西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的比较研究(四)免疫血清试验及总结

体内试验锥虫等原生动物可以引起宿主产生免疫性,这在本研究交叉免疫试验内已经表明。慢性锥虫病动物,或痊愈后甚止治愈后的锥虫病动物的血清如果和同种锥虫同时注射另一动物,那血清就有“保护作用”保护后者使其在不同程度上抵抗锥虫的感染;或者完全不感染,或者感染后,(?)维持生命较久。Rouget(1896)最早发现被致病的马(?)疫锥虫 Tryp-     

西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的比较研究总结

讨论和摘要(一)显微镜下观察并量度的结果;西北区骆驼锥虫和中南马锥虫形态上大致相同。它们和国外报告的 Trypanosoma evansi(Steel,1885)及 Trypanosoma ninae Kohl-jakimovi yakimoff,1918形态上没有显著差别。西北区骆驼锥虫接种犬体120代后的锥虫,发现形态上和原来的相比,变动不显著。(二)经过人工感染证明西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫都能感染骆驼。马、驴、牛、     

伊氏锥虫不同株的表面变异糖蛋白分离、纯化及特性比较

锥虫的抗原变异非常频繁,阻碍了免疫学防治技术的建立,国内外虽然对此有较多研究报告,但对中国不同地理、宿主株伊氏锥虫表面变异糖蛋白(VSG)分离和特性比较尚无报道,而我国北方新疆骆驼株伊氏锥虫和南方牛、马伊氏锥虫存在来源、地理、宿主和生化特性的差异,因此我们对这两个虫株的 VSG 进行了分离、纯化和特性比较研究,所用虫株来源于新疆骆驼体内、安徽水牛体内.分离后克隆为单一虫株,经小白鼠、大白鼠体内繁殖,鼠血经过 DEAE-52纤维素层析获得纯净锥虫,再经超声裂解,经过两次超速     

Samorin抗伊氏锥虫的效果观察

沙莫灵(Samorin)是英国生产的一种抗锥虫药,对刚果锥虫、活跃锥虫、布氏锥虫均有良好的抗虫活性,至于对伊氏锥虫是否具有抗虫活性,国内未见报道。本试验仅在观察沙莫灵对小鼠伊氏锥虫病的效果,为临床治疗试验提供依据。现将试验结果报告如下:一、沙莫灵 由香港利农有限公司提供。化学名为8(间——脒苯重氮氨基)——3——氨基——5——乙基——6——氯化苯菲啶盐酸盐,简称“脒氯苯菲啶”,其主要成分     

伊氏锥虫在兔和豚鼠体内抗原变异研究

为了解伊氏锥虫在动物体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株克隆虫体 ShTat1分别感染兔和豚鼠。在兔体30d 中,每3d 分离兔血中锥虫并克隆,获得10个克隆锥虫,经间接免疫荧光试验和生物素抗生物素酶标试验鉴定,为9个抗原性互不相同的抗原变异体 ShTat1.1～1.9.同中方法在4只兔体内30d 获得同样9个变异体,并且出现顺序一致,该克隆在豚鼠体内15d 所获得的5个变体,经鉴定均在兔体现出过,     

秉志锥虫的重描述及其系统发育分析

为丰富鱼类锥虫的物种资源,了解养殖鱼类锥虫的感染情况,通过调查湖北地区鱼类锥虫的感染情况,在武汉市江夏区牛山湖渔场养殖的鲫血液中分离到一种锥虫,并采用形态学和分子生物学数据对该锥虫进行描述。通过形态特征和衍征的比较与分析,发现该锥虫与秉志锥虫(Trypanosoma pingi)形态一致,故鉴定为秉志锥虫。扩增并获得秉志锥虫的18SrDNA分子序列,通过序列比对分析,发现其与黄颡锥虫(Trypanosoma pseudobagri)18SrDNA序列相似性最高,为94.62%,分子系统发育树分析显示秉志锥虫落于淡水鱼类锥虫支类,与黄颡锥虫(Trypanosoma pseudobagri)形成姊妹群。     

西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的比较研究(一)形态学

1.显微镜下观察并量度西北区骆驼锥虫100个后发现和外国的 Tryonosoma evansi 及T.ninae kohI—jekimovi 形态上没有显著差别。2.显微镜下量度西北区骆驼锥虫1000个的长度发现双 Bruce(1911)所量的 T.evansi 82个虫体的结果,体长较短的略多一些,但总的说来差异不大。3.显微镜下观察并量度100个西北区骆驼锥虫接种大体129代后的锥虫,发现形态上和原来的相比变动不显著。4.显微镜下观察并量度中南区马锥虫100个发现和西北区骆驼锥虫形态上大致相同。5.关于西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的学名鉴定,待今后结合其它方面的病原研究结束后再行决定。     

用间接血凝试验检查乳牛和水牛的泰氏锥虫感染

以水牛泰氏锥虫细胞培养的虫体裂解抗原,致敏双醛化绵羊红细胞,用以检查乳牛和水牛的泰氏锥虫感染,不仅特异性强,敏感性也很高,且与伊氏锥虫无交叉反应,是一种简易快速而又可靠的实验室诊断方法。本法较外周血液虫体培养检出率高32—36％。用本法随机检查乳牛1168头,阳性581头,阳性率49.74％;水牛395头,阳性168头,阳性率42.5％。在伊氏锥虫疫区的水牛,用二种间接血凝方法检测,部分牛表现伊氏锥虫和泰氏锥虫均为阳性,表明水牛可同时感染这二种锥虫。本文还讨论了泰氏锥虫感染同乳牛白血病、盱眙水牛病可能存在某种联系,以及泰氏锥虫有可能致病等问题。     

西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的比较研究(三)交叉免疫试验

以黄牛和猪各4头进行四次交叉免疫试验以比较西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的结果为:有两次试验说明有区别,一次试验说明略有区别,另一次试验说明无区别。关于西北区骆驼锥虫和中南区马锥虫的种别鉴定问题,在全部病原研究工作结束后再加以决定。     

伊氏锥虫新疆株在动物体内抗原变异程序的观察

伊氏锥虫在我国地理分布广泛,寄生于马、驴、骡、黄牛、水牛、骆驼和犬等家畜体内,感染后发病急,死亡快,危害很大,多年来,许多研究人员致力于研制防治伊氏锥虫病的疫苗,由于伊氏锥虫的抗原变异频繁,所以未能成功.我们曾对伊氏锥虫安徽株在动物体内抗原变异程序作了观察,发现有一定规律.因此我们对伊氏锥虫新疆株在兔中的抗原变异程序进行观察,用昆明系小白鼠95只,新西兰兔4只进行试验,先用来源于新疆骆驼株体内经过单虫克隆的虫株,接种兔2只,接种量为10~6条/只,每3d 采兔血一次分离     

伊氏锥虫单克隆抗体制备及性质研究

本研究运用杂交瘤技术成功地分离了B_8、I_2两株分泌抗伊氏锥虫单克隆抗体(McAb)的细胞系。首先用可溶性伊氏锥虫抗原接种BALB/C小鼠,经过一定的免疫程序后,取其脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,经过两次有限稀释法克隆,用ELISA方法选育出B_8、I_2两株产生抗伊氏锥虫McAb的细胞株。用琼脂扩散法与标准羊抗鼠亚类血清反应证明两种McAbs皆隶属于IgG_1亚类。细胞株在连续传代及冻存复苏后其分泌抗体能力稳定;经多种血清学反应证实,这两株McAb与伊氏锥虫可溶性抗原不起凝集反应,只有ELISA反应阳性。pH稳定试验表明,B_8株McAb比I_2株稳定。     

抗人血清的伊氏锥虫选育

初步研究了伊氏锥虫９Ｔ．ｂ．ｅｖａｎｓｉ）对人血清敏感性的变异。以不断递增的人血清处理在免疫抑制鼠体内连续传代的伊氏锥虫，经２０代的压力选择，获得了能耐受０．５ｍＬ正常要血清的抗性变异克隆。该变异克隆在无人血清压力的正常鼠体内经１０次连续传供，又恢复了对人血清的敏感性。结果表明，伊氏锥虫对人血清的敏感性或抗性均不稳定。     

抗锥虫感染非特异性免疫研究

从人血清天然杀伤伊氏锥虫活性作用着手,深入研究在自然选择下人血清和锥虫的相互作用关系,为揭示人体抗锥虫感染非特异性免疫奠定基础。首先,用体内和体外试验检测表明,正常人血清对 T.b.evansi 的体外杀锥虫活性明显受血清浓度,孵育时间和温度影响.被人血清溶解前 T.b.evansi 有一系列形态变化,虫体肿胀、变圆、游离鞭毛明显化、表膜毛边化等.还发现不同个体人血清溶虫活性有显著差异,但与血型无关;同一个体血清溶虫活性稳定不     

山羊感染伊氏锥虫诊断方法的研究

本研究结果表明,山羊感染伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)后,用血液压滴标本法查虫无效:小白鼠接种法在感染的检查上具有一定的价值;而间接血凝试验(IHA),因其检查结果具有早期性、重复性和可靠性,故被认为在疾病的诊断和带虫的普查上是较为理想的方法。笔者根据183头份血样的IHA测定結果,发现山羊感染锥虫6天以后,血凝效价最低为1:10,最高为1:1280;未感染锥虫的山羊血凝效价始终小于或等于1:10。因此可将1:20及其以上的血凝滴度定为感染的阳性标准,1:10为可疑,小于1:10则属阴性。     

水牛伊氏锥虫与血红蛋白尿混合感染防治

水牛伊氏锥虫病是由水牛伊氏锥虫寄生在马、牛、骆驼、犬等家畜的血浆和造血器官内所引起的一种原虫病.水牛血红蛋白尿是以水牛尿液呈棕红色为特征,主要原因可能与无机磷缺乏有关.2003年10月至2004年4月,凤阳、定远等县经常有水牛血红蛋白尿病例发生,且比以往年份有上升趋势.但笔者曾遇到一头4.5岁的母水牛发生伊氏锥虫与血红蛋白尿混合感染病例,临床较为少见,现报告如下.     

二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究

根据伊氏锥虫ITS序列（FJ416612）和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列（FJ588013）,设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的特异性条带,大小分别为213bp和360bp,最低检出量分别为4．00pg和0．38pg。但对牛双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、环形泰勒虫、附红细胞体、巴氏杆菌不敏感。用该二重PCR方法对95份水牛样品和134份奶牛样品进行检测,结果发现,水牛伊氏锥虫的感染率为13．7％（13／95）、牛巴贝斯虫的感染率为7．4％（7／95）,无混合感染;奶牛伊氏锥虫的感染率为3．7％（5／134）、牛巴贝斯虫的感染率为0（0／134）。说明该二重PCR方法具有敏感、快速、特异的特点,适用于牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的流行病学调查。     

从牛白血病淋巴细胞培养分离出一株泰氏锥虫的研究

从4头确诊为白血病的病牛淋巴细胞培养和3头淋巴肉瘤牛的肿瘤组织培养中,分离到5株非致病性锥虫,其形态和培养特性完全一致,表明为同一种锥虫。本锥虫在细胞培养上生长良好,能连续继代,并呈现一定的生长曲线和生活史阶段。通常在接种后1—4天为对数生长期,主要为锥虫鞭毛虫期锥虫,形态较一致,后端尖细,动基体偏近核,有游离的长鞭毛;5天至6天进入平衡期,这一时期除锥虫鞭毛虫期虫体外,还出现许多形态不规则的虫体(包括短胖型和蝌蚪型等),并往往聚集成团,它们可能是核上鞭毛虫期锥虫;第7天后进入衰老期,虫体溶解消失。在培养末期细胞层上出现很多球状的无鞭毛虫期(利什曼型)虫体,大部粘附在细胞间隙,在部分细胞浆内亦可见有此种利什曼型虫体。 本锥虫虽较泰氏锥为虫小,培养要求也较高,但从形态特征、生活史和生物学特性看,应可鉴定为泰氏锥虫。     

水牛伊氏锥虫与血红蛋白尿混合感染防治

水牛伊氏锥虫病是由水牛伊氏锥虫寄生在马、牛、骆驼、犬等家畜的血浆和造血器官内所引起的一种原虫病。水牛血红蛋白尿是以水牛尿液呈棕红色为特征，主要原因可能与无机磷缺乏有关。2003年10月至2004年4月，凤阳、定远等县经常有水牛血红蛋白尿病例发生，且比以往年份有上升趋势。但笔者曾遇到一头4．5岁的母水牛发生伊氏锥虫与血红蛋白尿混合感染病例，临床较为少见，现报告如下。     

四种药物对路氏锥虫的体外杀灭效果试验

观察硝唑尼特、贝尼尔、咪唑苯脲、Trypan等4种药物在不同浓度、不同作用时间对路氏锥虫的体外杀灭效果。将这4种药物分别以5、10、20、40、80mg/ml的浓度作用于体外培养路氏锥虫,在第24h和48h观察杀灭效果。试验结果:4种药物对路氏锥虫都有杀灭效果,药效依次为硝唑尼特>贝尼尔>Trypan>咪唑苯脲,药物对路氏锥虫的杀灭率随着药物浓度增加和作用时间的延长而增高。硝唑尼特具有较强的杀灭作用,效果较好。     

伊氏锥虫感染引起家兔的免疫抑制反应的研究

本文系统地观察和分析了家兔感染伊氏锥虫后外周血液淋巴细胞的动态变化。结果表明，家兔在受感梁后的第二周，淋巴细胞的转化率就明显降低（Ｐ＜０．０５），直到感染四周时，细胞内的ｃＡＭＰ水平才出现明显的升高（Ｐ＜０．０１）。二者的水平一直维持至动物死亡。此结果提示感染兔发生了持续的免疫抑制，免疫抑制的形成与疫病的发生有直接相关性。文中对免疫抑制的形成机理进行了探讨。并指出阻止免抑制的发生，是提高动物免疫的