海藻酸钠明胶联合固定化香菇纤维素酶的技术研究

以海藻酸钠、明胶为载体,戊二醛为交联剂,对香菇纤维素酶进行固定化。研究了海藻酸钠浓度、明胶浓度、氯化钙浓度、给酶量、戊二醛浓度及交联时间对固定化酶的影响,并对固定化酶的最适反应温度、最适pH、温度稳定性等酶学性质进行了测定。结果表明:海藻酸钠和明胶的最佳浓度分别为3.5%和3.0%,戊二醛浓度为1.0%。与游离酶相比,固定化酶最适反应pH向酸性方向移动了0.4,最适反应温度提高了5℃,并且固定化酶具有良好的贮存稳定性。     

毛木耳原生质体制备与再生条件的研究

通过对毛木耳原生质体制备与再生条件的系统研究,确定了原生质体制备的最佳出发菌龄、融壁酶浓度、酶解温度及酶解时间、渗透压稳定剂种类、浓度及最佳再生培养基配方。     

杏SSR-PCR反应体系中Taq酶的初步优化

Taq酶的浓度是PCR反应的主要影响因素之一。本文随机选择大杏梅等5个杏品种,提取DNA,并经检测后用于SSR-PCR实验。在20μl的PCR反应体系中,Taq酶浓度设0.5U、1.0U和2.0U三个梯度,其它因素不变。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,当Taq酶浓度为0.5U时,有2个品种不能扩增出特异性条带;当Taq酶浓度为1.0U时,只有1个品种无扩增条带;当Taq酶浓度为2.0U时,所有品种均能扩增出条带,但同时会产生杂带。因此,在20μl杏SSR-PCR反应体系中,Taq酶浓度的适宜范围为1U-2U。     

黄瓜幼苗子叶原生质体的分离纯化及融合条件优化研究

以黄瓜幼苗子叶为试材,采用正交实验,探讨了不同酶浓度、渗透剂浓度、酶解时间对原生质体产量和活性的影响,并研究了不同蔗糖浓度对原生质体纯化和不同PEG浓度对原生质体融合率的影响.结果表明:黄瓜幼苗子叶在含1.0％纤维素酶、0.8％果胶酶和0.3 mol/L甘露醇的混合酶液中酶解3h,获得具有活力的原生质体最高,为7.2×106个/g,原生质体活力为83.72％.蔗糖浓度为20％时纯化效果最好,得到有活力原生质体7.1×106个/g; PEG浓度为40％时融合率最高,融合率为32％.     

光核桃ISSR扩增体系的优化

为确保光核桃ISSR反应条件的稳定性,以改良的CTAB法提取光核桃基因组DNA,对模板DNA浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物浓度等因素进行了优化,确立了光核桃ISSR反应体系。结果表明:最佳反应体系为模板浓度40ng/μL、引物浓度0.4μmol/L、Mg2+的浓度2.5mmol/L、酶浓度0.5U、dNTPs浓度0.5mmol/L,为光核桃这一优质的种质资源的遗传多样性研究奠定了理论基础。     

硒对茶树菇胞外酶活性的影响

以茶树菇为试材,采用含梯度浓度亚硒酸钠(0、2.5、5、10、20、40mg·L-1)的液体培养基培养菌丝,研究了菌丝胞外木质素酶、羧甲基纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶的活性变化。结果表明:硒对菌丝胞外酶活性有一定的影响。添加适宜浓度的硒对茶树菇菌丝这6种胞外酶活性均有促进作用,其中木质素酶和果胶酶活力的最适硒浓度为2.5mg·L-1,其它4种酶活力的最适硒浓度均为5.0mg·L-1。     

香菇YJ-01原生质体制备与再生条件的优化

以香菇菌株YJ-01为试材,以原生质体产量与再生率为指标,探究酶种类、酶解时间、酶解温度、pH、稳渗剂种类、稳渗剂浓度及菌丝菌龄等7个因素对原生质体产量与再生率的影响。通过单因素试验,选出了4个因素(酶解温度、酶解时间、菌龄和稳渗剂浓度)利用四因素二次通用旋转设计进行优化。结果表明:(1)YJ-01原生质体最佳制备条件:pH 5.0,0.5 mol/L MgSO_4溶液作稳渗剂,对5日龄菌丝体于28℃条件下酶解3 h。各因素对原生质体产量的影响作用依次为酶解温度酶解时间菌龄稳渗剂浓度。(2)YJ-01原生质体最佳再生条件为,当p H 5.5,以0.5 mol/L蔗糖溶液作稳渗剂,对6.5日龄菌丝体在27.8℃酶解2.9 h。各因素对原生质体再生率的影响作用依次:稳渗剂浓度酶解时间菌龄酶解温度。     

灵芝原生质体的制备与再生研究

以泰山灵芝为试材,研究了菌龄、酶浓度、酶解时间、酶解温度、酶解pH、渗透压稳定剂对灵芝原生质体制备和再生的影响.结果表明:菌龄为7d,以甘露醇为渗透压稳定剂,采用酶浓度2.0％的溶壁酶,pH为6.0,31℃条件下酶解2.5h为灵芝原生质体制备的最适条件;并在原生质体再生固体培养基(以0.6 mol/L蔗糖为渗透压稳定剂)上,原生质体的再生率最高.     

白菜组织细胞微管间接免疫荧光检测体系的优化

 利用正交试验设计，从酶浓度、酶解时间、一抗稀释度、二抗稀释度4种因素3个水平对白菜组织细胞微管的间接免疫荧光检测体系进行了优化，确立了适合白菜组织细胞的微管免疫荧光检测体系——果胶酶和纤维素酶浓度均为1.0%，酶解时间1 h；一抗稀释浓度1:100，孵育时间1 h；二抗稀释浓度1:500，孵育时间1 h。使用优化后的微管免疫荧光检测体系在荧光显微镜上能够快速观察到白菜组织细胞内的微管。     

丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性的研究

为研究丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性,本研究应用分光光度计开展温度、pH、酶体积、反应底物浓度等对酶反应的影响,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。结果表明,CAT最适反应体系:以H_2O_2为底物,最适底物浓度为0.33 mol/L H_2O_2,Km值为0.1818 mol/L,最适温度为40℃,最适pH值为7.8,最适酶液体积为0.1 ml。     

松茸原生质体制备与再生的研究

本文针对酶种类及其浓度 ,酶解时间、渗透压稳定剂的种类及其浓度、菌龄及菌丝形态等对松茸菌丝原生质体制备与再生影响的研究。结果表明 ,采用三角摇瓶培养 3 d后、静置培养60 h的松茸菌丝体 ,在 3 0℃ ,p H6.5的条件下 ,以 0 .6M蔗糖为渗透压稳定剂 ,通过 2 .5 %溶壁酶、0 .5 %崩溃酶的复合酶进行2 .5 h酶解 ,松茸原生质体制备率与再生率最高     

大杯蕈原生质体菌株筛选的研究

对野生大杯蕈（Ｃｌｉｔｏｃｙｂｅ ｍａｘｉｍａ）原生质体的分离再生及再生菌株的构建进行研究，以纤维素酶、溶壁酶、崩溃酶、β－葡萄糖苷酸酶的去壁效果最好，而新生酶，几丁质酶，蜗牛酶的云壁效果较差。２种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液在０．１％￣２．０％浓度范围内原生质体释放量随酶解液的浓度升高几乎呈直线上升。酶解３￣５ｈ释放的原生质体最多。酶解液ｐＨ值在５．０￣６．０范围内原生质体的产量较高     

腐胺对藤稔葡萄果皮色素及相关酶的影响

通过对藤稔葡萄喷施不同浓度腐胺(Put),研究了腐胺对葡萄果皮色素及相关酶的影响.结果表明:不同浓度的Put都起到了延缓叶绿素降解的作用,影响花色素苷合成和色泽表现.Put影响葡萄果皮中花色素苷合成途径中苯丙氨酸氨解酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)3个酶活性.     

NaCl胁迫对羽衣甘蓝生理生化指标的影响

试验采用水培种植的方法研究不同NaCl浓度对羽衣甘蓝幼苗光合色素含量、可溶性蛋白质含量、过氧化氢酶(CAT)活性以及过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明:随着NaCl浓度的增加,叶绿素含量总体呈下降趋势;可溶性蛋白质含量、CAT和POD活性随着NaCl浓度的增加先上升后下降;在NaCl浓度为600mmol/L时可溶性蛋白质含量、CAT活性达到最高值,而POD活性则是在NaCl浓度为800mmol/L时达到最高。     

珠眉海棠根原生质体分离条件研究

以苹果属珠眉海棠（Maluzumi Mati）根为供体进行原生质体分离条件的研究，结果表明，酶解过程中酶液浓度、酶液渗透压、酶解时间均对原生质体分离效果产生重要影响。对于珠眉海棠，一步酶解法，两步酶解法皆可以分离根原生质体，但两步酶解法优于一步酶解法。     

微型结球白菜原生质体游离与纯化研究

以微型结球白菜无菌苗子叶为材料,探讨酶液浓度、酶解时间、酶液渗透压、离心转数对其原生质体分离效果的影响以及蔗糖浓度对纯化结果的影响。结果表明:以1.0%CellulaseR-10,0.08%Pectinase,0.4 mol/L甘露醇,酶解6 h,第1次离心转速1 200 r/min,24%蔗糖的条件组合最佳,原生质体产量为2.10×107个/g(FW),活力达91.20%。     

低聚糖激发子的制备及诱导杨树抗病性的研究

采用正交实验优选H2O2氧化降解壳聚糖的最佳工艺条件,得到最佳降解方案:30%H2O2用量10 mL,反应温度60℃,反应时间6 h,乙酸浓度2%。在此基础上用壳聚糖及低聚糖溶液作为激发子诱导杨树抗病性,当低聚糖浓度为10 mg/L时,PAL、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶及木质素活性达到最高值分别为对照的3.41、3.89、3.12、2.56倍。SOD、CAT及POD活性分别为对照的4.01、2.59、2.65倍。壳聚糖最佳诱导浓度为20 mg/L,此时PAL、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶及木质素酶活性分别为对照的3.15、3.85、3.02、2.56倍。SOD、CAT及POD活性分别为对照的3.81、2.43、2.59倍。相同浓度的低聚糖与壳聚糖相比诱导效果更好。     

油菜素内酯对青花菜叶片中几种酶和产量的影响

试验设置了 0 .0 0 1、0 .0 1、0 .1mg·L- 13种浓度的油菜素内酯 (BR)处理 ,研究了BR对青花菜叶片的硝酸还原酶 (NR)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 (POD)、过氧化氢酶 (CAT)活性和脯氨酸 (Pro)含量以及花球质量的影响。结果表明 ,中、低浓度BR可提高NR活性 ;适宜浓度的BR处理可影响植株细胞膜保护酶水平 ,提高SOD、POD、CAT活性 ,促进Pro的积累 ,提高花球的质量。处理中以中浓度BR处理的花球质量最大     

灵芝原生质体制备与再生条件的研究

本文研究了不同酶浓度、酶解温度、酶解时间、渗透压稳定剂及菌龄等对灵芝菌丝原生质体制备与再生的影响，结果表明，菌龄为60h的菌丝，采用浓度为2％的溶壁酶以0．6M的甘露醇作渗透压稳定剂于pH6.5，30℃下酶解2h，当酶解液中湿菌体含量对0．1g/mL时，其原生质体数可达2^*10^7个/mL，且再生率达8．5％。     

黑木耳原生质体制备、再生及单核体荧光鉴定

利用正交试验研究了黑木耳原生质体制备、再生的最佳条件,结果表明,原生质体制备最佳条件是酶解温度31℃、酶浓度1．0％、菌龄5d、酶解时间4h,原生质体再生的最佳条件是酶解温度27℃、酶解时间4h、酶浓度1．5％、菌龄11d。稳渗剂种类对黑木耳原生质体再生率的试验结果表明,采用0．5mol／L蔗糖为稳渗剂,各黑木耳菌株的原生质体再生率最高。HW2号菌株原生质体经核染色其单核化比率最高;在荧光显微镜下观察菌丝核相,单、双核清晰可辨。