著的升高COCs内cGMP的水平，而可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）抑制剂ODQ（10μM）能够消除SNP对cGMP水平升高的促进作用。同时10μM ODQ还能够逆转SNP对卵母细胞自发成熟的抑制作用，而PKG抑制剂KT5823（1μM）却不能够逆转SNP对COCs自发成熟的抑制作用。以上结果说明NO是通过激活sGC，提高细胞内cGMP水平来发挥其作用的，但cGMP下游的PKG信号通路并不参与NO调控的COCs自发成熟过程。     

早孕因子作为屡配不孕动物胚胎早期消失的标志

早孕因子作为屡配不孕动物胚胎早期消失的标志张美佳摘译王建辰校早孕因子（ＥＰＦ）首先由Ｍｏｒｔｏｎ等用改良玫瑰花环抑制试验所证实。玫瑰花环抑制值（ＲＩＴ）是指抗淋巴细胞血清（ＡＬＳ）抑制淋巴细胞和异种红细胞之间形成玫瑰花环的能力，其抑制结果低于无ＡＬＳ...     

大熊猫卵巢中“连体卵”的分离及其电镜观察

用切割法和切割加酶消化法对两对大熊猫卵巢进行了处理，结果在两对卵巢中别分离得到了一对典型的“连体卵”，并对其进行了电镜观察，表明大熊猫卵巢中存在“连体卵”，并初步探讨了其与大熊猫一胎产二仔的关系。     

牛卵母细胞电激活参数的研究

分析了影响牛体外成熟卵母细胞电激活的主要参数，初步建立了电激活的实验程序。结果表明，卵母细胞激活率随着卵龄的延长、电场强度的增加以及电脉冲次数的增多而升高，含Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋离子的电激液显著高于非电解质液。以０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋１００μｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２＋１００μｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２为电激液，施加１．６ｋＶ／ｃｍ、１６０μｓ，３次电脉冲间隔１５ｍｉｎ，激活率、卵裂率、囊胚发育率分别为８６．０％，８６．５％及４８．９％