囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测犬细小病毒的研究

应用斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA,简称斑点试验)能检出少至0.58ng/ml的犬细小病毒的病毒抗原,比常规ELISA及HA试验分别敏感8及64倍,与犬腺病毒等5种对照病毒不发生交叉反应,与病毒分离试验的阳性符合率为94.44％(17/18),比常规ELISA及HA试验提前24～48h检出实验感染犬粪中排毒。采用斑点试验、常规ELISA、HA试验三种方法对316份犬粪标本进行了检测比较,阳性率分别为33.23％、27.85％、23.10％(P<0.05)。该法可在4h内报告结果。     

三种检测禽副粘病毒2型(PMV-2)抗体方法的建立及其与HI方法的比较

建立了检测血清中禽副粘病毒2型（PMV-2）抗体的间接免疫荧光试验（IFA）、间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）以及斑点酶联免疫吸附试验（Dot—ELISA）方法，并将三种方法同血凝抑制试验（HI）进行了比较。结果表明，建立的IFA、间接ELISA和Dot—ELISA等三种抗体检测方法其敏感性、特异性均很好，与HI方法相比，敏感性也大大增强。     

新疆部分地区牛新孢子虫病的血清学调查

应用间接免疫荧光抗体试验，酶联免疫吸附试验，斑点酶联免疫吸附试验3种检测方法，对新疆地区部分牛和牦牛的血清样品进行新子虫病抗体检测。结果显示，298头份牛血清全部为阴性，4份牦牛血清1份为阳性。     

斑点免疫吸附试验(DIA)诊断绵羊布病及与补反的比较

传统的以塑料板作固相载休的酶联免疫吸附试验(ELISA)已在许多人畜传染病的抗体检测中应用。以后Havkes(1986)报道了用硝酸纤维薄膜替代塑料板的斑点免疫吸附试验(DIA),定量检测血清中抗体。硝酸纤维薄膜具有吸附抗原能力强,抗原     

酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体的比对报告

基层兽医部门实验室普遍采用正向间接血凝试验（IHA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测猪瘟免疫抗体,为了获得正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验两种检测方法之间存在的关系,笔者进行了本次猪瘟免疫抗体检测试验,并分别比较了2种方法的符合率和合格样品检出率。     

兽医实验室酶联免疫吸附试验操作要点

酶联免疫吸附试验(ELISA)是兽医实验室常用检测方法,具有灵敏度高、特异性强以及操作简便等特点。为了刚好地使用ELISA方法进行疫情检测以及疫病诊断,本文总结了常见ELISA试验各个操作步骤的注意事项,为广大实验员提供获得更准确有效的实验结果提供参考。     

禽流感病毒检测技术研究

禽流感病毒的检测方法主要分为血清学检测和分子生物学检测两大类。血清学检测方法包括琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验( ELISA)、神经氨酸酶抑制试验(NIT)和病毒中和试验(VN)。随着分子生物学的发展,近两年国内外学者更加注重对禽流感病毒的分子生物学检测方法的研究。分子生物学检测方法包括RT-PCR、多重RT-PCR、多种改进的RT-PCR和基因探针技术。     

应用ELISA检测犬狂犬病抗体水平的探讨

为了解应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测犬狂犬病抗体水平的效果,对东莞市采集的54份犬血清应用ELISA进行检测,采用Synbiotics软件进行分析,同时将该批血清送至军事医学科学院军事兽医研究所作荧光抗体病毒中和试验(FAVN)比较.ELISA检出阳性数35份,阳性率为64.82%,与军事医学科学院军事兽医研究所的测定结果差异不显著,符合率为85.19%.证明应用ELISA检测犬狂犬病抗体水平定性检测具有较高的准确率,适合在短时间内监测大批量的血清样品.     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测水牛伊氏锥虫抗体

应用斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测水牛伊氏锥虫IgG抗体,并与间接血凝试验(IHA)进行了比较。检测160份伊氏锥虫疫区水牛血清160份,Dot—ELISA和IHA的阳性率分别为55.63％和53.75％;其中42份虫检阳性血清的阳性率分别为100％和92.86％,两种试验的一致率为95.63％。两种试验的滴度呈显著正相关(r=0.8842)。10份非疫区健康水牛血清两种试验均为阴性。     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B基因原核表达产物单抗的制备

用大肠杆菌BL21表达了马立克氏病病毒（MDV）强毒GA株的囊膜糖蛋白B（gB)基因，通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶龟泳（SDS－PAGE）分离表达蛋白条带，切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光试验（IFA），得到1株GA株阳性的单克隆抗体杂交瘤细胞株7C8。该单抗腹水的ELISA效价为1：2^12，IFA效价为1：800，与MDV不同致病型毒株CVI988、GA、RB1B、MD11、648A株感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）均呈IFA阳性。1：100稀释时与GA感染的CEF在斑点酶联免疫吸附试验（dot-ELISA)中呈阳性。     

应用斑点酶联免疫试验快速检测绵羊布氏菌病

将斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)用于检测Br.ovis感染并和常规ELISA、R-SAT、R-co-omb’s进行比较。结果在150份血清标本中:Dot-ELISA为65.3%;ELISA64.0%;R-SAT38.6%;R-coomb’s52.7%。并用50份S型布氏菌阳性血清和8份TB阳性血清进行了Dot-ELISA试验,结果全部阴性,未发生交叉反应。3次重复试验结果一致。结果证明本方法敏感性高,特异性强,操作简便快速易于基层推广使用。     

不同方法及材料检测大片吸虫感染的比较试验

为片形吸虫病诊断提供高效、简便的新技术，以大片吸虫分泌排泄抗原（ES抗原），用于斑点酶联免疫吸附试验（Dot－ELISA）、琼脂扩散酶联免疫吸附试验（Dig－ELISA）、免疫胶体金滴渗法（DIGFA）检测动物体内的大片吸虫（Fasciolagigantica）感染。通过检测血清、血纸、牛奶等几种材料，多重试验比较，结果三种方法均具有敏感性高、特异性强、准确性可靠等优点，并各有特长，如操作简便快速、费用低廉，易于在基层推广应用等，同时证明用血纸和牛奶检测抗体效果同样可靠。本试验首次报道用Dot－ELISA、DIGFA在奶中检测片形吸虫抗体，为该寄生虫病普查提供一种新思路。     

上海地区野鸟中伯氏疏螺旋体和西尼罗病毒感染的血清学调查

于2005年从飞抵上海的12种候鸟和4种留鸟中采集208份血清样品,采用酶联荧光测定(ELFA)法和酶联免疫吸附试验(ELISA),分别对伯氏疏螺旋体和西尼罗病毒的感染状况进行了血清抗体调查,结果受检野鸟样品的检测结果均为阴性。     

呼和浩特地区犬弓形虫病血清学调查

为了研究呼和浩特地区犬弓形虫感染情况,试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对不同来源、不同性别、不同年龄试验动物的弓形虫抗体IgG与IgM进行检测.结果表明:酶联免疫吸附试验检测犬弓形虫抗体IgG与IgM 性率分别为12.4%和4.6%;不同来源犬的弓形虫感染率有显著差异,不同性别犬感染率无明显差异,随着年龄的增长I...     

内蒙古羊副结核病检测方法的比较研究

对选自内蒙古4个旗(县)的213只羊采用通过琼脂扩散试验(AGID)、皮内变态反应(DTH)、补体结合反应(CF)和酶联免疫吸附试验(ELISA)4种检测方法进行3次羊副结核病检测,以比较4种检测方法的检出率。结果表明,琼脂扩散试验、皮内变态反应、补体结合反应和酶联免疫吸附试验的检出率分别为3.8%、4.7%、5.2%和11.3%。其中以酶联免疫吸附试验的检出率最高,并且该方法简便、灵敏,具有实际应用和推广价值,对内蒙古地区羊副结核病检测方法的选择有一定的指导意义。     

用斑点免疫吸附试验快速诊断犊牛轮状病毒感染

现已证实轮状病毒已是人和动物的重要病原(McNulty 1978)。对于轮状病毒引起的腹泻,常用的诊断方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、电镜技术和反向免疫电渗电泳等。ELISA 是一种敏感性和特异性较强的试验,已被认为是检测犊牛粪便中的轮状病毒抗原较有效的方法(Ellens 等1977),     

用斑点—ELISA诊断绵羊片形吸虫病

酶联免疫吸附试验(ELISA)已被用于诊断人工感染和自发感染肝片吸虫的牛。此后,ELISA又被报导作为绵羊肝片吸虫感染的一种诊断技术。随着Pappas等人描述了用于诊断内脏利什曼病的一种更快速经济又直接可见读数的改进ELISA技术。根据这一技术,把毫微克量的寄生虫抗原施加到硝化纤维膜上,研制一种微量酶联免疫吸附试验(斑点-ELISA)。本研究的目的是修改斑点-ELISA,用于绵羊片形吸虫病的诊断。     

酶联免疫吸附方法检测禽流感病毒的研究进展

禽流感是由禽流感病毒(AIV)引起的人畜共患病,可以引起巨大的经济损失,严重威胁人类健康。酶联免疫吸附试验(ELISA)具有灵敏度高、可标准化操作、结果易于分析等特点,因此在禽流感病毒检测过程中占据非常重要的地位。本文重点介绍几种主要的禽流感病毒酶联免疫吸附试验方法,并就该方法的发展提出建议。     

抗独特型抗体检测H9亚型禽流感血清抗体

为了探讨用抗独特型抗体替代病毒或病毒亚单位检测H9亚型禽流感血清抗体的可行性,本试验分别用全病毒抗原和抗独特型抗体(Ab2)作检测原,通过琼脂免疫扩散试验(AGP)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了鸡的血清样品。在AGP试验中,分别用Ab2和禽流感病毒(AIV)对10份血清样品检测的符合率为70%。在间接ELISA试验中,Ab2和AIV抗原对10份血清样品检测的符合率为90%。用Ab2间接ELISA试验检测出的血清阳性率(8/10)高于血凝抑制试验(6/10)和AGP试验(5/10)。结果表明,在一定的情况下Ab2可以用来代替具有污染环境风险的病毒抗原来检测抗病毒抗体。