被毛突变小鼠解剖及繁殖学特性观察

对一种新的具有个毛、无毛、稀毛３种表型的被毛突变小鼠的大体解剖学特性研究结果表明,其心肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器的位置、形态及组织学结构无表型间差异,但无毛小鼠被毛和皮肤结构异常,大多数脏器的重量和脏器系数表现出表型差异和性别差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。繁殖学特性研究结果表明,虽然无毛小鼠雌雄生殖系统的器官组成、发情周期与其他２种表型之间无明显差异,但其雄性的初情期明显滞后（约２周左右）     

被毛突变无毛小鼠皮肤及毛结构观察

对国内首次发现并培育成群的ＢＡＬＢ／ｃ突变小鼠的３种表型（无毛、全毛、中间态）的皮肤组织及毛结构进行了观察。结果表明，无毛小鼠仅具有非常短（１～２ｍｍ）、细且弯曲的绒毛，其毛于中心为空泡状，缺乏髓质。无毛小鼠表皮、真皮、皮下组织结构基本与全毛、中间态小鼠相同，但其毛生长周期不健全；毛球位置浅表，数目少，排列不规则；皮脂腺异常增生。推测其被毛结构异常是由毛自身结构异常所致。该小鼠外观似裸鼠，能在普通条件下生长繁殖，可望成为某些皮肤病等研究的动物模型。     

AMMS／13近交系小鼠的培养及其生物学特性

ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符全中近交系标准，其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７     

豫医无毛小鼠遗传特性

通过时遗传规律、G带核型、13个生化标记位点及毛色基因等的测定，观察了豫医无毛小鼠的遗传特性。结果：该突变小鼠遗传性状符合孟德尔定律，且无性别差异；G显带核型分析发现，大带带型与正常昆明小鼠基本相同；生化标记位点纯合；毛色基因型为AABBccDD。结论：该突变无毛小钉是常染色体上单一隐性基因突变所致，毛色基因纯合，遗传纯度达近交系的要求。     

近交系小鼠RAPD标记的观察

采用随机扩增多态性DNA技术(RAPD),分析BALB/c、C57BL/6、DBA/2、C3H/He等4个近交系小鼠的基因多态性,探讨用RAPD作为遗传标记,对近交系小鼠进行遗传检测。结果表明,4种小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记,证明RAPD可作为近交系小鼠的分子标记,在DNA水平区别4种近交系小鼠。     

疾病模型近交系小鼠的繁殖保种方法及措施

文章旨在通过总结疾病模型的近交系小鼠遗传特性以及繁育特征,在饲养繁殖过程中不断调整、改善繁殖策略,以此实现疾病模型近交系小鼠品系的稳定遗传和可持续繁殖。结果显示,对疾病模型的近交系小鼠使用近交系常规繁育保种方法进行保种,并通过增加孕鼠营养、孕期特殊关照、放置丰容玩具、饲喂不同营养物质的饲料、调整配种周龄、替换繁殖种鼠等措施,可有效提升小鼠离乳存活率、增加经产胎次、提升母鼠受孕率,从而提升小鼠品系的整体繁殖性能,使小鼠稳定繁殖传代。     

用寡核苷酸探针对近交系小鼠DNA指纹图谱的分析

应用DNA指纹技术，用非放射性标记的寡核苷酸探针(GGAT)。对3个清洁级近交小鼠品系C57、DBA／2、BALB／c进行检测，分析其DNA指纹图谱。结果显示，不同品系近交系小鼠的DNA指纹图谱有明显差异，而品系内小鼠之间的DNA指纹图谱基本一致。证明DNA指纹技术能够较好地检测出近交系小鼠的基因纯合性，反映其遗传质量，可以应用于对近交系小鼠的遗传质量监测。     

利用RAPD标记分析近交系小鼠的遗传多态性

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）标记，分析了BALB／c、57BL／6、DBA／2、C3H／He近交系小鼠的遗传多态性。结果表明，上述小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记；RAPD可作为近交系小鼠的分子标记， 在DNA水平区别4种近交系小鼠。     

AMMS／13近交系小鼠的培育及其生物学特性

ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符合近交系标准。其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７％。血清ＩｇＧ含量随日龄而增加，相同条件下，雌性比雄性高。该系小鼠可作为莱姆螺旋体病的模型动物。     

无毛同类系小鼠皮肤形态及扫描电镜观察

对3种无毛同类系小鼠的皮肤形态及超微结构进行了观察。结果发现，3种无毛同类系小鼠约在12日龄开始从眶周脱毛，3～4周龄后除触须外全部脱净，并终生保持无毛状态；1月龄时，无毛小鼠内脏可视，随年龄的增长，皮肤逐渐变松、变厚，并形成特别的皱纹和褶痕，似犀牛状，指甲过度生长，呈螺旋状弯曲；BALB／c无毛小鼠无色素沉着，表型类似于豫医无毛小鼠，DBA／2、C57BL／6无毛同类系小鼠皮肤有黑色素沉着，嘴角、眶周、耳和尾部颜色较重。随年龄增长，皮肤及尾部表面出现一些类似人粉刺样的丘疹，数量逐渐增多，触须也随着年龄增长变得异常而稀疏。电镜扫描观察，脱毛前毛囊上部的毛管先变大，然后再脱毛。无毛同类系小鼠表面有较厚的一层鳞片状角化物，毛囊腔宽大，部分毛囊内含有一些能脱落到表面的角化样碎片。35日龄无毛同类系小鼠可见明显的包囊结构，4月龄包囊增多、变大。     

利用二代测序技术进行近交系小鼠品系验证

为了对生产群中的无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级近交系小鼠进行遗传质量检测,以确认其品系正确,未发生突变。选取2个品系(Balb/cByJ和C57BL/6J)雌雄各半,共16只小鼠,通过多重靶向多聚酶链反应(PCR),扩增包含112个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的DNA片段,对其进行二代测序(next-generation sequencing,NGS),获得它们在这些SNP位点的基因型。经二代测序后,得到有效读取数为6118873,每个位点的平均读取数为3631,97个SNP位点在所有的小鼠中都被分型,另外15个SNP位点,至少在1个样本中没有被检出。其中,6个SNP只在一个品系的小鼠中有结果,还有2个SNP只在一种性别的小鼠中有结果。在所有样本中得到的全部SNP分型结果都符合其品系的基因型,且均为纯合子。送检的小鼠遗传特征稳定,利用二代测序技术进行SNP分型,能对近交系小鼠的遗传特性进行快速准确的评估。     

Hematology and clinical chemistry values of normal and euthymic hairless adult male Dunkin-Hartley guinea pigs (Cavia porcellus)

Hematology and serum chemistry measurements were performed on blood specimens from 12 male Dunkin-Hartley hairless guinea pigs Crl:IAF(HA)BR and 10 haired Dunkin-Hartley male guinea pigs Crl:(HA)BR. Significantly higher activities of alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, amylase, and creatine kinase were observed in the hairless guinea pigs as compared to the haired strain. Alkaline phosphatase activity was found to be lower in the hairless guinea pig. The hairless guinea pigs were found to have serum urea concentrations approximately 46% higher than the normal guinea pig strain. The erythrocytic mean cell volume of the hairless strain was found to be smaller, with a greater hemoglobin content. Hairless guinea pigs were found to have approximately 40% fewer leukocytes with a reversed lymphocyte:neutrophil ratio compared to the haired guinea pigs which had much higher lymphocyte counts.     

Construction and Partial Biological Characteristics Analysis of Listeriolysin S llsB Gene Deletion Strain

In order to analyze the effect of listeriolysin S (LLS) llsB gene deletion on the biological characteristics of Listeria monocytogenes (LM),this study used homologous recombination to construct the llsB gene deletion strain LM90-ΔllsB,and the biological characteristics of growth characteristics,median lethal dose (LD₅₀) and organ-borne bacteria were studied in healthy Kunming male mice at 8 weeks old and weighing 40 g±5 g.The llsB gene deletion strain was successfully constructed,and the deletion strain had good genetic stability through continuous passage to 20 generations in vitro.Based on its growth curve examination,we found that the growth rate of the mutant strain was slightly higher than that of the parent strain.The results of mice infection test showed that the LD₅₀ of the parent strain and the deletion strain were 10^6.17 and 10^6.50 CFU,respectively.Compared with the parent strain,the amount of bacteria load of the deletion strain in the liver and spleen of the mice was extremely significantly decreased (P<0.01),the results showed that the infection ability of the mutant strain on mice was obviously weakened.No Listeria monocytogenes was detected in the brain.The results suggested that llsB gene might have direct or indirect regulatory effect on some biological characteristics of LM90,and it would provide a theoretical basis for further understanding of the pathogenic mechanism of LLS,prevention and control of listeriosis.     

猪链球菌2型感染昆明小鼠模型的建立及评价

为建立稳定的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)人工发病模型,本试验以天津某发病猪场分离的SS2 Y15293株为研究对象,经腹腔注射感染昆明小鼠,测定其LD₅₀,确定造模感染剂量,通过观察感染后小鼠的临床症状和病理变化,测定试验期间各组小鼠体重和采食量的变化及细菌回归等试验对模型进行评估。结果显示,SS2 Y15293株致昆明小鼠的LD₅₀为6.7×10~7 CFU/mL。以1个LD₅₀的剂量攻毒,与对照组相比,试验小鼠主要发病表现为攻菌后24 h出现精神沉郁、被毛逆立、眼睛有分泌物,72～96 h出现头颈歪斜、翻滚、震颤等神经症状,死亡高峰在48～72 h。3次重复试验中,试验组小鼠的发病率均为100%,死亡率为50%～70%,神经症状小鼠出现比率20%～30%。与对照组相比,试验组小鼠采食量和体重显著下降(P<0.05),临床症状分值显著升高(P<0.05)。组织病理检查发现,试验组小鼠心脏、肺脏组织均有不同程度出血、炎性细胞浸润;脑膜炎,脑室出血,充满炎性细胞。细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且形态、染色和分子生物学特性与攻毒菌一致。以上结果证实,SS2 Y15293株能感染昆明小鼠并致其发病,感染动物发病规律性强,重复性好,临床症状典型,说明SS2 Y15293株感染昆明小鼠可作为SS2的候选人工感染模型。     

Changes in the level of plasma cortisol, progesterone and total testosterone in developing hairless dogs.

Changes in the levels of plasma cortisol, progesterone and total testosterone were examined in developing hairless and haired dogs. Cortisol levels in the hairless dogs seemed to be higher than those in haired dogs within the age of 4-5 weeks. No apparent changes were seen in the level of plasma progesterone between the groups of hairless females and haired females. Total testosterone levels in hairless males showed to be significantly lower than those in haired males at the age of 13-21 weeks.     

小鼠Wip1基因的表达及其对受精能力的影响

本研究旨在探讨Wip1基因的表达及其对精子受精能力的影响,为阐明Wip1基因对雄性繁殖的影响提供新的着眼点。选取相同饲养环境、同一遗传背景的8周龄左右的野生型雄鼠,利用实时荧光定量PCR技术检测Wip1基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑组织及雄性生殖器官中的表达情况,利用免疫荧光技术检测Wip1蛋白在睾丸组织及精子细胞中的分布情况。以Wip1敲除型雄鼠为试验组,野生型雄鼠为对照组,利用ELISA试剂盒检测两组小鼠血清中睾酮水平;通过体外受精试验比较两组的2-细胞率及囊胚率。结果显示,Wip1基因mRNA在野生型雄鼠各组织中广泛表达,且在雄性生殖器官中表达量较高,其中睾丸中表达量最高,附睾体、附睾头、附睾尾次之;Wip1蛋白主要定位于睾丸组织中的长形精子细胞及附睾成熟精子细胞的头部。ELISA检测结果发现,与野生型雄鼠相比,Wip1敲除型雄鼠血清内睾酮含量极显著下降（P<0.01）。体外受精结果表明,Wip1敲除后2-细胞率及囊胚率均极显著下降（P<0.01）。结果表明,Wip1基因敲除能够引起雄性小鼠受精能力降低,这可能与Wip1基因在精子发生过程中发挥作用相关。     

1株副猪嗜血杆菌血清4型的分离鉴定及耐药性分析

【目的】 阐明引起河南漯河某规模化猪场仔猪呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性。【方法】 无菌采集发病仔猪的口鼻拭子及病死猪的胸腔积液及肺脏、肝脏、脾脏等组织器官,进行病原的PCR检测,并通过细菌分离培养、形态学观察、卫星试验、16S rDNA基因PCR扩增、系统进化树构建、多重PCR鉴定分离菌的血清型、致病性试验和药敏试验等对分离菌株进行生物学特性分析。【结果】 在含有V因子的BHI固体平板上生长出圆形、表面光滑湿润、无色透明的微小菌落,在不含V因子的培养基上不生长;分离菌株经革兰染色,镜下可见革兰阴性菌,多呈单个存在的球杆、长杆状;在金黄色葡萄球菌的培养物周围形成典型的"卫星菌落";16S rDNA基因序列分析表明,分离菌株与副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,Hps）处于同一分支,相似性>97%,亚型鉴定结果判定分离菌为Hps血清4型;将分离的Hps腹腔注射感染小鼠,可导致感染小鼠多个器官不同程度出血,以肺脏最为明显;高剂量感染可导致小鼠死亡。药敏试验发现,该菌株对四环素、环丙沙星、复方新诺明具有较强抗性,合理用药后,取得了良好的治疗效果。【结论】 试验成功分离出1株血清4型Hps,可致感染小鼠多个器官不同程度出血,对四环素、环丙沙星、复方新诺明耐药,研究结果为副猪嗜血杆菌病的临床诊断和治疗提供了理论依据。     

清宫散对小白鼠离体子宫收缩力的影响

子宫内膜炎是一种常见的奶牛生殖系统疾病,是造成奶牛不孕的主要原因之一。它严重影响奶牛的繁殖力,给奶牛业造成巨大的经济损失。清宫散为纯中药复方制剂,临床上用于治疗和预防奶牛子宫内膜炎,效果显著,为探讨其疗效机理,利用小鼠进行离体子宫收缩实验。结果显示：清宫散对小鼠离体子宫的收缩有明显的促进作用,能促使其收缩振幅加大,频率加快,子宫收缩力加强,与加药前相比较差异极显著（P〈0．01）,与益母草组相比,差异显著（P〈0．05）。