母乳乳清蛋白抗氧化活性肽的研究

母乳是婴幼儿的最佳食物来源,而乳清蛋白是营养和活性物质的基础,其中生物活性肽对人体健康具有重要促进作用.为研究母乳乳清蛋白抗氧化活性肽,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶4种酶制备抗氧化活性多肽,通过单因素试验和响应面分析对乳清蛋白酶解工艺进行优化.结果表明:中性蛋白酶最适于母乳乳清蛋白抗氧化肽的制备,此时的最佳工艺参数为pH 7.21、反应温度50.03℃、酶与底物比(E/S)4 486.68 U/g、酶解时间5h;影响1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率的因素大小为:酶与底物比＞温度＞pH值.利用大孔树脂、葡聚糖凝胶过滤色谱G-25、G-15分析得出组分峰Ⅰ抗氧化活性最强,其DPPH自由基清除率达到了60.31％.     

微生物发酵法脱除柞蚕蛹蛋白臭味和制备抗氧化肽的工艺研究

以感官评定值为脱臭指标,以DPPH自由基清除率为抗氧化肽指标,采用混合菌种发酵法,菌种组合(青春双歧杆菌∶嗜热链球菌)比例为1∶3,确定脱除柞蚕蛹蛋白臭味和制备抗氧化肽的工艺。并在单因素基础上,采用Design-Expert8.0软件,利用Box-Behnken设计实验,用响应面分析法优化各因素及其交互作用确定最佳工艺条件。结果表明:发酵温度为42℃、发酵时间为23 h、菌种接种量为4%、pH为6.8条件下,感官评定值为4.65,DPPH自由基清除率为93.78%。     

发酵牦牛乳蛋白肽的分离纯化及抗氧化活性研究

以牦牛乳为原料,从6株乳酸菌中筛选出对发酵牦牛乳具有较高水解度及肽得率的罗伊氏乳杆菌和约氏乳杆菌,并与保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和发酵乳杆菌按1:1:1:1:1复配发酵剂制备牦牛乳蛋白肽。通过离心提取发酵牦牛乳蛋白肽,经超滤和Sephadex-25柱层分离纯化蛋白肽,并测定各分离组分的体外抗氧化活性。结果表明,发酵牦牛乳蛋白肽的Sephadex-25分离纯化的最优工艺条件为:洗脱液浓度0.2mol/L,上样质量浓度50mg/mL,洗脱流速2mL/min,在此条件下一共分离出峰1、峰2两个组分。随着蛋白肽各分离组分浓度的增加,其抗氧化活性显著增强,分离组分峰1、峰2对ABTS自由基清除率的IC_(50)为1.778mg/mL、3.844mg/mL,对DPPH自由基清除率的IC_(50)为1.801mg/mL、3.286mg/mL,还原能力IC_(50)为0.571mg/mL、1.365mg/mL,对羟自由基清除率的IC_(50)为0.913mg/mL、2.466mg/mL。     

菌株及发酵条件对山药发酵液抗氧化活性的影响

试验旨在通过特定菌株发酵进一步提高山药的抗氧化活性。试验以超氧阴离子自由基(·O₂^-)清除率、羟自由基(·OH)清除率和二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)清除率为抗氧化活性指标，通过单因素和正交试验，从6株饲用益生菌中筛选出山药发酵菌株，并对山药液态发酵工艺及菌株发酵液功能性成分进行研究与分析。结果显示，试验确定山药发酵菌株为枯草芽孢杆菌，最优发酵工艺为山药麸皮总添加量为4 g、山药与麸皮比例为4∶6、氯化钠为6 g/L；发酵72 h，发酵液对·O₂^-自由基清除效果最佳，为69.91%，比优化前提高了1.2倍。山药与麸皮比例为5∶5，总山药麸皮添加量为4.5 g，硫酸锰添加量0.09%，接种量2.5%，发酵72 h，发酵液对·OH自由基清除效果最佳，为84.82%，比优化前提高了1.43倍。硫酸锰添加量0.12%，硫酸镁添加量0.75 g/L，接种量10%，发酵84 h，发酵液对DPPH自由基清除效果最佳，为72.21%，比优化前提高了2.1倍。发酵液经GC-MS检测新增了3-羟基丁酮、2-甲基丙酸...     

家蚕丝素蛋白抗氧化肽的制备及其稳定性研究

利用碱性蛋白酶水解家蚕丝素蛋白制备抗氧化肽,考察水解pH、水解时间、加酶量、底物浓度、水解温度5个因素对水解产物DPPH自由基清除率的影响,在此基础上采用响应面试验优化水解工艺条件,并调查家蚕丝素蛋白抗氧化肽对热、酸、碱和体外肠道消化的稳定性,测定不同分子质量范围的家蚕丝素蛋白水解产物组分的抗氧化活性.结果 表明,碱性蛋白酶水解制备家蚕丝素蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为水解pH 8.69、水解时间60 min、加酶量3035 U/g、底物(丝素蛋白)质量浓度26.80 g/L、水解温度53.89℃,在此条件下制备获得的家蚕丝素蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为55.16％.家蚕丝素蛋白抗氧化肽具有良好的热稳定性;在中性环境中抗氧化活性很稳定,但在强酸和强碱环境中抗氧化活性明显降低;经体外模拟胃肠道消化后,对DPPH自由基的清除率比未消化处理对照组提高了9.43百分点.分子质量小于5 kD组分是家蚕丝素蛋白抗氧化肽的主要活性组分.研究结果为家蚕丝素蛋白功能产品的开发提供了试验依据.     

副干酪乳杆菌发酵制备牛乳抗氧化肽饮料工艺优化

将副干酪乳杆菌用于牛乳发酵,制备含抗氧化肽的新型乳酸菌功能性饮料。通过测定发酵终产品的活菌数、酸度、多肽含量、多肽转化率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率,探讨最优的发酵培养方式和培养基配方。结果表明:确定出的最佳培养方式为摇床培养,摇床转速180 r/min、发酵时间24 h、脱脂乳粉添加量12 g、葡萄糖添加量6 g、接种量5％,在此条件下,产品的多肽产量最高达0.98 mg/mL,活菌数最高达8.5×108 CFU/mL,DPPH自由基清除率最高可达62.38％。     

益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的研究

试验旨在获得高活性的金针菇抗氧化肽，优化益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的条件。试验以金针菇为发酵基质，以抗氧肽对2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除率为指标，对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉3种益生菌进行了筛选，使用pH值沉淀法分离抗氧化肽的最适pH值，采用单因素和响应面试验对发酵条件（液料比、发酵时间、发酵温度、金针菇用量）进行考察。结果显示，枯草芽孢杆菌适合发酵金针菇制备抗氧化肽；沉淀抗氧肽的最适pH值为6；最佳发酵条件为液料比4.50 mL/g、发酵时间30 h、发酵温度35℃、金针菇用量40.00 g，此条件下金针菇抗氧化肽对ABTS自由基清除率预测值为95.60%，实测值为96.75%，实测值与预测值相差很小，表明此响应面法优化的工艺可靠，截留分子量小于3 kD的抗氧肽活性最强。研究表明，通过此法制备的金针菇抗氧肽具有很强的抗氧化性，为金针菇产品的开发利用提供了参考。     

凉茶渣的黑曲霉发酵工艺和抗氧化活性研究

为促进凉茶渣在畜牧业中的资源化利用,本研究以黑曲霉为菌种固态发酵凉茶渣,首先在单因素试验条件下考察了时间、温度、含水量、浸泡液pH、氮源和碳源对凉茶渣降解率和产物pH的影响;再根据单因素试验结果和规模化生产实际需要,以4%硫酸铵为氮源,2%葡萄糖为碳源,以降解率为考察指标,通过正交试验优化发酵工艺;并通过检测超氧自由基清除率、羟基自由基清除率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率,评价凉茶渣在最优工艺条件下发酵前后抗氧化活性的变化。结果发现,含水量为60%,浸泡液pH为9.0,31℃发酵168 h是凉茶渣的最佳发酵工艺参数。最佳工艺条件下凉茶渣的降解率为25.23%,发酵产物pH为4.53。当凉茶渣发酵前水提液浓度为24 mg/mL时,超氧自由基清除率为43.56%,羟基自由基清除率为47.06%,DPPH自由基清除率为90.71%;当最优条件下发酵产物水提液浓度24 mg/mL时,超氧自由基清除率为30.77%,羟基自由基清除率为95.63%,DPPH自由基清除率为87.36%。本试验结果表明,黑曲霉是适宜的凉茶渣发酵菌种,且凉茶渣经过黑曲霉发酵后具有良好的抗氧化活性。     

干酪乳杆菌对农家干酪抗氧化性及其存活.能力的研究

本研究通过向农家干酪加入干酪乳杆菌,研究农家干酪的抗氧化活性及干酪乳杆菌的存活能力。通过对DPPH自由基、羟自由基清除能力以及对铁还原能力指标的测定,研究干酪乳杆菌及农家干酪的抗氧化活性;并测定了农家干酪储藏期内干酪乳杆菌的存活能力,利用胃肠道模拟试验研究了干酪乳杆菌的存活能力。结果表明:干酪乳杆菌对H_2O_2的耐受水平为1mmol/L,对DPPH自由基的清除能力高于鼠李糖乳杆菌,且无细胞提取液的抗氧化性最强。在农家干酪的抗氧化性研究中,结果显示在第30天时,DPPH自由基的清除能力达到最高值,为316μmol/LTrolox,还原能力为0.647;羟自由基的清除率在第25天时最高,达到54.38%,在第30天时有所下降。综上所述,添加干酪乳杆菌的农家干酪在储藏期内抗氧化性显著增强。对农家干酪的微生物活性进行检测,显示此干酪乳杆菌菌株在添加到农家干酪之后仍然生长,两试验组的活菌数基本在10log_(10)cfu/g以上。模拟胃肠道条件选择第20天的农家干酪进行益生菌的存活能力研究,发现活菌数降低了5log_(10)cfu/g,最终为7log_(10)cfu/g,可起到益生作用。结果表明,加入干酪乳杆菌可显著提高农家干酪抗氧化性,在农家干酪中可以起到益生作用。     

响应面法优化液态发酵产多肽条件及其抗氧化性能初探

为了提高B-5菌株发酵产黑豆肽的能力,采用单因素法和响应面法对B-5菌株的发酵培养条件进行了优化,并采用DPPH法对优化后发酵产物的抗氧化性能进行了测定。从单因素试验的相关结果得出蔗糖含量、黑豆蛋白含量和接种量为影响B-5菌株发酵产多肽的主要影响因素。根据Box-Benhnken设计原理,建立以肽转化率为响应值的回归方程模型,利用Design-Expert得到最优发酵条件。结果表明,当蔗糖含量为2.1%,黑豆蛋白含量为11.4%,接种量为7.2%时,该菌株发酵的肽转化率为(67.921±0.81)%,与优化前相比提高了72.61%,且优化后发酵产物DPPH的清除率为79.12%,与优化前相比,提高了51.25%。本试验优化了发酵条件,提高了发酵产物的抗氧化性能,为高效利用黑豆蛋白提供了参考。     

糖基化反应对乳清蛋白-岩藻多糖共聚物抗氧化性能的影响

利用乳清蛋白和岩藻多糖为原料,通过干法糖基化手段研究乳清蛋白和岩藻多糖糖基化反应过程中的褐变程度变化,并对不同反应时间段糖基化产物的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率及还原力进行测定。结果表明:糖基化反应能够显著增加体系的褐变程度,同时与单独乳清蛋白或岩藻多糖相比,糖基化反应能显著增加二者混合物的DPPH自由基清除率和还原力;乳清蛋白和岩藻多糖质量比为1∶3、反应时间为80 h时,其DPPH自由基清除率达到最高(74.28%),与0 h相比提高了30%,但是仍低于0.01%VC对照组。     

正交试验优化糯玉米酸奶发酵工艺

目的:以脱脂奶粉和干糯玉米为主要原料,研制糯玉米酸奶.方法:对玉米进行脱苦处理,然后用嗜热链球菌TA40和瑞士乳杆菌LH100质量比为1∶1复配菌种进行发酵制备富含肽的糯玉米酸奶.结果:确立了最佳的干糯玉米预处理方法,并确立了富含肽的最佳发酵条件为糯玉米:脱脂奶粉:水1:0.8∶13(m/m),按4％(m/m)量加入乳清蛋白,接种量4 g/L,在37℃条件下发酵8h,经检测,发酵饮料中含肽4.6658mg/mL;对所制备的发酵饮料进行感官评定和理化性质分析表明,该发酵制品pH值为3.94,酸度为132.7°T,黏度值为5.276 Pa·s.无明显乳清析出,兼具糯玉米和酸奶香味.结论:制备富含玉米肽、乳肽等生物活性肽的发酵饮料,实现植物蛋白和动物蛋白的互补,产品具有较高的营养价值,同时提高了农作物附加值.     

发酵和酶解结合对乳清蛋白抗原性影响的研究

以瑞士乳杆菌为发酵菌种,胃蛋白酶和碱性蛋白酶为水解用酶,研究了乳酸菌发酵和蛋白酶酶解结合对乳清中β-乳球蛋白（β-LG）和α-乳白蛋白（α-LA）抗原性的影响。试验结果表明：与直接酶解相比,乳清先经瑞士乳杆菌发酵会促进胃蛋白酶对β-LG和α-LA的降解,提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,减少大肽的生成,但β-LG的抗原性仅比直接酶解降低了5%,而α-LA的抗原性反而升高了6%～7%。对于碱性蛋白酶,发酵并没有提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,对β-LG和α-LA抗原性也没有显著影响。     

瑞士乳杆菌发酵对牛乳中乳清蛋白抗原性影响的研究

以瑞士乳杆菌为发酵菌种,研究了脱脂乳发酵过程中乳清蛋白(β-乳球蛋白(β-LG)和α-乳白蛋白(α-LA))抗原性的变化规律及变化机制。结果表明,瑞士乳杆菌发酵能够显著降低脱脂乳中β-LG和α-LA的抗原性。发酵3~12h期间,β-LG和α-LA的抗原性迅速下降,继续发酵至48h,蛋白抗原性又出现缓慢升高。瑞士乳杆菌对乳清蛋白的水解作用导致其抗原性一定程度地降低;受发酵过程中生成的乳酸影响,β-LG和α-LA的抗原性随pH的降低呈现先逐渐下降后缓慢升高的变化规律。因此,瑞士乳杆菌的蛋白水解酶和发酵过程中生成的乳酸共同影响了发酵乳中β-LG和α-LA抗原性的变化。     

响应面法优化玉米黄粉抗氧化肽的制备工艺

以玉米黄粉醇溶蛋白为原料,选用碱性蛋白酶酶解制备玉米黄粉抗氧化肽,以加酶量(E/S)、p H、温度和时间作为研究对象,以酶解液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上。采用Design-Expert软件,通过Box-Behnken进行3因素3水平分析,得到的最佳酶解条件是加酶量(E/S)为8.00%,p H为9.30,温度为52℃,酶解时间为4 h,在这个条件下,DPPH自由基清除率可达到83.06%。     

小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白的体外抗氧化活性研究

试验旨在研究小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白的分子质量分布和体外抗氧化活性。试验采用单因素完全随机设计,以维生素C为对照,分别测定小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白在0.625、1.25、2.5、5、10 mg/mL浓度下对DPPH自由基、羟自由基和2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基的清除率,并通过测定T-AOC吸光度值计算总还原力。结果表明：使用高效液相色谱测定小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白重均分子质量分别为513 u和551 u,二者分子质量小于1 000 u的比例分别为90.22%和86.93%。在一定浓度范围内,随小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白浓度的升高,其体外抗氧化性能线性增加（P<0.05）,且呈正相关关系。在10 mg/mL浓度时,小麦胚芽肽对DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基清除率和总还原力分别为90.39%、70.66%、96.24%和2.23,大豆酶解蛋白对DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基清除率和总还原力分别达到65.55%、68.21%、75.14%和0.51。综上,在本试验条件下,不同浓度小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白均具有一定的抗氧化能力...     

乳酸菌发酵驼乳工艺优化及抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的研究

[目的]以实验室前期从驼乳中分离得到的乳明串珠菌、副干酪乳杆菌为对象,并通过体外实验对发酵驼乳抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性以及抗氧化能力进行测定。[方法]以α-淀粉酶抑制率和α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验优化发酵驼乳的参数条件。测定在不同储藏时间下试验组乳明串珠菌、副干酪乳杆菌发酵驼乳、对照组乳明串珠菌、副干酪乳杆菌发酵牛乳和嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌发酵驼乳pH值、酸度、活菌数、α-淀粉酶抑制率、α-葡萄糖苷酶抑制率、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率的变化。[结果]驼乳发酵的最佳工艺条件为乳明串珠菌∶副干酪乳杆菌比例2∶3、接种量2%、发酵温度39 ℃,发酵时间24 h,此条件下测得对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别达到87.20%和20.85%,与未优化前相比,α-淀粉酶的抑制率提高14.10%,α-葡萄糖苷酶抑制率提高4.4%。在4 ℃储藏期间发酵驼乳α-淀粉酶抑制率在第6d时最高为90.39%,对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高为36.32%,抑制率显著高于对照组。各组对羟自由基的清除率达到70%以上,最高为94.91%,超氧阴离子自由基清除率最高达到78.10%,整个测定过程中试验组的抗氧化活性均显著高于对照组。[结论]经乳酸菌发酵驼乳抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性提高,在储藏期间抗氧化活性显著高于对照组（P<0.05）。     

复合酶水解法提取大豆抗氧化肽的工艺优化

为提高脱脂豆粕的利用率,试验选用碱性蛋白酶与风味蛋白酶的组合从脱脂豆粕中提取大豆抗氧化肽,以加酶量(E/S)、温度、p H及时间为自变量,以酶解液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上,采用Design-Expert软件,建立DPPH自由基清除率与各因素间的二次多项式模型,确定提取大豆抗氧化肽的最佳提取条件为加酶量(E/S)5%、温度58℃、p H 10及酶解时间3 h,在此条件下,大豆抗氧化肽对DPPH自由基的清除率达到89.94%,与预测值90.69%的相对误差小。回归方程的预测值与试验值差异不显著(P0.05),说明回归模型拟合情况较好。     

复合酶水解乳清蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

以乳清蛋白为原料,采用酶法水解,分析酶解温度、pH值、底物浓度和酶底比对复合酶水解乳清蛋白的影响,通过单因素试验确定各因素的最适工艺参数,再通过正交试验及验证实验进一步确定乳清蛋白的最佳酶解条件。结果表明:根据单因素试验结果,并综合考虑水解度、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和铁离子螯合能力4项指标的正交试验结果,最终确定乳清蛋白的最佳酶解条件为酶解温度60℃、pH 8.5、底物质量浓度2.5 g/100 mL、酶底比3.5％。以上述最佳参数为酶解条件进行验证实验的结果表明,验证实验结果与正交试验结果相符,进一步验证了本研究确定的酶解条件为最佳条件。     

一株鸡源植物乳杆菌益生性能的评价

为评价一株来源于鸡肠道内容物的植物乳杆菌DK106的益生性能，试验测定了该菌株的生长特点、抗逆性、药物敏感性、抗氧化能力和黏附性等。结果显示，该菌株在14?h进入生长稳定期|能耐受0.3%胆盐浓度|对氟苯尼考、头孢噻肟、头孢曲松和林可霉素敏感|DPPH自由基清除率高达90.79%|该菌株经二甲苯处理30?min后，其表面疏水率高达97.40%|自凝聚率在第5小时可达68.80%|与大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌的第2小时共凝聚率分别达到20.59%、16.37%和55.32%。综上所述，植物乳杆菌DK106具有良好的益生性能，可作为家禽微生物饲料添加剂的菌株来源。 [关键词]鸡|植物乳杆菌|益生性能