向日葵(Helianthus annuus L.)不同外植体组织培养及其再生的研究

【目的】建立向日葵不同外植体离体培养再生体系，为向日葵遗传转化、突变体筛选奠定基础。【方法】以不同基因型向日葵为材料，研究了向日葵不同外植体在不同的培养基中诱导不定芽再生的频率。【结果】向日葵不同基因型外植体在含适宜吲哚-3-乙酸（IAA）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）等激素的培养基中均较易形成愈伤组织，但愈伤组织诱导不定芽的能力则较弱；不同基因型向日葵外植体的不定芽诱导率依次为子叶节＞下胚轴＞子叶＞真叶；诱导子叶节不定芽再生的适宜6-BA浓度为1.2～1.8 mg•L-1， 下胚轴为1.8 mg•L-1，子叶为0.6 mg•L-1，真叶却未见到诱导出不定芽；MS + 0.03 mg•L-1 IAA + 1.2～1.5 mg•L-1 6-BA培养基可用于向日葵子叶、子叶节和下胚轴再生体系；不同基因型向日葵诱导不定芽的能力差别较大，其中，基因型PR29再生能力较强。【结论】本研究成功地建立了向日葵不同外植体离体培养再生途径，并获得了再生植株。     

观赏向日葵腋芽组织培养及植株再生体系的研究

以4种不同基因型观赏向日葵的腋芽作为外植体建立离体培养再生体系,研究了不同腋芽日龄以及不同基因型和不同6-苄氨基嘌呤(6-BA)浓度对不定芽诱导的影响。结果表明:低日龄的腋芽更容易诱导出不定芽,腋芽在含有适宜浓度的α-萘乙酸(NAA)、6-BA等激素的培养基中诱导愈伤组织的能力较弱,但是可以直接诱导出不定芽,诱导不定芽再生的6-BA适宜浓度为0.6～1.5 mg/L。不同基因型观赏向日葵之间再生能力没有显著差异,但诱导不同基因型不定芽再生的6-BA最佳浓度略有差异。诱导白色普通花型观赏向日葵YAN1569腋芽的6-BA最佳浓度为0.6 mg/L,诱导黄色YAN1339和紫色YAN1328普通花型观赏向日葵腋芽的6-BA最佳浓度为0.6～0.9 mg/L,诱导黄色菊花型(重瓣型)观赏向日葵YAN1527腋芽的6-BA最佳浓度为0.9～1.2 mg/L。     

观赏向日葵腋芽组织培养及植株再生体系的研究

以4种不同基因型观赏向日葵的腋芽作为外植体建立离体培养再生体系,研究了不同腋芽日龄以及不同基因型和不同6-苄氨基嘌呤(6-BA)浓度对不定芽诱导的影响。结果表明:低日龄的腋芽更容易诱导出不定芽,腋芽在含有适宜浓度的α-萘乙酸(NAA)、6-BA等激素的培养基中诱导愈伤组织的能力较弱,但是可以直接诱导出不定芽,诱导不定芽再生的6-BA适宜浓度为0.6～1.5 mg/L。不同基因型观赏向日葵之间再生能力没有显著差异,但诱导不同基因型不定芽再生的6-BA最佳浓度略有差异。诱导白色普通花型观赏向日葵YAN1569腋芽的6-BA最佳浓度为0.6 mg/L,诱导黄色YAN1339和紫色YAN1328普通花型观赏向日葵腋芽的6-BA最佳浓度为0.6～0.9 mg/L,诱导黄色菊花型(重瓣型)观赏向日葵YAN1527腋芽的6-BA最佳浓度为0.9～1.2 mg/L。     

蚕豆组织培养再生植株的研究

[目的]研究不同外植体、培养基、基因型及放置方式对蚕豆不定芽诱导效果和植株再生的影响。[方法]以蚕豆幼胚、未成熟子叶、成熟子叶、成熟子叶节为材料,通过诱导不定芽→分成单个小植株→诱导生根这一过程检测不同外植体、培养基、基因型、放置方式对不定芽诱导及植株再生的影响。[结果]所试4种外植体中,以成熟子叶节芽诱导频率最高,可达95%;不同外植体所需要的适宜培养基不同;不同基因型对蚕豆子叶节诱导芽效果差异很大;子叶节垂直半埋于培养基比平置于培养基时,其芽诱导效率高,且不定芽在IBA浓度为120mg/L的MS培养基上诱导生根,长成完整小植株。[结论]该研究建立了蚕豆器官发生再生植株的试验程序,为进一步研究提供试验依据。     

龙椒2号大甜椒子叶离体培养中诱导不定芽的研究

[目的]采用子叶离体培养方法快速繁殖龙椒2号大甜椒,尤其在诱导不定芽阶段能更快、更多地诱导出不定芽。[方法]在诱导不定芽阶段中以MS为基本培养基,添加不同的激素配比进行对比,以优选出最佳的激素配比方案。[结果]生长素NAA对形成愈伤组织有主导作用,添加量以0.6 mg/L较为合适,6-BA和KT对促进芽分化都能起主导作用,6-BA以0.4 mg/L为宜,KT以1.0 mg/L为宜。[结论]选用子叶切片转入MS＋NAA0.6 mg/L培养基上,诱导出愈伤组织,然后将愈伤组织切块转入MS＋6-BA0.4 mg/L＋NAA0.5mg/L或MS＋KT1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L培养基上,分化出多数量的不定芽,然后利用这些不定芽进一步扩繁、生根,进而形成再生植株。     

紫菜薹子叶离体培养不定芽诱导频率的研究

为比较紫菜薹不同基因型之间的子叶不定芽诱导频率,以6个紫菜薹（Brassica campestris ssp.chinensis var.purpuraria）品种为试材,在不同的培养基上诱导不定芽,发现‘十月鲜’紫菜薹的子叶不定芽诱导频率最高。为确定‘十月鲜’紫菜薹子叶不定芽诱导最佳培养基,采用二次正交旋转组合设计研究了6-BA、NAA及AgNO3对‘十月鲜’子叶离体培养不定芽诱导频率的影响,发现3个因素对子叶不定芽诱导影响的主次关系为：AgNO3〉6-BA〉NAA,最佳培养基是MS＋3.0 mg/L6-BA＋1.5 mg/L NAA＋5.0 mg/LAgNO3,不定芽诱导率达85.71%。     

植物激素对无籽西瓜丛生芽诱导的影响

[目的]对无籽西瓜的组织培养技术进行探索。[方法]以墨童无籽西瓜子叶作为外植体,分别置于添加不同浓度6-BA、NAA、IBA、KT的MS培养基中诱导愈伤组织、丛生芽及丛芽的伸长。[结果]浓度0.3~1.2 mg/L6-BA、NAA均能诱导愈伤组织;浓度0.6~2.5 mg/L6-BA、IBA均能诱导丛生芽;浓度0.2~1.0 mg/LKT均能诱导丛生芽伸长。[结论]诱导无籽西瓜愈伤组织的最佳培养基为MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L,诱导丛生芽的最佳培养基为MS＋6-BA2.0 mg/L＋IBA0.8 mg/L;诱导丛生芽伸长的最佳培养基为MS＋KT0.2 mg/L。     

甜瓜红心脆和早皇后再生体系的建立

为了初步筛选出适宜诱导甜瓜红心脆、早皇后子叶和下胚轴愈伤组织和不定芽的培养基,以及筛选适宜其不定芽伸长和生根的培养基,采用组织培养的方法,以甜瓜红心脆和早皇后种子为材料、子叶和下胚轴为外植体,进行添加不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸(IAA)激素组合的MS培养基诱导愈伤组织和不定芽、不定芽伸长、芽生根的研究。试验结果表明,MS+0.5 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L IAA培养基不利于红心脆子叶愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其子叶和下胚轴愈伤组织的形成;MS和MS+0.3 mg/L IAA培养基不利于早皇后子叶愈伤组织的形成,MS培养基不利于其下胚轴愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其愈伤组织的形成;适宜诱导红心脆子叶不定芽的培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,适宜诱导早皇后子叶不定芽培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;适宜诱导红心脆、早皇后下胚轴不定芽的培养基分别为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA、MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA;MS+0.5 mg/L 6-BA、MS+1.0 mg/L IAA培养基分别适宜红心脆、早皇后不定芽伸长;2个品种适宜的生根培养基均是1/2MS+1.0 mg/L IBA。研究初步建立了甜瓜红心脆、早皇后的再生体系,为其遗传转化研究作了准备。     

派间杂种黑白杨组织培养和再生系统的建立

[目的]优化派间杂种黑白杨的再生和遗传转化体系。[方法]以黑白杨3种不同基因型组培苗叶片及茎段为材料,采用正交试验研究了不同激素配比、基因型及外植体状态对其生根、侧芽生长及愈伤组织再生的影响。[结果]1/2MS＋IBA0.4mg/L＋NAA0.1mg/L对黑白杨的4号基因型是最优的生根培养基;MS＋6-BA0.8mg/L＋NAA0.2mg/L是诱导黑白杨茎段侧芽生长的最优培养基;MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.1mg/L是诱导黑白杨叶片再生不定芽生成的最适培养基。[结论]建立了完整的黑白杨再生体系。     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体,建立快速繁殖体系,研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽;生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生,其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA;以胚轴为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。     

油葵组织培养及植株再生体系研究

[目的]研究油葵组织培养与植株再生技术。[方法]以油葵的茎尖分生区组织为外植体,探讨不同浓度的IAA、6-BA和AgNO3对不定芽诱导与分化的影响。同时,对生根培养基及炼苗与移栽条件进行优化。[结果]不定芽诱导及分化培养基为MS＋0.03 mg/L IAA＋1.6 mg/L 6-BA＋6 mg/L AgNO3,诱导率可达76.7%,增殖系数可达4~5;不定芽转入生根培养基1/2 MS＋0.3 mg/L NAA,生根率达100%,且须根较多。幼苗经炼苗和移栽后,成活率可达90%。[结论]建立了油葵的组织培养与植株再生体系。     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

组培固定番茄杂种优势优化体系的建立

[目的]建立组培固定番茄杂种优势优化体系。[方法]以番茄杂种优势组合优秀植株的侧芽作为外植体,MS培养基为基本培养基,通过添加不同浓度配比的6-BA和IAA筛选适宜的不定芽诱导、增殖培养基,并通过添加不同浓度的NAA筛选适宜的不定芽生根培养基。[结果]在温度25~26℃,光照强度3 000 lx,光照时间12 h/d的环境和静止培养的条件下,参试材料在MS+6-BA 2.4 mg/L+IAA 0.60 mg/L的培养基上能够诱导出生长状态良好的不定芽,并且能够大量增殖;在1/2MS培养基中添加的NAA浓度为0.5 mg/L时,不定芽生根状态较好。[结论]该研究建立的番茄杂种优势组合植株侧芽组培快繁体系,可以快速繁殖出大量番茄杂种优势组合侧芽的组培苗,将其用于固定番茄杂种优势,可以达到加快番茄新品种选育进程的目的。     

延龄草愈伤组织的诱导及植株再生

[目的]建立延龄草愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。[方法]以延龄草块根、根尖为外植体,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究植物生长调节剂对延龄草愈伤组织形成、增殖和分化的影响。[结果]1/2MS是最适合延龄草块根、根尖诱导愈伤的培养基,添加6-BA 1.2 mg/L和IAA 0.6 mg/L的1/2MS培养基最适合于愈伤组织的诱导,其中以根尖愈伤组织的诱导效果最好,在添加6-BA 0.5 mg/L、IAA 0.6 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高,附加6-BA 1.2 mg/L、IAA 1.0 mg/L的1/2MS培养基为生根适宜培养基。[结论]延龄草的块茎和根尖外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

欧李茎尖分生组织培养与快速繁殖技术研究

以欧李茎尖分生组织为外植体,研究了在培养基中添加不同的激素成分及不同浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。结果表明:不定芽诱导的最佳培养基是MS 6-BA0.4mg/L IAA0.5mg/L;增殖培养的最适培养基为MS 6-BA0.3mg/L IAA0.4mg/L;最佳生根培养基是2/3MS IAA0.5mg/L。应用症状诊断和指示植物鉴定法进行病毒检测,平均脱毒率为73%。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0．5～2．0mg／L6-BA、0．1～0．5mg／LIAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0～0．5mg／LIAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0．5～2．0mg／L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当IAA浓度在0．1,-0．5mg／L时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6．BA2．0mg／L、IAA0.3mg／L的诱导效果最好,分化率高达86％。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100．0％。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0-3mg／LIAA;不定芽生根最佳培养基为MS＋0．1mg／LIAA。     

大豆子叶节高效再生系统的研究

为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株.实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素.结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90％,丛生芽数基本都在4～6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型.最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+ 6-BA 1.6 mg/L+ IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5 +6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.2 mg/L;4个大豆品种的适宜丛生芽伸长培养基为1/2 MS+B5有机+GA3 0.5 mg/L;生根培养基为B5 +NAA0.5 mg/L+ 2.0 g/L活性炭.     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。