三种ELISA方法与荧光抗体病毒中和试验检测狂犬病抗体的一致性分析

为筛选合适狂犬病抗体检测的试剂盒，该研究以荧光抗体病毒中和试验（fluorescent antibody virus neutralization FAVN）方法为参照，与3个ELISA试剂盒方法进行比对，进行一致性分析，并计算了三种试剂盒的敏感性和特异性。结果显示：三种不同的试剂盒中，试剂盒A与FAVN一致性最好，Kappa值为0.605，有较高的一致性，符合率为86%；试剂盒B次之，Kappa值为0.485，为中度一致，符合率为80%；试剂盒C与FAVN的一致性最差，Kappa值为0.310，符合率也最低，为74%。在敏感性和特异性方面，试剂盒A的敏感性最高，为92.1%，试剂盒B的特异性最高，为72.7%。本研究为临床上科学的筛选试剂盒提供了依据。     

两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒检测效果比较

为研究比较国内市售两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒(ZJ-ELISA、HB-ELISA)的检测效果,以期为猪群PCV2抗体监测选择试剂盒提供参考。首先通过间接免疫荧光方法(IFA)测定44份猪血清的PCV2抗体滴度,并以此为标准,判定猪血清中PCV2抗体的阴阳性,然后利用两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒分别测定上述血清的OD值,并判定PCV2抗体阴阳性。通过计算各种试剂盒检测结果与IFA检测结果的符合率以及配对卡方检验及Kappa检验,判定最优检测试剂盒。结果表明,国内市售两种PCV2抗体检测试剂盒与IFA检测结果的总符合率均为86.36%(38/44),配对卡方检验及Kappa检验表明国产试剂盒与IFA检测结果差异不显著。     

6种狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的比对

为评价不同品牌狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的有效性,以确保实验室检测结果更加客观可靠,采集85份北京市犬临床血清样本,分别用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)和6种品牌试剂盒(包括国产、进口,阻断法、间接法)进行抗体检测。以FAVN检测结果为标准,通过Kappa一致性检验、χ2检验及诊断效能评价,比对分析6种品牌试剂盒的检测效果。结果显示:6种试剂盒的一致性有差异,且整体一致性不高;3种试剂盒的检测结果与FAVN无统计学差异(P0.05),另3种存在差异(P0.05);2种试剂盒的灵敏度及符合率较好,均在90%左右,2种试剂盒较差,在70%左右,剩余2种在80%左右。结果表明:不同品牌的商品化试剂盒检测效果存在差异,且这种差异与品牌来源及试剂盒类型无明显相关性。因此,建议在实际监测工作中,以标准方法为参考,对商品化试剂盒进行一致性、差异性检验和诊断效能评价,将检测效果作为筛选试剂盒的首要考量因素,以确保实验室检测结果客观准确。     

6种非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较

为了比较市场上国产及进口非洲猪瘟病毒(ASFV)ELISA抗体检测试剂盒的产品质量和使用效果,本试验对B、C、D三种进口试剂盒和A、E、F三种国产试剂盒进行敏感性、特异性和重复性比较。结果显示,试剂盒B、D、E、F分析敏感性均为1∶512;试剂盒C分析敏感性为1∶256;试剂盒A分析敏感性为1∶128;诊断敏感性比较结果为试剂盒B>试剂盒D、F>试剂盒E>试剂盒C>试剂盒A;6种试剂盒对7份特异性质控血清的检测结果均为阴性,表明6种试剂盒均具有排除潜在交叉反应的病原抗体的能力;诊断特异性比较结果为试剂盒A、C、D>试剂盒F>试剂盒E>试剂盒B;批内重复性结果显示,6种试剂盒的批内变异系数(CV%)均在15%以内。结果表明,非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测国产试剂盒与进口试剂盒的敏感性、特异性和批内重复性相差无几,国产试剂盒的兴起解决了以往过度依赖昂贵的进口试剂盒的问题,国产化替代进程在不断加速。     

3种猪伪狂犬病gB抗体ELISA检测试剂盒的比较

采用3种猪伪狂犬病gB抗体ELISA检测试剂盒检测121份血清样品,对检测结果进行Kappa一致性检验。结果显示:3种gB抗体检测试剂盒都具有很好的重复性,两两之间检测结果的符合率达80%以上,Kappa值0.6,表明3种检测试剂盒具有较好的重复性和一致性。     

Kappa检验比较2种猪伪狂犬病gE抗体ELISA检测试剂盒

采用2种猪伪狂犬病gE抗体ELISA检测试剂盒分别检测1100份猪血清,应用Kappa检验比较试验数据的一致性。结果显示:2种猪伪狂犬病抗体检测试剂盒都具有很好的重复性,检测定性结果一致性强度为极好,Kappa值=0.929(95%置信区间:0.899~0.959),其符合率达98.2%,说明2种猪伪狂犬病抗体检测试剂盒都适用于PRV gE抗体检测。     

2种蓝舌病ELISA抗体检测试剂盒的比较和分析

为了验证云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心自主研发的蓝舌病病毒C-ELISA抗体检测试剂盒(YN BTV C-ELISA)的可应用性,将YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒与美国IDEXX公司研制的蓝舌病病毒VP7蛋白抗体ELISA检测试剂盒对田间牛羊的1 028份血清样本进行对比检测试验,并使用YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒对15份检出的已知背景血清进行批内和批间可重复性试验。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒相对IDEXX公司蓝舌病病毒ELISA抗体试剂盒的符合率、敏感性、特异性分别是98.44%、98.03%、98.85%,两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0.97。批内试验强阳性、弱阳性变异系数在0.23~1.81之间,阴性血清变异系数在3.94~6.64之间,批间试验强阳性、弱阳性变异系数在0.26~2.35之间,阴性血清变异系数在3.55~8.51之间。结果表明:YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的符合率、敏感性、特异性均较高,具有高度的可靠性、一致性和真实性。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的批内和批间有高度的重复性,在蓝舌病的诊断中具有良好的实用价值。     

比较两种ELISA试剂盒在猪伪狂犬病血清抗体检测中的一致性

比较两种ELISA试剂盒检测结果的一致性,为流行病学调查和临床诊断筛选适合的商品化试剂盒。采用来自两个厂家的野毒抗体(gE)和免疫抗体(gB)ELISA检测试剂盒分别检测362份和392份猪血清,应用Kappa检验比较试验数据的一致性。结果显示:两种猪伪狂犬病抗体(g E)检测试剂盒联合检测出95份抗体阳性和256份阴性,符合率97.24%,结果一致性为极强(Kappa值0.932);两种猪伪狂犬病抗体(gB)检测试剂盒联合检测出351份抗体阳性和9份阴性,符合率91.84%,一致性为弱(Kappa值0.347)。以上结果说明,两种猪伪狂犬病抗体(gE)检测试剂盒都适用于PRV gE抗体检测,而两种猪伪狂犬病抗体(gB)检测试剂金差异较大,需慎重选择。     

四种口蹄疫病毒非结构蛋白抗体ELISA试剂盒检测猪血清样本的质量评估

[目的]对4种口蹄疫病毒非结构蛋白抗体ELISA试剂盒进行质量评估。[方法]用4种商品化的口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒,对非免疫无疫、免疫健康、免疫感染和非免疫人工感染4种类型猪血清样本进行检测,分析试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、分析敏感性、分析特异性及重复性。[结果]4种试剂盒的诊断敏感性在76.8%~94.4%之间,诊断特异性在97.7%~100%之间,分析敏感性和分析特异性较好。4种检测试剂盒与4种猪常感染疾病的阳性血清不发生反应。试剂盒的批间重复性为(10.545±6.845)%~(37.577±28.626)%;批内重复性为(9.037±6.075)%~(37.601±27.027)%。[结论 ]在实际应用中,需根据检测目的不同,选取相应的试剂盒。     

狂犬病中和抗体检测FAVN方法的建立、应用和CMA资质认证

狂犬病荧光抗体病毒中和试验(FAVN)为细胞水平的病毒中和试验,检测的敏感性、特异性和重复性均较好,是世界动物卫生组织(OIE)推荐进行动物狂犬病中和抗体定量检测的标准方法而广泛应用。本单位严格依照《OIE陆生动物检测与免疫手册》狂犬病章节的2.1.13.2.a,建立了动物狂犬病荧光抗体病毒中和试验(FAVN)方法,内部稳定运行后,又依据相关要求,先后3次与长春兽医研究所OIE狂犬病参考实验室进行平行比对,符合率100%,重复性良好。并以此获得广东省质量技术监督局实验室资质认定证书(CMA),FAVN方法正式纳入本单位的CMA资质检测项目,可面向社会出具相应资质检测报告,为狂犬病综合防控,临床检测等提供帮助和服务。